模拟高原缺氧大鼠脑线粒体UCP活性与含量的变化及其对线粒体能量合成的影响

目的 观察模拟高原暴露大鼠脑线粒体UCP活性和含量的改变,探讨其对线粒体能量合成功能的影响.方法 健康成年SD大鼠置于模拟海拔5 000 m低压舱中,23 h/d,连续3 d.差速离心法分离大鼠脑组织线粒体,Clark氧电极法测定线粒体的呼吸活性,罗丹明123法测定线粒体膜电位,高压液相色谱法测定腺苷酸的含量,用[3H]-GTP结合法测定线粒体UCP活性及含量.结果 高原缺氧导致大鼠脑线粒体解偶联蛋白与[3H]-GTP结合的解离常数Kd下降37%,结合[3H]-GTP的最大量Bmax增加2.9倍(P＜0.01);线粒体的呼吸ST3氧耗减为对照组的83.1%,而ST4则升高28%,RCR降为对照的66.67%(P＜0.01);相关分析显示,ST4与反映UCP活性的Kd呈显著负相关,而与UCP含量Bmax呈显著正相关(P＜0.01);同时线粒体内ATP含量仅为对照组的58.4%(P＜0.01),线粒体膜电位显著下降(P＜0.01).结论 模拟高原缺氧暴露可增加脑线粒体解偶联蛋白活性和含量,揭示缺氧时线粒体的呼吸氧耗及能量的生成的改变与关系.     

奥氮平下调SD大鼠棕色脂肪产热基因UCP1介导代谢综合征的分子机制

目的:探究抗精神病药物奥氮平通过棕色脂肪产热基因解偶联蛋白1(UCP1)介导代谢综合征的分子机制.方法:24只SD大鼠适应饲养和自主进食空白药物糖丸训练各7 d后,随机分为对照组和奥氮平给药组,每组12只.奥氮平给药组给予奥氮平(1 mg/kg),对照组给予等量空白糖丸,3次/d,共28 d.Western bolot和生化检测奥氮平介导的代谢综合征与棕色脂肪组织(BAT)中UCP1的变化情况;体外细胞实验研究奥氮平对C3H10T1/2间充质干细胞定向分化为棕色脂肪细胞的影响及UCP1蛋白的变化.结果:体内实验表明,奥氮平明显增加大鼠的体重和白色脂肪的重量(P<0.05),同时升高血清中甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及游离脂肪酸(FFA)的水平(P<0.05),降低高密度脂蛋白(HDL)的水平(P<0.05),降低大鼠基础体温和棕色脂肪组织的重量(P<0.05),改变棕色脂肪组织的形态,并减少了棕色脂肪组织中UCP1、PRDM16及β3-AR蛋白的表达(P<0.05);体外实验证明奥氮平抑制了棕色脂肪细胞分化发育及UCP1的表达(P<0.05).结论:奥氮平通过降低大鼠棕色脂肪组织的产热活性与棕色脂肪细胞的发育分化介导机体代谢紊乱.     

白色脂肪组织“棕色化”的发生机制

<正>肥胖现如今已成为全球性健康问题,但目前仍缺乏安全有效的治疗肥胖的药物。哺乳动物体内存在两种不同类型的脂肪细胞,即棕色脂肪细胞和白色脂肪细胞。白色脂肪组织主要用于储存能量,棕色脂肪组织因细胞内含有丰富的线粒体和表达解偶联蛋白1(UCP1),拥有非颤栗产热的能力。研究表明,体内高水平的棕色脂肪组织可阻止代谢性疾病的发生[1]。因此,棕色脂肪组织的存在提示了一种潜在地有效控制肥胖的新策略。近年来,人们不断探寻白色脂肪组     

