亚砷酸钠对人皮肤细胞增殖作用的影响

目的：探讨亚砷酸钠对人皮肤细胞增殖作用的影响。方法：使用原代培养的人真皮成纤维细胞和表皮细胞，采用直接细胞计数法和MTT法检测亚砷酸钠对两种细胞系生长的影响。结果：成纤维细胞较表皮细胞易于培养；MTT法检测，不同剂量的亚砷酸钠与对照组比较，吸光度值均有提高，有剂量－效应关系（P＜0.01)；0.5-8.0μmol/L的亚砷酸钠对成纤维细胞有明显增殖作用；低浓度（0.8μmol/L、1.6μmol/L)对表皮细胞有明显的增殖作用，浓度高于3.2μmol/L时，表皮细胞生长受抑制；10.00μmol/L亚砷酸钠对成纤维细胞有毒性作用。结论：无机砷诱导人皮肤细胞的增殖作用可能是引起慢性砷中毒皮肤损伤的重要原因，具体作用机制有待进一步研究。     

生长调节物质对霍山石斛试管苗生根的影响

目的 研究不同生长调节物质和有机添加物对霍山石斛原球茎试管再生苗生根的影响。方法 将试管苗分别培养在添加不同浓度的NAA，IBA，BA，KT，香蕉泥或氨基酸的MS基本培养基中诱导生根，观察并统计试管苗生根状况。结果 不同NAA，IBA，BA，KT，香蕉泥或氨基酸添加浓度对试管苗生根率、根长、生根数及长势的影响有明显差异，它们的适合浓度分别为0．2，0．1，0．8，0．8mg／L，20％和0．1％。结论 NAA，IBA和香蕉泥对霍山石斛原球茎试管再生苗生根影响较大；氨基酸，BA和KT对生根作用不明显；KT有持绿作用。     

姜黄素改变端粒酶活性对肝癌细胞体外增殖的影响

目的 观察姜黄素对人肝癌细胞株HepG2体外增殖和端粒酶活性的影响，为彰明其抗肝癌机制提供依据。方法 四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验检测细胞生长抑制率；流式细胞法检测细胞周期的分布；端粒片断重复扩增-酶联免疫吸附法（TRAP-ELISA）测定细胞端粒活性的变化；并用RT—PCR法检测细胞端粒酶hTERT—mRNA的表达。结果 姜黄素对HepG2细胞生长有显著的抑制作用，并呈明显的量效依赖性；不同浓度的姜黄素使G2／M期细胞比例明显增加，G1期／细胞比例明显降低；随姜黄素浓度的增加，HepG2细胞端粒酶活性依次下降；不同浓度提取物对HepG2细胞的hTERT—mRNA表达均有明显抑制作用，具有显著的量效关系。结论 姜黄素对HepG2细胞有明显的生长抑制作用，可能作用机制为诱导细胞周期G2／M期阻滞并抑制HepG2细胞端粒酶hTERT-mILNA的转录，从而降低端粒酶的活性。     

三种蟾毒单体对SMMC-7721和BEL-7402人肝癌细胞生长的抑制作用

目的：探讨蟾蜍中主要蟾毒内酯类成分蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基的抗肝癌作用及机制。方法：以SMMC—7721、BEL—7402人肝癌细胞为靶细胞，以丝裂霉素为阳性对照药物，应用四甲基偶氟唑盐比色法、锥虫蓝染色和DNA染色分析法观察这3种蟾毒单体对肝癌细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。结果：蟾毒灵和华蟾酥毒基对上述肝癌细胞具有明显生长抑制作用，华蟾酥毒基较蟾毒灵作用略弱，但两者达到相同生长抑制效果所需浓度均低于丝裂霉素，酯蟾毒配基只有在较高浓度下才显示对肝癌细胞的生长抑制作用；不同浓度蟾毒灵、华蟾酥毒基对人肝癌细胞细胞膜具有破坏作用；可使人肝癌细胞阻止于G2／M期，使处于S期的细施比例降低，并有明显诱导肝癌细胞凋亡作用。结论：蟾毒灵、华蟾酥毒基对上述人肝癌细胞具有明显生长抑制作用，具有对肝癌细胞膜的直接破坏作用和诱导凋亡作用；酯蟾毒配基抗肿瘤作用较弱。     

