HBV DNA在HBsAg阴怀的原发性胆管细胞性肝癌石蜡包埋肝…

对２４例酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）ＨＢｓＡｇ阴性的生胆管细胞肝癌的石蜡包埋肝组织，ＰＣＲ－ＥＢ法检测了乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，并与ＥＬＩＳＡ法检测的血表免疫学标志物（乙肝５项；ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ抗０－ＨＢｅ、抗－０ＨＢｃ）结果进行对比。结果显示血肖学乙肝５项均阴性的及ＨＢｓＡｇ阴性但其它４项中至少有１项阳性的胆和细胞性肝癌石蜡包埋肝组织中，ＨＢＶＤＮＡ阳性检出率分别为３８     

PCR检测HBV—DNA对探讨肝癌病因的意义

为探讨乙肝病毒复制标志物在原发性肝细胞癌发生中的病因学意义，我们应用多聚酶链瓜尖方法检测了启东，泰兴１４０例ＨＣＣ病例和２４７例对照的血清乙型肝炎病毒ＤＮＡ，并结合其它乙肝病毒指标，分析了ＨＢＶ－ＤＮＡ在ＨＣＣ发生中的病因学作用。结果显示：ＰＣＲ方法检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的灵敏度和特异度均较高，在探讨ＨＣＣ的病因中具有重要的应用价值。     

应用聚合酶链反应进一步探讨原发性肝癌与HBV,HCV感染的关系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测原发性肝癌（ＰＨＣ）及肝硬化（ＬＣ）患者血中ＨＢＶ－ＤＮＡ及ＨＣＶ－ＲＮＡ，同时检测血中乙肝５项标志及抗－ＨＣＶ。结果５６例ＰＨＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者４３例（７６．７８％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者４２例（７５．００％），两种方法联合应用阳性率为４９例（８７．５％）；其中３４例检测ＨＣＡ－ＲＮＡ阳性者８例（２３．５３％）。６２例ＬＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者３５例（５６．４５％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者３８例（６１．２９％），二者联合应用阳性数为４５例（７２．５８％），其中３４例检测ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性数为９例（２３．６８％）。ＰＨＣ组ＨＢＶ感染率显著高于ＬＣ组（Ｐ＜０．０５），ＨＣＶ感染率两组差异无显著性（Ｐ＜０．０５）。并对ＨＢＶ、ＨＣＶ感染与ＬＣ、ＰＨＣ的发生发展作进一步讨论。     

石蜡包埋肝组织中乙型肝炎病毒DNA的检测

石蜡包埋肝组织中乙型肝炎病毒ＤＮＡ的检测骆抗先，梁炽森，何海棠，侯金林，陈伟华，章廉检测肝内乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶＤＮＡ），一般从组织匀浆中提取ＤＮＡ，用斑点或Ｓｏｕｔｈｅｒｍ吸印转移杂交。我们曾报告１０９例慢性无症状ＨＢＶ携带者（ＡｓＣ）...     

用原位PCR研究石蜡包埋肝组织中微量HCV RNA

为定位分析石蜡包埋肝组织中微量ＨＣＶ ＨＮＡ，改良建立了原位ＰＣＲ检测技术，并对１７例丙型肝炎相关的肝细胞癌患者癌组织和癌周肝组织石蜡包埋切片进行检测。结果显示：该技术的特异性可靠，敏感性高于原位杂交法；两种组织切片ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率分别为４１．２％和７０．６％，阳性信号主要呈胸浆型分布；     

HBsAg携带者HBV DNA的检测及结果分析

本文用聚合酶链反应技术，检测了３８７例ＨＢｓＡｇ携带者人群中的ＨＢＶ ＤＮＡ，其阳性率为３５．９％，男性的阳性率（３９．１５％）高于女性（３２．８％），且随年龄的增高而明显下降，并与ＨＢｓＡｇ滴度呈正相关。认为可通过观察ＨＢｓＡｇ滴度来估计乙型肝炎病毒是否复制和具有传染性的指标。     

PCR技术用于检测肝细胞癌石蜡包埋肝组织中的HBV DNA

用多聚酶链反应(PCR)技术检测了16例肝细胞性肝癌(HCC)患者癌灶和癌旁双份组织石蜡包埋标本中的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)。以C基因引物扩增HBV-DNA,32份标本中检出率71.87％。以新鲜冷冻肝标本作对照检出率81.25％,二者相比无显著性差别(X~=0.57,P>0.05)。以质粒提取HBV-DNA作灵敏度测定,PCR-EB可达10fg,PCR-SBH可达lag。应用非放射性的地高辛素标记探针作杂交灵敏度达~32P标记探针的水平。     

肝外胆管癌组织中HBV DNA的检测及意义

1　材料和方法1 1　材料　 5 1例肝外胆管癌 (血清ＨＢｓＡｇ阳性率 3 9% )来自解放军总医院 ,常规石蜡包埋。引物 :5′ＧＣＣＴＴＧＧＧＴ ＧＧＣＴＴＧＧＧＧＣ3′ ,5′ＣＣＴＧＡＧＴＧＣＴＧＴＡＴＧＧＴＧＡ 3′。探针 :5′ＧＡＧＡＴＣＴＣＣＴＴＧＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＴＧＣ 3′,生物素标记 ,上海生物工程公司合成并标记。Ｓ Ａ/ＨＲＰ购自中山生物技术有限公司。原位ＰＣＲ扩增仪为美国ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ公司产品 :ＧｅｎｅＡｍｐＳｙｓｔｅｍ 10 0 0。1 2　方法　切片脱蜡 ,蛋白酶Ｋ消化 ,加扩增反应液每片5 0 μｌ(Ｍｇ2 2…     

