卡托普利抑制自发性高血压大鼠左心室肥厚与血管紧张素Ⅱ及原癌基因c－myc，c－fos表达的关系

目的高血压左心室肥厚是心肌细胞肥大、间质细胞（主要是成纤维细胞）增生和胶原堆积的结果，这一病理改变与心脏局部肾素－血管紧张素系统和某些癌基因的表达密切相关。本文探讨自发性高血压大鼠左心室肥厚与心肌细胞及成纤维细胞的局部血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）及原癌基因ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ表达的关系，以及卡托普利逆转左心室肥厚的可能机理。方法雄性ＳＨＲ大鼠（ｎ＝４３）从宫内期开始给予卡托普利治疗（１００ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１），到１６周停药，处死。性别、年龄配对的未治疗ＳＨＲ（ｎ＝３１）和ＷＫＹ大鼠（ｎ＝３２）作对照。测定收缩压（ＳＢＰ）、心率（ＨＲ）、左室重（ＬＶＭ）与体重（ＢＷ）比、左心室ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达（ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ）、右心室心肌细胞与成纤维细胞的ｃ－ｍｙｃ蛋白、ｃ－ｆｏｓ蛋白、ＡｎｇⅡ表达（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ，免疫组化）。结果卡托普利早期治疗显著降低ＳＨＲ１６周时的ＳＢＰ（１３８．４１±１８．０１ｍｍＨｇｖｓ１９３．２２±１９．０２ｍｍＨｇ，Ｐ＜０．０５），抑制左心室肥厚形成［ＬＶＷ／ＢＷ（ｍｇ／ｇ），２．６１±０．２０ｖｓ３．５９±０．３５，Ｐ＜０．０５］，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达（随     

血管紧张素Ⅱ促进大鼠血管平滑肌细胞表达IGFBP-5增加

目的明确大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)中IGFBP-5的高表达和高血压的关系。方法采用Western blot方法检测Ang Ⅱ处理组和自发性高血压大鼠(SHR)组VSMCs中IGFBP-5表达量的变化。结果 Ang Ⅱ处理组IGFBP-5表达量随着Ang Ⅱ浓度的增加显著提高。结论 IGFBP-5的高表达和高血压的发生密切相关。     

血管紧张素Ⅱ对主动脉平滑肌中血管紧张素AT1受体的影响

采用离体血管环方法对主动脉中ＡＴ１受体对ＡｎｇⅡ的反应作了观察。实验发现给予ＡｎｇⅡ组的最大收缩反应为（７７６．２８±２２．２２）ｍｇ较之对照组（６３３．４３±６７．２）ｍｇ，明显增高，统计学检验具有显著性意义（Ｐ＜０．０５）；同时测定血浆中ＡｎｇⅡ和醛固酮水平发现二者均增高，分别由原来的（６５４．８６±１００±１０）ｍｇ／Ｌ和（３４０．５６±１９．３６）ｍｇ／Ｌ升高至（９１９．５４±１１８．３２）ｍｇ／Ｌ和（５１６．６０±１１１．０５）ｍｇ／Ｌ。本研究结果提示ＡｎｇⅡ与其受体结合后，在引起血浆醛固酮水平升高的同时，可以使血管ＡＴ１受体反应性升高     

血管紧张素Ⅱ对大鼠血管钙化的影响

目的在钙化大鼠主动脉血管平滑肌细胞上观察血管紧张素Ⅱ对钙化的影响及其信号通道。方法用β磷酸甘油制备钙化的大鼠血管平滑肌细胞,再以血管紧张素Ⅱ,血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂缬沙坦,通过Von Kossa染色及检测钙含量、碱性磷酸酶活性、骨钙素浓度来探讨血管紧张素Ⅱ对钙化的影响及其信号通道。结果血管紧张素Ⅱ增加大鼠体内碱性磷酸酶活性、血管平滑肌细胞钙含量、体内骨钙素浓度升高,其P0.05;而血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂可通过鼠体内血管紧张素Ⅱ对于血管平滑肌细胞钙含量调节和对其碱性磷酸酶活性及骨钙素浓度上调作用(P0.05)。结论血管紧张素Ⅱ可促进β磷酸甘油诱导的血管平滑肌细胞钙化。     