淫羊藿甙、薯蓣皂甙元和染料木素对新生大鼠颅骨细胞增殖和分化的影响

目的探讨淫羊藿甙、薯蓣皂甙元、染料木素对新生大鼠颅骨细胞增殖和分化的影响。方法体外培养新生大鼠颅骨细胞，通过描绘细胞生长曲线、细胞计数及碱性磷酸酶活性测定等方法，观察不同浓度淫羊藿甙、薯蓣皂甙元和染料木素对新生大鼠颅骨细胞的作用效果。结果淫羊藿甙、染料木素在10^-8～10^-5mol／L浓度范围内对细胞增殖没有明显效果，薯蓣皂甙元在10^-8～10^-4mol／L浓度范围内对细胞生长作用不明显，在10^-5mol／L时对细胞有明显的抑制杀伤作用；3种药物在10^-8～10^-6mol／L浓度范围内，对细胞内碱性磷酸酶的活性有轻微抑制作用，其中以淫羊藿甙较为显著，抑制作用随药物作用时间延长、浓度提高而有所增加。结论3种药物对新生大鼠颅骨原代细胞的增殖无促进作用。     

HT-29细胞生长增殖的影响及其机制初探

目的 研究经过温热、放射及热放联合处理后人大肠癌HT-29细胞系生长增殖的变化情况。方法 温热、放射及热放联合处理后，观察不同处理方法对体外培养人大肠癌TH-29细胞系在电镜下的形态改变。结果 与单纯温热或照射相比，联合处理后的HT-29细胞生长和增殖能力受到更明显的抑制，同时明显增加了HT-29细胞的凋亡比例：温热对HT-29细胞杀伤作用以胞浆损伤尤为明显，照射对HT-29细胞杀伤作用表现在以细胞凋亡形式为主的细胞核损伤，经联合处理造成胞浆与核的共同损伤。结论 与单纯温热或照射处理相比，联合处理能够更明显抑制HT-29细胞的生长增殖能力，加重细胞损伤；温热、照射联合杀伤效应机制可能在于两种处理侧重于不同的靶结构。     

左旋精氨酸治疗胎儿宫内生长迟缓的临床观察

目的 观察左旋精氨酸治疗胎儿宫内生长迟缓（IUGR）的临床疗效，探讨其可能的作用机制。方法 将50例胎儿宫内生长迟缓住院治疗的孕妇分为两组，用左旋精氨酸与氨基酸综合治疗30例（精氨酸组），单一用氨基酸治疗20例（氨基酸组）。结果 精氨酸组新生儿出生体重显著高于氨基酸组（P＜0．05）；精氨酸组胎儿生长参数包括双顶径、股骨长度、胎儿体重的增长均较氨基酸组快（P＜0．05）；治疗后精氨酸组孕妇血清雌三醇显著增高（P＜0．05），而氨基酸组无明显差异（P＞0．05）；精氨酸组治疗后脐动脉血流参数RI、S／D显著下降（P＜0．01）。未发现左旋精氨酸对母儿有明显不良反应。结论 左旋精氨酸具有改善胎盘功能，促进胎盘转运氨基酸的作用，其疗效优于单一氨基酸治疗。     

顺铂与白藜芦醇联合应用对人胃癌MGC803细胞作用的研究

目的研究顺铂（CDDP）联合白藜芦醇（RES）对人胃癌MGC803细胞株的影响。方法采用MTT法检测两种药物单用和联合应用对细胞的作用，联合应用判断两药舍用效果，流式细胞仪检测MGC803细胞周期分布。结果CDDP可抑制MGC803细胞的生长，且呈荆量及时间依赖性（P〈0．05）；CDDP对人胚肺成纤维细胞（HPF）生长起促进作用，且呈剂量依赖性（P〈0．05）；CDDP与RES联合应用对MGC803细胞生长的抑制具有协同作用（P〈0．05）；CDDP对G0／G1期有阻滞作用，RES有明显的S期阻滞作用，两者可从不同环节抑制细胞增殖。结论CDDP对胃癌MGC803细胞有抑制作用，相同剂量对正常细胞无抑制作用。CDDP与RES对胃癌细胞的抑制具有协同作用，与单用RES相比，CDDP与RES联合应用可减少RES的用药剂量。     

