应用基因芯片技术筛查卵巢癌相关基因

目的 探讨卵巢癌组织中相关基因的差异表达。方法 应用含有512条人类基因的cDNA芯片,检测卵巢癌组织和正常组织中相关差异表达的基因。结果 共筛查与卵巢癌相关的差异表达的基因37条,其中14条基因表达增加(上调),23条基因表达减少(下调)。结论 应用基因芯片技术,可筛查出新的卵巢癌相关基因。     

基因芯片在卵巢癌相关基因研究中的应用

人类基因组计划已进入功能基因组时代，随着致癌基因的破译和肿瘤敏感药物的开发应用，人类对肿瘤的研究已取得了日新月异的进展。拥有大规模、高通量特点的基因芯片技术在卵巢癌的研究方面发挥着举足轻重的作用：     

雌孕激素受体基因及其相关基因在卵巢癌组织中的表达

目的应用基因芯片技术筛查卵巢癌雌孕激素受体基因及其相关基因表达。方法制备含有雌孕激素受体及其相关基因表达谱芯片，分别提取人正常卵巢组织及卵巢癌组织的mRNA，通过逆转录PCR方法，将^33P—dATP分别标记两种组织的cDNA纯化后与表达谱芯片进行杂交及扫描，用ImaGene3．0软件分析信号的强度和比值，筛选雌孕激素受体相关基因。对雌孕激素受体基因信号绝对值按早、晚期求均值及标准差筛选受体基因。结果筛选出4条雌孕激素受体基因、受体相关基因12条。结论通过基因芯片技术方法，初步筛出了卵巢癌雌孕激素受体基因及其相关基因。     

BRCA1基因与遗传性卵巢癌的相关研究

BRCA1(breast cancer susceptibility gene 1)作为一个肿瘤抑制基因,与遗传性卵巢癌(hereditary ovarian cancer syndrome,HOCS)的发生高度相关.该基因通过不同途径对细胞进行调节与监控.BRCA基因突变为生殖细胞突变,按照常染色体显性遗传的方式在家族中传递,从而导致了遗传性卵巢癌的发生.对BRCA1基因进行检测,并从某些环节给予干预,可能为遗传性卵巢癌的预防及治疗提供新思路.     

BRCA1基因与遗传性卵巢癌的相关研究

BRCA1(breast cancer susceptibility gene 1)作为一个肿瘤抑制基因,与遗传性卵巢癌(hereditary ovarian cancer syndrome,HOCS)的发生高度相关。该基因通过不同途径对细胞进行调节与监控。BRCA基因突变为生殖细胞突变,按照常染色体显性遗传的方式在家族中传递,从而导致了遗传性卵巢癌的发生。对BRCA1基因进行检测,并从某些环节给予干预,可能为遗传性卵巢癌的预防及治疗提供新思路。     

卵巢癌化疗耐药相关基因与预后的研究进展

卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤，死亡率居妇科之首。化疗是目前治疗卵巢癌的重要手段之一。化疗耐药是影响晚期卵巢癌患者预后的主要原因。卵巢癌化疗耐药是多基因多因素共同参与的结果。近年来卵巢癌化疗耐药相关基因成为监测预后的指标。主要从细胞内有效药物浓度的降低（MDR基因，MRP，LRP，GST），药物作用的靶点异常（微管蛋白基因），DNA损伤修复功能异常（MMR，BRCA1基因）及细胞凋亡异常（p53、bcl—2基因、caspase，survivin基因）这四个方面对卵巢癌化疗耐药相关基因及其与预后作一综述。     

基因芯片在筛选卵巢癌基因中的应用研究

目的:研究人卵巢癌相关基因在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的差异表达。方法:用含512条癌及抑癌基因的cDNA表达谱芯片研究一组卵巢癌组织样本的基因表达谱。结果:共筛选出差异表达与癌相关的基因54条,其中18条表达上调,36条表达下调。结论:用基因表达谱芯片研究基因谱,可有效的筛选出新的卵巢癌相关基因。     

基因芯片技术在卵巢癌相关基因研究中的应用

随着人类基因组框架的完成，人类基因组计划已经进入后基因组时代，功能基因组研究已经成为当代科学家科学研究的方向。这时首先迫切需要一种大规模、高通量的研究方法，基因芯片技术应运而生。     