血管紧张素Ⅱ研究进展

血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)是目前已知的最为有效的升压物质,在心血管活动的调节中具有十分重要的作用。近年来的研究表明,AngⅡ除来源于血浆外还可由局部组织产生,血浆中的AngⅡ可由多种激活物激活。大量的研究显示,AngⅡ对心肌肥大、血管内皮细胞结构与功能、心律、C-型利钠利尿肽的释放和/或生成、血管平滑肌增殖、肾脏等方面均有不同程度的影响,但其作用机制有待进一步研究。     

血管紧张素Ⅱ研究进展

肾素—血管紧张素系统（ＲＡＳ）完全涉及心血管功能的自身稳定性，其生理作用的主要调节剂是血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）。ＡｎｇⅡ的前体—血管紧张素肽原被特异的蛋白酶肾素水解，导致１０个氨基酸的ＡｎｇⅠ生成，另一种蛋白酶血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）从ＡｎｇⅠ上水...     

黄芪甲苷逆转血管紧张素Ⅱ引起的主动脉平滑肌细胞线粒体功能障碍

目的:研究黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)引起的线粒体功能障碍的逆转作用?方法:培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),低血清培养液饥饿处理后分为24 h 对照组?Ang Ⅱ 24 h 处理组?48 h 对照组?Ang Ⅱ 48 h 处理组?As-Ⅳ 治疗组?24 h 对照组和Ang Ⅱ 24 h 处理组使用线粒体呼吸功能检测仪进行线粒体呼吸功能检测,线粒体 ATP 含量检测;48 h 对照组?Ang Ⅱ 48 h 处理组和As-Ⅳ 治疗组进行线粒体呼吸功能检测?线粒体ATP 含量检测?电镜观察线粒体结构变化,共聚焦显微镜检测线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和Mn-SOD活性检测?结果:Ang Ⅱ 24 h 处理组与 24 h 对照组相比,线粒体耗氧率(oxygen consumption rates,OCRs)出现下降,线粒体ATP 含量减少(P ≤ 0.05);Ang Ⅱ 48 h 处理组与 48 h 对照组相比,线粒体 OCRs 显著下降,线粒体ATP含量明显减少(P < 0.05),线粒体出现嵴模糊?肿胀?空泡,线粒体内 ROS 水平升高(P < 0.05),Mn-SOD 活性下降(P ≤ 0.05);As-Ⅳ 治疗组较 Ang Ⅱ 48 h 处理组线粒体 OCRs 和线粒体 ATP 含量明显回升(P < 0.05),线粒体形态结构损伤减轻,线粒体内 ROS 水平降低(P < 0.05),Mn-SOD 活性升高(P ≤ 0.05)?结论:As-Ⅳ可以通过增强线粒体Mn-SOD 活性,降低线粒体内 ROS 水平,进一步减轻线粒体结构损伤并提高线粒体 OCRs 和 ATP 含量,从而逆转Ang Ⅱ引起的线粒体功能障碍?     

大鼠肾小球血管紧张素Ⅱ受体的测定

为探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AⅡ)在肾脏疾患中可能的作用和机理,本研究建立了大鼠肾小球AⅡ受体(AⅡR)放射配体结合分析测定方法。 材料和方法 雄性Wistar大鼠,3～4月龄,重200～350g,由北医大实验动物中心提供。~(125)I-AⅡ(5-L-isoleucin)2000 ci/mmol(英国Amersham公司)、AⅡ、杆菌肽及phenylmethyl sulfonyl fluoride(PMSF,Sigma和Seroa公司),其余试剂均为国产分析纯。     

