异丙酚对人脐静脉内皮细胞上细胞间粘附分子-1表达的影响

目的 观察异丙酚对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)上细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达及对中性粒细胞(PMN)在内皮细胞上粘附数的影响。方法利用人脐带体外培养获得人脐静脉内皮细胞,将其随机分为空白组、异丙酚组、内毒素组、异丙酚 内毒索组。用流式细胞仪检测人脐静脉内皮细胞上ICAM-1的表达量。利用PMN分离液从人全血中分离出PMN。在光镜下计数PMN在内皮细胞上的粘附数。结果 4 μg/ml异丙酚对人脐静脉内皮细胞上ICAM-1的表达和对PMN在内皮细胞上的粘附数均无显著影响(P>0.05);40μg/ml异丙酚对人脐静脉内皮细胞上ICAM-1的表达和对PMN在内皮细胞上的粘附数均有抑制作用(P<0.01)。结论40μg/ml异丙酚对PMN与内皮细胞之间的过度粘附有抑制作用,从而可能对机体有一定的保护作用。     

辛伐他汀对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎性反应抑制作用

目的：运用脂多糖（LPS）诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的炎性反应,观察辛伐他汀对HUVECs炎性反应的抑制作用。方法：体外培养HUVECs,细胞至第3代,随机分为空白对照组、LPS（100 ng/mL）组、辛伐他汀（5 mg/mL）组、辛伐他汀（5 mg/mL）和LPS（100 ng/mL）共作用组,运用实时荧光定量PCR和ELISA的方法,测定各组细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白介素-1（IL-1）、白介素-6（IL-6）和尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体（uPA/uPAR）的mRNA和蛋白表达的变化。结果：与对照组相比,LPS组细胞的MCP-1I、L-1I、L-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中各因子蛋白的表达均明显增加（P均〈0.01）;与LPS组相比,辛伐他汀和LPS共作用组的细胞MCP-1I、L-1、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中各因子蛋白的表达均明显降低（P均〈0.05）。结论：辛伐他汀可抑制HUVECs合成及分泌细胞因子MCP-1I、L-1I、L-6及uPA/uPAR,延缓动脉粥样硬化的进程。     

辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞分泌IL-6和IL-8的影响

目的：研究辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞分泌IL-6和IL-8的影响。方法：辛伐他汀（5μg／mL，10μg/mL）分别预处理细胞8h后加入100ng／mL的脂多糖（ipopolysaccharides，LPS）共同孵育，用ELISA方法检测不同时间点（1、12和24h）JL-6和IL-8含量变化。结果：空白对照组细胞在不施加任何刺激的情况下可以分泌少量IL-6和JL-8，并随时间的延长分泌量不断增加；LPS刺激组IL-6和IL-8分泌量比对9鼐组明显增加．差异有统计学意义（P〈0．05）；经过辛伐他汀预处理组IL-6和IL-8分泌量明显低于LPS单独刺激（P〈0．01）。结论：辛伐他汀具有抑制LPS刺激血管内皮细胞分泌炎症因子JL-6和JL-8的作用。     

内毒素对人脐静脉内皮细胞形态和功能-的影响

目的 研究内毒素对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）形态和功能的影响,探讨内毒素对血管内皮细胞的激活全身性炎症反应、脓毒症、多器官功能衰竭中的作用。方法 以体外培养的人脐静脉内皮细胞为模型,应用倒置显微镜观察内毒素对HUVEC形态的影响;ELISA双抗夹心法测定IL－6的含量;应用免疫荧光染色法,激光共聚焦扫描显微镜观察细胞间粘附分子－1（ICAM－1）的表达。结果 内毒素可明显改变HUVEC的形态,使其发生梭状变形。刺激HUVEC分泌IL－6的最小剂量为1ng/ml,呈剂量依赖性增加,8h达高峰。激光共聚焦扫描显微镜观察结果显示,LPS10ng/ml与HUVEC作用24h后,ICAM－1在核膜的表达都明显增强。结论 内毒素可明显改变HUVEC的形态和功能,对增加血管通透性,促进白细胞粘附,在炎症瀑布反应的触发过程中可能起着重要的始动作用。     

