血清标本前处理对HBV-DNA测定的影响

目的探讨标本前处理在乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)中对检测结果的影响。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测乙型肝炎病人血清标本及第2、4、6、8次循环冻融后的HBV-DNA含量变化和各循环冻融提取核酸后置4℃冰箱24 h后检测其HBV-DNA含量变化。结果112份血清标本中,65例冻融后HBV-DNA含量较未冻融标本轻度升高(P0.05),占58.04%。线性回归显示HBV-DNA含量在每次冻融后较基线水平升高约8.91%,血清标本冻融对不同水平的HBV-DNA拷贝数影响不显著;血清标本提取核酸后4℃冰箱静置24 h后上机检测,其HBV-DNA含量较直接上机法呈下降趋势(P0.05)。结论血清标本经过2~8次冻融后,其HBV-DNA水平基本稳定;血清HBV-DNA提取核酸后4℃冰箱长时间保存会导致DNA的降解。     

标本存放时间对荧光定量PCR检测HBV-DNA结果的影响

目的 探讨标本存放时间及温度对PCR检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)结果的影响.方法 收集乙型肝炎表面抗原阳性的血清标本64例,采用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对不同时间点及不同温度条件下的同批标本进行HBV-DNA定量检测.结果 在室温和2 ℃～8 ℃条件下存放7 d、14 d和30 d的血清标本,其HBV-DNA定量结果均无显著性差异(P>0.05).而在-20 ℃条件下更可长期保存.结论 在本室实验条件下,标本存放时间及温度对HBV-DNA的检测结果无明显影响.若资源有限可放宽标本保存条件来较长期的保存所需标本以供临床及科研等所需.     

标本保存对实时荧光定量HCV-RNA检测的影响

目的：研究标本保存对实时荧光定量HCV-RNA检测结果的影响。方法收集HCV阳性血清标本42份并平均分成6份分别置于室温、4℃和-20℃保存1d和1周后用荧光定量PCR法检测结果,行统计学分析。结果血清在室温、4℃和-20℃条件下保存1d和1周对HCV RNA的荧光定量检测结果无统计学差异。结论保存温度和保存时间对HCV RNA的定量检测结果无影响。     

电化学发光法定量检测乙型肝炎表面抗原与荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA载量的关系

目的 探讨外周血中电化学发光免疫分析法(ECLIA)定量检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)载量之间的相互关系.方法 运用电化学发光法、荧光定量PCR法两种方法同时检测180份血清标本的HBsAg含量和HBV-DNA载量,并按HBV-DNA载量分成4组,对其结果应用统计学分析.结果 在180份血清标本中,HBsAg阳性为161例,占89.4%,HBV-DNA阳性为101例,占56.1%,两者同时为阳性的有101例,占56.1%.经统计学分析HBsAg定量与HBV-DNA载量之间无统计学意义,没有相关性(r＜0.3,P＞0.05).结论 电化学发光法定量检测HBsAg与HBV-DNA载量无关,联合检测两者可以为临床提供诊断治疗依据.     

实时荧光定量PCR检测HBV-DNA的临床应用价值

目的 探讨实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV-DNA的临床应用价值.方法 采用FQ-PCR方法检测296例不同血清学类型的乙肝病毒感染者血清中的HBV-DNA,同时检测了乙肝血清标志物与肝功能.结果 99例HBeAg( )标本中HBV-DNA阳性率为100%,平均HBV-DNA含量为1. 21×l07拷贝/mL,其 HBV-DNA检出率和含量与HBeAg(-)模式的检出情况比较差异有显著性(P＜0.01);HBsAg( )与HBsAg(-)模式比较,HBV-DNA检测结果差异有显著性(P＜0.01); 肝功能正常组与肝功能异常组HBV-DNA检出率比较差异有显著性(P＜0.01).58例HBsAg(-),且肝功能又正常的标本中检出了4例HBV-DNA阳性.结论 实时荧光定量PCR可以快速、准确定量检测HBV-DNA,是诊断乙肝病情和判断疗效的重要手段,在临床上具有重要应用价值.     

