千里光总碱和千里光碱对体外培养的小鼠黑色素瘤细胞增殖的影响

目的探索千里光总碱和千里光碱对体外培养的小鼠黑色素瘤细胞增殖的影响。方法 采用MTT法观察千里光总碱和千里光碱对小鼠黑色素瘤B16F10株的影响。结果 千里光总碱和千里光碱可以抑制体外培养的小鼠黑色素瘤B16F10株的增殖。结论 千里光总碱和千里光碱可以抑制体外培养的小鼠黑色素瘤细胞的增殖。     

粉防己碱对宫颈癌细胞周期影响及其机制研究

目的:研究粉防己碱对HeLa细胞的抗肿瘤作用,并探讨其分子机制。方法:用MTT法检测粉防己碱对HeLa细胞增殖的影响。流式细胞仪检测细胞周期分布。Western blot法检测粉防己碱处理前后HeLa细胞中Chk1/2蛋白表达情况。结果:粉防己碱对HeLa细胞的增殖抑制作用呈时间浓度相关性并可引起S期阻滞,粉防己碱作用后HeLa细胞Chk1/2蛋白的表达较对照组减少。可能与细胞周期阻滞的分子机制相关。结论:粉防己碱可以抑制宫颈癌HeLa的增殖,其诱导S期阻滞的分子机制可能与Chk1/2蛋白相关。     

粉防己碱对宫颈癌细胞周期影响及其机制研究

目的：研究粉防己碱对HeLa细胞的抗肿瘤作用,并探讨其分子机制。方法：用MTT法检测粉防己碱对HeLa细胞增殖的影响。流式细胞仪检测细胞周期分布。Western blot法检测粉防己碱处理前后HeLa细胞中Chk1/2蛋白表达情况。结果：粉防己碱对HeLa细胞的增殖抑制作用呈时间浓度相关性并可引起S期阻滞,粉防己碱作用后HeLa细胞Chk1/2蛋白的表达较对照组减少。可能与细胞周期阻滞的分子机制相关。结论：粉防己碱可以抑制宫颈癌HeLa的增殖,其诱导S期阻滞的分子机制可能与Chk1/2蛋白相关。     

Adinbitor对B16黑色素瘤细胞侵袭能力的影响

目的观察Adinbitor对黑色素瘤细胞侵袭迁移能力的影响。方法应用细胞培养技术,培养B16黑色素瘤细胞,经不同浓度的Adinbitor处理后,采用结晶紫染色法,检测其对基膜黏附的影响;Transwell小室模型观察其侵袭和迁移能力的变化。结果Adinbitor能显著抑制黑色素瘤细胞与基膜的黏附、抑制其迁移和侵袭（P〈0．01）,随Adinbitor浓度的增高其抑制作用增强。结论Adinbitor具有抑制B16黑色素瘤细胞侵袭迁移的作用。     

双歧杆菌对小鼠黑素瘤B16细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨双歧杆菌对小鼠恶性黑素瘤B16细胞的增殖及细胞周期的影响。方法：用MTT比色法测定B16细胞活力,用H-E染色法观察B16细胞形态,用流式细胞术测定B16细胞周期。结果：1×10^9cfu/ml的双歧杆菌作用B16细胞24h后,细胞增殖抑制率为36.69%;1×10^8cfu/ml的双歧杆菌作用B16细胞72h后,抑制率为63.47%;由此可见,双歧杆菌对B16细胞具有显著的增殖抑制作用。经双歧杆菌处理后,B16细胞核浆比例下降,细胞变小,核仁减少,说明B16细胞胞质和细胞核都趋于成熟化;经双歧杆菌处理后B16细胞周期阻滞于G1期[对照组和处理组G1期细胞比例分别为（41.22±1.15）%和（67.25±3.13）%],但凋亡作用不明显[处理组凋亡率为（1.87±0.04）%]。结论：双歧杆菌通过影响细胞周期抑制B16细胞的生长。     

输血对局部B16黑色素瘤生长的影响

用小鼠的输血模型，探讨输血对局部Ｂ１６黑色素瘤生长的影响，结果发现，同种异品系间的输血，可降低血鼠的ＮＫ细胞活性和淋巴细胞转化率，并能促进肿瘤的生长，肿瘤的体积及重量均明显高于输生理盐水组，而同种同品系间的输血则无此不良影响，本研究提示，Ｈ－２不相容性输血可促进肿瘤的生长，免疫功能下降可能是输血促进肿瘤生长的重要因素。     

