急性白血病患儿骨髓细胞血管内皮生长因子及其受体表达

目的探讨儿童急性白血病（AL）骨髓细胞血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（Flt,KDR）表达差异,分析其与儿童AL临床特征关系及化疗前后变化。方法采用S-P免疫组织化学方法检测53例AL患儿治疗前后及对照组骨髓VEGF/Flt-1,KDR表达情况,其中急性淋巴细胞白血病（ALL）33例,急性髓系白血病（AML）20例;对照组21例为骨髓像正常非恶性血液病患儿,抽取骨髓肝素抗凝,应用梯度离心法分离单个核细胞。结果VEGF、Flt-1、KDR在AL患儿骨髓中表达水平高于对照组,AML组表达高于ALL组。化疗后完全缓解（CR）40例患儿,其VEGF、Flt-1、KDR的表达在化疗后较化疗前显著性降低;化疗后未获得CR患儿的表达在化疗前后无显著性。AL患儿VEGF的表达与骨髓中幼稚细胞百分比、外周血幼稚细胞百分比呈正相关。骨髓VEGF、Flt-1、KDR表达水平在不同年龄、性别、有无髓外浸润无差异。高表达VEGF组缓解率低于低表达组。结论VEGF、Flt-1、KDR在儿童AL中高表达,提示可能与儿童AL的发生过程、发展、疾病预后有关。     

急性白血病骨髓细胞增殖细胞核抗原、P^53基因表达及其意义

目的 探讨骨髓细胞增殖细胞核抗原（PCNA）及P^53基因在儿童急性白血病（AL）中表达及其临床意义。方法 用SP免疫组化法检测儿童AL骨髓细胞的PCNA和P^53。结果 急性淋巴细胞白血病（ALL）组、急性非淋巴白血病（ANLL）组PCNA、P^53表达与对照组比较显著差异，组间比较均无差异；PCNA表达在ALL标危组显著高于高危组。PCNA阳性表达者缓解率显著低于阴性表达者，3年无病生存率无差异；P^53阳性表达者缓解率较阴性表达者无差异，而3年无病生存率显著低于阴性表达者。结论 PCNA、P^53基因均参与了儿童AL发病过程，但基作用机制可能是独立的。     

血管内皮生长因子及其受体在急性白血病儿童骨髓和血浆中的表达

目的　血管内皮生长因子(VEGF)与实体瘤的发生、发展和预后相关,但其与儿童急性白血病的 关系尚不明确。本实验通过检测VEGF及其受体fms样酪氨酸激酶受体(Flt 1)及含激酶插入区受体(KDR)在儿 童急性白血病的表达情况,分析它们与儿童急性白血病的发生与预后的关系,为进一步研究抗白血病治疗新靶点 提供思路。方法　采用RT PCR法检测21例初发和复发、20例缓解后白血病患儿和5例健康儿童骨髓单个核细 胞VEGF、Flt 1、KDRmRNA的表达。使用酶联免疫吸附法检测上述患儿及20例正常儿童外周血VEGF蛋白浓度。 结果　健康儿童骨髓单个核细胞均未检测到VEGF及其受体Flt 1,KDR的表达。90%(19/21)初发/复发白血病 患儿骨髓单个核细胞表达VEGF,86%(18/21)表达Flt 1,30%(6/20)缓解后白血病患儿骨髓单个核细胞表达 VEGF,15%(3/20)表达Flt 1,两组差异有显著性(均P<0.001)。初发/复发组VEGF和Flt 1阳性率与正常组 [0%(0/5);0%(0/5)]比较差异有显著性(均P<0.001),而缓解组与正常组比较差异无显著性。两组白血病患 儿未检测到KDR表达。初发/复发组血浆VEGF浓度为405±270pg/mL,高于缓解组(136±98pg/mL,P<0.01) 和正常组(91±41pg/mL,P<0.01)。缓解组与正常组比较差异无显著性。结论　白血病患儿表达VEG     