荧光定量PCR检测肝病患者血清HBV-DNA的对比研究

[目的]探讨荧光定量PCR检测HBV-DNA的应用价值.[方法]采用荧光定量PCR检测309例不同肝病患者血清HBV-DNA含量,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定乙肝病毒血清免疫标志物HBeAg.[结果]肝硬变、肝癌患者血清HBV-DNA含量低于慢性乙型肝炎患者(x2=10.8,P＜0.01).309例肝病患者的HBV-DNA的阳性率为73.8%(228/309),其中HBeAg阳性组的DNA阳性率为87.7%(136/155),HBeAg阴性组的DNA阳性率为59.7%(92/154),两组的差异具统计学意义(x2=31.3,P＜0.0001).236例慢性乙型肝炎中HBeAg阳性患者血清HBV-DNA含量与HBeAg阴性患者的差异具统计学意义(t=-2.45,P＜0.05).[结论]荧光定量PCR是直接检测HBV-DNA水平,能够更精确直观的反映人体体内病毒复制情况及所带病毒量.     

FQ-PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床价值

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV-DNA的应用价值。方法从1000份用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝五项的体格检查血清标本中,抽取288份HBsAg阳性标本及100份全阴标本,进行荧光定量聚合酶链式反应HBV-DNA定量分析。结果经FQ-PCR检测,80份HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性的标本,HBV-DNA阳性率为100%(80/80),平均HBV-DNA拷贝数为2.5×108拷贝/m l;164份HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性的标本,HBV-DNA阳性率为76.2%(125/164),平均HBV-DNA拷贝数为1.5×106拷贝/m l;12份HBsAg单项阳性的标本,HBV-DNA的阳性率为83.3%(10/12),平均HBV-DNA拷贝数为1.6×105拷贝/m l;100份HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb均阴性的标本,HBV-DNA的阳性率为2.0%(2/100),平均HBV-DNA拷贝数为4.5×105拷贝/m l。结论FQ-PCR可以检测HBV的感染和复制情况,对准确报告HBV感染、指导其选择治疗方案和观察疗效具有重要的临床意义。     

血清HBV前S1蛋白检测的临床应用价值

目的探讨血清HBV前S1蛋白检测的临床应用价值。方法对171例HBsAg( )血清采用ELISA方法检测其前S1抗原及HBV标志物，用荧光定量PCR法检测其HBV-DNA含量。结果前S1抗原在HBcAg( )的标本血清中的检出率为98。85％(86／87)，明显高于HBeAg(-)标本的67．86％(57／84)，两者之间存在极显著性差异(X^2=29．9806，P＜0．01)；前S1抗原在HBV-DNA( )的标本血清中的检出率为66．91％(93／139)，明显高于HBV-DNA(-)标本的18．75％(6／32)，两者之间存在极显著性差异(X^2=24．7459，P＜0．01)。结论前S1蛋白在乙型肝炎的临床诊断及疗效观察等方面中起到重要的作用，对HBV标志物及HBV=DNA的检测有着重要的补充作用。     

乙型肝炎病毒DNA与血清标志物的检测结果分析

目的 探讨血清乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)水平与HBV血清标志物(HBV-marks,HBV-M)的相关性.方法 采用实时荧光定量PCR对649例HBV感染者血清标本中HBV-DNA含量进行检测,同时用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immuno sorbent assay,ELISA)法检测其HBV-M.结果 246例乙型肝炎e抗原(hepatitis Beantigen,HBeAg)阳性标本中HBV-DNA阳性率为100.0%,与HBeAg阴性标本的阳性率比较,差异有统计学意义(P＜0.01);乙型肝炎表面抗原(hepatitis B s antigen,HBsAg)阳性标本和HBsAg 阴性标本,HBV-DNA检测结果比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 患者血清HBV-DNA的阳性率与HBV-M的存在状态相关,采用实时荧光定量聚合酶链反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)法检测HBV-DNA能更准确、直接地反映体内病毒复制情况.     

