杂交景天组织培养和植株再生

以杂交景天子叶、胚轴为外植体,接种在附加不同激素组合的MS培养基形成的愈伤组织有红、绿两种类型。子叶在MS 6-BA1 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L和MS 6-BA 1 mg/L NAA 0.5 mg/L培养基上的愈伤组织诱导率高达80%~82%。愈伤组织用MS 6-BA2 mg/L NAA 0.5 mg/L可诱导产生丛生不定芽,壮苗生根培养基为1/2 MS。组培苗移栽成活率达80%。     

金樱子组织培养及植株再生研究

目的对金樱子茎段进行离体培养研究,为金樱子人工培育种苗提供依据。方法用带腋芽的茎段作外植体,采用不同激素配比的MS培养基进行诱导培养。结果金樱子丛生芽诱导用MS+6-BA1.8mg·L-1+KT0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1培养基较佳;芽继代增殖用MS+6-BA1.5mg·L-1+KT0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1培养基,其增殖系数达12.0;诱导生根用1/4MS+NAA0.2mg·L-1+IBA0.2mg·L-1培养基,根多、粗壮,生根率达100%。结论本研究结果对人工培育金樱子种苗是可行的。     

土贝母组织培养及植株再生

用土贝母茎段和叶片作外植体培养,可获得大量的试管苗。茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS 2,4-D 2.0 mg/L NAA 0.5 mg/L BA 1.0 mg/L(单位下同);叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方为MS 2,4-D0.5 NAA 2.0。叶片接入MS BA 3.0 NAA 1.0培养基可直接产生不定芽;愈伤组织用MS BA 2.0 IAA 1.0培养基也可产生不定芽。MS BA 2.0 IAA 0.1适于腋芽发育、增殖。壮苗生根培养基为1/2 MS IBA 1.0。诱导愈伤组织和不定芽,选用pH 6.0,琼脂0.8%~1.0%;诱导生根选用pH 5.8,琼脂0.6%~0.7%。经炼苗后,组培苗移栽成活率达90%。     

新疆雪莲的香豆素类化学成分的研究

 目的研究新疆雪莲(Saussurea involucrate Kar.et Kir)的化学成分。方法应用各种柱色谱的方法进行分离;应用化学和各种光谱分析的方法鉴定化合物。结果从新疆雪莲的乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物中分离得到8个香豆素类成分,它们分别为蛇床子内酯(osthol),佛手内酯(bergapten),异茴芹内酯(isopimpinellin),爱得尔庭(edultin),叶鞘二醇二乙酸酯(vaginidiol di-acetate),别异因波拉托内酯(alloisoimperatorin),噢洛内酯(oroselol),花椒香豆素(xanthotoxol)。结论这8个香豆素均为首次从新疆雪莲中分离得到。     

新疆雪莲产业化发展对策

介绍了新疆雪莲资源分布与特点和应用现状，分析了目前存在的问题，并提出了相应的对策。     

新疆雪莲的应用基础研究

雪莲水液 (SWS) ,依肌内注射液工艺制成 ,每mL含 0 .1 5g生药。离体子宫用 1 .2 5g/L和 2 .5 0g/L浓度 ,全身给药小鼠ig0 .4 5、0 .9、1 .8g/kg,大鼠ig0 .3、0 .6、1 .2g/kg·qd× 3- 2 2天不等 ,具有下述药理作用 :(1 )使大鼠AA模型急性炎症、继发性炎症明显减轻 ,血清IL - 1、IL - 6减少。 (2 )减轻角叉莱胶致大鼠足跖肿。 (3)抑制大鼠棉肉芽肿的形成。 (4)减少ip乙酸致小鼠的扭体次数。 (5 )抑制小鼠腹腔毛细血管的渗出。 (6 )使小鼠耳廓细动脉、细静脉扩张 ,毛细血管开放量增加。 (7)使离大鼠子宫收缩幅下降 ,并能对抗缩宫素的子宫收缩作用 ,使收缩时间间隔延长。 (8)以雌激素与缩宫素制作小鼠痛经模型 ,使痛经小鼠扭体反应明显减少。 (9)使血清雌二醇含量、子宫与卵巢重量增加。     

新疆雪莲黄酮类化学成分的研究

 目的研究新疆雪莲中的黄酮类化学成分。方法对新疆雪莲全草乙醇提取物的各个萃取部位进行反复柱色谱,根据光谱数据和理化性质确定化合物结构。结果从新疆雪莲干燥全草中分离得到7个化合物,分别为4′,5,7-三羟基-3′,6-二甲氧基黄酮(1)、4′,5,7-三羟基-6-甲氧基黄酮(2)、泽兰黄素(3)、槲皮素(4)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(5)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(6)、芦丁(7)。结论其中3和6为首次在该植物中分离得到的黄酮类化合物。     

