抑制ERK1/2通路对卡铂诱导人卵巢癌细胞凋亡的影响

目的:探讨抑制ERK1/2通路对卡铂诱导卵巢癌细胞凋亡作用的影响。方法:采用Hoechst 33258荧光染色法检测抑制ERK1/2通路对卡铂诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡的影响;用分光光度法检测卡铂浓度的增加及抑制ERK1/2通路对卵巢癌HO-8910细胞Caspase-8和Caspase-9活化的影响。结果:CBP组、PD98059组及联用组部分细胞核呈现亮蓝色荧光的为凋亡细胞,细胞核可见碎块状荧光信号,凋亡指数CBP组为20.35%,PD98059组为15.21%,联用组为29.78%。随着卡铂浓度的增加,Caspase-8、Caspase-9活性的改变并不明显(P>0.05),而联用组的Caspase-8、Caspase-9活性最高,抑制ERK1/2通路可促进卡铂增强Caspase-8、Caspase-9的活性(P<0.01)。结论:抑制ERK1/2通路可促进卡铂诱导卵巢癌细胞凋亡作用,并与Caspase-8、Caspase-9活化有关。     

二氢杨梅素诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡及机制研究

目的二氢杨梅素体外对人卵巢癌HO-8910细胞生长、凋亡的影响,及其作用机制的探讨。方法体外培养HO-8910细胞,以不同浓度(10、20、40 μmol/L)的二氢杨梅素作用于HO-8910细胞,MTT法及CCK-8法检测对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响;Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡情况;Western blotting法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax、ERK、p-ERK蛋白表达情况。结果MTT和CCK-8结果均显示二氢杨梅素可浓度依赖性地抑制HO-8910细胞的生长;流式细胞仪结果显示二氢杨梅素可浓度依赖性促进HO-8910细胞凋亡;Hoechst 33258荧光染色结果显示,二氢杨梅素作用后的HO-8910细胞呈现典型凋亡形态学改变;Western blotting结果显示二氢杨梅素可上调HO-8910细胞Caspase-3和Bax水平,下调Bcl-2、ERK、p-ERK水平(P < 0.05)。结论二氢杨梅素具有抗人卵巢癌HO-8910细胞活性的作用,并诱导其凋亡,其作用机制与调控ERK/MAPK信号通路有关。     

三氧化二砷、顺铂对人卵巢癌细胞联合作用研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)、顺铂(DDP)对人卵巢癌细胞HO-8910的联合作用及其相关机制。方法采用形态学方法研究As2O3、DDP对细胞增生的影响,用流式细胞术分析细胞周期,免疫细胞化学染色法检测p53基因表达。结果1.As2O3、DDP协同作用时,浓度分别在1.5μmol/L以上、2μmol/L以上时,有显著性差异;当三氧化二砷、顺铂浓度分别是12μmol/L、4μmol/L时,72h时癌细胞接近100%死亡。2.As2O3、DDP引起HO-8910细胞S期阻滞、p53基因表达增强。结论As2O3、DDP对人卵巢癌细胞HO-8910的生长有协同抑制作用;As2O3、DDP联合作用引起卵巢癌细胞凋亡的机制与S期阻滞、p53基因表达增强有关。     

双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠皮下移植瘤的生长及Caspase-3活性的影响

目的 探讨双氢青蒿素(DHA)对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠皮下移植瘤的生长及Caspase-3活性的影响.方法 建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为双氢青蒿素低、高剂量组、生理盐水组及阳性对照顺铂(DDP)组,每组5只,用药前后分别称取裸鼠体重,绘制体重变化曲线;DDP组连续腹腔注射10 d,其他三组分别灌胃连续给药10 d,停药后24 h后处死裸鼠,称取瘤质量,计算抑瘤率,免疫组化检测Caspase-3的阳性表达率.结果 低、高剂量DHA组及DDP组抑瘤率分别为30.00%,48.03%及60.06%.四组间瘤重比较,差异均有统计学意义(P<0.05);低剂量DHA组与DDP组、高剂量DHA组比较,差异有统计学意义(P<0.008 3);高剂量DHA组与DDP组比较,差异无统计学意义(P=0.04).免疫组化检测各组Caspase-3的阳性表达时,NS组、低、高剂量DHA组和DDP组的阳性表达率分别为18%,29%,73%,80%,随着青蒿素剂量的增加,Caspase-3活性逐渐增加,高剂量DHA组与DDP组比较差异无统计学意义(P＞0.01),而其他各组间两两比较,差异均有统计学意义.结论 双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠皮下移植瘤有明显的抑制作用,在体内可能通过活化Caspase-3诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用.     