儿童急性白血病患儿骨髓细胞中血管内皮生长因子及其受体的表达

目的探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VFGF)及其受体(vascu-larendothelialgrowthfactor-receptorVEOFR)在儿童急性白血病(acuteleukemia,AL)骨髓中的表达,分析其在化疗前后的变化。方法采用SP免疫组化方法检测53例急性白血病患儿治疗前后以及对照组骨髓中VEGF/VEGFR(包括Flt-1和KDR两种)的表达。光学显微镜下观察阳性细胞数,并判定其染色强度,计算二者之积,结果用任意单位(arbitraryunits,AU)值表示。统计分析采用t检验、方差分析、卡方检验,用SPSS11.0计算机软件进行分析。结果VEGF、FIt-1、KDR在急性白血病患儿骨髓中表达水平(AU=5.35±3.51,2.25±1.05,4.53±2.14)高于对照组(AU=3.36±1.85,1.12±0.85,1.90±1.12)(P<0.01).化疗后获得完全缓解(CR)的40例患儿,其VEGF、Fit-1、KDR的表达在化疗前为5.28±3.41,2.17±1.08和4.61±2.08,获CR后为3.02±1.78,1.18±0.96和2.50±1.15,差异有显著性(P<0.05)化疗后未获得CR患儿VEGF、Flt-1、KDR的表达在化疗前后无显著性(P>0.05)。骨髓中VEGF、Flt-1,KDR的表达水平在不同年龄、不同性别、有无髓外浸润无差异(P>0.05)。结论VEGF、Flt-1,KDR在儿童急性白血病中。表达增高,提示VEGF,Flt-1,KDR在儿童急性白血病的发生过程中起着重要作用。VEGF、Fit-1、KDR在儿童急性白血病化疗后均有明显的降低,提示VEGF可以作为评价儿童急性白血病化疗反应的指标。     

儿童急性白血病患者血清血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的 　探讨儿童急性白血病患者化疗前血清血管内皮生长因子 (VEGF)水平与急性白血病的发生及复发之间的关系。方法 　采用酶联免疫吸附法 (ELISA)对4 6例儿童急性白血病患者治疗前后及 33例健康体检者 (对照组 )进行VEGF测定。结果 　初发及复发的儿童急性白血病患者VEGF高于对照组水平 (P <0 0 0 1 ) ;完全缓解者和部分缓解者较治疗前明显降低 (P <0 0 0 1 ) ;AML的VEGF表达高于ALL(P<0 0 5)。结论　VEGF可作为儿童急性白血病的辅助诊断、疗效的评定及预后判断的有效指标。     

血管内皮生长因子在儿童急性白血病的表达及与预后的关系

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在儿童急性白血病(AL)患者的表达状况及其与长期预后的关系。方法采用S-P免疫组织化学方法,检测41例自愿受试的急性白血病患者治疗前后、缓解前后骨髓细胞VEGF的表达状况并随访预后。选择同期住院的非白血病患者15例正常骨髓作为对照组。结果VEGF在急性白血病患者中表达明显高于对照组(t=8.780、P<0.01),在急性白血病患者中阳性表达状况与骨髓中原始细胞数呈显著正相关(r=0.536);一个标准化疗后ALL组、ANLL组VEGF表达水平明显下降(t分别为6.7733、6.6294;p均<0.01),仍高于正常对照组(t分别为2.7829、3.8985;p均<0.01);未缓解组患者化疗前表达显著高于缓解组及对照组(t分别为2.0580、5.1890、p均<0.05),未缓解组患者化疗后VEGF表达下降,但较化疗前无显著性差异(t=1.3158、p>0.05),显著高于化疗后缓解组患者及对照组病例(t分别为4.1191、4.7760、p均<0.01)。随访3年VEGF高表达组死亡及复发等不良预后率显著高于低表达组(χ2=2.7619、p<0.05)。结论VEGF在儿童急性白血病患者中存在高表达,一定程度上可能反映体内白血病细胞的总负荷量、疾病状态和预后;化疗未缓解组持续高表达,化疗缓解患者表达明显下降,血清VEGF水平可以作为诊断和预测白血病发生、是否难治的有效指标。     

血管内皮生长因子及其受体与白血病

血管内皮生长因子（VEGF）是主要作用于血管内皮细胞的一种细胞因子，具有促进内细胞增殖、分化，增加微血管通透性及诱导血管生成等功能。VEGF及其受体（VEGFRs）在多种肿瘤细胞均有较高水平的表达，且与肿瘤的复发、转移及预后密切相关。最近国外学者用逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法、固相放射免疫分析等方法，对不同类型及不同时期的折血病患者外周血及骨髓标本的VEGF及VEGFRs进行了测定及分析，认为VEGF及VEGFRs与不同类型白血病的治疗、复发及预后均有一定关系。     

