高温与低剂量香烟联合致仔鼠的神经行为异常

背景神经行为是评价中枢神经发育异常的最敏感指标,导致其发育畸形的影响因素较多.为此,探讨高温与香烟联合环境下对神经行为发育的影响. 目的探讨高温与香烟联合对仔鼠神经行为发育的影响.设计以动物为观察对象的随机对照实验.单位新乡医学院第三附属医院妇产科和新乡医学院的细胞生物学教研室.材料健康未生育的sD大鼠270只,雌性大鼠180只,体质量190-210 g,雄性大鼠90只,体质量225～275 g,鼠颗粒饲料喂养,常规饮水,自然光照,室温25℃.将动情期的雌雄大鼠按21合笼过夜,次日晨检到阴栓为妊娠第0 d,共获孕鼠160只,随机分成16组,暴露于高温、香烟及高温联合香烟的条件下,孕鼠自然分娩,观察仔鼠的早期反射和学习记忆. 干预160只孕鼠从妊娠第2 d开始,37℃,41℃,42℃高温联合香烟组大鼠每只隔日皮下注射相当于1.0支香烟水溶物,25℃对照组和37℃,41℃,42℃单独高温组每日注射2.0mL的双蒸水,共7次.于孕第10 d将孕鼠置于温箱中,37℃,41℃,42℃单独高温组肛温分别保持在(37+0.5)℃,(41+0.5)℃,(42+0.5)℃,持续2.0min;37℃,41℃,42℃高温联合香烟组肛温保持同单独高温组,每组均分别持续0.5,1.0,1.5,2.0 min;25℃对照组不做高温处理.受孕18 d后单笼饲养待其自然分娩.记录妊娠天数、仔鼠数、死胎数,并观察有无外观畸形,每周测量每窝仔鼠的平均体质量.观察仔鼠张耳、出牙、开眼、生毛的天数,判断发育情况.分别于仔鼠生后3,7,12,16 d观察平面翻正、空中翻正、视觉定向、听觉惊愕等反射及感觉功能,评估标准为每窝仔鼠均达标天数,以判断神经反射情况.采用Y迷宫试验对仔鼠(30日龄)的学习和记忆功能进行测试. 主要观察指标①主要结局仔鼠平面翻正、空中翻正、视觉定向和听觉惊愕等反射及感觉功能.②次要结局高温联合香烟对仔鼠学习记忆的影响.结果高温组(41℃和42℃)仔鼠体格发育(开眼、张耳、生毛、出牙)和反射感觉功能(平面翻正、空中翻正、视觉定向和听觉惊愕)的达标天数与记忆能力达标时间(min)与对照组及37℃组比较明显迟缓(X2=11.34,P＜0.01);同时还表明持续较长时间的高温(1.5 min)与香烟联合对仔鼠上述神经行为具有复合作用,与单独高温组比较有显著性差异(X2=10.29,P＜0.01).结论持续较长时间的高温与香烟联合导致仔鼠生长发育迟缓及学习记忆功能降低等神经行为异常.     

高温联合辐射对仔鼠神经系统与行为的影响

目的探讨高温联合辐射对仔鼠神经系统与行为的影响。方法将130只孕鼠按随机抽签法分为13组,每组10只。在孕鼠妊娠第8、9d分别接受60Co及γ-射线全身照射各1次,照射剂量1．0Gy;第10d各置温箱中,分别使其肛温保持在37、±0．5℃,41±0．5℃,42±0．5℃,并持续3、4、5min。移出温箱2h后,每组随机取5只,单笼饲养,待其自然分娩,观察仔鼠体格发育、生理发育、神经反射、活动能力等神经行为指标。结果孕鼠经高温联合辐射后,其仔鼠的生理发育、早期反射、感觉功能、活动能力均显著滞后于对照组(P<0．01)。结论高温联合辐射具有复合作用,可增强对仔鼠神经系统的不良影响。     

