低温保存同种心脏瓣膜活性及临床应用的研究

取正常成人心脏瓣膜３６个，置于低浓度广谱抗生素的营养液中灭菌４８ｈ，－８０℃冰箱初冻，置于液氮中长期保存。灭菌前后瓣膜细菌培养阴性率分别为９４．３％和１００％，解冻后经光镜、电镜检查证实瓣组织细胞结构正常，组织培养葡萄糖消耗率测定示瓣组织存活良好，临床同种心脏瓣膜原位移植３例，随访６￣３０个月，瓣功能良好。     

同种异体心脏瓣膜移植的保护和应用现状

1962年,Ross首次把人同种异体主动脉瓣移植应用于临床取得成功。经过40年的不断发展,同种瓣膜的基础研究和临床应用均取得了很大的进步。本文就有关同种心脏瓣膜的优越性、获取、保存和应用等问题作一回顾,同时对目前同种心脏瓣膜研究所需解决的问题作一展望。     

低温保存同种心脏瓣膜活性及临床应用的研究

取正常成人心脏瓣膜３６个，置于低浓度广谱抗生素的营养液（ＲＰ－ＭＩ１６４０细胞培养液）中灭菌４８ｈ，－８０℃冰箱初冻，置于液氮中长期保存。灭菌前后瓣膜细菌培养阴性率分别为９４．３％和１００％，解冻后经光镜、电镜检查证实瓣组织细胞结构正常，组织培养葡萄糖消耗率测定示瓣组织存活良好。临床同种心脏瓣膜原位移植３例，随访６～３０个月，瓣功能良好     

同种心脏瓣膜及带瓣血管的研究及应用

1同种瓣的发展历史及生物学特点自1966年Ross[1]首次应用同种异体主动脉治疗1例肺动脉闭锁病人获得成功后,经过了几十年的发展,保存手段不断改进,使同种瓣临床应用的疗效不断发展,由于与机械瓣和生物瓣相比具有更好的血流动力学特性,越来越受到临床的重视。根据研制和应用,同种     

去细胞组织工程同种心脏瓣膜的构建

目的 全面评价去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物学、生物力学及免疫学特性。方法采用低渗液-去污剂[0.5％去氧胆酸(DOA),1％DOA,1％Triton]-核酸酶去细胞法,测定了,47例去细胞同种心脏瓣膜去细胞前后组织学、免疫学、组织厚度、组织含水量、热皱缩温度、组织基因组DNA含量、胶原蛋白含量、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比变化。结果组织学检查1％DOA 24 h组完整地去除了同种心脏瓣膜、管壁及肌肉组织中所有的细胞成分,保留了完整的细胞外基质;免疫组织化学证实白细胞DR(HLA-DR)抗原表达明显下降;组织基因组DNA含量显著下降(瓣叶下降91.14％,管壁下降91.53％);与去细胞前相比,只有管壁组织的含水量(去细胞前75.4±1.8,去细胞后82.0±0.7,P<0.05)明显增加,组织厚度、瓣叶组织含水量、热皱缩温度、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比差异无显著意义。结论低渗液-去污剂(1％DOA)-核酸酶去细胞法方便有效,去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物学及生物力学特性稳定,免疫性显著下降,符合机体的要求,为受体细胞化组织工程心脏瓣膜的研制提供了可靠的天然的纤维支架材料。     

建立人同种异体心脏瓣膜库及心瓣制备的临床应用

总结分析了我院心脏瓣膜库的建立、制备、管理及临床应用。于１９８７年建立心脏瓣膜库，来制定了供体标准、采集处理贮存全过程中的质量监测标准，以保证临床应用的安全性。在无菌条件下采集，Ｈａｎｋ′ｓ液中修剪，ＲＰＭＩ１６４０加抗生素过渡，液氮贮存。１９８７年９月至１９９７年１２月，共采集处理贮存同种心脏瓣膜１１０份，临床应用２０份，其中我院１１份，外院９份，取得较满意的效果。     

低温保存对同种动脉瓣膜活性的影响

同种带瓣膜动脉因其不可替代的优点,近年在国外受到高度重视.我们应用液氮深低温保存兔子的同种带瓣动脉,利用葡萄糖消耗试验及形态学观察冷冻保存对动脉瓣膜活性的影响.     