血清血管内皮生长因子/内皮抑素比值与儿童急性白血病的相关性

目的：检测急性白血病（AL）患儿血清血管内皮生长因子（VEGF）、内皮抑素（ES）水平,探讨VEGF /ES (V/E) 比值与儿童AL的临床相关性。方法：采用酶联免疫双抗体夹心法检测35例AL患儿化疗前后血清VEGF、ES水平及V/E比值,并与30例健康儿童进行比较。结果：化疗前AL患儿血清中VEGF和ES水平分别为196±66 pg/mL和 31±7 ng/mL,显著高于对照组（29±10 pg/mL、19±4 ng/mL; P0.05）。35例AL患儿化疗前血清VEGF、V/E 比值与骨髓白血病细胞数呈正相关 (r=0.301和0.411,P<0.05)。结论：血清VEGF和ES与儿童AL的发生发展有关,V/E比值能更准确反映AL患儿疾病动态变化情况,有利于指导相关治疗。     

血管内皮生长因子及其受体在儿童急性白血病中的表达以及临床意义

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(vas-cular endothelial growth factor,VEGF)在儿童急性白血病骨髓中的表达,以及化疗前后的变化。方法53例儿童急性白血病患儿,其中急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukem ia,ALL)33例,急性髓系细胞白血病(acute myeloid leukem ia,AML)20例,对照组21例为骨髓象正常的非恶性血液病患儿。采用免疫组化方法检测53例急性白血病患儿治疗前后以及对照组骨髓中VEGF/VEGFR(包括Flt-1和KDR两种)的表达。结果VEGR、Flt-1、KDR在急性白血病患儿骨髓中表达水平高于对照组,在AML组中的表达高于ALL组。化疗后获得完全缓解(CR)的40例患儿,其VEGF、Flt-1、KDR的表达在化疗前后差异有显著性(P<0.05);化疗后未获得CR患儿VEGF、Flt-1、KDR的表达在化疗前后无显著性(P>0.05)。同时VEGF、KDR在儿童ALL中化疗后有明显的降低,但Flt-1无明显改变;VEGF、Flt-1、KDR在儿童AML中化疗后均有明显的降低。结论①VEGF、Flt-1、KDR在儿童急性白血病中表达增高。提示VEGF、Flt-1、KDR在儿童急性白血病的发生过程中起着重要作用。②VEGF、Flt-1、KDR在儿童AML中表达比ALL高。VEGF可以作为评价儿童急性白血病化疗反应的指标,同时说明ALL与AML可能具有不同的血管新生机制。     

急性髓系白血病患儿骨髓细胞中血管内皮生长因子及其受体的变化

目的探讨儿童急性髓系白血病(AML)骨髓细胞中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)的表达差异,分析其与儿童急性髓系白血病临床特征的关系,以及化疗前后的变化。方法采用SP免疫组化方法检测20例AML患儿治疗前后以及对照组骨髓中VEGF/VEGFR(Flt-1和KDR)的表达情况。结果VEGF、Flt-1、KDR在AML患儿骨髓中表达水平高于对照组。化疗后获得完全缓解(CR)14例患儿的VEGF、Flt-1、KDR表达在化疗后比化疗前显著降低;化疗后未获得CR的6例患儿的表达化疗前后差异无统计学意义。AML患儿的VEGF表达与骨髓中幼稚细胞百分比、外周血中幼稚细胞百分比呈正相关。骨髓中VEGF、Flt-1、KDR的表达水平在不同年龄、不同性别、有无髓外浸润差异无统计学意义。高表达的VEGF组缓解率低于低表达组。结论VEGF、Flt-1、KDR在AML患儿中呈高表达,提示可能与儿童急性白血病发生过程与预后有关。     

血管内皮生长因子与Bcl-2基因在急性淋巴细胞白血病的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）和抗凋亡基因Bcl-2在儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）的表达与临床危险分级和早期治疗反应及其预后的关系。方法采用S-P免疫组织化学方法,检测32例ALL骨髓细胞VEGF和Bcl-2基因的表达状况,比较不同危险分级及不同的早期治疗反应的ALL患者之间的表达差别。选择同期住院的非白血病患者15例正常骨髓细胞作为对照组。结果VEGF、Bcl-2在ALL患者中表达均明显高于对照组（t=7.4917,3.2558Pa〈0.01;二者呈正相关（r=0.457P〈0.01）。VEGF、Bcl-2在高危组（HR）、中危组（MR）、标危组（SR）中的表达化疗前后均有显著性差异（F=11.570,4.558,4.574,3.013Pa〈0.05）;治疗反应好与反应差化疗前、后组间比较均有显著性差异（t=1.957,2.798,3.565,2.375Pa〈0.05）;化疗前后组内比较,反应好组有显著性差异（t=1.8038,1.7309Pa〈0.05）,反应差组均无显著性差异（t=1.3798、1.1875Pa〉0.05）;二者均低表达者与均高表达者复发率有显著性差异（P〈0.05）。结论VEGF和Bcl-2在儿童急性白血病中存在高表达,与临床高危因素分级一致,二者以不同机制参与急性白血病的发生、发展,可作为判断疾病预后的参考指标,联合检测对预后判断优于单一指标检测。     