高温和香烟对鼠早期胚胎脑蛋白质及热休克蛋白的影响

背景：应用分子生物学技术与体内／外实验动物模型结合手段，从发育学角度探讨了热休克蛋白(heat shock protelna，HSPs)与胚胎生长发育和畸形发生的内在联系，为充实和推动从分子水平揭示胚胎发育正常或异常的奥秘开辟了一条新的途径。目的：探讨高温、香烟及联合对鼠胚胎脑HSP70及蛋白质合成的影响。设计：随机对照的实验研究。地点、材料和方法：实验在新乡医学院细胞生物学教研室和实验动物中心完成。实验选用SD雄性大鼠100只。雌性大鼠200只合笼过夜，按随机抽签法将150只孕鼠分为高温和高温与香烟联合组，高温组分为37，40，41，42℃4个大组，每一大组随机分为处理时间为1，2，3，4，5min小组，共20组；高温与香烟联合组分为37和42℃两大组，每一大组再分为皮下注射相当于0，0．5，1．0，1．5，2．0支香烟5个小组，共10组。高温组于孕鼠孕第10天进行高温处理，高温与香烟联合组于孕鼠孕第2天进行香烟处理，各组孕鼠高温处理，2h后处死，取胎鼠全脑组织制备匀浆，测量HSP70和蛋白质含量，观察高温及高温+香烟各组胎鼠大脑蛋白质含量及诱导合成的HSP70的含量。主要观察指标：高温、高温与香烟联合对胎鼠脑蛋白质及HSP70变化的影响。结果：高温(40,41，42℃)导致胎脑蛋白质含量从7．01mg下降到5．66mg．与对照组(37℃)比较，差异有显著性意义(F=3．92，P&;lt;0．01)，并与温度持续时间呈正相关；同时可诱导HSP70的合成，40，41℃及42℃最高诱导量分别为57．3，71．3，83．2mg／g，41℃持续3min以上组及42℃各组与对照组比较有显著性差异(F=4．02。P&;lt;0．01)；高温+香烟(1．0，1．5和2．0支)组胎脑蛋白质含量分别降到5．31，5．24。5．09mg。与单独高温组比较(42℃持续5min)胎脑蛋白质含量有明显变化(F=4．45，P&;lt;0．01)：诱导HSP70合成量与单独高温组比较未见明显变化(F=1．05．P&;gt;0．05)。结论：高温、香烟烟雾及其联合可引起胎脑蛋白质含量减少，并诱导脑HSP70合成，但香烟的诱导作用较高温弱，与高温联合胎脑HSP70合成表现出交叉适应性反应。     

高温和香烟对鼠早期胚胎脑蛋白质及热休克蛋白的影响

背景应用分子生物学技术与体内/外实验动物模型结合手段,从发育学角度探讨了热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)与胚胎生长发育和畸形发生的内在联系,为充实和推动从分子水平揭示胚胎发育正常或异常的奥秘开辟了一条新的途径.目的探讨高温、香烟及联合对鼠胚胎脑HSP70及蛋白质合成的影响.设计随机对照的实验研究.地点、材料和方法实验在新乡医学院细胞生物学教研室和实验动物中心完成.实验选用SD雄性大鼠100只,雌性大鼠200只合笼过夜,按随机抽签法将150只孕鼠分为高温和高温与香烟联合组,高温组分为37,40,41,42℃4个大组,每一大组随机分为处理时间为1,2,3,4,5 min小组,共20组;高温与香烟联合组分为37和42℃两大组,每一大组再分为皮下注射相当于0,0.5,1.0,1.5,2.0支香烟5个小组,共10组.高温组于孕鼠孕第10天进行高温处理,高温与香烟联合组于孕鼠孕第2天进行香烟处理,各组孕鼠高温处理,2 h后处死,取胎鼠全脑组织制备匀浆,测量HSP70和蛋白质含量,观察高温及高温+香烟各组胎鼠大脑蛋白质含量及诱导合成的HSP70的含量.主要观察指标高温、高温与香烟联合对胎鼠脑蛋白质及HSP70变化的影响.结果高温(40,41,42℃)导致胎脑蛋白质含量从7.01 mg下降到5.66mg,与对照组(37℃)比较,差异有显著性意义(F=3.92,P＜0.01),并与温度持续时间呈正相关;同时可诱导HSP70的合成,40,41℃及42℃最高诱导量分别为57.3,71.3,83.2 mg/g,41℃持续3 min以上组及42℃各组与对照组比较有显著性差异(F=4.02,P＜0.01);高温+香烟(1.0,1.5和2.0支)组胎脑蛋白质含量分别降到5.31,5.24,5.09mg,与单独高温组比较(42℃持续5 min)胎脑蛋白质含量有明显变化(F=4.45,P＜0.01);诱导HSP70合成量与单独高温组比较未见明显变化(F=1.05,P＞0.05).结论高温、香烟烟雾及其联合可引起胎脑蛋白质含量减少,并诱导脑HSP70合成,但香烟的诱导作用较高温弱,与高温联合胎脑HSP70合成表现出交叉适应性反应.     