H2O2、LPS 和 TNF-α诱导人类脐静脉内皮细胞损伤的实验研究

目的探讨人类脐静脉内皮细胞损伤模型建立方法,为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法分离培养人类脐静脉内皮细胞,分别采用不同浓度的过氧化氢（H2O2）、脂多糖（LPS）、肿瘤坏死因子（TNF）‐α刺激细胞,孵育不同时间后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞活力（OD值）。结果各浓度H2O2损伤组较对照组OD值显著降低（P＜0．01）,不同浓度H2O2损伤组间OD值无统计学差异（P＞0．05）。0．1μg／mLLPS损伤组与对照组OD值无统计学差异（P＞0．05）;其余各浓度LPS损伤组较对照组OD值显著降低（P＜0．05）,且LPS浓度在一定范围内,OD值随LPS浓度的增加及作用时间的延长而降低,具有一定的浓度与时间依赖性。各浓度TNF‐α损伤组较对照组OD值显著降低（P＜0．01）,且TNF‐α浓度在一定范围内,OD值随TNF‐α浓度的增加及作用时间的延长而降低,具有一定的浓度与时间依赖性。结论H2O2、LPS和TNF‐α能体外损伤人类脐静脉内皮细胞,成功建立人类脐静脉内皮细胞损伤模型,且在一定浓度范围内各损伤因子对人类脐静脉内皮细胞损伤程度呈浓度和时间依赖性。     

右美托咪定对脂多糖诱导脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的 评价右美托咪定对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的血管内皮细胞凋亡的影响.方法 参照随机数字表法将人脐静脉内皮细胞HUVEC-12随机分为4组(每组20孔):正常对照组(C组)、右美托咪定组(D组)、LPS组(L 组)、LPS+右美托咪定组(L+D组),培养24 h后:四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)和流式细胞术分别检测细胞活力和细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid,TBA)测定各组细胞超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)的活性和丙二醛(malonaldehyde,MDA)的含量,Western blot法检测细胞多聚腺苷酸二磷酸-1(Poly-ADP Ribosy polymerase-1,PARP-1)蛋白裂解片段的表达.结果 L组和L+D组细胞活力分别是0.95±0.08和1.08±0.10(P＜0.05),与C组比较,分别降低36％和27％;L组和L+D组细胞凋亡率分别是(14.7±1.8)％和(8.8±1.1)％(P＜0.05),分别是C组的2.6倍和1.1倍;L组和L+D组细胞SOD活性分别是(99±6) U/mg和(182±9) U/mg(P＜0.05),与C组比较,分别降低53％和14％;L组和L+D组细胞MDA含量分别是(29.9±1.8) nmol/mg和(19.3±2.1) nmol/mg(P＜0.05),分别是C组的1.6倍和79％;L组和L+D组细胞内PARP-1片段(相对分子质量89×103)表达分别是1.152±0.095和0.564±0.045 (P＜0.05),分别是C组的4.8倍和1.8倍;D组上述指标的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 右美托咪定可有效减少LPS诱导下脐静脉内皮细胞的凋亡,其机制可能与抑制氧化应激、下调PARP-1裂解片段的表达有关.     

高晶体-高胶体渗透压混合液对脂多糖刺激的人血管内皮细胞ICAM-1 mRNA表达的影响

目的：探讨脂多糖（LPS）刺激的人血管内皮细胞（HUVECs)表面ICAM－1 mRNA表达的规律以及高晶体－高胶体渗透压混合液（HHS）对此过程的影响，方法：分离健康产妇脐静脉内皮细胞，进行原代培养，细胞长至单层时用逆转录酶－聚合酶链反应法分析其ICAM－1 mRNA的表达，结果：正常情况下HUVECs表面ICAM－1 mRNA表达微弱，LPS刺激1h后表达开始增加，至4h处达到峰值，0．25％，0．5％高晶体－高胶体渗透压混合液均可明显抑制LPS刺激的ICAM－1 mRNA表达（P＜0．05），但两者之间并无明显差异，且其作用时间对ICAM－1 mRNA表达也无明显影响，结论：LPS刺激的ICAM－1 mRNA表达是一个缓慢而持续的过程，HHS可明显抑制脂多糖诱导的ICAM－1 mRNA表达，且这种作用不受HHS浓度及作用时间的影响。     