不同时间和浓度大蒜素对卵巢癌细胞的影响及机制探究

目的 探讨大蒜素(allicin)对人卵巢癌普通型HO-8910和高侵袭型HO-8910PM细胞株增殖的影响及诱导细胞凋亡机制、作用效果比较。方法 不同浓度的大蒜素作用于人卵巢癌HO-8910和HO-8910PM细胞株不同时间,采用MTT法观察细胞活力;集落形成实验计算克隆形成率;PI/Hochest 33342荧光染色,检测caspase-3活性;Western blot法检测caspase-3和PARP蛋白表达。结果 大蒜素能显著抑制HO-8910和HO-8910PM细胞的增殖和集落形成,影响caspase-3的活性和PARP蛋白裂解(P＜0.05),呈时间和剂量依赖性;HO-8910PM细胞对大蒜素的敏感度均强于HO-8910细胞。结论 大蒜素可显著抑制卵巢癌细胞增殖,可能通过调节caspase-3和PARP诱导细胞凋亡,且高侵袭性卵巢癌细胞更敏感。     

抑制单羧酸转运蛋白1可增强鼻咽癌细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性

目的 探讨siRNA沉默单羧酸转运蛋白1(MCT1)增强鼻咽癌细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性及其可能机制.方法 Western blot检测HNE1和HNE1/DDP细胞中MCT1的表达及siRNA转染沉默MCT1在HNE1/DDP细胞中MCT1的表达;MTT法检测不同浓度顺铂和MCT1 siRNA联合顺铂对HNE1/DDP细胞的增殖抑制作用;PI单染流式细胞术检测细胞凋亡;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测细胞线粒体膜电位;Western blot检测Mcl-1、Bak、Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 MCT1在HNE1/DDP细胞中高表达,抑制MCT1的表达可增加HNE1/DDP细胞对顺铂的敏感性(P<0.05),部分逆转鼻咽癌细胞对顺铂的耐药.此外,抑制MCT1的表达可增强HNE1/DDP细胞对顺铂诱导凋亡的作用,MCT1 siRNA与8μmol/L顺铂联合作用于HNE1/DDP细胞24 h的凋亡率为(51.23±2.86)%,较单用MCT1 siRNA、顺铂的凋亡率明显升高(P<0.05).同时使细胞线粒体膜电位降低,下调Mcl-1、Bcl-2的表达和上调Bax的表达.结论 抑制MCT1的表达可增强鼻咽癌HNE1/DDP细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性,其机制可能与下调Mcl-1、Bcl-2和上调Bax有关.     

顺铂、三氧化二砷对人卵巢癌细胞的作用研究

目的:探讨顺铂(DDP)、三氧化二砷(As2O3)对人卵巢癌细胞 HO-8910 的联合作用及其分子生物学机制.方法:采用形态学方法研究 DDP、As2O3 对细胞增殖的影响,免疫化学染色法检测基因表达.结果:1.联合作用时,As2O3 浓度在 1.5μmol/L 以上、DDP浓度在2μmol/L 以上时,有显著性差异;当三氧化二砷、顺铂浓度分别是12μmol/L、4μmol/L 时,72h 时癌细胞接近100%死亡.2.DDP、As2O3 引起HO-8910 细胞 p53 基因表达增强.结论:DDP、As2O3对人卵巢癌细胞 HO-8910的生长有协同抑制作用;DDP、As2O3 联合作用引起卵巢癌细胞凋亡的机制与 p53 基因表达增强有关.     