不同时程砷暴露对子代大鼠神经行为和学习记忆能力的影响

目的:比较不同时程饮水砷暴露时大鼠仔鼠神经行为发育和学习记忆功能的影响.方法:雌性SD大鼠于受孕后第0天开始分孕期暴露(受孕0d～仔鼠出生)、哺乳期暴露(仔鼠出生1～21 d断乳)和全程暴露(受孕0d～仔鼠出生后42 d)3组以自由饮水方式给予100 mg/L的NaAsO2水溶液,同时设对照组(饮用蒸馏水).观察砷对子代大鼠生理发育、神经行为发育及学习记忆能力的影响.结果:哺乳期染毒组和全程染毒组仔鼠从出生后1周起体重明显低于对照组(P＜0.05),但张耳、开眼、长毛、出牙等生理发育指标与对照组相比差异无统计学意义.在神经行为测试中,全程染毒组仔鼠平面翻正、悬崖回避和负趋地性等指标达标日龄显著长于对照组(P＜0.05),出现神经行为发育迟缓.方位水迷宫实验中,哺乳期染毒组仔鼠正确寻找隐蔽平台所需时间显著长于全程染毒组(P＜0.05),穿越目标区域次数也显著少于全程染毒组(P＜0.05).结论:不同时程饮水砷暴露对仔鼠神经行为和学习记忆的影响程度存在差异,哺乳期砷暴露能够明显减缓仔鼠体重增长,并迟滞其神经行为发育以及显著削弱学习记忆能力.     

高温联合辐射对胚胎神经发育及脑热应激蛋白的影响

目的探讨高温联合辐射致胚胎神经发育与早期胚胎脑蛋白质和HSPs表达的关系。方法将130只孕鼠按随机抽签分为13组,每组10只。在鼠妊娠第8d,第9d分别接受60Co及γ-射线全身照射各1次,照射剂量1.0Gy;第10d各置温箱中,分别使其肛温保持在37±0.5℃,41±0.5℃,42±0.5℃,并持续3,4,5min。移出温箱2h后,每组每时段随机取5只脱颈法处死,采用Westerndotblot和lowry方法定量分析胚胎脑HSP70和蛋白质含量与胚胎神经系统畸形。结果高温联合辐射对胚胎神经毒性明显增加,并与高温强度及作用时间呈正相关;高温联合辐射作用于胚胎早期对胚胎脑蛋白质降低有复合作用(P<0.01),并可诱导脑HSP70合成。结论高温与辐射联合致神经发育与胚胎脑蛋白质合成及热应激蛋白的诱导有一定的相关性。     

被动吸烟影响仔鼠小脑皮质神经生长因子含量及牛磺酸的干预作用术

背景：被动吸烟致对胚胎神经系统发育影响的报道比较少见，并缺乏有效的防治措施。我们以往实验证明，被动吸烟可致仔鼠海马组织神经生长因子含量减少，学习能力下降。小脑皮质也是胚胎期神经生长因子水平较高的部位之一，被动吸烟也可能降低小脑皮质神经生长因子的含量。牛磺酸在哺乳类动物的脑内含量丰富，神经元和神经胶质细胞可能通过选择性储存和释放牛磺酸，以维持脑组织的正常活动，牛磺酸的合成和摄人受阻可能导致其功能异常。因此推测胚体内一定水平的牛磺酸与神经生长因子含量具有相关性，而小脑皮质神经生长因子含量的减少可能是仔鼠脑损伤的原因之一，故设计此实验。 目的：探索被动吸烟对仔鼠所致脑损害机制及牛磺酸的干预作用。 设计：随机对照动物实验。 单位：山西医科大学汾阳学院。 材料：实验于2001—03／2001-12在山西医科大学汾阳学院中心实验室进行。选Wistar雌性大鼠21只，体质量150-210g，采用编号随机分组方法分为3组，每组7只：被动吸烟组，被动吸烟＋牛磺酸组，正常对照组。3组大鼠均于受孕的第2天起进行处理至自然分娩。被动吸烟组给予连续实验性吸烟，每日吸烟前用生理盐水0．65mL／只灌胃；被动吸烟＋牛磺酸组于每日吸烟前用牛磺酸500mg／kg灌胃；正常对照组不予吸烟，每日用生理盐水0．65mL／只灌胃。 方法：各组孕鼠分娩的仔鼠称量体质量后断头法处死，分离出脑并称重，在沸生理盐水中煮5min。再分离出小脑，用免疫放射测定法测神经生长因子含量。以小脑皮质神经生长因子蛋白变化为指标观察被动吸烟及牛磺酸对其的影响。主要观察指标：各组仔鼠体质量、脑质量和小脑神经生长因子蛋白的比较。 结果：21只孕鼠的147只仔鼠检测数据进人结果分析。被动吸烟组仔鼠的体质量、脑质量和小脑神经生长因子蛋白水平分别与正常对照组和被动吸烟＋牛磺酸组比较均显著降低（P〈0．001）；被动吸烟＋牛磺酸组仔鼠的3项指标与正常对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）。 结论：被动吸烟可能是导致仔鼠小脑皮质神经生长因子水平下降的因素；牛磺酸可能对被动吸烟所致仔鼠脑损害具有保护作用。     

