肺泡巨噬细胞培养上清液对小鼠红系血细胞发生的影响

采用常规实验血液学方法和造血祖细胞体外培养技术观察了肺泡巨噬细胞培养上清液对早期红系造血祖细胞和晚期红系造血祖细胞的影响。结果表明：肺泡巨噬细胞培养上清对早期和晚期红系造血祖细胞的增殖具有双向调控作用，即低浓度上清液有促进作用，高浓度有抑制作作用。     

人胎盘培养上清液对单克隆抗体分泌的影响

本研究在培养分泌抗甲状腺球蛋白单克隆抗体（ＩｇＧ型）杂交瘤Ｈ４株时，加入不同浓度（０％、２．５％、５％、１０％、２０％）的人胎盘培养上清液（ＨＰＳ）、培养不同的时间（２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ）后取上清液，用ＥＬＩＳＡ法检测各培养上清液中抗体含量。结果表明，低浓度（２．５％、５％）ＨＰＳ能够使Ｈ４单抗分泌增强（Ｐ〈０．０１）；而高浓度（２０％）的ＨＰＳ能够使Ｈ４单抗分泌减弱（Ｐ〈０．０１）。研     

ROS对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响

目的 探讨ＲＯＳ影响巨噬细胞凋亡的机制。方法 激光扫描共聚集显微术,流式细胞术和荧光标记技术等,结果（１）凋亡巨噬细胞内ＤＡＤＰＨ氧化酶活性急剧降低使得胞内ＲＯＳ水平快速上降;（２）ＲＯＳ清除剂促进地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡;（３）ＰＫＣ促进巨细胞凋亡和ＲＯＳ急剧减少;ｃＡＭＰ抑制巨噬细胞凋亡和ＲＯＳ急剧减少。结论 （１）ＲＯＳ抑制地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡;（２）ＰＫＣ,ｃＡＭＰ等因素通过影响地     

漏芦脱皮甾酮对小鼠腹腔巨噬细胞的影响

漏芦(Rhaponticum uniflorum(L·)DC·)属菊科多年草本植物.从漏芦根中提取的植源性蜕皮甾酮是一种常见的蜕皮激素。它具有较强的生物活性,如改善细胞膜脂流动性,保护细胞膜结构完整性和     

量子点体外对小鼠腹腔巨噬细胞细胞化学的影响

目的 探讨量子点(QDs)体外对巨噬细胞细胞化学及酶活性的影响.方法 用倒置相差显微镜、荧光显微镜、细胞化学方法,在细胞水平观察QDs对巨噬细胞的生物相容性及对PAS反应、Feulgen反应、ATP酶、酸性磷酸酶(AcP)、碱性磷酸酶(ALP)、α-醋酸萘酚酯酶(ANAE)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响.结果 3.125mg/L剂量的QDs对巨噬细胞的结构没有影响,但细胞内的细胞化学及酶活性发生了不同的变化,即PAS反应、Feulgen反应、AcP、ALP、ANAE和Mg2 -ATP酶表现为阳性,而SDH、LDH则为阴性.阳性结果中,Feulgen反应、ANAE、ALP和Mg2 -ATP组中QDs组与空白组比较,有统计学意义(P＜0.05),而PAS反应、AcP组中QDs组与空白组比较,无统计学意义(P＞0.05).结论 在细胞学水平上,QDs虽然可以使巨噬细胞内的某些酶发生变化,但不影响其结构及吞噬功能.3.125mg/L剂量的QDs可以很好地应用于生物医学领域标记活细胞,对细胞没有明显的影响.     

由小鼠骨髓培养衍生的巨噬细胞的观察

<正> 巨噬细胞在机体免疫应答过程中起着十分重要的作用,为进一步了解机体的免疫功能,对巨噬细胞的研究是必不可少的。在动物试验中,小鼠腹腔渗出细胞(PEC)中的巨噬细胞是国内外运用最广的细胞来源,目前,另一类巨噬细胞——从骨髓细胞中培养而得的巨噬细胞(BM-Mφ)也已逐步成为国外一些实验室的实验细胞。     

胸腺因子对小鼠腹腔巨噬细胞影响的电镜观察

小白鼠15只,其中10只作实验组(用胸腺因子激活其腹腔巨噬细胞),5只(以等量生理盐水作对照)。通过扫描与透射电镜观察注射腹腔巨噬细胞的微细结构变化。结果:实验组的巨噬细胞其形态、突起、胞质内溶酶体、空泡、吞噬体、线粒体和游离核蛋白体、吞噬鸡红细胞数等均强于对照组。这些变化与活比巨噬细胞旺盛的功能状态有密切关系,本课题可进一步了解胸腺因子(一种免疫促进剂)。对巨噬细胞的激活与免疫的加强作用,并提供巨噬细胞一些形态学的依据。     

