系统性红斑狼疮患者的Th细胞亚群平衡失调的初步研究

为分析Th亚群平衡失调在系统性红斑狼疮 (SLE )发生发展中的变化特点 ,以ELISA法检测血清IL 10、IL 12水平 ,以细胞内细胞因子的流式细胞术检测SLE患者PBMC的不同Th细胞亚群分泌细胞因子的变化特点 ,应用三色荧光标记技术分析Th1/Th2细胞表型。结果显示 :SLE患者血清IL 10水平显著高于正常人 ,而IL 12呈低水平表达。SLE患者CD4 + IFN γ IL 10 + 细胞亚群百分率显著高于正常人 ,IFN γ+ IL 10 与IFN γ IL 10 + 细胞亚群的比值明显降低 ,IFN γ+ IL 10 + 双阳性的CD4 + T细胞亦显著增多。SLE患者的CD4 + CCR5 CCR3+ 细胞亚群百分率与正常人比较显著升高 ,CD4 + CCR5 + CCR3 细胞亚群与正常人比较 ,示发现有显著差异 ,CD4 + CCR5 + CCR3 /CD4 + CCR3+ CCR5 比值显著低于正常对照组。这些结果提示 :SLE高水平IL 10与IL 12的低水平表达呈负相关 ;患者体内分泌IL 10的Th细胞数增多 ;Th细胞表面趋化因子受体的表达提示SLE存在CCR5 CCR3+ 细胞亚群的优势活化、数量增多 ,CCR5 + CCR3 /CCR3+ CCR5 细胞比例失调 ,从而导致免疫网络平衡被破坏。     

霉酚酸对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞细胞因子分泌及Th亚群的影响

目的研究霉酚酸（mycophenolic acid,MPA）对系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者外周血单个核细胞（PBMCs）细胞因子分泌及Th细胞亚群的作用。方法分离SLE患者及健康对照的外周血单个核细胞（PBMCs）,加入MPA或对照药物地塞米松（DEX）培养48h,用ELISA法测培养上清中IL-10、IL-12及IFN-γ的水平,用三色流式细胞术检测培养细胞中CD4^＋IFN-γ^＋IL-10^-T细胞、CD4^＋IFN-γ^-IL-10^＋T细胞及CD4^＋IFN-γ^＋IL-10^＋T细胞百分率。结果①MPA可使SLE患者PBMCs培养上清中IL-10、IL-12及IFN-γ的分泌显著降低,而DEX却使IL-10分泌水平增高。②MPA可降低SLE患者培养的PBMCs中CD4^＋IFN-γ^＋IL-10^-T、CD4^＋IFN-γ^-IL-10^＋T及CD4^＋IFN-γ^＋IL-10^＋T细胞比率,而DEX在使CD4^＋IFN-γ^＋IL-10^＋T细胞亚群比率增高的同时,却使CD4^＋IFN-γ^＋IL-10^-T细胞亚群的比率降低。结论MPA可抑制SLE患者PBMCs细胞因子分泌,并降低SLE患者外周血培养的PBMCs中Th亚群比率。     

Fas-FasL和caspase-3信号通路在启动SLE患者T细胞亚群凋亡中的作用

目的：探讨SLE患者T细胞亚群的Fas-FasL信号传导通路与T细胞凋亡紊乱的关系。方法：应用流式细胞术测定T细胞亚群表面Fas、FasL的表达率及细胞质中活化caspase-3的表达率。结果：与健康对照组相比较，活动期及稳定期SLE患者组CD4^＋T细胞表面Fas的表达率均显著增加（P〈0．05），CD8^＋T细胞表面Fas的表达率略有增加但无统计学意义（P〉0．05）。稳定期和活动期SLE患者组T细胞亚群表面FasL的表达率均显著增加（P〈0．05），但两疾病组问T细胞亚群表面Fas、FasL的表达率无显著性差异（P〉0．05）。活动期SLE患者组T细胞亚群细胞质中活化caspase-3的表达率，明显高于稳定期SLE患者组和健康对照组（P〈0．05）。稳定期SLE患者组T细胞亚群细胞质中活化caspase-3的表达率略高于健康对照组，但无统计学意义。结论：SLE患者外周血T细胞亚群凋亡加速，CC4^＋ T细胞的凋亡活跃，其中Fas-FasL信号传导途径可能起重要的作用。T细胞凋亡紊乱的程度与SLE的活动程度密切相关。     