缺氧条件下鼠胚软骨c-Fos和巢蛋白表达及当归的保护作用

目的：探讨宫内缺氧对胚胎大鼠软骨组织内c—Fos和巢蛋白表达的影响，以及中药当归注射液对缺氧状态下其表达的调节。 方法：于2004-06／12在四川省泸州医学院动物科将成年发情期雌性Wistar大鼠（220-250g）12只，分别与1只雄鼠合笼饲养，于次13上午8：00发现阴栓记孕鼠怀孕0d，饲养雌鼠至孕15d。将12只孕鼠随机分为对照组、缺氧组和当归组各4只（每只孕鼠产胎鼠5～8只）。当归组孕鼠经尾静脉注入当归注射液，然后用低张性缺氧模型致鼠胚宫内缺氧；缺氧组用生理盐水代替当归注射液，其余同当归组；对照组不缺氧，其余同缺氧组。然后麻醉状态下处死孕鼠，快速剖腹取胎，每组中随机选取20个鼠胚，将各组胎鼠头部软骨组织作c—Fos和巢蛋白免疫组化双标染色后，进行观察分析。结果分析与判断：每张切片用DPl2数码相机在400倍下照相，并随机选择1个软骨组织视野观察计数。c—Fos免疫组化反应阳性细胞为胞核着蓝色，巢蛋白免疫组化反应阳性细胞胞质染红色。将凡是胞质染红色的细胞根据红色深浅分为3个等级：深红色计为＋＋、红色计为＋＋、淡红色计为＋，分别对其记数，然后将同一组内20个鼠胚3个等级的阳性细胞数分别相加，得出该组的巢蛋白免疫组化结果。既有胞核染蓝色，又有胞质染红色的为c—Fos／巢蛋白免疫组化双染阳性细胞．计数每例鼠胚软骨组织双染阳性细胞的数量。 结果：60个鼠胚头部软骨组织进入结果分析。①对照组软骨组织c—Fos和巢蛋白有弱表达；与对照组相比，缺氧组软骨组织c—Fos和巢蛋白表达增强[c—Fos：（5．35&;#177;1．42），（14．55&;#177;3．37）个／视野，q=16．48，P〈0．05；巢蛋白：193，427个／20个鼠胚，｜R^-A-R^-B｜=66．78，P〈0．051。②与缺氧组相比，当归组软骨组织c—Fos和巢蛋白表达减弱[c—Fos：（8．00&;#177;2．31）个／视野，q=11．73，P〈0．05；巢蛋白：250个／20个鼠胚，{R^-A-R^-B}=51．83，P〈0．05]。 结论：①缺氧可刺激鼠胚软骨组织巢蛋白的表达，c—Fos可能是缺氧刺激巢蛋白表达的机制之一。②当归注射液对缺氧鼠胚软骨组织可能有保护作用。’     

维生素E抗B超辐照早孕大鼠的仔鼠神经行为致畸的观察

本文研究维生素Ｅ抗Ｂ超辐照早孕大鼠的仔鼠神经行为致畸的效应。４０只受孕Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为４组：Ｂ超加维生素Ｅ（ＶＥ），Ｂ超，ＶＥ组及空白组。观察仔鼠神经行为致畸指标。结果表明．活胎数、体重、体格发育、早期反射及感觉功能、运动和协调功能、学习和记忆等Ｂ超组与空白组间、Ｂ超加ＶＥ组与Ｂ超组间比较有不同程度的显著性差异，提示ＶＥ对２０分钟诊断剂量超声辐射早孕大鼠所致仔鼠神经行为致畸有一定的干预效应。     