重组凋亡素基因特异性诱导卵巢癌细胞凋亡的体外研究

卵巢癌是女性生殖器官三大恶性肿瘤之一，其死亡率位居妇科恶性肿瘤之首。随着分子生物学的发展，卵巢癌的治疗性研究已进入到基因水平。研究发现，利用合适的载体将鸡贫血病毒（chicken anemia virus，CAV）的凋亡素基因（即VP3基因）导入靶细胞，能特异性诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞无影响，提示凋亡素基因是用于恶性肿瘤基因治疗的一个理想的目的基因。迄今为止，国内外尚未有凋亡素基因对卵巢癌细胞影响的报道。为了探讨凋亡素基因能否诱导卵巢癌细胞及其耐药株细胞凋亡，而对正常卵巢细胞无影响，本研究构建了重组凋亡素基因真核表达质粒pcDNA3．1-VP3，并将其转染人正常卵巢细胞（中国仓鼠卵巢细胞株CHO-K1）、人卵巢癌细胞株COC1及其顺铂耐药细胞株COCl／DDP，观察凋亡素基因对这些细胞的影响，为凋亡素基因治疗卵巢癌的临床研究提供理论和实验依据。     

卵巢癌与基因检测的规范化

随着卵巢癌精准治疗的全面推广,肿瘤易感基因检测的需求日益增长.国内外指南均建议卵巢癌患者在初次病理确诊时进行BR CA 1/2胚系基因检测,以确定是否为遗传性上皮性卵巢癌,同时可预测患者对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)抑制剂的获益.准确识别遗传性上皮性卵巢癌,可...     

Characterization of differentially expressed genes in ovarian cancer by cDNA microarrays

The molecular events leading to the development and progression of ovarian carcinoma are not completely understood. We performed a large-scale survey for the identification of differentially expressed genes between ovarian carcinoma and normal ovarian tissue by using cDNA microarray analysis. We utilized 512 member human novel putative oncogene and tumor suppressor gene cDNA microarrays to study the differences in gene expression between ovarian carcinoma and normal ovarian tissues. Some differentially expressed genes have been further confirmed by immunohistochemical analysis. A total of 39 differentially expressed genes were identified, of which 16 and 23 were specifically expressed in ovarian cancer and normal ovarian tissue, respectively. The comparison of average signal of differentially expressed genes exhibited at least a twofold difference in expression. The differentially expressed genes may be related to the carcinogenesis and progression of the malignant growth. The use of cDNA microarrays allows simultaneous monitor of the expression of many genes, thereby it speeds up the identification of differentially expressed genes. It is essential for further exploration of the mechanisms of the disease.     

应用抑制性消减杂交筛选卵巢癌紫杉醇耐药差异表达基因

目的:应用抑制性消减杂交技术研究人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OC3/Tax300与其亲本细胞OC3(敏感株)之间基因表达的差异,筛选耐药相关基因,探讨基因表达差异与卵巢癌耐药的相关性。方法:以卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OC3/Tax300 mRNA为检测子(tester),以其亲本细胞OC3(敏感株)mRNA为驱赶子(driver),构建cDNA消减文库。随机挑取文库克隆测序,所得结果在GenBank中做同源性比较分析。结果:成功构建了卵巢癌紫杉醇耐药细胞株的特异性cDNA消减文库。从文库中选取阳性克隆,其中76个测序成功,再随机选取36个序列与GenBank数据库进行初步比对,8个可能为新基因,1个为蛋白序列,另27个来源于16个已知基因,这些差异表达基因主要涉及细胞代谢、信号转导、细胞骨架、凋亡、蛋白翻译合成、发育等相关基因。结论:部分基因表达差异与卵巢癌紫杉醇耐药有关。     

罗勒多糖对卵巢癌生物学行为的影响及其机制研究

目的:观察中药罗勒多糖对卵巢癌生物学行为的影响,探讨其抗卵巢癌作用的可能机制。方法:建立荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型,观察罗勒多糖对荷瘤鼠肿瘤生物学行为的影响;抽提肿瘤组织总RNA,逆转录标记cDNA探针,用Cy3-dUTP标记对照组,Cy5-dUTP标记实验组,与表达谱芯片进行杂交,ImaGene3.0软件分析统计。同时取肿瘤组织,进行常规病理学检测。结果:与对照组相比,罗勒多糖治疗组肿瘤的生长及转移行为都受到明显的抑制:肿瘤数量减少,体积减小,腹水量显著减少(P<0.05);腹腔脏器转移程度积分显著降低(P<0.01)。罗勒多糖作用后,卵巢癌的基因表达谱发生了明显变化,应用表达谱芯片共筛选出168条差异表达基因。结论:罗勒多糖通过多个药效靶点抗肿瘤增殖及转移。     

The prohibitin 3' untranslated region polymorphism in patients with ovarian cancer