SLE患者外周血T细胞亚群ICOS与CD28共表达水平与疾病的关系

目的观察系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)病人外周血CD4^ 及CD8^ T细胞表面可诱导共刺激分子(inducible co-stimulator，ICOS)及CD28共表达水平，探讨ICOS和CD28共表达水平与SLE疾病的关系。方法采用三色流式细胞术检测SLE病人(n=51)及正常人(n=30)外周血CD4^ 及CD8^ T细胞表面ICOS与CD28共表达水平，并结合SLE病人疾病活动程度、临床表现等进行分析。结果与正常人相比，SLE活动期和稳定期病人外周血CD4^ T细胞中仅表达ICOS不表达CD28(即CD28^-ICOS^ )的细胞比例明显升高，但活动期病人和稳定期病人之间并无差异；活动期病人外周血CD8^ T细胞上同时表达CD28和ICOS的细胞(即CD28^ ICOS^ 细胞)和CD28^-ICOS^ 细胞比例都明显升高；同一SLE病人在疾病活动期CD4^ 和CD8^ T细胞中CD28^ ICOS^ 的细胞比例和CD8^ T细胞中CD28-ICOS^ 细胞比例明显高于该病人经过治疗病情稳定时；初发未治疗SLE病人仅CD4^ T细胞中CD28^ ICOS^ 细胞的比例比复发病人明显升高；血清抗dsDNA抗体( )病人和血清免疫球蛋白含量(IsG、IgA和IgM中任何一种)异常升高的病人外周血CD4^ T细胞中CD28^ ICOS^ 细胞和CD8^ T细胞中CD28-ICOS^ 细胞比例分别明显高于血清抗dsDNA抗体(-)和血清免疫球蛋白含量正常的病人。结论CD28和ICOS在SLE病人外周血CD4^ 和CD8^ T细胞上共表达水平与SLE疾病的活动程度、病程及临床表现等存在一定的关联。     

外周血T细胞亚群及细胞因子对外源性哮喘IgE生成的作用

对３０例哮喘患者及３０例健康成年人的外周血，采用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）间接免疫荧光法测定Ｔ细胞亚群；ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定ＩｇＥ、ＩＬ－４；ＦＩ２细胞株，生物学方法测定ＩＬ－２；ＩＬ－６依赖细胞株７ＴＤ１，掺入法测定ＩＬ－６；用抗人ＣＤ２３的ＭｃＡｂ测定ＣＤ２３。为研究Ｔ细胞、细胞因子对哮喘ＩｇＥ生成调节机理及细胞因子在哮喘发病过程中的作用。结果显示：发作期ＩｇＥ、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＣＤ２３、ＣＤ８~＋、ＣＤ４／ＣＤ８~＋比值较对照组及缓解期有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。缓解期ＩｇＥ与对照组之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；ＣＤ８＋、ＣＤ４／ＣＤ８比值，ＣＤ２３与对照组之间有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ＣＤ２３、ＣＤ４、ＩＬ－６三组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果表明，ＩｇＥ合成增加是哮喘发作的关键，Ｔ细胞对日细胞合成ＩｇＥ的调节是通过细胞因子实现的，细胞因子又参与气道炎症过程。     

多发性硬化患者外周血记忆性T细胞亚群的研究

目的：近来研究表明中心记忆性和效应记忆性T细胞构成记忆性T细胞的两个亚群，但在多发性硬化（Multiple sclerosis，MS）中的作用尚不清楚，因此测定了MS患者外周血记忆性T细胞亚群的水平，并进一步探讨了可能导致记忆性T细胞亚群变化的机制。方法：采用流式细胞仪和酶联免疫吸附分析（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）分别检测未治疗MS、正常对照组外周血记忆性T细胞亚群的阳性率和血浆IL-15浓度。进一步根据MS临床表现分为复发-缓解型MS（Relapse-remission MS，RRMS）和慢性进展型MS（Chronic progressiveMS，CPMS）两个亚组。结果：与正常对照比较，在CD8^＋T细胞亚群中，MS患者中心记忆性T细胞（Central memory T cell，TCM）、终末效应记忆性T细胞明显增多和减少（P〈0．05和P〈0．01），RRMS患者终末效应记忆性T细胞明显少于正常对照（P〈0．05）；MS患者血浆IL-15水平较正常对照明显升高（P〈0．05）。结论：研究显示了Ms患者中CD8^＋T CM上调，可能反映了在MS早期被诱导产生的一个持续慢性炎性应答，我们推测CD8^＋T CM的异常改变可能在维持MS慢性炎症的过程中起着重要作用，而IL-15则可能参与了促进TCM分化的调节过程。     