纹状体边缘区注射FK506增强大鼠逃避性长期记忆

目的：观察大鼠纹状体边缘区注射钙神经素特异性抑制剂FK506对大鼠逃避性长期记忆功能的影响。方法：实验于2003-05／12在南方医科大学珠江医院神经生物学研究室进行。取SD成年大鼠25只，Y迷宫筛选后获得合格动物21只，单纯随机分成FK506组(11只)和生理盐水组(10只)。两组均进行Y迷宫训练，第3天训练后立即进行立体定位双侧边缘区药物注射，FK506组每侧注射0．5μL(1．6g／L)FK506，生理盐水组注射等容积的生理盐水，1周后测试其Y迷宫长期记忆。结果：25只大鼠，Y迷宫筛选剔除大鼠4只，注射位点不准确剔除5只，纳入最后分析FK506组9只，生理盐水组7只。两组大鼠注射前Y迷宫成绩无显著差异[(21．78&;#177;3．07)，(21．57&;#177;2．64)次，t=0．141，P=0．89]，但在药物注射后1周测试Y迷宫长期记忆成绩，FK506注射组显著好于生理盐水组[(24．44&;#177;2．13)，(2000&;#177;2．94)次，t=3．513，P=0．003]。结论：FK506边缘区注射可增强大鼠逃避性长期记忆。     

鼠胚神经干细胞增殖对缺氧的反应及当归的保护作用

目的：探讨宫内缺氧对胚胎大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液对缺氧神经干细胞的保护作用。方法：实验于2003-09／2004-06在四川省泸州医学院动物科将12只孕鼠随机分为对照组、缺氧组和当归组，每组4只（每只孕鼠产胎鼠5～8只）。当归组孕鼠经尾静脉注入当归注射液，然后用低张性缺氧模型致胎鼠宫内缺氧；缺氧组用生理盐水代替当归注射液，其余同当归组；对照组不缺氧，其余同缺氧组。然后在麻醉状态下处死孕鼠，快速剖腹取胎鼠，每组随机选取20个胚鼠，将各组胎鼠脑组织作神经巢蛋白免疫组化染色，并进行图像分析。结果：60个胎鼠脑室周围脑组织进入结果分析。①缺氧组胎鼠巢蛋白免疫组化反应阳性细胞的吸光度较对照组强（0．262&;#177;0．043，0．173&;#177;0．021，P〈0．05）；阳性细胞数量较对照组多[（101．4&;#177;15．76），（42．7&;#177;6．25）个／视野，P〈0．05]。②与缺氧组相比较，当归组胎鼠的巢蛋白免疫组化反应阳性细胞的吸光度减弱（0．222&;#177;0．035，P〈0．05）；阳性细胞数量减少[（58．5&;#177;12．53）个／视野，P〈0．05]。结论：缺氧后神经干细胞表达巢蛋白增加，当归注射液减弱了缺氧刺激引起的神经干细胞的增殖和分裂，提示当归对缺氧有保护作用。     

不同温度条件下体外培养小鼠皮质神经元形态及骨架蛋白的表达

目的：观察不同温度条件下体外培养的小鼠皮质神经元的形态及其骨架蛋白表达的变化，以及与热休克蛋白70的关系。 方法：实验于2005-02／06在解放军第四军医大学西京医院神经内科实验室完成。①选取孕15-18d昆明种二级孕鼠1只，处死后取胎鼠的大脑皮质进行神经元原代培养，培养第7天经鉴定的神经元用于实验，随机分为高温处理组和正常对照组。②高温处理组建立热应激损伤模型，将培养好的神经元移入经乙醇消毒的全自动水浴加热器，分别于38。39，40，41，42℃处理30min。正常对照组不造模，于37℃对神经元进行常规培养。③两组均随机选取3个细胞爬片，应用倒置相差显微镜观察刺激后神经元的形态变化，应用激光共聚焦扫描观察不同温度刺激后神经元中骨架蛋白、热休克蛋白70的表达变化。 结果：①两组培养的神经细胞光镜观察结果：培养7d时正常对照组细胞光晕明显．胞体饱满并聚集成团，细胞团间有粗大的突起并相互连接，神经网络稠密：高温处理组38℃时漂浮细胞增加，神经网络稀疏。39℃时部分细胞坏死。42℃大部分细胞出现坏死，胞体碎裂，突起漂浮或消失。②培养神经细胞的纯度鉴定结果：培养7d的神经细胞，荧光显徽镜下可见神经元及突起为绿色荧光，突起一至两个不等，计算结果显示培养细胞中神经元占（82．0&;#177;1．9）％。⑧不同温度条件下两组骨架蛋白及热应激蛋白荧光强度的变化：高温处理组38，39，40，41，42℃热刺激后骨架蛋白荧光强度低于正常对照组，且温度愈高降低愈明显。热休克蛋白70荧光强度呈钟形分布，39℃最高，37，42℃最低。 结论：高温可以导致神经元形态变化，其中骨架蛋白结构紊乱可能是神经元形态变化的原因之一，热休克蛋白70可能参与其中。     