十一酸睾酮对胃上皮细胞生长的实验研究

目的：观察十一酸睾酮对正常胃上皮细胞株HFI－145生物学行为的影响，评价此药的安全性。方法：用不同浓度的十一酸睾酮作用细胞，MTT方法研究细胞生长状况，FCM观察细胞周期分布，TUNEL法检测细胞凋亡。比较不同浓度作用组间差异以及与对照组的差异。结果：0．0004μmol/L－0．4μmol/L十一酸睾酮对HFI－145细胞作用不明显，4μmol/L逍度能抑制细胞生长，并且有时间依赖性，作用第3天抑制率为27％；4μmol/L用药组细胞的G0／G1期比较较对照组增多；FCM以及TUNEL未发现凋亡百分比的改变。结论：药理浓度范围内十一酸睾酮对正常胃粘膜上皮细胞无毒性作用，高浓度十一酸睾酮抑制胃上皮细胞生长。     

碳铂对A549肺癌细胞作用的光,电镜观察

用光镜和透射电镜观察了不同浓度碳铂对Ａ５４９肺癌细胞的作用。发现碳铂对细胞外形、细胞核及核仁有明显的作用。能使细胞由不规则形向圆形转变；细胞质密度增加，许多细胞中出现空泡，核内染色质在碳铂浓度低时无明显改变，浓度高时变得粗糙致密。核仁从大而不规则的网状型变成小而致密的球型。提示：碳铂对Ａ５４９肺癌细胞有明显的抑制和攻击作用，其可能通过核仁的抑制而阻止癌细胞ＤＮＡ复制及细胞生长，并对细胞内某些代谢活     

造血干细胞移植后免疫重建及其意义的研究进展

本文对造血干细胞移植后的免疫重建及其意义的研究进展作一综述,着重介绍移植后宿主体内T细胞、自然杀伤(NK)细胞及树突细胞(DC)数量和功能的变化。     

细胞培养技术的研究进展

随着现代科学的发展,体外细胞培养技术已成为多个领域必不可少的研究工具,并且其新技术和方法也在不断涌现。本文就细胞培养技术的发展、支架材料以及细胞培养的影响因素作一综述。     

EPCs在MSCs向肝样细胞转化中作用的初步探讨

目的：探讨内皮前体细胞(endothelial precursor cells, EPCs)在间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)向肝样细胞转化中的作用。方法：分离培养SD大鼠MSCs和EPCs,取第3代MSCs向肝样细胞转化培养,培养过EPCs的无血清及因子的培养基(endothelial progenitor cell-conditioned medium, EPCs-CM)、无血清的α-最低必需培养基(alpha minimal essential medium, α-MEM)分别与肝细胞转化培养基按1∶1比例配置,作为实验组和模型对照组,正常α-MEM培养基为空白对照组,分别观察细胞形态及数量变化;在培养3、5、7、9 d时应用免疫荧光检测甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)、清蛋白(albumin, ALB)的表达。结果：空白对照组MSCs形态无明显变化;实验组与模型对照组细胞均出现肝样细胞形态。空白对照组未见AFP、ALB表达,模型对照组和实验组在3、5、7、9 d AFP、ALB表达水平均增高,其中实验组比模型对照组AFP、ALB水平增高明显。结论：EPCs在MSCs向肝样细胞转化中可能起一定的促进作用。     

Culture and Identification of Human Amniotic Mesenchymal Stem Cells

Objective To establish the method of isolation, purification, and identification of human amniotic mesenchymal stem cells （hAMSCs）. Methods hAMSCs were isolated from human amniotic membrane by trypsin-collagenase digestion, and cultured in Dulbecco＇s modified Eagle＇s medinm/F12 medium supplemented with 10% fetal bovine serum. Phenotypic characteristics of these cells were analyzed by means of immunocytochemistry and flow cytometry. Results The cells successfully isolated from human amniotic membrane expressed representative mesenchymal cell surface markers CD44, CD90, and vimentin, but not CD45. Conclusions This study establishes a potential method for isolation of hAMSCs from human amnion, in vitro culture, and identification. The isolated cells show phenotypic characteristics of mesenchymal stem cells.     

大鼠胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定

利用无血清培养和细胞克隆技术从孕鼠(14d)胚胎中分离出神经干细胞，并进行传代培养，采用免疫细胞化学技术检测神经巢蛋白和成熟脑细胞特异性抗原神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase，NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)的表达，同时采用H-E染色法鉴定神经细胞类型。证实从大鼠胚胎大脑皮质分离出的细胞具有连续的克隆能力，并表达神经巢蛋白，分化的细胞表达神经元和神经胶质细胞的特异性抗原，为中枢神经系统的干细胞。     