降浊合剂通过调节TLR4/IκBα/NF-κB信号通路影响肥胖大鼠糖脂代谢

目的:探究降浊合剂影响肥胖大鼠糖脂代谢的机制。方法:30只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、降浊合剂组，每组各10只，其中正常对照组给予普通饲料喂养，模型对照组给予高脂饲料喂养，降浊合剂组在给予高脂饲料喂养的同时给予50 g/kg降浊合剂浓缩液灌胃。各组干预8周后，采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血糖、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平；采用定量逆转录PCR法检测各组大鼠白色、棕色脂肪中PR结构域蛋白16(PRDM16)、解偶联蛋白1(UCP1)信使RNA表达；采用蛋白质印迹法检测各组大鼠白色、棕色脂肪中PRDM16以及各组大鼠白色脂肪中Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子抑制蛋白（IκBα）和核因子κB(NF-κB)蛋白表达水平；采用免疫组织化学法检测各组大鼠白色、棕色脂肪中UCP1蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较，模型对照组白色脂肪质量（P<0.01）、白色脂肪系数（P<0.05）和Lee’s系数（P<0.01）均显著升高；血糖、总胆固醇、三酰甘油、LDL-C含量均升高，其中三酰甘油含量...     

玉米须总皂苷对肥胖大鼠脂肪组织中UCP1和PRDM16表达的影响

目的:探讨分析玉米须总皂苷对高脂饮食喂养的肥胖大鼠棕色脂肪组织中解偶联蛋白-1(UCP1)和PR结构域蛋白16(PRDM16)表达的影响。方法:雄性健康清洁级SD大鼠共40只,在适应性喂养1周后随机分为正常对照组、模型对照组以及玉米须总皂苷低剂量和高剂量干预组,每组10只,给予高脂饮食12周后构建肥胖大鼠模型,治疗时玉米须总皂苷低和高剂量组分别给予玉米须总皂苷100、200 mg·kg-1·d-1灌胃,正常对照组和模型对照组给予1 m L·kg-1·d-1生理盐水灌胃,治疗12周后称重、处死大鼠,收集血清和棕色脂肪组织,检测血清血脂指标,HE染色检测棕色脂肪组织病理学,Real-Time PCR和Western Blot检测棕色脂肪组织中UCP1和PRDM16的m RNA和蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠体重明显升高(P0.05),棕色脂肪组织重量和棕色脂肪组织重量/大鼠体质量明显降低(P0.05),与模型组相比,玉米须总皂苷治疗后,大鼠体质量明显降低(P0.05),棕色脂肪组织重量和棕色脂肪组织重量/大鼠体质量明显升高(P0.05);与正常对照组相比,模型对照组血清葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇和HDL-C明显升高(P0.05),LDL-C明显降低(P0.05);与模型对照组相比,玉米须总皂苷治疗后,血清葡萄糖、甘油三酯水平、总胆固醇和HDL-C降低(P0.05),LDL-C明显升高(P0.05);与正常对照组相比,模型对照组棕色脂肪细胞分布明显减少,脂肪空泡数量明显增加,而玉米须总皂苷治疗后,脂肪空泡数量明显降低;与正常对照组相比,模型对照组大鼠棕色脂肪组织中UCP1和PRDM16的m RNA和蛋白表达明显降低(P0.05),玉米须总皂苷治疗后表达明显升高(P0.05)。结论:玉米须总皂苷治疗12周可以明显降低肥胖大鼠体质量和棕色脂肪组织中的相对含量,这可能与其可以降低棕色脂肪组织中UCP1和PRDM16的表达有关。     

荀运浩：重视棕色脂肪组织在非酒精性脂肪性肝病防治中的作用

<正>记者问：那么请问什么是棕色脂肪组织？荀运浩主任：棕色脂肪组织（BAT）是脂肪组织的一种。脂肪组织普遍被分为3种类型:白色脂肪组织（WAT）、棕色脂肪组织（BAT）和米色脂肪组织。其中白色脂肪就是我们平常所说的脂肪组织主体,主要以油脂的形式储存化学能,长胖了一般就是说白色脂肪增加了。棕色脂肪组织是非寒颤性产热组织,对寒冷环境中的体温维持具有重要作用,并且通过线粒体的非偶联呼吸作用产热消耗能量,     