OBJECTIVE: Prohibitin is an important antiproliferative protein inhibiting cell proliferation by blocking the G1/S transition of the cell cycle. Recent findings indicate that the presence of at least one mutant allele within a certain prohibitin gene polymorphism causes inactivation of bioactive RNA resulting in the loss of its pro-apoptotic function and a subsequent risk for malignant growth. Based on these findings we studied whether the presence of this prohibitin polymorphism increases the risk and worsens the prognosis of ovarian cancer in Caucasian women. STUDY DESIGN: A polymorphism within the 3' untranslated region (UTR) of the prohibitin gene was evaluated by pyrosequencing in 136 Caucasian patients with epithelial ovarian cancer and 129 healthy Caucasian controls. RESULTS: The wild-type C/C, heterozygous C/T, and the mutant T/T prohibitin genotype was found in 88 (64.7%), 46 (33.8%), and 2 (1.5%) patients with ovarian cancer and in 84 (65.1%), 39 (30.2%), and 6 (4.7%) healthy controls. Presence of at least one mutant allele of the prohibitin 3' UTR polymorphism was not associated with an increased risk of ovarian cancer as compared to healthy controls (P=0.9). No association was found between presence of the prohibitin 3' UTR polymorphism and the clinico-pathological parameters tumor stage, tumor grade, and patients' age at diagnosis. Presence of at least one mutant allele of the prohibitin 3' UTR polymorphism was not associated with disease-free and overall survival. CONCLUSION: The prohibitin 3' UTR polymorphism was not associated with risk and prognosis of ovarian cancer in Caucasian women.     

卵巢上皮性癌细胞转移相关蛋白的比较蛋白组学分析

目的筛选卵巢上皮性癌（卵巢癌）转移相关蛋白,进一步探讨卵巢癌的转移机制。方法以卵巢癌细胞系HO-8910和高转移卯巢癌细胞系HO-8910PM为研究对象,采用比较蛋白组学的研究技术（双向电泳、质谱分析）,筛选两个细胞系中差异表达的蛋白质。结果高转移细胞系HO-8910PM与卵巢癌细胞系HO-8910比较,共出现了21个差异表达蛋白质点,其中16个蛋白质点表达上调,5个蛋白质点表达下调。21个差异表达蛋白质点有17个被鉴定,并分为7大类,即锌指蛋白、钙结合蛋白、DNA修复及合成蛋白、细胞调节蛋白、细胞代谢相关蛋白、细胞信号和传导蛋白及细胞表面抗原。结论卵巢癌细胞系HO-8910和高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM的蛋白质表达存在明显差异。     

卵巢癌细胞c－erbB2基因表达与细胞免疫的关系及基因的反义调控

利用卵巢癌细胞株３ＡＯ和ＡＯ，采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、流式细胞分析和乳酸脱氢酶释放法，在体外进行卵巢癌细胞ｃ－ｅｒｂＢ２表达与细胞免疫的关系及ｃ－ｅｒｂＢ２反义脱氧寡核苷酸的反义调控（ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏ）研究。结果：ｃ－ｅｒｂＢ２高表达可抑制肿瘤坏死因子和淋巴因子激活杀伤细胞的杀伤活性，对以过氧化氢为代表的非特异性杀伤活性无明显影响；ｃ－ｅｒｂＢ２反义脱氧寡核苷酸可特异性降低ｃ－ｅｒｂＢ２的高表达，改善肿瘤坏死因子和淋巴因子激活杀伤细胞的杀伤活性。提示：ｃ－ｅｒｂＢ２反义脱氧寡核苷酸富含ｃ－ｅｒｂＢ２高表达，对卵巢癌的治疗有一定作用。     

MRP3基因参与卵巢癌细胞拓扑替康耐药机制形成的研究

目的:分析人卵巢癌SKOV3/TPT多药耐药的分子机制,寻找可能参与拓扑替康(TPT)耐药机制的新基因。方法:采用大剂量间歇诱导法,对SKOV3细胞株用TPT反复冲击诱导培养,获得稳定的SKOV3/TPT;利用Affymetrix U133A基因表达谱芯片,比较SKOV3及SKOV3/TPT细胞的基因表达;从中选择高表达的MRP3基因进行RT-PCR验证。再将MRP3反义及正义寡核苷酸片段分别用脂质体转染进耐药细胞,用MTT法、流式细胞仪及半定量RT-PCR检测体外转染后细胞内TPT的荧光强度、耐药指数及MRP3 mRNA表达的改变。结果:基因芯片检测发现,有7个差异表达基因可能参与了SKOV3/TPT细胞的耐药,其中4个基因被上调,3个基因被下调,MRP3为上调最明显的基因。MRP3反义寡核苷酸转染SKOV3/TPT细胞后,可明显降低细胞内TPT的浓度及耐药指数(P<0.05),细胞内MRP3 mRNA的表达较未转染细胞下降了60.16%(P<0.05)。结论:SKOV3/TPT细胞耐药表型的形成涉及多个基因表达的改变。MRP3的高表达导致细胞内药物浓度降低,可能是卵巢癌细胞对TPT耐药的主要原因。