过敏性紫癜患儿血浆血管内皮生长因子和可溶性血管细胞黏附分子-1的表达

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）和可溶性血管细胞黏附分子-（sVCAM-1）在过敏性紫癜（HSP）儿童表达的意义。方法HSP患儿58例。其中急性期30例,缓解期28例。正常对照组23例。采用固相酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测其血浆VEGF、sVCAM-1水平,并进行两两比较和相关分析。结果HSP急性期患儿血浆VEGF、sVCAM-1水平明显高于缓解期和对照组（Pa〈0.01）,且二者呈正相关（r=0.939P〈0.001）。结论VEGF、sVCAM-1可能参与HSP发病过程,对病情发展及预后判断有一定意义。     

激素敏感型肾病综合征患儿血、尿血管内皮细胞生长因子的变化

目的观察激素敏感型肾病综合征(SSNS)患儿活动期及缓解期血清和尿血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平的变化,并探讨其临床意义。方法以SSNS患儿30例为研究对象,年龄、性别匹配的正常健康儿童作对照,用液相芯片分析技术检测患儿在活动期与缓解期及正常健康儿童30例血清和晨尿VEGF水平,分析VEGF在SSNS患儿活动期及缓解期的变化。结果SSNS患儿活动期血VEGF水平[(186.62±106.21)ng/L]明显高于缓解期[(118.75±73.08)ng/L],同时也高于正常对照组[(108.64±54.75)ng/L](P均<0.05);缓解期与正常对照组相比,血VEGF无明显差异(P>0.05);SSNS患儿活动期晨尿VEGF水平[(201.66±100.46)ng/L]明显高于缓解期[(116.35±55.99)ng/L],也高于正常对照组[(99.94±42.07)ng/L](P均<0.05);缓解期与正常对照组相比,尿VEGF无明显差异(P>0.05)。结论VEGF在SSNS发生发展过程中起一定病理生理作用。     

急性髓细胞性白血病患儿淋巴系分化抗原表达的意义

目的探讨淋巴系抗原在儿童急性髓细胞性白血病(AML)细胞中的表达及其临床意义。方法选择华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科2000年1月-2009年7月收治的初诊AML患儿42例。其中原粒细胞白血病未分化型(M1)2例,急性髓细胞性白血病(M2)17例,颗粒增多的早幼粒细胞白血病(M3)12例,急性粒单核细胞白血病(M4)4例,急性单核细胞白血病(M5)7例。采用CD45/SSC双参数散点图设门方法对42例AML患儿进行三色流式细胞术细胞免疫分型检测。同时对伴淋巴系相关抗原表达的AML(Ly+AML)患儿与不伴淋巴系相关抗原表达的AML(Ly-AML)患儿的临床资料进行比较分析。结果42例AML患儿中13例伴有淋巴系抗原的阳性表达(30.95%),其中CD19在AML中的阳性表达率最高(33.33%),其次为CD7(11.90%)、CD3(11.90%)。CD19在M5中的阳性表达率为71.43%。Ly+AML组肝大例数与Ly-AML比较有统计学差异(χ2=6.48,P<0.05),其余临床指标均无统计学差异。Ly+AML组与Ly-AML组首次化疗后完全缓解率比较无差异。结论儿童AML伴有淋巴系抗原CD19...     