HBsAg阳性原发性肝癌根治术后血清HBV DNA水平对肝癌复发的影响

目的 探讨HBsAg阳性原发性肝癌根治切除术后血清HBV DNA水平对肝癌复发的影响.方法 HBsAg阳性原发性肝癌72例行根治性切除并经病理证实,检测术后1,3,6月血清HBV DNA水平、肝功能、复发时间与临床病理资料,行并统计学分析.结果 术后不同时期血清HBV DNA水平变化差别无统计学意义(P>0.05);HBV DNA高水平、低水平、阴性组的术后2年复发率和中位复发时间分别为70%、45.57%、36.36%和14、34、41月,高水平与低水平、阴性组比较差别均有显著性统计学意义(P<0.01);多因素COX回归分析肝癌术后复发危险因素为门静脉分支癌栓、血清HBV DNA水平和肿瘤分化程度(P<0.05).结论 肝癌根治术后血清HBV DNA持续高水平是肝癌术后复发的危险因素.     

同一HBV感染者外周血单个核细胞与肝组织中HBV DNA

用聚合酶链反应(PCR)及Southern印迹杂交检测了16例慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)及肝组织中HBV DNA.有13例同时在PBMCs及肝组织中检出HBV DNA,1例仅在PBMCs中检出,1例只在肝组织中检出。结果表明,在慢性HBV感染过程中PBMCs可同时被感染。     

用原位 PCR 研究石蜡包埋肝组织中微量 HCV RNA

为定位分析石蜡包埋肝组织中微量ＨＣＶＲＮＡ，改良建立了原位ＰＣＲ检测技术，并对１７例丙型肝炎相关的肝细胞癌患者癌组织和癌周肝组织石蜡包埋切片进行检测。结果显示：该技术的特异性可靠，敏感性高于原位杂交法；两种组织切片ＨＣＶＲＮＡ阳性率分别为４１．２％和７０．６％，阳性信号主要呈胞浆型分布；在癌细胞中核型和核膜型分布比例较癌周肝组织明显增高，提示ＨＣＶ可能与宿主细胞基因存在着相互作用。     

晚期原发性肝癌患者血清PCR－HBV DNA的意义

目的：为进一步研究ＨＢＶ感染与原发性肝细胞癌的关系．方法：ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ和抗－ＨＢｓ；ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ．结果：３７例晚期原发性肝癌患者血清ＨＢ－ｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ阳性者分别为１７例（４５．９５％），４例（１０．８１％），１６例（４３．２４％）和９例（２４．３２％），而抗－ＨＢｓ全部阴性．聚合酶链式反应检测ＨＢＶＤＮＡ，１８例（４８．６９％）阳性，非常显著地高于ＨＢｅＡｇ检出率（Ｐ＜０．０１）．抗－ＨＢｅ阳性中有７例ＰＣＲ－ＨＢＶＤＮＡ阳性．ＨＢＶ总感染率８９．１９％．结论：提示原发性肝癌发生与ＨＢＶ感染有关．     

肝癌石蜡包埋组织miRNA提取方法的优化

目的改进并优化从肝癌(HCC)甲醛固定石蜡包埋组织(FFPE)提取并检测微小RNA(miRNA)的方法。方法使用miRNeasy FFPE试剂盒探讨提取HCC石蜡组织miRNA最佳切片厚度及蛋白酶K作用时间。实时定量RT-PCR检测miR-221、miR-146a、let7-a、miR-191、miR-103及RNU6B的表达量。将HCC细胞制成石蜡组织,对比同一细胞系新鲜细胞及石蜡包埋细胞的各个miRNA表达量差异。结果切片厚度30μm,蛋白酶K作用时间48h时提取miRNA效果最佳。各HCC细胞系及临床HCC石蜡组织均有不同水平的miRNA-221、miR-146a、let7-a、miR-191、miR-103及RNU6B表达。同一细胞系新鲜细胞与石蜡包埋后的各miRNA表达无明显差别。结论改良后的miRNeasy FFPE提取方法能提取石蜡组织中的miRNA,可重复性强,可推广用于临床各种石蜡包埋组织的miRNA提取。     

应用聚合酶链反应检测乙肝患者外周血单个核细胞HBV.DNA的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测６０例乙型肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及血清ＨＢＶ．ＤＮＡ阳性率分别为７６．７％和４５％，尤其在急性乙肝（ＡＨ）或抗ＨＢｅ阳性或抗ＨＢｓ阳性的患者中，ＨＢＶ．ＤＮＡ在ＰＢＭＣ中检出率显著高血清，提示ＨＢＶ．ＤＮＡ普遍存在乙肝患者甚至ＨＢｓＡｇ转阴的病人ＰＢＭＣ中，可能是肝脏病病变反复活动及病毒重复感染的来源。因此也导致既往有ＨＢＶ感染史的ＨＢｓＡｇ阴性献血员传