中链甘油三酯对C57BL/6J小鼠棕色脂肪组织的影响

目的观察中链甘油三酯（MCT）对C57BL/6J小鼠棕色脂肪组织的影响。方法选择4-5周龄C57BL/6J雄性小鼠30只,随机分为中链甘油三酯高脂组（MCT）,大豆油高脂组（LCT）及普通饲料对照组,每组10只,喂饲15周。观察研究前后各组间小鼠体质量、饲料消耗量及食物功效比、棕色脂肪组织重量差异以及解偶联蛋白-1（UCP1）表达水平的变化。结果研究结束时,MCT高脂组小鼠的体质量、体脂肪量显著低于LCT组（P〈0.05）,饲料消耗量MCT组和LCT组之间无统计学差异（P〉0.05）,MCT组棕色脂肪组织重量及UCP1蛋白表达量显著高于LCT组。结论 MCT可促进棕色脂肪组织增殖,提高棕色脂肪组织UCP1的表达,增强棕色脂肪组织的产热功能,从而抑制高脂饲料诱发的C57BL/6J小鼠体质量增加和体脂肪积累。     

保元解毒汤对癌症恶病质小鼠血清脂质及白色脂肪组织棕色化的影响

[目的] 探讨保元解毒汤对癌症恶病质小鼠血清脂质及白色脂肪组织棕色化的影响。[方法] 将4～6周龄无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级C57BL/6雄性小鼠分为对照组、模型组、保元解毒汤组和醋酸甲羟孕酮组,连续干预21 d,观察记录小鼠体质量、摄食饮水量和肿瘤体积,以多维质谱“鸟枪”法脂质组学(multidimensional mass spectrometry-based shotgun lipidomics,MDMS-SL)技术测定血清脂质含量,检测小鼠附睾白色脂肪组织和腹股沟白色脂肪组织质量;以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察白色脂肪组织形态及脂滴面积;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测白色脂肪组织棕色化相关mRNA表达;免疫印迹法和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色检测白色脂肪组织解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)的蛋白表达。[结果] 与模型组比较,保元解毒汤组小鼠摄食饮水量改善,一般状态良好,肿瘤增长受到抑制,体质量明显增加(P<0.05)。MDMS-SL技术检测提示,模型组小鼠血清中共有61种脂质分子发生了异常调节(P<0.05),而保元解毒汤影响了其中30种脂质的异常变化(P<0.05)。与模型组比较,保元解毒汤抑制癌症恶病质小鼠附睾白色脂肪组织和腹股沟白色脂肪组织丢失和脂滴面积减少(P<0.05),抑制白色脂肪组织棕色化相关基因UCP1、Cidea、Prdm16的mRNA表达(P<0.05)以及白色脂肪组织棕色化标志蛋白UCP1的蛋白表达(P<0.05)。[结论] 保元解毒汤能抑制癌症恶病质小鼠体质量丢失,改善血清脂质异常变化,抑制附睾白色脂肪组织和腹股沟白色脂肪组织棕色化。     

小鼠不同脂肪组织对冷应激的适应性反应

目的：明确C57BL/6J小鼠不同脂肪组织对于冷刺激适应性应答的相似点与差异。方法：建立冷刺激组及对照组小鼠模型,测量体重、进食量等;HE染色观察各脂肪组织切片形态;荧光定量PCR法检测棕色化、线粒体功能等相关基因的表达变化;Western blot检测产热等相关蛋白的表达情况;免疫组化检测脂肪组织交感神经支配;流式细胞术分析脂肪组织中巨噬细胞的分型。结果：与米色和白色脂肪相比,棕色脂肪组织的产热相关基因解偶联蛋白1表达量最高,但冷刺激不能进一步促进其表达;而冷刺激能够显著诱导米色脂肪组织中产热基因和蛋白的表达。冷刺激能够促进棕色脂肪和米色脂肪中交感神经支配和巨噬细胞M2型极化。结论：冷刺激能够诱导米色脂肪组织棕色化,同时促进交感神经支配和巨噬细胞的M2型极化;冷刺激对内脏白色脂肪组织的影响最小。     