自发性高血压大鼠血管紧张素Ⅱ－1型受体基因的表达

应用反转录一聚合酶链式反应（ＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，亚克隆出大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ－１型受体（ＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡＴｙｐｅ－１Ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＡＴＲ１）ｃＤＮＡ，并以此为探针，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析和定量ＰＣＲ方法，测定大鼠不同组织中ＡＴＲ１ｍＲＮＡ的分布，证明ＡＴＲ１ｍＲＮＡ广泛存在于不同组织中，其中以肾脏含量为最高，其次为心脏和小脑；自发性高血压大鼠（ＳｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅＲａｔ，ＳＨＲ）肾、心组织中ＡＴＲ１ｍＲＮＡ较正常对照大鼠（Ｗｉｓｔａｒ－ＫｙｏｔｏＲａｔ，ＷＫＹ）明显下隆。     

大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠胸主动脉内皮细胞增殖的影响

目的:观察大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠胸主动脉内皮细胞(RAECs)增殖的影响及机制。方法:组织贴块法培养RAECs,AngⅡ刺激RAECs建立细胞增殖模型。采用MTT法检测细胞增殖,观察不同浓度大豆异黄酮、亚硝基-精氨酸甲酯(L-NAME,100μmol/L)对AngⅡ诱导RAECs增殖的影响。硝酸还原酶及化学比色法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平。半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测RAECs iNOS mR-NA的表达。结果:大豆异黄酮在0.1～1.0μmol/L呈剂量及时间依赖性抑制RAECs增殖,但可被L-NAME部分抵消;大豆异黄酮能升高NO、NOS和iNOS水平,增加iNOS mRNA的表达。结论:大豆异黄酮对AngⅡ诱导的RAECs增殖有抑制作用;而上调iNOS基因表达,升高NO水平可能是其发挥作用的机制。     

血管紧张素Ⅱ与心房颤动

心房颤动(房颤)是临床最常见的心律失常,有很高的致病率和致死率.其发病率和患病率还在继续升高,成为越来越大的临床和经济负担.美国的房颤患者估计有220万[1],根据年龄调整的发病率推算,到2050年,这一数字将超过500万.在英国,每年新诊断的房颤患者在46000例以上[2].从50岁以后,年龄每增加10岁,房颤的发病率增加一倍[3].发生房颤的独立危险因素有男性、高龄、高血压、糖尿病、吸烟、瓣膜性心脏病和心肌梗死[4],左房扩大、左室肥厚和左室收缩功能受损也与房颤有关[5].     

血管紧张素Ⅱ调节大鼠心肌胶原的表达

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维蛋白基因表达的影响,评价DMP811(新型血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂)对其干预作用.方法6周龄雄性SD大鼠随机分为3组,每组6只.(1)组生理盐水输注;(2)组AngⅡ输注;(3)组AngⅡ输注 DMP811管饲(3mg@kg-1@d-).1周后取其心脏,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)及胶原染色的方法分别检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的mRNA及蛋白表达水平.结果(2)组心重(CW)、心重/体重(C/B)、胶原Ⅰ、Ⅲ基因转录水平均高于(1)组,它们分别增加(4.7±0.4)%,(4.9±0.9)%,(22.0±4.7)%和(20.6±4.9)%(P＜0.01);而且心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白沉积也较(1)组明显.AngⅡ导致的上述改变能被DMP811完全阻断.结论AngⅡ通过其1型受体的介导,上调心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的表达.     

大鼠动脉粥样硬化不同阶段的血管紧张素Ⅱ变化

目的:探讨组织和血浆血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的关系.方法:40只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组(每组10只):正常对照组、高脂组、维生素D负荷组、内皮损伤组,分别以普通饲料、高脂饲料、高脂饲料+维生素D负荷、高脂饲料+维生素D负荷+内膜球囊损伤术处理,复制大鼠AS形成3个阶段(高脂血症、纤维增生性动脉硬化、较成熟AS病变斑块形成)模型.利用计算机图像分析系统测定大鼠胸主动脉内(中)膜厚度,采用放射免疫分析法测定各组大鼠胸主动脉组织和血浆AngⅡ水平.结果:与正常对照组相比,维生素D负荷组及内皮损伤组大鼠胸主动脉内膜厚度均显著增加(P＜0.01),中膜厚度减少(P＜0.05,P＜0.01);3组模型动物胸主动脉组织AngⅡ水平均显著高于(以内膜损伤组最高)对照组(P＜0.05或P＜0.01),且组织AngⅡ水平与内膜厚度呈显著正相关(r=0.934,P＜0.01);而血浆AngⅡ水平在各组间无统计学差异.结论:AS的病变程度与大鼠胸主动脉AngⅡ水平密切相关,而与血浆AngⅡ水平无关.提示AngⅡ水平增高是AS的致病因素之一.     