高压氧对糖尿病大鼠周围神经病变的改善作用及其机制

目的：研究高压氧治疗是否可改善链脲佐菌素(streptozocin，STZ)糖尿病大鼠的周围神经病变并探讨其机制。方法：SD大鼠83只，用STZ制造糖尿病模型成功60d、肌电图和电镜证实有周围神经病变后，随机分为3组：①高压氧组(n=31)：每天接受0．15MPa、高压氧1h，连续20d。②糖尿病对照组(n=32)：不做治疗。③正常对照组（n=20）：腹腔注射生理盐水的无糖尿病的正常STZ大鼠。分别在疗程5，10，20d时测定右后肢胫神经、腓神经的传导速度（nerve conduction velocity，NCV)和H反射后处死治疗组及同期对照组大鼠，取坐骨神经进行苏木精-伊红染色病理学观察，同时进行电镜观察。结果：治疗前糖尿病大鼠的胫神经(28．56&;#177;6．99)mm／s、腓神经(28．92&;#177;7．37)mm／s的NCV明显低于正常组[分别为(48．29&;#177;8．04)mm／s，(51．93&;#177;8．50)mm／s]，而H反射的潜伏期延长，波幅变小。高压氧治疗10d后，治疗组后肢胫神经(45．17&;#177;9．80)mm／s和腓神经的传导速度(43．81&;#177;7．05)mm／s明显高于同期糖尿病对照组，但低于正常对照组；治疗组H反射的潜伏期(7．27&;#177;0．76)ms较糖尿病对照组[7．49&;#177;1．26)ms缩短，波幅增大[(1．09&;#177;0．39)mV。(0．57&;#177;0．30)mV，P&;lt;0．05]；病理学变化不明显，但电镜观察显示治疗组的许旺细胞数较糖尿病对照组增多，髓鞘结构有所改善；氧疗20d后，治疗组后肢胫神经[(46．56&;#177;9．72)，(36．75&;#177;4．29)mm／s]和腓神经[(44．43&;#177;11．23)，(30．74&;#177;6．03)mm／s]的传导速度明显高于糖尿病对照组(P&;lt;0．01)，而与正常对照组间无明显差异[分别为(56．6&;#177;9．72)mm／s和(45．07&;#177;4．08)mm／s，P&;gt;0．05]，H反射的潜伏期(7．01&;#177;1．14)ms较糖尿病对照组(7．74&;#177;0．86)ms进一步缩短(P&;lt;0．05)，但波幅变化不明显；病理观察显示此时神经髓鞘和神经纤维结构明显好转；电镜下也观察到许旺细胞增生、有髓神经结构好转、轴突增大等改变。结论：高压氧可改善STZ糖尿病大鼠周围神经病变。     

宫内感染对新生仔鼠脑内蛋白GAP-43和MAP-2影响的实验研究

目的:通过观察神经生长相关蛋白(GAP-43)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的变化,以研究宫内感染对新生儿脑发育的影响。方法:取孕17d的大鼠36只,随机取30只腹腔注射脂多糖(LPS)450μg/kg,连续注射2d,造成宫内感染模型,22d后出生的仔鼠22只作为I组;另6只注射等剂量生理盐水,将其所生仔鼠作为对照组(N组)。2组均于生后即刻(0日龄)、14和28日龄3个时间点观察仔鼠脑内GAP-43和MAP-2的表达情况。结果:0日龄I组仔鼠脑皮层、海马及内囊GAP-43、MAP-2免疫阳性面积比(AF)较对照组明显减少(P0.05)。结论:GAP-43和MAP-2是神经生长发育和损伤修复的重要标记物之一,宫内感染可干扰仔鼠脑组织GAP-43和MAP-2的表达。     