低温对中缅树鼠句解偶联蛋白-1的影响

为揭示低温对中缅树Ju解偶联蛋白1（UCP1）含量的影响。我们将中缅树Ju分为3组。1组为对照组，室温饲养，2组和3组分别在低温冷驯化14d,28d，提取各组动物体内的褐色脂肪组织（BAT）中的UCP1，并用Folin-酚法定量测定蛋白质含量。结果：随着冷台化时间的延长，中缅树JuUCP1含量有增加的趋势，结论：冷刺激是诱发了UCPmRNA的转录活性的重要因素。且使UCP1含量增加。     

冷驯化条件下中缅树鼩脂肪组织切片的对比研究

目的 探讨冷驯化不同时期中缅树鼩脂肪细胞形态变化,为冷驯化是否可以诱导白色脂肪组织中米色脂肪细胞(beige adipocytes)的产生提供形态学依据。方法 通过苏木素-伊红染色切片、免疫组织化学染色切片、免疫荧光染色切片进行对比。结果 随着冷驯化时间延长,白色脂肪细胞和褐色脂肪细胞形态都明显变小,且褐色脂肪组织中解偶联蛋白1(uncoupling protein 1, UCP1)表达增加,同时腹部皮下白色脂肪组织中可能已发生褐变,产生一些具有UCP1表达的浅褐色脂肪细胞,即米色脂肪细胞。结论 不同染色切片不仅能够清晰观察到脂肪细胞的形态改变,还能从抗体阳性颜色中观察出UCP1表达变化,为中缅树鼩脂肪组织研究提供基础性材料。     

Supplementation of Fermented Barley Extracts with Lactobacillus Plantarum dy-1 Inhibits Obesity via a UCP1-dependent Mechanism

Objective We aimed to explore how fermented barley extracts with Lactobacillus plantarum dy-1(LFBE) affected the browning in adipocytes and obese rats.Methods In vitro, 3T3-L1 cells were induced by LFBE, raw barley extraction(RBE) and polyphenol compounds(PC) from LFBE to evaluate the adipocyte differentiation.In vivo, obese SD rats induced by high fat diet(HFD) were randomly divided into three groups treated with oral gavage:(a) normal control diet with distilled water,(b) HFD with distilled water,(c) HFD with 800 mg LFBE/kg body weight(bw).Results In vitro, LFBE and the PC in the extraction significantly inhibited adipogenesis and potentiated browning of 3T3-L1 preadipocytes, rather than RBE.In vivo, we observed remarkable decreases in the body weight, serum lipid levels, white adipose tissue(WAT) weights and cell sizes of brown adipose tissues(BAT) in the LFBE group after 10 weeks.LFBE group could gain more mass of interscapular BAT(IBAT) and promote the dehydrogenase activity in the mitochondria.And LFBE may potentiate process of the IBAT thermogenesis and epididymis adipose tissue(EAT) browning via activating the uncoupling protein 1(UCP1)-dependent mechanism to suppress the obesity.Conclusion These results demonstrated that LFBE decreased obesity partly by increasing the BAT mass and the energy expenditure by activating BAT thermogenesis and WAT browning in a UCP1-dependent mechanism.     

Effect of Acupuncture on Uncoupling Protein 1 Gene Expression for Brown Adipose Tissue of Obese Rats

Objective:To explore the effects of acupuncture on the expression of uncoupling protein 1(UCP_1)gene of brown adipose tissue (BAT)in obese rats.Methods:The expression of UCP_1 gene ofBAT was determined with RT-PCR technique.The changes of body weight,Lee’s index,body fat,andthe expression of UCP_1 gene of BAT in obese rats were observed before and after acupuncture.Results:The body weight,Lee’s indeX,body fat in obese rats were all markedly higher than those in normal rats,but the expression of UCP_1 gene of BAT in obese rats was all lower than that in normal rats.There werenegative correlation between the Obesity index and the expression of UCP_1 gent in BAT.After acupunc-ture the marked effect of weight loss was achieved while the expression of UCP_1 gene of BAT Obviously in-creased in obese rats.Conclusion:The abnormal reduction for expression of UCP_1 gene of BAT might bean important cause for the obesity.To promote the expression of UCP_1 in obese organism might be an im-portant cellular and mole     