同种异体骨移植的免疫反应及处理方法

因同种异体骨来源丰富 ,不受形态、大小限制 ,又有生物学活性 ,已广泛用于修复创伤、感染、肿瘤等原因造成的骨关节缺损。同种异体骨移植诱发的宿主免疫排异反应一般不引起危及生命的严重后果 ,但免疫排异反应往往干扰移植骨愈合 ,可导致移植骨的过度吸收或骨不连、骨折和深部感染 ,影响治疗效果。现笔者将同种异体骨移植免疫原性及处理方法进行综述1　同种异体骨移植免疫学基础骨组织由矿物质、胶原、非胶原蛋白和细胞成分构成。骨骼中的矿物质不具有抗原性 ,胶原和非胶原蛋白仅是弱抗原 ,同种异体骨移植的抗原刺激主要来自其骨髓的造血细…     

丹参酚酸B后处理脱细胞猪心脏瓣膜的形态学及生物力学研究

目的探讨曲拉通法联合丹参酚酸B处理对猪心脏瓣膜形态学及生物力学的影响,为组织工程提供理论支持。方法新鲜的猪主动脉瓣叶,采用两种不同方法脱细胞处理,应用光镜、电镜进行形态学观察,厚度仪测量组织厚度,行拉力测试观察乍物力学的差异。结果两种方法处理后组织厚度差异无统计学意义（P〉0．05）,曲拉通一丹参酚酸B法较好地保留心脏瓣膜原有的三维空间,且生物力学测试优于传统曲拉通法（P〈0．05）。结论曲拉通联合丹参酚酸B处理可以制备基质成分保留充分、生物力学性能优良的心脏瓣膜支架,显示了可观的临床应用前景。     

心脏瓣膜病的瓣膜置换治疗

目的 总结心脏瓣膜病的人工瓣膜置换手术治疗经验。方法 对人工瓣膜置换手术治疗的414例病人结果进行回顾分析。结果 414例中风湿性瓣膜病349例、退行性瓣膜病21例、先天性瓣膜病13例,以及感染性心内膜炎31例。共行主动脉瓣膜置换（AVR）94例,二尖瓣置换（MVR）255例,双瓣置换（DVR）65例。414例手术并发症74例（17．9％）。围术期死亡16例（3．86％）。随访4个月-10年,远期死亡12例（3．02％）,余各例均能从事正常生活和工作。结论 适当地选择手术时机、充分的术前准备、良好的手术技巧和围术期处理及恰当的术后抗凝治疗是获得良好手术效果的必要因素。     

同种生物瓣膜低温保存效果的评价

目的从功能代谢角度评价深低温保存生物瓣膜的实际效果,观察冷冻保存对同种带瓣膜动脉活性的影响。方法主动脉瓣膜取自空气栓塞处死的兔子,修剪后程控降温,液氮长期保存。复温后光镜检查,体外培养检测糖消耗量,同时采用组织块贴壁法进行原代细胞培养检测细胞生长活性。结果带瓣动脉解冻后弹性纤维结构基本完整,有轻度水肿和黏膜变性,动脉壁结构大致正常;体外培养葡萄糖消耗量平均为>16mmol/dl.d;复温后材料有生长和代谢活性。结论同种生物瓣膜低温保存技术较稳定较理想。     

同种异体神经移植后免疫反应的实验研究

目的：研究在哪种温度和时间条件下保存异种神经，其排斥反应较小。方法：用不同温度和时间保存的异体神经进行移植，实验取３５只成年雄性ＳＤ大白鼠，其中对照组８只大白鼠异体神经不作任何处理，实验组分为Ａ，Ｂ二组，每组１５只，即Ａ组为异体神经，分别在保存在一－１９６℃，－８０℃，－４０℃环境中１周；Ｂ组中为同样温度和数量的大白鼠保存３周，移植前实验组大白鼠在３７℃生理盐水中反复冷冻复温５次，手术在显微镜下由     

巨大心脏病人的瓣膜置换

我院于１９９４年５月～１９９６年５月,对心胸比率超过０．７０的１９例巨大心脏瓣膜病人进行外科治疗,取得了良好的临床效果,现报告如下。１　临床资料与结果１．１　一般资料本组男５例,女１４例,年龄１６～５３岁（平均３６岁）,病史最长１４年,最短１年半。既往多有关节痛及心衰史。术前心功能Ⅲ级者１６例,Ⅳ级者３例。超过５０岁的患者需行ＥＣＴ检查,了解冠脉供血情况。临床诊断：风湿性心脏病,二尖瓣狭窄并关闭不全１０例,主动脉瓣关闭不全２例,联合瓣膜病７例。全组有１１例合并三尖瓣关闭不全。全组术前均长期服用洋…     