类风湿关节炎患者外周血Th细胞亚群的变化及依那西普的调节作用

目的:观察活动期类风湿关节炎(RA)患者外周血中辅助性T细胞亚群(Th1、Th2和Thl7)数量和比例的变化,探讨依那西普治疗对Th亚群的作用.方法:选择20例活动期中重度RA患者,随机分为依那西普加MTX联合治疗组、MTX治疗组,于治疗前后分离PBMC,采用流式细胞术(FCM)检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1/Th2比值,同步用ELISA测定培养上清中IFN-γ、IL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并与患者的病情活动指标进行相关性分析.结果:治疗前活动期RA患者PBMC中IFN-γ Th1细胞的量、IL-17 Th17细胞的量及平均荧光强度、Th1/Th2比值均高于健康对照组[(27.0±2.9)%vs(23.2±1.7)%,P<0.05;(36.78 ±2.6)%vs(2.35±0.9)%及(26.61±2.6)vs(11.4±1.2),P<0.01;(12.8±1.6)vs(8.60±1.9),P<0.01];依那西普加MTX联合治疗12周后,RA患者的病情改善,IFN-γ Th1细胞、Th1/Th2比值、IL-17 Th17细胞的量及平均荧光强度、培养上清中IL-17水平均低于治疗前,而与健康对照组相比无统计学意义(P>0.05),且联合治疗组降低的幅度均大于MTX治疗组;治疗前后Th17细胞的量与C反应蛋白(CRP)、疾病活动指数(DAS28)的消长呈正相关(P<0.05,r=0.38和P<0.05,r=0.42).结论:IL17 Th17细胞、IFN-γ Th1细胞及Th1/Th2比值的增高可能参与活动期RA的发病机制,依那西普治疗可改善RA病情并下调Th1和Th17细胞亚群.     

发作期哮喘患者外周血T细胞亚群、B细胞和NK细胞的变化及临床意义

目的：探讨发作期哮喘患者外周血T细胞亚群、B细胞和NK细胞变化及临床意义。方法：采用直接免疫荧光法,用流式细胞术检测30例发作期哮喘患者和30例正常人对照的T细胞亚群、B细胞和NK细胞的变化。结果：与正常对照组比较,发作期哮喘患者CD4^＋T细胞、CD19^＋B细胞和CD4^＋／CD8^＋比值显著增高（P〈0．01）,CD8^＋T细胞显著下降（P〈0．01）和CD56^＋CD16^＋NK细胞下降（P〈0．05）。CD3^＋T细胞无明显变化。结论：发作期哮喘患者的免疫功能紊乱在哮喘发病中起着重要作用。     

外周血TBNK淋巴细胞亚群和血清Th1/Th2细胞因子与不明原因复发性流产的相关性研究

目的:探讨外周血TBNK淋巴细胞亚群和血清Th1/Th2细胞因子与不明原因复发性流产(URSA)的相关性.方法:淋巴细胞亚群和Th1/Th2细胞因子均采用流式细胞术检测;选取2018年5月至2019年5月成都西囡妇科医院就诊的60例不明原因复发性流产女性患者为URSA病例组,同时选择年龄匹配的近1年有健康分娩史的30例...     

环孢素A联合沙利度胺治疗骨髓增生异常综合征对T细胞亚群影响的初步研究

为探讨环孢素A联合沙利度胺治疗骨髓增生异常综合征对T细胞亚群的影响,我们对2007年6月至2012年6月我院血液内科门诊和住院低中危MDS患者22例,在给予环孢素A联合沙利度胺治疗前后,应用流式细胞仪对于患者和健康志愿者外周血标本进行T淋巴细胞亚群检测。我们发现:CD4+T细胞在MDS患者外周血的百分比低于正常对照组(P<0.05),CD4/CD8比值与正常对照组相比有显著性差异(P<0.05)。治疗显效组患者治疗后的CD4+T细胞百分率增高(P<0.05),CD8+T细胞百分率减低(P<0.01),CD4/CD8比值在治疗前后有显著性差异(P<0.05)。在治疗前,无效组和显效组在T细胞总数百分率,CD4+T、CD8+T细胞百分率以及CD4/CD8的比值均有统计学意义(P<0.05)。由此我们认为,MDS患者存在T淋巴细胞亚群免疫失调,细胞免疫功能紊乱。CsA以及沙利度胺治疗MDS的机制可能与Th,Ts细胞比率改变有关。     

腹膜透析对终末期肾病患者NK细胞和T细胞亚群的影响

目的了解腹膜透析能否改变终末期肾病患者细胞免疫功能。方法采用流式细胞仪检测CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值和NK细胞。结果与腹膜透析前相比,腹膜透析后6个月、12个月,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值均升高,CD3+透析后12个月与6个月相比继续升高。CD8+腹膜透析后无变化。NK细胞腹膜透析后6个月、12个月分别与透析前相比,均有明显下降。结论腹膜透析可以改善终末期肾病患者的细胞免疫功能。     