针刺翳风、耳门、中渚穴对庆大霉素中毒性听力损害听觉脑干反应的干预效应

背景：研究表明，针灸治疗有一定作用，三焦经是临床治疗耳病的首选穴位，但其机制尚不十分清楚。目的：观察针刺三焦经腧穴翳风、耳门、中渚穴对庆大霉素中毒性听力损害的改善作用。设计：完全随机分组设计。单位：北京首都医科大学宣武医院神经内科。材料：选用健康白色雄性豚鼠60只，34月龄，普通级，体质量250～300g，耳廓反射正常。按随机抽签法将鼠分为5组：正常组、模型组、翳风穴组、耳门穴组、中渚穴组，每组12只。方法：实验于2001-01／07在北京中医药大学针灸实验室完成。①正常组保持正常饲养条件，模型组、针刺各组每日肌肉注射庆大霉素80mg／kg，连续20d。3个针刺组分别选取翳风、耳门、中渚穴，在给药同时两耳分别进行针刺治疗，针刺前豚鼠固定，选用0．35mm&;#215;25mm不锈钢毫针，快速进针刺人皮下，直刺约10mm，平补平泻捻转行针，隔10min 1次，0．5min／次，留针30min，治疗20d。②干预前后采用7S11A诱发电位仪进行脑干听觉反应测试，声源通过耳机输入，检测豚鼠脑干听觉反应阈值。③组间计量资料差异比较采用t检验。主要观察指标：针刺翳风、耳门、中渚穴对庆大霉素致听力损害大鼠脑干听觉反应阈值的影响。结果：豚鼠60只均进入结果分析。干预前，各组间脑干听觉反应阈值差异不明显（P〉0．05）；干预后，模型组、翳风组、耳门组、中渚组鼠脑干听觉反应阈值明显高于正常组（P〈0．01），翳风组、耳门组、中渚组鼠脑干听觉反应阈值明显低于模型组（P〈0．01），其中，翳风组与模型组差异最明显。结论：针刺耳门、中渚穴，特别是翳风穴可以减轻庆大霉素耳毒性。     

宫内感染致脑瘫大鼠运动功能不同评定方法的比较

目的研究宫内感染致脑瘫大鼠运动功能评价的最佳方法。方法受孕17 d的48只孕鼠脂多糖(LPS) 450 μg/kg腹腔注射（LPS组）,对照组孕鼠腹腔注射同等剂量的生理盐水。随机选取对照组活产足月仔鼠60只（A组）, LPS组活产足月仔鼠120只,将LPS组仔鼠随机分为干预组（B1）60只和非干预组（B2）60只。干预组进行早期干预,非干预组和对照组常规饲养。25日龄各组进行神经行为学检测,鉴定脑瘫鼠,B1组中检测出的脑瘫鼠（B1CP组）继续早期干预,B2组中检测出的脑瘫鼠（B2CP组）常规饲养,A组中随机选取10只鼠作为对照组（A′组）常规饲养,其余鼠常规处死;25日龄、42日龄时,A′组、B1CP组和B2CP组均进行神经行为学检测及运动功能评定。结果25日龄仔鼠神经行为学检测B1组中鉴定出7只脑瘫鼠,B2组中鉴定出13只脑瘫鼠, A组中无脑瘫鼠。B1CP组25日龄与42日龄各项检测结果比较,悬吊试验、斜坡试验、旷场实验、拒俘反应有非常显著性差异（P<0.01）;改良的BBB运动功能评分有非常显著性差异（P<0.01）;B2CP组和A′组25日龄与42日龄各项检测结果比较无显著性差异。结论联合应用悬吊试验与改良BBB运动功能评定法可用于宫内感染致脑瘫鼠运动功能的评定。     