液氮冻存人同种心脏瓣膜、大动脉免疫原性的对比研究

目的 进行液氦冻存人同种带瓣主、肺动脉(CVH)瓣叶、动脉壁和瓣下心肌组织的免疫原性对比研究.方法 随机解冻13例液氮冻存人同种带瓣管道标本,获取瓣叶、动脉壁及瓣下心肌组织,制成单细胞悬液,其中7例获得CVH瓣叶(实验组A组)、10例获得CVH动脉壁(实验组B组)活的单细胞悬液;采用CVH瓣叶、动脉壁的单细胞悬液分别与相同血型受体的淋巴细胞混合培养法,检测混合培养后不同时点CD25、HLA-DR的表达;随机选取13例中的10例行单纯淋巴细胞培养(对照组C组),将实验组间、实验组与对照组进行对比研究.结果 13例均未获得CVH瓣下心肌细胞悬液.获得的CVH瓣叶、动脉壁和受体淋巴细胞在培养前和培养后各时点行锥虫蓝染色,活细胞均>96.2%;随着培养期的延长,各组培养细胞CD25、HLA-DR的表达均呈下降趋势;CVH瓣叶、动脉壁与受体淋巴细胞混合培养液CD25、HLA-DR水平显著高于对照组,说明CVH瓣叶及动脉壁具有一定免疫原性,且CVH动脉壁的免疫原性较其瓣叶强,表现为CD25、HLA-DR高水平表达;实验中未能获得CVH瓣下心肌的细胞悬液.结论 液氮冻存人CVH动脉壁的免疫原性较其瓣叶的免疫原性强.     

猪动脉瓣膜冷冻保存方法比较

目的：研究各种因素夺动脉瓣膜细胞活性的影响,寻找一种更好保护瓣膜的方法。方法：按照正交试验设计,猪瓣膜经过4种因素即抗生素液浸泡,不同浸泡时间,不同冷冻保护液配方和甲基强的松龙加入处理过程,最后以流式细胞仪计数的方法计算瓣膜的细胞活性,结果：3个处理因素即抗生素液浸泡,冷冻保护液配方,甲基强的松龙加入对细胞活性的影响差异有统计学意义。结论：同种瓣的制作储存过程中应用试验提出的方法可能有助于提高同种瓣临床应用的耐久性。     

巨大心脏瓣膜手术的几点体会

巨大心脏瓣膜手术的几点体会杨丹宁周玉篇顾懋栋马旺扣蒋佩明（南京铁道医学院附属医院心胸外科南京２１０００９）从１９８６年１月～１９９６年１月，我们对１３例慢性风湿性心脏瓣膜疾病巨大心脏的病人施行二尖瓣置换术１１例，二尖瓣加主动脉瓣置换术２例，三尖瓣成型...     

大心脏瓣膜疾病的外科治疗

目的 :探讨大心脏瓣膜疾病的外科治疗经验及疗效。方法 :分析 1 0 2例心胸比率≥ 0 .70大心脏瓣膜病人手术的临床资料。本组病例全部应用人工机械瓣膜 ,手术施行了单纯二尖瓣、三尖瓣、主动脉瓣置换 ;二尖瓣置换加三尖瓣成形 ;二尖瓣置换加主动脉瓣成形 ;联合瓣膜置换。附加术式为保留二尖瓣装置行二尖瓣置换 ,左心房折叠缝合及部分切除。结果 :全组术后早期死亡 5例 ,占同期手术病例的 4.9% ,晚期死亡 7例。长期生存病人心功能明显改善 ,心胸比率平均缩小 0 .1 9。结论 :大心脏瓣膜病人经围术期全面、确切的心肌保护 ,同时行改进的心脏瓣膜置换技术 ,完全可以得到救治 ,近、远期疗效良好。     

同种与异种骨基质明胶(BMG)的骨诱导能力的实验研究

本文按Urist方法制备了大鼠和兔的骨基质明胶,并分别将其植入25只成年SD大鼠的胸部和股部肌肉内,在植入后第1、2、3、4、6周,通过光学显微镜观察同种和异种BMG的免疫排斥反应和诱导成骨性。结果表明:同种BMC具有较强的生物诱导成骨活性,免疫排斥反应性低,而异种BMG亦具有一定的诱导成骨能力,但在BMG周围亦出现了程度不同的排斥反应。本文认为,如能进一步降低异种BMG的抗原性,它将具有重要的临床应用价值。     

超低温冻存同种异体成骨细胞与异种脱钙骨复合异位组织工程化骨

目的：研究同种异体成骨细胞经超低温冻存后在体内的成骨能力及其免疫反应。方法：体外分离培养SD大鼠颅骨成骨细胞，提纯并传代至第3代时一部分作为对照组用；另一部分采用-196℃超低温冻存，24h后复苏。将该两种第3代细胞分别与脱细胞并去抗原性的猪脱钙型松质骨(decalcmed bone，DB)复合，将两种复合体和单纯DB分别植入SD大鼠背部肌袋内，各24只，4周后取标本，应用组织学、碱性磷酸酶测定、体视学及免疫学测定，观察成骨现象及免疫反应。结果：经超低温冻存的同种异体成骨细胞异体异位植入后，成骨量、成熟度明显优于未冻存成骨细胞；引起的免疫反应亦低于未冻存细胞。结论：同种异体成骨细胞经超低温冻存、复苏后，抗原性明显降低，未引起强烈的免疫排斥反应，仍具有成骨能力。