针刺胃经穴位对超重大鼠褐色脂肪细胞的影响

[目的]观察针刺对超重大鼠的治疗作用以及对褐色脂肪细胞形态学影响。[方法]清洁级SD大鼠60只,随机分为 正常组、模型组和针剌组。正常组喂普通饲料,其他组饲喂高脂饮食12周;针剌组针刺超重大鼠的足三里、内庭穴15 d, 各组治疗前后均测量体质量、体长、计算体质量指数(Lee's指数),治疗后剥离肾周脂肪称(湿)质量,并取肩胛间褐色 脂肪组织,处理后于透射电镜观察其形态学变化。[结果]针刺治疗后大鼠体质量下降,Lee's指数和肾周脂肪质量降低, 与模型组比较有显著性差异(P<0.01或P<0.001);电镜下可见针刺组大鼠褐色脂肪细胞的毛细血管变得丰富,胞质中 线粒体数量明显增多,嵴排列致密。[结论]针刺胃经穴位对超重大鼠具有一定干预作用,可能与改变其褐色脂肪细胞的形 态、提高产热效能和能量代谢有关。     

低温对中缅树鼩褐色脂肪组织及肝脏解偶联蛋白mRNA表达的影响

目的研究低温对中缅树鼩褐色脂肪组织及肝脏解偶联蛋白（UCP2）mRNA表达的影响.方法中缅树鼩冷驯化28d,观察低温对中缅树鼩体重、BAT的影响,并应用RT-PCR方法测定中缅树鼩褐色脂肪组织及肝脏UCP2mRNA表达水平.结果实验前各组体重无统计学意义（P〉0.05）,冷驯化28d后,实验组的体重与对照组相比有统计学意义（P〈0.05）;实验组BAT显著高于对照组（P〈0.05）.冷驯化28d后,实验组与对照组相比,肝脏的UCP2基因表达增强（P〈0.05）,实验组BAT的UCP2基因表达显著高于对照组（P〈0.05）.结论低温可增强中缅树鼩UCP2mRNA表达.     

1H-MRS、Dixon水脂分离与Z谱成像技术在大鼠棕色脂肪上的量化比较

目的 比较1H-MRS、Dixon水脂分离与Z谱成像技术在体模以及大鼠棕色脂肪上的脂肪量化结果。方法 首先,制作6个脂肪含量分别为0%、20%、40%、60%、80%、100%的油水混合体模,共同放置于50 mL离心管内。依次采用ZS-MRI、1H-MRS和Dixon水脂分离技术对体模的脂肪含量进行定量评估,其结果与体模脂肪真实值相比较。其次,使用ZS-MRI和Dixon水脂分离技术分别采集了六只大鼠肩胛间的数据,并计算出水脂分布图,并将结果与1H-MRS定量结果进行比较。结果 ZS-MRI可以很好地准确定量并区分出各个不同脂肪含量的体模（Y=0.95*X+1.48）;能较好地区分棕色脂肪与白色脂肪,并与Dixon方法得到的脂肪含量在空间分布上高度一致。在棕色脂肪的量化上,ZS-MRI结果 与1H-MRS结果相比无显著性差异（P=0.35）。结论 ZS-MRI作为一种新的脂肪定量方法,可以生成无伪影的脂肪分布图,用于定量测量大鼠体内棕色脂肪的含量以及分布。     