电针联合丰富康复训练对脑损伤仔鼠脑皮质脑源性神经营养因子表达的影响

目的探讨电针联合丰富康复训练对脑损伤仔鼠脑皮质脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法脂多糖组孕17 d孕鼠腹腔注射脂多糖450μg/kg d,连续2 d,制备脑损伤模型;对照组孕鼠腹腔注射等量生理盐水。脂多糖组仔鼠随机分为非干预组和干预组,干预组予丰富康复训练、电针干预,每天1次,至第28天。对照组、非干预组仔鼠均常规饲养。采用SABC免疫组织化学方法检测第1、14、21、28天脑皮质BDNF阳性胞表达情况。结果第1天脂多糖非干预组仔鼠脑皮质BDNF表达高于对照组(P<0.01),此后两组间比较无显著差异(P>0.05);干预组仔鼠各时相点脑皮质BDNF表达均高于非干预组和对照组(P<0.01)。结论电针联合丰富康复训练能显著增强脑损伤仔鼠脑皮质BDNF阳性表达。     

神经干细胞和脑源性神经营养因子联用对老年痴呆鼠学习记忆能力和基底前脑小白蛋白的影响

目的：观察神经干细胞和脑源性神经营养因子联合应用对老年痴呆大鼠学习记忆能力及其基底前脑小白蛋白神经元的作用。方法：实验于2003-12／2005-10在广州医学院解剖教研室神经生物学实验室完成。取健康雄性SD大鼠40只，随机分为4组：正常对照组、损伤组、移植组和联合组，每组10只。①利用无血清培养技术获得新生SD鼠的海马神经干细胞。②除正常组外，其他3组切断SD大鼠左侧穹隆海马伞建立老年痴呆大鼠模型；移植组和联合组，基底前脑注射神经干细胞；联合组同时侧脑室注射脑源性神经营养因子。（3）4周后行Y迷宫测试大鼠学习、记忆能力（学习次数分值高表示差，记忆能力分值低表示差），免疫组织化学结合图象分析技术观察各组大鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元数目受影响的情况。结果：①损伤组大鼠比正常对照组大鼠学习、记忆能力明显下降（98．2&;#177;5．6比59．8&;#177;4．1，3．5&;#177;0．5比8．4&;#177;0．4，P〈0．01）。②移植组学习、记忆能力均有改善（74．1&;#177;5．4，6．7&;#177;0.5，P〈0．05），但与正常组比较差异有显著性意义伊〈0．05）。③联合组学习记忆能力（56．7&;#177;0．9，8．3&;#177;0．3）与正常组比较无显著性差异（P〉0．05）。④大鼠的学习记忆能力与基底前脑小白蛋白阳性细胞数呈正相关。结论：神经干细胞和脑源性神经营养因子联用较单独使用神经干细胞或脑源性神经营养因子更好地改善老年痴呆大鼠的学习记忆能力。     

定量评估经皮神经电刺激促进周围神经的再生和功能恢复

目的：探讨经皮电刺激对周围神经损伤后组织修复和功能恢复的作用，以神经传导速度为量化恢复指标，以髓鞘增生数目定量分析再生神经纤维数目。方法：实验于1998-09／1999-06在复旦大学附属华山医院实验动物部和显微外科实验室、复旦大学上海医学院手外科研究所肌电图研究室、复旦大学上海医学院电镜中心和病理实验室完成。雄性SD大鼠20只随机分成2组，每组10只。用显微外科手术造成大鼠坐骨神经损伤模型后电刺激组行神经吻合术并进行经皮电刺激，对照组只固定于和电刺激组相同的固定装置上，不进行干预。采用电生理学方法和组织学方法分别观察经皮电刺激对损伤周围神经的神经电位参数和髓鞘结构及数目的影响。结果：实验过程中对照组1只大鼠和电刺激组2只大鼠在麻醉过程中死亡，进入结果分析对照组9只大鼠，电刺激组8只大鼠。①电刺激组大鼠受损坐骨神经的潜伏期较对照组缩短[(0．58&;#177;0．33)ms，(2．27&;#177;0．88)ms，(f=5．12，P&;lt;0．001)]。电刺激组的神经传导速度较对照组增快[(21．44&;#177;8．31)m／s，(16．74&;#177;22．82)m／s，P&;gt;0．05l，波幅低于对照组[(1．95&;#177;1．56)mV，(6．64&;#177;8．42)mV，P&;gt;0．05]。②电刺激组可见大量新生髓鞘，其数目较对照组明显增多[9900．86&;#177;1433．65，6505．83&;#177;77950，(t=5．16，P&;lt;0．001)]。结论：电刺激定量检测的大鼠坐骨神经潜伏期缩短，神经髓鞘计数增高。说明电刺激可能通过促进许旺细胞增殖和髓鞘形成来改善受损周围神经再生和修复的作用。