自发性高血压大鼠左心室癌基因c－myc的表达

探讨在体情况下癌基因ｃ－ｍｙｃ与心肌肥厚的关系，研究已有心肌肥厚雄性４０周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和年龄、性别相配的Ｗｉｓｔａｒ京都种（ＷＫＹ）大鼠左心室ｃ－ｍｙｃ基因表达变化。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交的结果显示ＳＨＲ左室肌ｃ－ｍｙｃ表达量明显比ＷＫＹ高。左室增强的ｃ－ｍｙｃ表达可能在ＳＨＲ左室肥厚形成中起重要作用。     

血管紧张素Ⅱ输注诱导大鼠足突滤孔膜改变增加蛋白尿产生

目的:通过直接输注血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的方法观察大鼠尿蛋白及足细胞足突和裂孔结构损伤的变化,分析这些改变与足细胞裂孔膜蛋白nephrin表达改变的相互关系。方法:Wistar大鼠随机分为两组,AngⅡ组通过皮下埋置渗透性微泵(osmotic minipump)以400 ng/(kg.min)持续给予AngⅡ,对照组由生理盐水代替AngⅡ。大鼠每周检测24 h尿蛋白并收集肾组织标本,连续4周。电镜观察并计算肾小球足突宽度。Nephrin蛋白和mRNA检测分别应用免疫荧光及RT-PCR的方法。结果:AngⅡ组大鼠在第1周即出现蛋白尿,且与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),并且随试验的进展蛋白尿逐渐增加。肾小球形态学显示在第1周时肾小球基底膜被拉伸变薄,裂孔膜宽度增加,nephrin表达增加;至第2周可见足细胞足突数量明显增多,单位长度基底膜上的裂孔数量增加,同时观察到nephrin的表达较对照组明显增加(P<0.05);到第3,4周时,随着足细胞进一步损伤,基底膜出现有不规则增厚和裸露,足突出现部分的融合和足突裂孔膜的消失,nephrin的表达逐渐下降至低于对照组水平。结论:AngⅡ可以直接导致足细胞结构完整性的破坏,引起蛋白尿,并与肾小球内nephrin的表达密切相关。表明在某些肾小球疾病或损伤中,足突裂孔膜结构和蛋白表达异常是蛋白尿产生的主要原因。     

自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统的关系

目的以２０周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压大鼠（ＷＫＹ）胸主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）为模型，探讨ＳＨＲＡＳＭＣ异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）的关系。方法用３Ｈ－ＴｄＲ参入量和倍增时间（ＤＴ）反映ＡＳＭＣ的增殖能力，放射免疫法测定血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）浓度，紫外分光光度法测定血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性。结果（１）ＳＨＲＡＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ，ＤＴ显著短于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。基础状态下，ＳＨＲＡＳＭＣ合成ＡｎｇⅡ、ＡＣＥ以及分泌ＡｎｇⅡ的量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。（２）在含２％ＦＣＳ的培养基中，１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲ、ＷＫＹ的３Ｈ－ＴｄＲ参入量分别提高到对照组的３．３倍、２．２倍（Ｐ＜０．０１），ＳＨＲＡＳＭＣ在不同浓度ＡｎｇⅡ刺激时的３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１），１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲＡＳＭＣ细胞数增加７２．５±２３．１％（Ｐ＜０．０１），ＷＫＹＡＳＭＣ细胞数无显著增加，１０倍浓度ＡｎｇⅡ的Ｓａｒａｌａｓｉｎ对ＳＨＲ、ＷＫＹ３Ｈ－ＴｄＲ参入的抑制率分别为６６．７±３．３％，４４．７±９．９％（Ｐ＜０．０１）