急性白血病儿童黑色素瘤特异性抗原基因表达的意义

目的检测黑色素瘤特异性抗原(PRAME)基因在急性白血病儿童中的表达,并探讨其临床意义。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测72例急性白血病(AL)患儿及20例对照者骨髓或外周血中PRAME基因mRNA的表达,并对PRAME基因mRNA表达阳性者进行动态检测。结果急性白血病患儿确诊时PRAME基因的阳性表达率为40.28%,其中45例急性淋巴细胞白血病患儿阳性表达率为40.0%,27例急性髓细胞白血病患儿中PRAME基因的阳性表达率为40.74%,两者之间无显著差异(P>0.05);而对照组均为阴性表达。PRAME基因的表达在白血病缓解期明显降低,当病情复发时PRAME基因的表达再次上升。结论PRAME基因在儿童AL中有较高水平表达,其动态变化与预后密切相关,可作为儿童AL微小残留病变的一个监测指标,对判断预后、指导治疗有重要意义。     

慢性胃炎患儿胃窦组织促胃液素和生长抑素及增殖细胞核抗原与凋亡基因配体水平表达

目的探讨慢性胃炎患儿胃窦黏膜组织促胃液素(GAS)、生长抑素(SS)、增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡基因配体(Fas-L)的表达在发病机制中的意义。方法50例胃窦黏膜标本采用快速尿素酶试验及Giemsa染色法诊断,其中慢性胃炎幽门螺杆菌(Hp)阳性20例(A组),慢性胃炎Hp阴性19例(B组);胃窦黏膜未见明显病变11例为对照组(C组)。采用免疫组织化学EnVision法对每例组织分别进行GAS、SS、PCNA、Fas-L染色。结果GAS、SS的表达A组和B组均高于C组,但无显著性差异;PCNA表达A组显著高于B组(P=0.019);Fas-L表达各组间无显著差异。结论慢性胃炎患儿GAS、SS表达均有增高,GAS和SS升高可能在小儿慢性胃炎发病因素、防御机制中起一定作用;Hp感染促进胃窦黏膜上皮细胞增殖。     

缺氧缺血性脑病新生儿血清血管内皮生长因子动态变化及其临床意义

目的观察HIE患儿血清血管内皮生长因子(VEGF)的动态变化,探讨其与疾病早期诊断、病情程度及预后的相关性。方法确诊为HIE的足月新生儿63例(轻度18例、中度33例、重度12例)。对照组为正常健康足月新生儿20例。分别在出生即刻(0 h),生后24、72 h,7 d采集空腹静脉血2 mL,采用酶联免疫法检测血清VEGF。结果HIE组血清VEGF水平在出生即刻表达为最高峰,与对照组相比具有显著差异(P<0.01),以后下降;72 h、7 d时与对照组均无明显差异(P均>0.05);血清VEGF水平随病情加重而升高。结论VEGF的高表达对HIE的早期诊断、病情程度判断及预后评估具有重要参考价值。     

过敏性紫癜患儿血管内皮生长因子变化的意义

目的探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血清血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化及其在HSP发病中的作用。方法采用双抗体夹心ELISA检测20例急性期HSP患儿、15例恢复期HSP患儿及15例正常儿童血清VEGF水平。结果急性期HSP患儿血清VEGF水平(533.85±127.63)ng/L,明显高于恢复期(160.47±37.39)ng/L及正常对照组(68.93±19.16)ng/L,差异具有显著性(F=158.86P<0.01),3组间作两两比较差异均具有显著差异(P均<0.01)。结论HSP患儿急性期血清VEGF水平明显升高,提示VEGF可能参与HSP的发病过程,可能在HSP发病机制中具有重要意义。     

Proliferating Cell Nuclear Antigen in Human Placenta and Trophoblastic Disease

Expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA), an auxiliary factor for the DNA polymerase δ, is closely related to cell proliferation. Using the monoclonal anti-PCNA antibody 19F4, we examined the distribution of PCNA in formalin-fixed, paraffin-embedded sections of mature and first-trimester placentas, 8 hydatidiform moles, and 7 choriocarcinomas. In normal placentas there was strong expression of PCNA in cytotrophoblastic nuclei, while the syncytium and the amnionic epithelium were PCNA unreactive. Staining of stromal cells was variable. These results are in complete agreement with the autoradiographic localization of [³H]thymidine incorporation and demonstrate that immunoreactivity for PCNA accurately defines areas of proliferative activity in routinely processed placental tissues. In choriocarcinomas and hydatidiform moles PCNA was predominantly expressed in the cytotrophoblast and intermediate trophoblast. Again, the syncytium was largely unreactive for PCNA. These findings indicate that even after neoplastic transformation the syncytium has comparatively little proliferative activity whereas the mononuclear trophoblastic cells divide actively.