人成纤维细胞产生的抑制因子对肿瘤和转化细胞增殖与分化的影响

对人成纤维细胞产生的抑制因子(HFDI)的细胞生长抑制效应进行研究,发现HFDI对肿瘤细胞~3H—TdR掺入抑制是由于使细胞变性坏死或促使细胞有限分化所致;并证明HFDI对PHA刺激的淋巴细胞转化的抑制,也是由于使转化细胞变性坏死或促使细胞向成熟方向发展所致。     

成人血源性间充质干细胞的分离和鉴定

目的建立一种分离、培养扩增成人血源性间充质干细胞(MSCs)的方法进行鉴定,并与骨髓源性MSCs比较生物学特性。方法30名成年志愿者随机平分为二组,一组直接抽静脉血,并细分为全血细胞法组和外周血密度梯度离心法组,同时抽骨髓为骨髓密度梯度离心法组;另一组为血细胞分离机法组。各组进行细胞存活率、集落形成率、形态学、流式表型分析、胶原染色等研究。结果外周血密度梯度离心法分离成人静脉血后培养,贴壁细胞呈梭形,集落形成率为(0.12±0.08)/106单个核细胞,传代扩增到第5代时每份平均细胞数达51.4674×106,表达CD44、CD54、CD105和CD166,不表达CD14、CD34、CD45和CD31,细胞分泌Ⅰ、Ⅲ型胶原。全血细胞法和血细胞分离机法获得的细胞不能连续多次传代。结论外周血密度梯度离心法比全血细胞法和血细胞分离机法简单,贴壁细胞培养扩增容易,获得的血源性MSCs与骨髓源性MSCs的生物学特性相似。     

新生豚鼠神经干细胞的分离培养、鉴定及标记

目的 从新生豚鼠海马中分离培养神经干细胞，为神经干细胞移植治疗感音神经性耳聋的实验研究创造条件。方法 分离新生豚鼠海马组织，用含碱性成纤维生长因子（bFGF）和表皮生长因子（EGF）无血清培养技术培养神经干细胞，免疫组化技术检测其巢蛋白（Nestin）的表达。采用荧光染料DAPI标记神经干细胞。结果 从新生豚鼠海马组织分离出的细胞中可获得呈集落样生长的神经干细胞团，并能表达Nestin；荧光染料的标记效率可达93．4％，细胞传代8次后荧光亮度仍无明显衰减。结论 从新生豚鼠海马分离的细胞具有明显的增殖能力，荧光染料的标记可获得较高的标记效率，可作为神经干细胞移植治疗感音神经性耳聋实验研究的供体细胞。     

睾丸支持细胞与骨髓间充质干细胞共培养的初步研究

目的 观察睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)与骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)共培养时SCs对MSCs扩增的影响. 方法 取雄性SD大鼠睾丸,分离出SCs,取SD大鼠,分离出骨髓MSCs,将两种细胞用"三明治"式的方法共培养7 d. 结果 共培养组的MSCs前四天生长较对照组快,第5天无明显差异,第6和第7天细胞数量迅速减少. 结论 在体外共培养的早期,SCs可以显著促进MSCs的生长,但在后期则反而抑制MSCs的生长,具体原因有待进一步研究.     

大鼠胃壁细胞的分离及培养

目的　完成胃壁细胞分离及纯化 ,建立原代培养胃壁细胞的方法 .方法　制备大鼠翻转的胃囊用含链霉蛋白酶E的消化液注入胃囊内孵育 ,并用磁力搅拌器轻轻搅拌而制备单个的胃底腺细胞 ,Percoll梯度离心富集胃壁细胞 ,用含10 0 m L· L- 1 血清的 PBS或培养液 ,时差贴壁去除成纤维细胞 ,然后 ,将壁细胞接种于培养板中 ,培养液用无血清的 1∶ 1Harm's F- 12 / DMEM培养 ,内含胰岛素 5 mg· L- 1 ,氢化可地松 4μg· L- 1 ,转铁蛋白 5 mg· L- 1 ,硒酸钠 5μg· L- 1 ,牛血清白蛋白 2 g· L- 1 ,表皮生长因子 2 5 μg· L- 1 ,葡萄糖 1.98g· L- 1持续培养可达 1wk以上 .结果　获得的壁细胞经吖啶橙 (acridine orange,AO)鉴定纯度达 80 %以上 ,原代培养经HE染色可见壁细胞呈分散小组式生长 ,且生长状态良好 .结论　此方法适宜于大鼠胃壁细胞的分离及体外培养 ,为体外进一步研究壁细胞的功能打下基础 .