乙双吗啉对B16黑色素瘤细胞作用的形态学研究

乙双吗啉(Bimolane,AT-1727)是我所研制的新药。临床上用于治疗银屑病和眼葡萄膜炎。动物实验观察到它有抑制肿瘤生长的作用。临床上也已试用于治疗恶性肿瘤。但其作用机理还不太清楚。本文应用显微缩时电影和电子显微镜观察此药对体外培养的B_(16)黑色素瘤细胞的作用。方法和材料乙双吗啉由本所合成室提供,白色粉剂,用少量DMSO溶解,无菌生理盐水稀释,置4℃冰箱避光保存。 B_(16)黑色素瘤细胞由日本引进原代瘤源,经体内外交叉传代10次以上获肺100％高转移株,以1×10~5/ml细胞数接种于玻璃培养瓶中,含10％小牛血清,100 IU/ml青霉素,100μg/ml链霉素的RPMI-1640     

双歧杆菌对小鼠黑素瘤B16细胞增殖和细胞周期的影响

目的: 探讨双歧杆菌对小鼠恶性黑素瘤B16细胞的增殖及细胞周期的影响。方法:用MTT比色法测定B16细胞活力，用HE染色法观察B16细胞形态，用流式细胞术测定B16细胞周期。结果:1×109 cfu/ml的双歧杆菌作用B16细胞24 h后，细胞增殖抑制率为36.69％；1×108  cfu/ml     

不同条件微波辐射对PC12细胞周期、死亡方式和超微结构的影响

目的探讨不同条件微波辐射对PC12细胞的损伤效应,为深入研究微波辐射的损伤机制提供剂量学依据。方法采用平均功率密度(重复频率×脉宽)分别为10 m W/cm2(100 pps$500 ns)、30 m W/cm2(300 pps$500 ns)和30 m W/cm2(1000 pps$150 ns)的微波辐射NGF诱导后的PC12细胞5 min,于辐射后6 h,采用流式细胞术检测细胞周期、凋亡和坏死率,采用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞凋亡和坏死率,采用透射电镜观察PC12细胞超微结构的改变。结果10 m W/cm2(100 pps$500 ns)辐射后6 h,G0-G1期PC12细胞数减少(p<0.05),G2-M期细胞数增加(p<0.01);30 m W/cm2(1000 pps$150 ns)辐射后6 h,G0-G1期细胞数增加(p<0.05),G2-M期减少(p<0.01);30 m W/cm2(300 pps$500 ns)辐射后6 h,G0-G1期细胞数增加(p<0.05),S期细胞数减少(p<0.01),细胞凋亡率增加(p<0.01),PC12细胞核膜间隙增宽,染色质浓缩边集,核仁呈蜂窝状;线粒体肿胀、空化。结论 30 m W/cm2(300 pps$500 ns)微波辐射可引起PC12细胞生长抑制,凋亡率增加,结构损伤;30 m W/cm2(300 pps$500 ns)可作为深入研究微波辐射的损伤机制的辐射剂量。     

Angiostatin的分离纯化及对B16黑色素瘤的抑制作用

目的:研究Angiostatin对黑色素瘤的治疗作用.方法:从人血浆组分Ⅲ中用亲和层析的方法分离Plasminogen和通过离子交换层析和分子筛技术得到弹性蛋白酶纯品.经此酶分离Plasminogen进行有限酶解,产物经亲和层析分离得到Angio-statin.结果:体外实验表明,Angiostatin能显著抑制牛主动脉弓内皮细胞的增殖.体内实验发现,以0.6 mg/kg·d的剂量腹腔注射14d后,B16黑色素瘤生长抑制率达77%(P<0.05);以小鼠尾静脉注射的方法建立黑色素瘤转移模型,采用同样的方法冶疗18d后,B16黑色素瘤的肺转移率降低了65%(P<0.05).结论:本研究为Angiostatin用于黑色素瘤的治疗提供了实验依据,说明Angiostin在肿瘤治疗方面有着广泛的应用前景.     

TNF-α诱导小鼠B16黑色素瘤细胞凋亡及其对小鼠B16细胞移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨TNF-α对小鼠B16黑色素瘤(MM)细胞凋亡的诱导及其对小鼠B16移植瘤生长的抑制作用.方法:用不同浓度的TNF-α直接作用于培养的小鼠B16黑色素瘤细胞,36h后,采用流式细胞仪(FCM)及原位末端标记法(TUNEL法)检测B16细胞的凋亡率.动物实验观察TNF-α小量瘤体内注射对小鼠B16移植瘤生长的抑制作用.结果:在1000、3000、5000及10000U/mL TNF-α作用下,B16细胞的凋亡指数均明显高于空白对照组(P＜0.01),随着TNF-α浓度增加,B16凋亡细胞数呈增加趋势.动物实验结果显示,TNF-α治疗3周后,治疗组荷瘤小鼠MM移植瘤的体积和重量明显低于对照组(P＜0.01).结论:TNF-α能够诱导小鼠B16黑色素瘤细胞发生凋亡,且小剂量TNF-α瘤体内注射能显著抑制小鼠移植性MM的生长.     