支气管哮喘患者外周血T细胞亚群的表达及临床分析

支气管哮喘是以气道高反应性和可逆性气流受阻为特征的慢性气道炎症性疾病。很多细胞参与该炎症过程,其病理基础是多种炎症性细胞（肥大细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等）及自细胞介素等细胞因子和黏附分子的相互调控下释放炎症介质引起支气管平滑肌收缩、微血管渗漏,黏液腺分泌增加以及直接损伤气道上皮甚至剥脱,并导致气道高反应性发生的病理基础,气道高反应性是支气管哮喘的特征。其中T淋巴细胞及其分泌的细胞因子在哮喘的发病过程中发挥着重要的免疫调节作用。     

介入治疗对原发性肝癌患者T细胞亚群比例的影响

介入治疗是中晚期肝癌的主要治疗手段,而机体的细胞免疫状态肿瘤的发生、发展中起重要作用,为了解介入治疗对肝癌患者机体细胞免疫状态的影响,我们对比观察了30例中晚期肝癌患者介入治疗前后外周血T细胞亚群的变化情况,为肝癌介入治疗过程中的辅助治疗提供实验依据。     

肝硬化患者血清CA199、外周血T细胞亚群和B细胞数检测的临床意义

目的:探讨肝硬化患者血清CAl99和外用血T细胞亚群和B细胞数.方法:分别应用RIA和单克隆技术测定61例肝硬化患者血清C199含量和外周血T细胞亚群和B细胞数,并与35名正常人作比较.结果:肝硬化患者血清CA199含量和外周血B细胞数显著高于正常组(P<0.01),而CD3、CD4、CD4/CD8水平则显著地低于正常组(P<0.01).结论:检测肝硬化患者血清CA199和外周血T细胞亚群及B细胞水平的变化可作为病情及预后评估的重要指标.     

早孕外周血及蜕膜中NK细胞表型及T淋巴细胞亚群的变化

目的: 检测孕妇外周血及蜕膜中T淋巴细胞亚群和NK细胞表型, 探讨它们与母-胎界面免疫耐受的关系.方法: 收集20例早孕同一患者的蜕膜组织及外周血, 密度梯度离心法分离出淋巴细胞, 流式细胞术(FCM)检测两组中NK细胞、 T细胞含量及其表面分子CD16、 NKG2A、 NKG2D表达水平.结果: 蜕膜自然杀伤(dNK)细胞占蜕膜淋巴细胞(57.15±4.0)%, 外周血自然杀伤(pNK)细胞占外周血淋巴细胞(11.46±1.58)%; dNK细胞表面CD16的表达明显低于pNK细胞, 二者分别(10.3±3.9)%与(95.6±2.6)%(P＜0.05); dNK细胞表面NKG2A的表达明显高于pNK细胞, 二者分别为(87.10±4.5) %与(27.5±4.2)% (P＜0.01), dNK细胞NKG2D的表达水平与外周血NK细胞相近, 分别为(88.70±4.1)%与(93.10±3.6)% (P＜0.05); 蜕膜中的CD4 T淋巴细胞的表达低于外周血中CD4 T淋巴细胞, 二者分别为(13.70±1.0)%与(15.85±2.4)% (P＜0.05), 蜕膜中CD8 T淋巴细胞表达明显低于外周血中CD8 T淋巴细胞, 二者分别为(15.23±1.5)%与(18.85±1.73)%(P＜0.01).结论: 妊娠期蜕膜中的NK细胞及T淋巴细胞可能是同维持母-胎界面的免疫耐受的重要原因.     

银屑病患者治疗前后血清IL-2、SIL-2R和外周血B细胞及T淋巴细胞亚群检测的临床意义

银屑病是临床较为常见的一种皮肤病,其发病机理十分复杂。近十多年来研究证实,本病与免疫有密切的关系。免疫异常可导致角朊细胞膜的异常,进而引起cAMP和前列腺素失去平衡,使表皮增生而发病。国内尚少见有银屑病患者治疗前后血清IL-2,SIL-2R和外周血B细胞及T淋巴细胞亚群水平变化的报道。为此,我们进行了探讨,现将结果报告如下。     