Bcl-xL和Caspase3在人卵巢癌细胞株凋亡过程中的调节作用

目的 探讨Bcl-xL和Caspase3基因在顺铂诱导人卵巢癌细胞株凋亡过程中的表达及其在肿瘤细胞凋亡中的作用。方法 应用流式细胞术，RT—PCR技术和原位杂交技术，分别对顺铂诱导人卵巢癌敏感细胞株(COCl)及卵巢癌耐药细胞株(COCl／DDP)的细胞凋亡及其Bcl-xL和Caspase3表达进行研究。结果 ①不同顺铂浓度(3、6、9．9μg／m1)作用下COCl和COCl／DDP细胞凋亡率不同，COCl／DDP细胞明显低于COCl(P＜0．05)。②COCl和COCl／DDP细胞株中均有Bcl-xL基因表达，但COCl／DDP表达明显强于COCl。在6μg／m1顺铂作用下COCl和COCl／DDP细胞株中Bcl-xL基因表达下调，以COCl下降更明显。②原位杂交结果，6μg／m1顺铂作用后COCl和COCl／DDP细胞Cas—pase3呈阳性，可见到凋亡细胞特征性形态学变化。结论 凋亡抑制基因Bcl—xL在人卵巢癌多药耐药细胞株(COCl／DDP)中高表达，是导致其细胞凋亡受抑制和对药物敏感性降低的重要原因，Caspase3在顺铂诱导凋亡的过程中被激活，促进凋亡。     

含survivin启动子重组的条件复制腺病毒联合顺铂对卵巢癌株HO-8910体外作用的实验研究

目的 观察含survivin启动子的条件复制腺病毒CRAd-survivin-RGD4C联合顺铂对卵巢癌细胞株HO-8910的抑制作用.方法 不同浓度的条件复制腺病毒CRAd-survivin-RGD4C病毒、顺铂以及该病毒联合顺铂体外处理人卵巢癌HO-8910细胞,四甲基偶氮唑蓝比色法检测人卵巢癌HO-8910细胞的生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡. 结果 该腺病毒对肿瘤细胞生长具有明显的抑制效应,并有浓度依赖性,联合化疗可以取得更佳的抑制肿瘤细胞生长的效果.结论 溶瘤病毒联合顺铂治疗卵巢癌可能具有良好的前景.     

他莫昔芬联合顺铂对人卵巢癌细胞HO-8910增殖抑制作用的研究

目的:验证他莫昔芬(TAM)和顺铂(DDP)两种药物联合应用抑制人卵巢癌细胞HO-8910增殖作用的有效性,为卵巢癌的内分泌治疗和化学治疗联合应用提供理论依据。方法:以体外培养的HO-8910细胞为研究对象,不同剂量的TAM和DDP联合作用于HO-8910细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;免疫组化SP法检测PCNA在细胞中的表达;流式细胞仪PI染色法分析细胞周期分布的改变,并用AV-PI双染色法检测TAM联合DDP对细胞凋亡的影响。结果:TAM和DDP联合用药组与阳性对照组相比,大剂量TAM合用不同剂量的DDP组及中剂量TAM合用大剂量DDP(3.3μmol/L)组,细胞生长抑制率有显著性差异(P<0.05);TAM浓度≥1.0μmol/L合用不同剂量的DDP时PCNA表达阳性率有显著性差异(P<0.05);TAM使G1期细胞抑制,DDP作用于G1期细胞,G1期减少,细胞阻滞于S期;TAM和DDP联合应用时随着药物浓度增加凋亡指数逐渐增大。联合用药组组间比较,大剂量TAM合用小剂量DDP(1.7μmol/L)组与中剂量TAM合用大剂量DDP(3.3μmol/L)组间细胞生长抑制率及PCNA表达阳性率无显著性差异(P>0.05)。结论:TAM和DDP联合用药可有效抑制人卵巢癌细胞HO-8910细胞生长及增殖。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。