PAQR9对棕色脂肪产热及UCP1表达的影响

目的 初步探究孕激素和脂联素受体家族成员9（progestin and adipoQ receptor family member 9,PAQR9）对棕色脂肪产热及解偶联蛋白1（uncoupling protein 1,UCP1）表达的影响。方法 选取C57BL/6J小鼠的白色脂肪组织（white adipose tissue,WAT）、棕色脂肪组织（brown adipose tissue,BAT）及前棕色脂肪细胞系DE2-3和间充质干细胞C3H10T1/2细胞系进行研究。实时荧光定量PCR技术检测不同条件下PAQR9及UCP1的mRNA水平,蛋白免疫印迹法检测UCP1的蛋白质水平。实时荧光定量PCR技术和油红O染色法检测脂肪细胞的成脂分化情况。结果 C57BL/6J小鼠BAT中PAQR9的mRNA水平显著高于WAT。冷刺激诱导下,BAT和腹股沟皮下WAT中PAQR9的mRNA水平显著升高。DE2-3细胞诱导分化成熟即第6天时,PAQR9的mRNA水平显著高表达。在DE2-3细胞中过表达PAQR9,UCP1的mRNA水平显著上调,细胞耗氧量显著增加,而DE2-3细胞成脂分化功能无显著性差异。在DE2-3细胞中敲低PAQR9,UCP1的mRNA水平显著下调。在C3H10T1/2细胞第4~6天脂肪细胞分化成熟时,PAQR9的mRNA水平显著上调,在敲低PAQR9后UCP1蛋白质水平下调,而C3H10T1/2细胞成脂分化功能无显著性差异。结论 PAQR9能够促进棕色脂肪细胞产热,调控产热基因UCP1的表达。     

Medium-Chain Triglyceride Activated Brown Adipose Tissue and Induced Reduction of Fat Mass in C57BL/6J Mice Fed High-fat Diet

Objective To investigate activation of brown adipose tissue (BAT) stimulated by medium-chain triglyceride (MCT). Methods 30 Male C57BL/6J obese mice induced by fed high fat diet (HFD) were divided into 2 groups, and fed another HFD with 2% MCT or long-chain triglyceride (LCT) respectively for 12 weeks. Body weight, blood biochemical variables, interscapular brown fat tissue (IBAT) mass, expressions of mRNA and protein of beta 3-adrenergic receptors (β3-AR), uncoupling protein-1 (UCP1), hormone sensitive lipase (HSL), protein kinase A (PKA), and adipose triglyceride lipase (ATGL) in IBAT were measured. Results Significant decrease in body weight and body fat mass was observed in MCT group as compared with LCT group (P<0.05) after 12 weeks. Greater increases in IBAT mass was observed in MCT group than in LCT group (P<0.05). Blood TG, TC, LDL-C in MCT group were decreased significantly, meanwhile blood HDL-C, ratio of HDL-C/LDL-C and norepinephrine were increased markedly. Expressions of mRNA and protein ofβ3-AR, UCP1, PKA, HSL, ATGL in BAT were greater in MCT group than in LCT group (P<0.05). Conclusion Our results suggest that MCT stimulated the activation of BAT, possible via norepinephrine pathway, which might partially contribute to reduction of the body fat mass in obese mice fed high fat diet.     

黄芪对高脂饲养大鼠脂肪组织分布的影响

目的 :探讨黄芪改善高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的机制。方法 :高脂饲养大鼠 ,治疗组同时灌服黄芪 ,对照组不灌服 ,另设正常饮食之正常对照组。采用葡萄糖 -胰岛素耐量实验测量大鼠胰岛素敏感性 (K值 ) ,并观察不同部位脂肪组织重量的变化及其与胰岛素敏感性 (K值 )的关系。结果 :7周后 ,对照组大鼠K值减小 ,腹腔脂肪组织重量增加 ;治疗组大鼠经黄芪治疗后K值较正常组有所减小 ,但与对照组相比明显增大 ;治疗组大鼠腹腔脂肪组织重量未见增加 ,与对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1) ,与正常对照组相比未见明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :黄芪具有改善胰岛素抵抗的作用 ;黄芪改善高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的机制可能与调控脂肪细胞分布有关。