实时荧光PCR在乙肝病毒DNA检测中的临床意义

目的用实时荧光定量PCR检测乙型肝炎患者HBV DNA结果进行分析,以探讨其临床诊疗意义。方法对630例血清标本用时间分辨荧光免疫技术定量测定乙肝炎病毒血清学指标,用荧光定量PCR法检测血标本中的HBVDNA,并依据乙肝两对半结果进行归类分组。结果 630份标本中,大三阳206例标本中有173份HBV-DNA为阳性,阳性率为84.0%,其PCR定量拷贝数为(2.13±0.72)×107/ml;小三阳211例中有64份HBV-DNA阳性,阳性率达到30.3%,PCR定量拷贝数为(1.61±0.85)×106/ml;69份HBs Ab(+)、HBe Ab(+)、HBc Ab(+)标本有33份HBV-DNA阳性,阳性率47.8%;27份HBs Ag(+)、HBc Ab(+)标本中有8份HBV-DNA为阳性,阳性率为29.6%;22份HBe Ab(+)、HBc Ab(+)标本有3份PCR HBV-DNA阳性,阳性率13.6%;20份HBs Ag(+)、HBs Ab(+)、HBe Ag(+)、HBc Ab(+)标本中有17份HBV-DNA为阳性,阳性率为85.0%;17份HBs Ab(+)、HBe Ab(+)阳性标本有3份PCR HBV-DNA阳性,阳性率为17.6%;13份HBs Ab(+)、HBc Ab(+)标本有1份HBV-DNA阳性,阳性率7.7%;12份HBc Ab(+)标本有5份PCR HBV-DNA阳性,阳性率为41.7%;2份HBs Ab(+)的标本HBV-DNA均为阴性,PCR定量拷贝数为1.00E×103;1份HBs Ag(+)标本HBV-DNA均为阳性,阳性率为100%;其余30例全阴性结果和各少见模式基本未见有HBV-DNA的检出。结论 PCR定量测定HBV-DNA可以真实反映体内乙肝病毒感染和复制及病毒载量情况,更有利于临床治疗和疗效观察。     

实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义

目的对实时荧光定量PCR测定的472例HBV-DNA结果进行分析,以探讨其临床价值。方法对472份临床血清标本用ELISA法进行定性检测,并依据乙肝两对半定性结果进行归类分组,再用实时荧光PCR定量检测。结果92份HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)标本中有89份HBV-DNA为阳性,阳性率为96.7%,其PCR定量拷贝数为(3.23±1.45)×107/ml;168份HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)标本有118份HBV-DNA阳性,阳性率达到70.2%,PCR定量拷贝数为(4.65±2.10)×105/ml;32份HBsAg(+)、HBcAb(+)标本中有11份HBV-DNA为阳性,阳性率为34.4%,PCR定量拷贝数为(1.92±1.54)×104/ml;62份HBsAb(+)的标本HBV-DNA阳性2例,阳性率为3.2%,PCR定量拷贝数为(5.45±1.14)×103;60份全阴性的标本HBV-DNA阳性1例,阳性率为1.7%,PCR定量拷贝数为(2.36±1.12)×104/ml。结论PCR定量测定HBV-DNA可以真实反映体内乙肝病毒感染和复制及病毒载量情况,更有利于临床治疗和疗效观察。     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与血清标志物的关系探讨

目的:探讨乙型肝炎血清HBV-DNA水平与乙肝抗原抗体模式的关系。方法:对320例血清标本同时用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA和用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝标志物,根据不同检测结果进行对比分析。结果:320份血清中,乙型肝炎病毒标志物不同组合HBV-DNA阳性率有差异(P<0.01),320份血清中,有188例HBV-DNA阳性,占56.2%,HBsAg HBeAg HBcAb阳性者HBV-DNA阳性率占98.6%,>10copies/ml占64.5%,HBsAg HBeAb HBcAb阳性者HBV-DNA阳性率占37.5%,10 copies/ml占18.2%。结论:HBeAg和HBV-DNA有明显的相关性,PCR定量检测HBV-DNA含量更有助于判断体内HBV复制的情况及传染性强弱,在临床上有重要意义。     