血小板、红细胞对T细胞亚群的调控作用

目的: 在体外实验中, 探讨血小板和红细胞对T细胞亚群的调控作用. 方法: 流式细胞术测定血小板CD59、红细胞CD59、 T细胞CD3 CD4 、 CD3 CD8 的表达水平.按不同的实验条件进行分组, 全血细胞组、有PL无红细胞(RBC)组、无血小板(PL)组、无RBC无PL组.同时观测各组抗原刺激前后T细胞变化.结果: 各组T细胞CD3 CD4 、 CD3 CD4 /CD3 比较: 全血细胞组＞有PL无RBC组, 抗原刺激前后(P＜0.001); 有PL无RBC组＞无RBC无PL组刺激前(P＞0.05)刺激后(P＜0.05).各组T细胞CD3 CD8 表达无明显变化.各组CD3 CD8 /CD3 比较: 全血细胞组＜有PL无RBC组抗原刺激前后(P＜0.01); 有PL无RBC组＜无RBC无PL组刺激前(P＞0.05)刺激后(P＜0.05).全血细胞组和无PL组比较各项指标均无统计学意义(P＞0.05).抗原刺激前RBCCD59与CD3 CD4 在全血细胞组中负相关(P＜0.05); 而在无PL组中则无相关性; PLCD59与CD3 CD8 CD3 全血细胞组中的正相关无统计学意义(P＞0.05); 而在无红细胞组中则呈负相关(P＜0.05).结论: 活化血小板、红细胞均可正向调节CD3 CD4 /CD3 , 负向调节CD3 CD8 /CD3 .     

三氧疗法对非霍奇金淋巴瘤患者Th1/Th2细胞亚群漂移的影响

目的：探讨三氧疗法（Ozone therapy）联合化疗对非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin lymphoma，NHL）患者外周血CD4^＋T淋巴细胞Tn1／Tn2漂移的影响和临床疗效。方法：67例初治NHL患者随机分为治疗组（37例）和对照组（30例），治疗组化疗同时联合三氧（Ozone，O3）治疗，采用q自血回输（Major O3 auto-haemotherapy，MAH）和O3直肠注气疗法（Rectal O3 gas insutfiation，RI），应用两个周期。对照组单用相同化疗方案治疗。两组均化疗两周期，化疗前后采用流式细胞仪分析外周血CD4^＋T淋巴细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4的表达，分别反应1h1、Th2细胞的数量，同时评价疗效以及肿瘤标志物LDH和β2-MG水平的变化。结果：①NHL患者Tn1细胞比例低于正常对照组（P〈0．05），Th2细胞比例与正常对照组差异无显著性（P〉0．05），Tn1／Tn2比值低于正常对照组（P〈0．05）；②治疗组Tn1细胞较治疗前升高（P〈0．05），Th2细胞与治疗前差异无显著性（P〉0．05），Tn1／Th2较治疗前升高（P〈0．05），LDH和β2-MG较治疗前降低；③对照组1h1细胞较治疗前降低（P〈0．05），Th2细胞较治疗前升高（P〈0．05），Tn1／3h2和LDH较治疗前降低（P〈0．05），β2-MG与治疗前差异无显著性（P〉0．05）；④两组治疗后比较，治疗组1h1细胞高于对照组，Th2细胞、LDH和β2-MG低于对照组，Tn1／Th2高于对照组，差异有显著性意义（P〈0．05）；⑤治疗组完全缓解率（CR）64．9％，部分缓解（PR）29．7％，有效率（CR＋PR）94．6％；对照组CR40．0％，有效率70．0％。治疗组与对照组比较，CR率及有效率明显提高，有统计学意义（P〈0．05）。结论：NHL患者外周血CD4^＋淋巴细胞向Th1细胞的分化明显减少，向Th2细胞的分化无明显变化，Tn1／Th2平衡失调并向Th2方向漂移。受化疗打击后Tn1反应向Th2漂移，抗肿瘤免疫功能进一步降低，O3可使化疗后Tn1／3h2平衡向1h1方向漂移。O3联合化疗较单纯化疗比，可以提高淋巴瘤患者的疗效。     

IL-15和TGF-β对人PBMC上LAIR-1表达的调节作用

目的:研究细胞因子IL-15和TGF-β对人外周血单个核细胞(PBMC)上LAIR-1表达的调节作用.方法:以IL-15和TGF-β作用于人PBMC,流式细胞术(FCM)检测PBMC上白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)的表达.结果:与单独PHA刺激组相比,IL-15刺激72 h后细胞免疫荧光强度明显减弱(P<0.05),阳性细胞百分率也有所下降;TGF-β刺激的PBMC上LAIR-1表达水平也有所降低.结论:IL-15和TGF-β都可以下调PHA活化PBMC上LAIR-1的表达.