异丙酚预先给药对TNF-α诱导人脐静脉血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是一种重要的炎性介质,也是重要的免疫调节因子,是炎性反应的早期启动因子,可诱导血管内皮细胞上细胞间黏附分子-1（ICAM-1）等黏附分子表达上调,ICAM-1通过识别炎性细胞上相应的配体来介导炎性细胞向局部组织募集,促进炎性反应的发生。异丙酚是广泛用于临床的静脉麻醉药,可通过抑制炎性反应减轻细胞损伤,但其机制有待进一步研究。本研究拟评价异丙酚预先给药对TNF-α诱导人脐静脉血管内皮细胞ICAM-1表达的影响。     

大黄素对脂多糖诱导的内皮细胞骨架损伤及通透性影响的实验研究

目的：观察大黄素对脂多糖（ lipopolysaccharide,LPS）诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞（ human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）的干预作用,探讨其对内皮细胞细胞骨架及通透性的影响。方法：以0．2μg/ml LPS作用于HUVECs 24 h,造成血管内皮损伤模型。Y27632（ ROCK特异性抑制剂）和缬沙坦（西药对照,AngⅡ受体1拮抗剂,Rho/ROCK信号通路的间接抑制剂）作为阳性对照药物。观察了大黄素对LPS诱导的内皮损伤后的HUVECs的变化：流式细胞仪An-nexin V-FITC/PI染色观察凋亡率,transwell迁移实验观察细胞迁移能力,10 mg/ml波连蛋白预包被/无包被96孔板观察细胞黏附能力,硝酸还原酶法检测细胞培养上清中的cNOS、iNOS和NO浓度,免疫荧光法观察细胞骨架和黏着斑蛋白的结构和分布。结果：（1）LPS成功诱导构建了HUVECs细胞骨架损伤模型。HUVECs细胞增殖减弱、凋亡增加,细胞骨架肌动蛋白皱缩、黏着斑蛋白聚集,LPS活化内皮、诱导肌球蛋白收缩,导致细胞间隙开放、内皮通透性增加、细胞迁移能力和黏附能力下降。LPS作用24 h后,cNOS减低,tNOS、iNOS、NO升高,呈现内皮损伤和炎症状态。（2）大黄素诱导HUVECs细胞凋亡、提高细胞迁移能力和黏附能力、cNOS升高、iNOS减低,对细胞骨架和黏着斑蛋白形态无明显影响。结论：LPS诱导了HUVECs细胞骨架损伤,大黄素通过调节细胞的凋亡率、调节细胞合成和利用NO的能力、改变细胞迁移和黏附能力,而调节血管内皮通透性、改善内皮屏障功能。同时大黄素促进HUVECs凋亡,抑制内皮细胞的过度增殖,对内皮细胞有一定的保护作用。     

异丙酚对IL-1β诱导人脐静脉内皮细胞通透性增高的影响

目的 评价异丙酚对IL-1β诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)通透性增高的影响.方法 原代分离培养HUVECs并用免疫磁珠法进行纯化.免疫荧光法检测内皮细胞VE-钙粘素的表达.使用Transwell系统检测HUVECs单层通透性,以每孔2× 105个内皮细胞接种于12孔Transwell系统嵌套膜上层,待生长至汇合后3d时以两种方式干预细胞.采用随机数字表法,将细胞分为6组(n=36):对照组不作任何处理,其余5组分别以1、2、5、10和20 ng/ml IL-1β干预24h;采用随机数字表法,将细胞分为5组(n=30):对照组不作任何处理,其余4组分别先以0、10、50和100 μnol/L异丙酚预处理30 min,再以10 ng/ml IL-1β干预24h.采用随机数字表法,将细胞分为3组(n=18):对照组不作任何处理,其余2组分别以50 μmol/L异丙酚处理30 min,再以10 ng/ml IL-1β干预24h或30 min.采用Western blot法检测HUVECs occludin蛋白、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及p-p38 MAPK的表达水平.结果 与对照组比较,5、10和20 ng/ml IL-1β呈浓度依赖性地增加HUVECs通透性(P＜0.05或0.01).10、50和100 μnol/L异丙酚可呈浓度依赖性地抑制IL-1β诱导HUVECs通透性增加(P＜0.01).IL-1β可下调HUVECs occludin蛋白表达,激活p38 MAPK信号通路,异丙酚可抑制IL-1β诱导的HUVECs occludin蛋白表达下调和p38 MAPK信号通路激活(P＜0.01).结论 异丙酚可减轻IL-1β诱导HUVECs通透性增高,与抑制p38 MAPK信号通路激活有关.     