Adinbitor对B16黑色素瘤细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响

目的探讨Adinbitor对B16黑色素瘤细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法 MTT法检测Adinbitor对B16黑色素瘤细胞增殖的影响;双苯并咪唑(Hoechst33258,Ho)染色法观察Adinbitor作用于B16黑色素瘤细胞后细胞形态的改变;结晶紫染色法和聚碳酸酯膜浸润试验观察其对黑色素瘤细胞体外黏附以及迁移的影响。结果 Adinbitor可呈剂量依赖性方式抑制B16黑色素瘤细胞的增殖,其抑制B16黑色素瘤细胞增殖的ID50为2.68μmol/L。Adinbitor可明显诱导黑色素瘤细胞凋亡,并且剂量依赖性地抑制瘤细胞的黏附和迁移(P<0.01)。结论 Adinbitor在体外能够显著降低黑色素瘤细胞的黏附及迁移能力,有效地抑制黑色素瘤细胞的增殖,同时促进细胞凋亡。     

白藜芦醇对黑色素瘤细胞增殖的抑制作用

目的:探讨白藜芦醇对黑色素瘤细胞WM239增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法:MTT法检测白藜芦醇对WM239细胞增殖的影响;流式细胞术检测白藜芦醇对WM239细胞周期及凋亡的影响。结果:12.5～200μmol/L的白藜芦醇作用于WM239细胞48h和72h后,对其增殖具有一定的抑制作用,作用72h时,浓度>50μmol/L其抑制率>50%,且抑制程度与药物浓度呈正相关。其中0、25、50和100μmol/L药物与WM239细胞作用48h后,凋亡率分别为0.1%、9.7%、8.9%和19.3%,处理组与未处理组相比细胞凋亡明显增加,G0/G1期细胞分别为71.9%、77.3%、81.0%和83.7%,S期分别为21.5%、17.9%、16.0%和14.6%,G2/M期为6.5%、4.8%、2.9%和1.8%,细胞周期阻滞于G1期,S期和G2期细胞比例下降,剂量依赖关系明显。结论:白藜芦醇可以抑制WM239细胞的增殖,引起细胞周期改变,凋亡细胞明显增加。     

反义survivin-脂质体复合物对肝癌细胞生长凋亡和细胞周期的影响

目的探讨反义survivin-脂质体复合物（survivin-ASODN）对肝癌细胞系HepG2的生长抑制作用及其机制,为肝癌及survivin阳性肿瘤的治疗提供理论依据。方法用脂质体介导survivin-ASODN转染肝癌细胞系HepG2细胞;通过RT-PCR和Western blot检测survivin表达水平;以MTT法测量细胞生长情况;以流式细胞术测定caspase-3活性及凋亡率,电镜观察细胞形态学变化,并应用流式细胞仪同步分析survivin-ASODN对肝癌细胞系HepG2增殖周期的影响。结果surviving-ASODN可有效下调survivin表达水平,并呈剂量依赖关系,其IC50值为250nmol／L,最大效应浓度为600nmol／L;可抑制细胞生长,激活caspase-3活性,诱导细胞凋亡,使其出现凋亡形态学变化,如胞浆空泡变性、核浓缩和核碎裂。细胞周期的同步分析显示,surviving-ASODN对HepG2细胞增殖周期有明显影响,HepG2先出现细胞周期阻滞,紧接着出现细胞凋亡;低浓度处理后,可将细胞先后阻滞在S期和G2／M期;高浓度时,S期阻滞被加强,可快速诱导细胞凋亡,并且,细胞凋亡率随着药物浓度的增加和作用时间的延长明显上升。结论surviving-ASODN对肝癌细胞有强的生长抑制效应,其机制是与阻断细胞周期及诱导细胞凋亡有关。     