荧光定量PCR检测 HBV-DNA的临床意义

目的了解荧光定量PCR法检测的HBV-DNA与乙型肝炎,标志物的关系,探讨荧光定量PCR在HBV-DNA检测方面的临床价值。方法采用荧光定量PCR技术对乙肝标志物阳性血清进行HBV-DNA定量测定,对26例HBV-DNA( )(拷贝数105～109/ml)、HBeAg( )(≥10.86NCU/ml)患者贺普丁治疗前后血清HBV-DNA、HBeAg进行定量监测。结果①108例HBsAg( )/HBeAg( )/HBcAb( )者有106例HBV-DNA阳性,阳性率98%,含量为(7.65±1.06)拷贝/ml;112例HBsAg( )/HBeAb( )/HBcAb( )者有58例阳性,阳性率为51%,含量为(5.38±1.55)拷贝/ml;46例HBsAg( )/HBcAb( )者有17例阳性,阳性率36%,含量为(4.09±1.79)拷贝/ml。②HBV-DNA基因拷贝数与HBeAg水平呈正相关。③26例HBeAg( )、HBV-DNA( )患者经12个月治疗,HBeAg阴转率为42%,HBV-DNA( )阴转率为80%,明显高于HBeAg阴转率(P<0.01)。结论荧光定量PCR检测HBV-DNA,能直接反映HBV-DNA含量,在判断体内HBV是否复制,复制程度,是否被清除等方面明显优于HBV血清标志物检测,对抗病毒治疗过程监测、愈否监控以及疗效评价具有一定的实用价值。     

标本因素对HBV DNA测定的影响

目的 探讨脂血、黄疸、溶血及常温储存3d和4℃保存7d对乙肝病毒D N A(H B V D N A)荧光定量测定结果的影响.方法 将阳性标本进行即时检测、室温保存3d检测、4℃保存7d后检测及高脂血和非脂血、黄疸和非黄疸、溶血血清和未溶血血清同时作HBV DNA荧光定量PCR.结果 溶血与未溶血血清标本、黄疸和非黄疸、脂血和非脂血血清标本HBVDNA含量都在同一数量级.血清标本在室温下短期贮存(3d)、4～12保存7d内分别与即时检测HBV DNA含量比较均无统计学意义(P>0.05).结论 脂血、黄疸、溶血、血清标本不同储存温度及时间对HBV DNA定量结果测定无影响.     

荧光定量PCR检测HBV-DNA的临床价值

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的临床价值.方法用FQ-PCR检测860份血清标本中HBV-DNA含量,同时用ELISA法检测乙肝血清学指标,即两对半(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb).结果HBsAg( )HBeAg( )HBcAb( )组(大三阳),HBV-DNA阳性率为97.00%,HBV-DNA平均含量为7.34±0.73;HBsAg( )HBeAb( )HBcAb( )组(小三阳),HBV-DNA阳性率37.93%,HBV-DNA平均含量为4.36±1.34;HBsAg( )HBcAb( )组,HBV-DNA阳性率为61.11%,HBV-DNA平均含量为4.82±1.47;HBsAg( )HBeAg( )组,HBV-DNA阳性率为100%,HBV-DNA平均含量为7.03±0.83;HBsAb( )HBeAb( )HBc( )模式HBV-DNA也有低水平复制.结论荧光定量PCR在乙肝的诊断、判断传染性强弱及抗病毒治疗效果方面具有较大的价值.     