妊娠小鼠末梢血白细胞和腹腔巨噬细胞的数量变化

妊娠小鼠末梢血中性粒细胞和腹腔巨噬细胞的数量随妊娠持续增加,于妊娠晚期和分娩前后增加最为显著。这种现象可能是体内激素,或免疫物质调节的结果。注射β-17雌二醇后,小鼠末梢血白细胞总数明显增加,其中,单核细胞比例增加尤为显著,腹腔巨噬细胞数亦增多。该结果表明β-17雌二醇具有促进单核巨噬细胞增殖的作用。     

针刺对小鼠巨噬细胞基因表达的效应

目的 为了探讨针刺镇痛效应与细胞免疫的关系,研究了针刺对小鼠巨噬细胞中ｃ－ｆｏｓ ｍＲＡＮ ｐｐＥＮＫｍＲＮＡ,ｉＮＯＳｍＲＮＡ及ｉＮＯＳ活性的效应。方法 ２０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠被随机分成２组;ａ．用５Ｈｚ电针处理的针刺组;ｂ．未用电针处理的对照组。针刺或牵拉前后用钾离子渗透法检测痛阈。实验采用原位杂交,ＮＡＤＰＨＮＢＴ组织化学,ＲＮＡ斑点印迹及蛋白质斑点印迹技术。应用ＴＬＣ扫描仪扫描斑点印迹信号并作统计学处理。结果 杂交信号和ｉＮＯＳ活性呈现蓝紫色,信号均定位于巨噬细胞的胞质。与对照组相比,针刺组的所有印迹信号均增强,Ｐ〈０．０１。针刺组中ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ,ｐｐＥＮＫｍＲＮＡ,ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达及ｉＮＯＳ的活性与提高的痛阈呈正相关。此外,ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ与ｍＲＮＡ与ｐｐＥＮＫｍＲＮＡ之间的变动呈正     

细脚拟青霉对大鼠腹腔巨噬细胞的激活作用

用细脚拟青霉给正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠灌胃２１ｄ，灌洗并培养腹腔巨噬细胞，用生化方法测定巨噬细胞内乳乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和精氨酸酶的活性，并进一步观察巨噬细胞摄取中性红的能力。     

转移程度不同的小鼠肝癌细胞株对腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

目的 研究转移程度不同的小鼠肝癌细胞株对腹腔巨噬细胞功能的影响.方法 在两株转移程度不同的小鼠腹水型肝癌模型中,取荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞,检测其在干扰素γ(IFN-γ)和脂多糖(LPS)刺激下产生一氧化碳(NO)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,并检测其活化后的杀伤能力.进一步采用夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,研究不同荷瘤小鼠腹水中IFN-γ与转化生长因子β1(TGF-β1)的水平,并用相应抗体封闭TGF-β1后,检测活化巨噬细胞产生NO能力及杀伤活性.结果 经IFN-γ和LPS活化后,荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO和TNF-α能力明显低于正常巨噬细胞,杀伤能力下降.高转移性肝癌小鼠巨噬细胞分泌NO水平和杀伤能力均低于低转移性小鼠,但其分泌TNF-α量较高.此外,荷瘤小鼠腹水含较高水平IFN-γ与TGF-β1,不同转移程度荷瘤小鼠IFN-γ水平接近,但高转移性肝癌小鼠腹水含更多TGF-β1,而且TGF-β1的封闭可导致与肿瘤细胞共培养的巨噬细胞分泌NO的能力部分恢复.结论 肿瘤细胞可以通过分泌TGF-β1等抑制性因子下调巨噬细胞的活性和免疫功能.肿瘤的转移程度可能与其分泌免疫抑制因子的能力相关.     

小鼠1-细胞胚胎体外培养条件的研究

目的　检验培养基（Ｗｈｉｔｔｅｎ、ＣＺＢ、ＳＯＭ 和ＫＳＯＭ）、培养器皿（进口、国产新旧平皿）与配制培养基的水质对小鼠胚胎体外发育的影响。　方法　采用微滴培养法培养昆明种小白鼠１－细胞胚胎,以胚胎发育到囊胚的比例为判断培养效果的标准。　结果　Ｗｈｉｔｔｅｎ、ＣＺＢ、ＳＯＭ 和ＫＳＯＭ 培养基中２－细胞发育率分别为１００％ 、１００％ 、１００％ 和９８．６％ ,而囊胚发育率却分别为０％ 、７８．３％ 、４．８％ 和９．５％ ;用三蒸水、五蒸水和去离子水配制的ＣＺＢ培养基,培养囊胚发育率分别为４０．８％ 、５４．１％ 和５２．４％ ;国产和进口新平皿的囊胚发育率分别为６８．０％ 和７２．２％ ;国产和进口旧平皿的培养囊胚发育率为２７．２％ 和４６．１％ 。　结论　昆明小白鼠早期胚胎存在体外发育阻断现象;ＣＺＢ培养基培养昆明小白鼠早期胚胎效果最好;用三蒸水、五蒸水和去离子水配制的ＣＺＢ培养基培养结果无显著差别;进口和国产新平皿的培养效果相近,但再次使用时培养效果显著下降。     