盐酸小檗碱对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究盐酸小檗碱对人胃癌细胞及永生化胃上皮细胞增殖和凋亡的影响,初步探讨其中可能的分子机制。方法:利用不同浓度的小檗碱处理胃癌细胞系MKN-45和SGC-7901细胞,以及永生化胃上皮细胞系GES细胞,采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡(PI标记),Western blot检测细胞周期和凋亡相关蛋白的表达。结果:MTT结果显示与空白对照组相比,小檗碱处理后,细胞增殖速度明显受到抑制(P<0.05),并呈浓度依赖性,其中50μg/ml处理组最大抑制率为81.3%,这种抑制作用对胃癌细胞更为明显。流式细胞仪检测表明,小檗碱在较低浓度(10μg/ml)时即可诱导胃癌细胞出现G0/G1阻滞,S期细胞百分比减少和细胞凋亡(P<0.05),这种作用呈时间和浓度依赖性。Western blot结果提示小檗碱处理后,胃癌细胞Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax及p53蛋白表达水平明显上调。结论:小檗碱可抑制胃癌细胞增殖,诱导胃癌细胞凋亡,其机制与阻滞细胞周期进展以及调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和p53密切相关。     

盐酸小檗碱对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究盐酸小檗碱对人胃癌细胞及永生化胃上皮细胞增殖和凋亡的影响,初步探讨其中可能的分子机制。方法：利用不同浓度的小檗碱处理胃癌细胞系MKN-45和SGC-7901细胞,以及永生化胃上皮细胞系GES细胞,采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡（PI标记）,Western blot检测细胞周期和凋亡相关蛋白的表达。结果：MTT结果显示与空白对照组相比,小檗碱处理后,细胞增殖速度明显受到抑制（P〈0.05）,并呈浓度依赖性,其中50μg/ml处理组最大抑制率为81.3%,这种抑制作用对胃癌细胞更为明显。流式细胞仪检测表明,小檗碱在较低浓度（10μg/ml）时即可诱导胃癌细胞出现G0/G1阻滞,S期细胞百分比减少和细胞凋亡（P〈0.05）,这种作用呈时间和浓度依赖性。Western blot结果提示小檗碱处理后,胃癌细胞Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax及p53蛋白表达水平明显上调。结论：小檗碱可抑制胃癌细胞增殖,诱导胃癌细胞凋亡,其机制与阻滞细胞周期进展以及调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和p53密切相关。     

DKC1影响黏膜型黑色素瘤细胞的增殖、凋亡和细胞周期且与MEKERK通路相关

目的：研究角化不良素假尿苷合成酶1（dyskerin pseudouridine synthase 1,DKC1）对黏膜型黑色素瘤细胞的增殖、细 胞周期和凋亡的影响及其可能的机制。方法：qPCR检测DKC1 mRNA在黏膜型黑色素瘤细胞系HMV Ⅱ、GAK和正常皮肤细胞 株BJ中的表达水平; 用DKC1 siRNA（si-DKC1 组）和对照 siRNA（si-Ctrl 组）转染 HMV Ⅱ和GAK细胞,干扰48 h后用qPCR和 Western blotting验证敲减效率,CCK-8法检测敲减DKC1对黏膜型黑色素瘤细胞增殖的影响,流式细胞技术检测对细胞凋亡和周 期的影响,Western blotting和qPCR检测MEK-ERK通路相关分子表达变化。结果：HMV Ⅱ、GAK细胞的DKC1 mRNA和蛋白表 达水平均显著高于BJ细胞（均P<0.01）。转染siRNA48 h后, 与si-Ctrl组相比,si-DKC1组HMV Ⅱ和GAK细胞中DKC1 mRNA和 蛋白水平均显著降低（均P<0.01）,细胞的增殖水平显著下降(P<0.05或P<0.01）,细胞的凋亡率显著升高（均P<0.01）且促凋亡分 子caspase 9、BAK和PUMA mRNA的表达显著升高（P<0.05或P<0.01）,发生细胞周期阻滞(P<0.05或P<0.01）,MEK和ERK1/2 的磷酸化水平显著下调（P<0.05）。结论：敲减DKC1可抑制黏膜型黑色素瘤细胞的增殖,促进细胞周期阻滞并诱导细胞凋亡, 其 机制可能与MEK/ERK信号通路有关。     

氧化砷对NB4和Jurkat细胞周期的影响

目的：研究氧化砷(As2O3)对白血病细胞系NB4、Jurkat细胞周期的影响及对细胞周期及凋亡相关蛋白的调节作用。方法：以MTT、基因组DNA电泳、蛋白／DNA双参数流式细胞术等方法研究As2O3对白血病细胞的作用及机制。结果：随着As2O3作用时间的延长,白血病细胞增殖明显受到抑制,DNA电泳出现“梯”状条带,流式细胞术检出亚G1峰,细胞周期阻滞于G1和G2／M期,部分细胞周期及凋亡相关的调控蛋白表达改变。结论：As2O3通过改变细胞周期及凋亡相关蛋白的表达而抑制白血病细胞增殖和诱导其凋亡。