实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床应用

目的:探讨实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV-DNA在乙型肝炎病毒(HBV)感染的诊疗中的应用价值。方法:用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法定量检测523例患者的血清HBV-DNA含量(临界值为500cop ies/m l),同时用ELISA法测定HBV血清标记物。结果:经FQ-PCR检测,116份HbsAg,HbeAg,HbcAb,ProS1-Ag都阳性的标本,HBV-DNA阳性率为98.7%,平均拷贝数为1.87×108copy/m l,显著高于其他组(P<0.05)。HbsAg,HbeAg,ProS1-Ag一项或多项阳性者的HBV-DNA阳性率和平均拷贝数显高于三项抗原全阴者。结论:FQ-PCR可以快速而准确地检测HBV-DNA拷贝数。HBV-DNA可准确、灵敏地反映HBV复制。与HBV血清标记物联合应用可使诊断更准确,治疗更合理。     

两台不同厂家PCR扩增仪检测血清HBV-DNA低浓度标本的对比分析

目的:通过两台不同厂家PCR扩增仪对血清HBV-DNA低浓度标本进行复检,分析这两台仪器实验结果的重复性.方法:随机收集两台PCR扩增仪所测结果为HBV-DNA低浓度的血清标本31份,于干净的离心管中置-80℃保存备测.经相同预处理后同时再在两台PCR扩增仪上复检,获取两台仪器的实验数据.结果:两台PCR扩增仪的结果对比差异无统计学意义(P>0.05),二者呈高度正相关(r=0.858,P<0.05). 结论:经过相同预处理,两台不同厂家的PCR扩增仪检测结果具有良好的相关性,所得结果重复性好.     

血清标本的保存条件对乙肝病毒五项指标定量测定的影响

目的 探讨血清标本保存条件对乙型肝炎（下称乙肝）病毒五项指标定量检测结果的影响，对血清标本的存放提供依据。方法 分别采用4℃和-20℃两种温度保存标本，应用雅培i2000SR化学发光仪定量测定乙肝五项指标，4℃保存标本每隔3天检测1次，-20℃的保存标本按照1、3、5、6个月周期检测。结果 4℃保存标本7d，结果差异无统计学意义（P〉0．05），超过7d，乙肝病毒e抗原和核心抗体结果发生变化，差异有统计学意义（P〈0．05）；-20℃连续保存6个月，测定结果无统计学意义（P〉0．05）。结论 标本的保存温度和时问直接影响乙肝两对半定量结果的准确性，-20℃可以保存6个月而对结果无明显影响。     

新型HBV-DNA实时荧光定量PCR试剂盒的应用

目的:观察新型HBV-DNA荧光定量PCR试剂盒的临床应用价值。方法:采用荧光定量PCR检测法,用10份正常血清、10份HBV高滴度(106 IU/ml)血清和梯度稀释的HBV克隆质粒标准品,验证该试剂盒检测结果的重复性、特异性和灵敏度;并将该10份HBV高滴度(106 IU/ml)血清结果与同时用传统方法所测结果进行配对检验。结果:10份正常血清标本均无假阳性HBV-DNA检测结果,特异性极好;灵敏度可达到103 IU/ml,重复性和准确性两者之间差异无显著性(t=1.15,P>0.05)。结论:该方法特异性和灵敏度高,方便、快捷,可替代传统试剂盒用于HBV的临床检测和科学研究。     

血清HBV前S1蛋白检测的临床应用价值

目的探讨血清HBV前S1蛋白检测的临床应用价值.方法对171例HBsAg(+)血清采用ELISA方法检测其前S1抗原及HBV标志物,用荧光定量PCR法检测其HBV-DNA含量.结果前S1抗原在HBcAg(+)的标本血清中的检出率为98.85%(86/87),明显高于HBeAg(-)标本的67.86%(57/84),两者之间存在极显著性差异(χ2=29.9806,P<0.01);前S1抗原在HBV-DNA(+)的标本血清中的检出率为66.91%(93/139),明显高于HBV-DNA(一)标本的18.75%(6/32),两者之间存在极显著性差异(χ2=24.7459,P<0.01).结论前S1蛋白在乙型肝炎的临床诊断及疗效观察等方面中起到重要的作用,对HBV标志物及HBV-DNA的检测有着重要的补充作用.