应用Protein G纯化细胞培养上清中的大鼠单抗

用ｍｉｎｉＰｅｒｍ系统旋转连续培养大鼠杂交瘤细胞株,获得大量含抗鼠ＩＬ－４（ＩｇＧ１）和ＩＬ－５（ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ）抗体的培养上清;经ＰＭ１０膜超滤,５０％饱和硫酸铵沉淀及链球菌Ｃ蛋白－琼脂糖亲和层析纯化ＩｇＧ单抗。结果每升杂交瘤细胞２上清得到大鼠,ＩｇＧ２２－３６ｍｇ;１次可纯化抗体２０ｍｇ;经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ＥＬＩＳＡ鉴定,所得到的抗体纯度高,活性保持良好。     

小鼠腹腔巨噬细胞凋亡时线粒体的改变及其调控

目的：研究小鼠腹腔巨噬细胞凋亡过程中线粒体和磷酸烟酰胺腺嘌呤（NADPH）氧化酶活性的变化以及信使分子对线粒体膜电位,细胞内活性氧（reactive oxgen species,ORS)和凋亡的影响。方法：激光扫描共聚焦显微术、流术细胞术和荧光标记技术等。结果：1地塞米松诱导巨噬细胞快速凋亡;2例粒体膜电位快速去极化,NADPH氧化酶活性剧降,ROS快速减少,ROS清除剂促进凋亡,3－蛋白激酶C（protein kinaseC,PKC)促进凋亡,ROS急剧减少、线粒体膜去极化;环腺苷酸（cAMP）抑制凋亡、ROS急剧减少,线粒体膜去极化;环鸟苷酸（cGMP),酪氨酸蛋白激酶（TPK）略抑制凋亡,不影响ROS变化,但影响线粒体膜去极化,结论1：地塞米松处理使线粒体内NADPH氧化酶活性剧降,生成ROS迅速减少从而促进巨噬细胞凋亡,2信使分子影响线粒休生成ROS的变化以及线粒体膜去极化从而影响巨噬细胞凋亡,提示线粒体变化,尤其是ROS和膜电位的变化影响巨噬细胞凋亡。     

巨噬细胞条件培养液对原代培养小鼠成肌细胞生长的影响

目的 观察小鼠巨噬细胞条件培养液对小鼠成肌细胞生长的影响.方法 小鼠腹腔内连续3d注射肌匀浆和淀粉混合物,然后分离小鼠腹腔巨噬细胞,在无血清培养液中培养48h后收集上清.取生后5d小鼠的成肌细胞,在含10%血清的DMEM/F12培养液中培养36～48h后,将血清浓度降低至0.5%.将巨噬细胞培养上清加入低浓度血清培养的成肌细胞中,作用72h后收集细胞,通过Wright染色、LDH细胞化学和免疫细胞化学方法观察成肌细胞的生长情况.结果 巨噬细胞条件培养液能够在低浓度血清的条件下维持成肌细胞的正常形态和活性,并促进成肌细胞增殖.实验组LDH阳性细胞与对照组相比,其平均吸光度与积分吸光度均存在极显著性差异(分别为P＜0.001和P＜0.000 1).免疫细胞化学显示,实验组desmin阳性细胞数明显多于对照组.结论 巨噬细胞条件培养液中含有促进小鼠成肌细胞生长的因子.     

云芝多糖增强巨噬细胞M-CSF的表达与分泌

为揭示云芝多糖作用与巨噬细胞Ｍ－ＣＳＦ表达与分泌的关系,采用活性测定、斑点杂交等方法,将云芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞Ｍ－ＣＳＦ表达及分泌的影响进行了探讨。结果显示,腹腔注射云芝多糖可以提高小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中的Ｍ－ＣＳＦ活性,并使巨噬细胞Ｍ－ＣＳＦｍ ＲＮＡ的含量增加;应用ｍ ＲＮＡ 合成抑制剂及蛋白合成抑制剂的研究发现,ａｃｔｉｎｏｍ ｙｃｉｎ Ｄ及ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍ ｉｄｅ均能阻断云芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞Ｍ－ＣＳＦｍ ＲＮＡ的诱导