洛伐他汀对人血管内皮细胞双向调节作用的实验研究

目的 探讨洛伐他汀对人血管内皮细胞的调节作用及其浓度相关性.方法 配制含不同浓度洛伐他汀的培养基(0.001、0.01、0.1、1、10μmol/L),分别于96孔板中进行人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)培养,在培养24、72、120 h后以噻唑蓝比色法(MTT)法进行细胞活性及增殖情况评估.将HUVECs接种于6孔板中,分别加入含上述不同浓度洛伐他汀的培养基,培养24 h后,消化细胞,计数,按照2×104/ml每孔接种在24孔板中,30 min后,洗掉尚未黏附的细胞,将余下的细胞每孔随机选一个视野,在200×视野中计量黏附细胞数,比较各组细胞的黏附情况. 结果培养24 h,0.01、0.1μmol/L的洛伐他汀对HUVECs存在明显的促进增殖作用;培养72 h,1μmol/L的洛伐他汀对HUVECs存在明显的促进增殖作用;培养120 h,0.001、0.01、0.1、1 μmol/L的洛伐他汀与对照组相比HUVECs增殖活性差异无统计学意义,10μmol/L的洛伐他汀表现出明显的增殖抑制作用.洛伐他汀与HUVECs作用24 h后,0.1、1μmol/L的洛伐他汀表现出明显的促进HUVECs黏附作用.结论 洛伐他汀对人血管内皮细胞存在双向调节作用,与浓度相关.体外浓度0.1、1μmol/L时可以表现出明显的促进增殖及黏附作用,浓度达10 μmol/L时则表现出抑制作用.     

低温对培养人脐静脉内皮细胞Ⅷ因子相关抗原表达的影响

为了研究低温对内皮细胞凝血物质表达的影响及其在血栓形成中的作用,作者利用免疫组化及图像定量分析系统,测定低温（３３℃）及常温（３７℃,对照组）分别作用１、２、４和６小时对培养人脐静脉内皮细胞Ⅷ因子相关抗原表达的影响。结果显示,低温１小时时内皮细胞Ⅷ因子相关抗原表达量高出常温组０．２７倍,６小时时高出１倍（Ｐ＜０．００１）。作者认为,低温可以增加内皮细胞Ⅷ因子相关抗原的表达,并且表达量与低温作用时间呈正相关,提示低温在血栓形成中具有重要的作用。     

脐静脉内皮细胞与双向羟基磷灰石联合培养的初步研究

目的:研究脐静脉内皮细胞在双向羟基磷灰石(BPM)的生长情况,为组织工程材料研究提供实验基础。方法:人脐静脉内皮细胞来源于永生细胞系,BPM紫外线照射30min ,70 0ml/L乙醇洗涤6 0min ,无菌滤纸吸干,用磷酸缓冲盐水洗涤3遍,每次30min ,而后用无菌滤纸吸干,将处理过的BPM材料泡入DMEM培养基(DMEM ) +2 0ml/L胎牛血清中过夜,使用前用无菌滤纸吸干。应用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和BPM进行混合培养,应用光学显微镜、荧光显微镜及扫描电子显微镜对其进行观察,并应用MTT测定细胞增殖情况。结果:人脐静脉内皮细胞在BPM表面生长、增殖良好,并可观察到细胞长入基质材料微孔内的改变。在培养的第3天,采用MTT法测定对照组与双向羟基磷灰石组的光吸收值,对照组为0 . 6 16±0. 0 17,双向羟基磷灰石组为0 . 6 38±0 . 0 18,两组比较无统计学差异(P >0 . 0 5 )。结论:双向羟基磷灰石(BPM )可作为细胞移植的载体。     

降钙素基因相关肽对血管内皮细胞体外血管生成的作用及机制研究

 目的 观察降钙素基因相关肽(calcitonin-gene-related peptide,CGRP)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的成血管作用,初步探讨其在骨组织工程中的应用价值。方法 体外分离获取HUVECs,采用细胞免疫荧光检测其CGRP受体1的表达。体外成管实验检测CGRP的成血管作用,ELISA法检测CGRP直接作用于HUVECs时血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的分泌水平。Q-PCR检测CGRP刺激HUVECs不同时间点VEGF、VEGF受体1(FLT1)、VEGF 受体2(KDR)及CGRP受体1 mRNA的表达,Western blot检测HUVECs不同时间点FLT1、KDR的蛋白表达。结果 细胞免疫荧光显示HUVECs表达CGRP受体1,体外成管实验显示CGRP有明显的成血管作用。ELISA显示CGRP能明显促进HUVEC分泌VEGF。Q-PCR结果显示不同浓度组CGRP受体1 mRNA的表达较对照组增高,且在第10天最为明显;Q-PCR及Western blot结果显示不同浓度组FLT1、KDR mRNA和蛋白的表达在各时间点较对照组均增高。结论 CGRP能明显促进HUVECs的体外生成血管,可能与其促进VEGF分泌,增强HUVECs的FLT1与KDR表达有关;同时,CGRP受体表达也增加,可进一步增强CGRP的促血管生成作用。     

异丙酚对肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞凋亡的影响

目的 评价异丙酚对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响.方法3～4代人脐静脉内皮细胞于融合状态,随机分为5组:①TNF-α组(P0+TNF-α);②12.5μmol/L异丙酚和TNF-α组(P12.5+TNF-α);③25μmol/L异丙酚和TNF-α组(P25+TNF-α);④50μmol/L异内酚和TNF-α组(P50+TNF-α);⑤100μmol/L异丙酚和TNF-α组(P100+TNF-α);TNF-α终末浓度为2000U/ml,各组先加入不同浓度的异丙酚孵育30min后再加入TNF-α共同培养24h。用DNA原位缺口末端标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡指数(AI),并用透射电镜观察细胞形态学改变。结果 肿瘤坏死因子组(P0+TNF-α)可见较多凋亡细胞,不同浓度的异丙酚预处理后再加入肿瘤坏死因子的各组(P12。5+TNF-α、P25+TNF-α、P50+TNF-α、P100+TNF-α细胞凋亡指数与肿瘤坏死因子组(P0+TNF-α)比较,均有明显下降(P<0.05或P<0.01),且随异丙酚浓度的升高,AI逐渐减小,内皮细胞损伤明显减轻。结论 临床相关浓度的异丙酚可抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡。     

抑制核因子-κB的活性减少内皮细胞与T淋巴细胞粘附

目的探讨抑制核因子κB(NFκB)对内皮细胞活化及内皮细胞与T淋巴细胞粘附的影响。方法应用pCMVIκBαM质粒建立稳定表达突变型IκBα蛋白的内皮细胞系,同时以表达野生型IκBα蛋白(pCMVIκBα)的内皮细胞作为对照。通过逆转录聚合酶链反应及流式细胞仪检测细胞表面细胞间粘附分子1(ICAM1)、血管细胞粘附分子1(VCAM1)和P选择素的变化,并将两种转染细胞分别与人T淋巴细胞株Jurkat细胞混合培养,通过相差显微镜下细胞计数来观察内皮细胞与T淋巴细胞的粘附情况。结果高表达突变型IκBα蛋白的内皮细胞的NFκB活性被显著抑制,其ICAM1mRNA和VCAM1mRNA水平明显低于对照细胞(P<0.05),细胞表面的ICAM1、VCAM1和P选择素的表达较对照细胞显著减少(P<0.05),与T淋巴细胞的粘附较对照细胞显著减少(P<0.05)。结论抑制核因子κB的活性能有效减少内皮细胞与T淋巴细胞的粘附。     

地氟醚预处理对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的 探讨地氟醚预处理对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的影响.方法 人脐静脉内皮细胞株接种于培养板或培养皿中,随机分为5组(n=5),正常对照组(C组)不行任何处理;缺氧/复氧组(A/R组)缺氧30 min后,复氧60 min;缺氧/复氧+炎症介质刺激组[A/R+重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)组]在复氧同时加入10 ng/ml rhTNF-α 10 μl;地氟醚预处理+缺氧/复氧组(Des+A/R组)及地氟醚预处理+缺氧/复氧+炎症介质刺激组(Des+A/R+ rhTNF-α组)先给予7.2%地氟醚30 min,洗脱10 min,然后进行缺氧/复氧,复氧同时加入10 ng/ml rhTNF-α 10 μl.采用流式细胞术和原位缺口末端标记法测定细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;应用透射电镜观察细胞凋亡和坏死情况.结果 与C组比较,A/R组和A/R+rhTNF-α组细胞凋亡率升高(P＜0.05);与A/R组比较,Des+A/R组细胞凋亡率降低(P＜0.05);与A/R+rhTNF-α组比较,Des+A/R+rhTNF-α组细胞凋亡率降低(P＜0.05).电镜下,A/R组和A/R+rhTNF-α组可见凋亡和坏死细胞,Des+A/R组和Des+A/R+rhTNF-α组细胞处于增殖和修复状态.结论 7.2%地氟醚预处理30 min可减轻人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤.     

异氟醚预先给药对缺氧复氧诱发人脐静脉内皮细胞多配体蛋白聚糖-1脱落的影响

目的 探讨异氟醚预先给药对缺氧复氧诱发的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)多配体蛋白聚糖-1脱落的影响.方法 HUVECs培养于EMB-2培养液,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=32),正常对照组(C组):密闭箱内通入5%CO295%O2混合气体30 min,在正常氧浓度下继续培养;缺氧,复氧组(H/R组)置于氧浓度为1%缺氧培养箱内孵育4 h后,置于正常氧浓度的培养箱复氧2 h;异氟醚预先给药组(I组):密闭箱内通入1.73%异氟醚,30 min后行细胞缺氧复氧,方法同H/R组.缺氧复氧结束时测定HUVECs多配体蛋白聚糖-1表达、培养液脱落多配体蛋白聚糖-1浓度、细胞渗透性和细胞活力.结果 与C组比较,H/R组和Ⅰ组培养液脱落多配体蛋白聚糖-1浓度和细胞渗透性升高,HUVECs多配体蛋白聚糖-1表达水平和细胞活力降低(P＜0.01);与H/R组比较,Ⅰ组培养液脱落多配体蛋白聚糖-1浓度和细胞渗透性降低,HUVECs多配体蛋白聚糖-1表达水平和细胞活力升高(P＜0.01).结论 异氟醚预先给药可通过抑制HUVECs多配体蛋白聚糖-1的脱落,从而减轻HUVECs缺氧复氧损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effect of isoflurane pretreatment on hypoxia/reoxygenation (H/R)-induced syndecan-1 shedding from human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) . Methods HUVECs were cultured in EMB-2 medium and randomly divided into 3 groups ( n = 32 each) : control group (group C), H/R group and isoflurane pretreatment group (group I). H/R was produced by 4 h exposure of HUVECs to hypoxia followed by 2 h reoxygenation in H/R and I groups. HUVECs were exposed to the mixture of 5% CO2 and 95% O2 for 30 min and then cultured in normal culture atmosphere (21% O2) in group C. In group I, HUVECs were expased to 1.73% isoflurane and incubated for 30 min before H/R. The syndecan-1 expression, concentrations of shed syndecan-1 in the medium, and cell permeability and viability were measured at the end of reoxygenation. Results Compared with group C, the shed syndecan-1 concentration in the medium and cell permeability were significantly increased, while the syndecan-1 expression and cell viability decreased in H/R and Ⅰ groups ( P ＜ 0.01) . Compared with group H/R, the shed syndecan-1 concentration in the medium and cell permeability were significantly decreased, while the syndecan-1 expression and cell viability increased in group Ⅰ (P ＜ 0.01) . Conclusion Isoflurane pretreatment can protect HUVECs against H/R injury through inhibiting the syndecan-1 shedding.