HPLC法建立新疆雪莲指纹图谱研究

目的：对7种不同产地的新疆雪莲药材进行指纹谱比较研究。方法：以乌鲁木齐南山产新疆雪莲药材为分析对象，选择适宜的色谱条件，建立了7个不同产地的新疆雪莲药材样品的指纹图谱。结果：方法学考察表明，本研究建立的分析方法有比较好的重现性；不同产地的新疆雪莲药材共有峰相对保留时间基本一致，但其相对面积存在一定的差异。结论：指纹谱分析方法可简便、快速的鉴别和区分不同产地的新疆雪莲药材。     

新疆雪莲细胞悬浮系的建立和黄酮类活性成分的产生

目的:建立新疆雪莲的悬浮培养体系。方法:研究不同培养基、培养基初始pH、碳源、接种量、植物生长物质含量对雪莲细胞生长和黄酮合成的影响。结果:N₆液体培养基在pH5.8、蔗糖含量50g·L^-1、接种量60-80g·L^-1FW时有利于细胞生长和黄酮合成,附加BA0.2mg·L^-1+NAA2mg·L^-1有利于黄酮合成,而附加BA0.5mg·L^-1+NAA3mg·L^-1则对生长有利。结论:培养条件的优化可有效提高雪莲悬浮细胞的生长和总黄酮的合成。     

雪莲组织中蛋白质提取方法比较

目的:比较雪莲组织中蛋白质的提取方法.方法:采用酚法、TCA/丙酮法、尿素法提取雪莲组织中蛋白质,所得蛋白质进行一维SDS-PAGE和双向电泳检测,通过比较电泳图谱确定雪莲组织中蛋白质的最佳提取方法.结果:酚法提取的雪莲组织蛋白质杂质量最少、纯度最高,一维SDS-PAGE和双向电泳图谱显示其具有较多的蛋白质点,且蛋白质种类较多.结论:3种提取方法均有一定的蛋白质损失,建议采用酚法从雪莲组织中提取蛋白质,为雪莲蛋白质组学研究提供参考.     

大苞雪莲总黄酮体外抗氧化活性

目的:研究大苞雪莲总黄酮体外自由基清除能力及抗氧化活性。方法:采用体外清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·),2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐阳离子自由基(ABTS+·),超氧阴离子(O-2·),羟基自由基(·OH),一氧化氮(NO),以及测定金属螯合能力、还原力、总抗氧化能力共8种方法对大苞雪莲总黄酮的自由基清除能力及抗氧化活性进行了评价。每组实验平行3次。结果:大苞雪莲总黄酮在一定浓度下能够有效地清除DPPH·,ABTS+·,O-2·,·OH,NO,对DPPH·,ABTS+·,·OH,NO的半数清除质量浓度分别为52.52,71.71,60.38,203.95 mg·L-1,对超氧阴离子的半数清除质量浓度为271.06 mg·L-1,小于维生素C(VC,380.10 mg·L-1),半数金属螯合质量浓度为184.52 mg·L-1,并且具有一定的还原力和总抗氧化能力。结论:大苞雪莲总黄酮具有较强的体外自由基清除能力及抗氧化活性,是一种具有较高研究价值和潜力的天然抗氧化物质。     

盾叶薯蓣成熟叶片植株再生的研究

目的 :以成熟叶片为外植体 ,建立一套盾叶薯蓣Dioscoreazingiberensis的快速繁殖技术。方法 :以大量元素减半的MS培养基为基本培养基 ,通过研究BA ,NAA和IBA对愈伤组织诱导、不定芽分化、不定芽增殖和生根的影响找出相应的最佳激素组合。结果与结论 :在含 1.0～ 5 .0mg·L^-1BA和 1.0～ 2 .0mg·L^-1NAA的培养基上 ,80 %以上的叶片可以在 60d内形成愈伤组织 ;愈伤组织转到含 2 .0～ 5 .0mg·L-1BA和 0 .2～ 0 .5mg·L^-1NAA的培养基上后 ,60 %以上的愈伤组织可以在 50d内分化出不定芽 ;在含 2 .0mg·L-^-1IBA的培养基上 ,100 %的不定芽可在20d内长出 4～ 6条不定根。再生植株移栽后 ,生长健壮 ,成活率达 80 %以上。     

天山雪莲水提取物对小鼠辐射损伤的保护作用

目的 观察天山雪莲水提取物(ES)对电离辐射损伤小鼠的保护作用。方法 小鼠ig ES0．75，1．5，3．0g/kg，14d后接受8和2．5Gy的照射，观察8Gy照射小鼠的平均生存时间和生存率及2．5Gy照射小鼠的脾T淋巴细胞转化能力和骨髓DNA含量。结果 ES能显著延长8Gy照射小鼠的平均生存时间(P＜0．05)，并提高生存率；显著提高2．5Gy照射小鼠的脾T淋巴细胞转化能力和骨髓DNA含量(P＜0．05，0．01)，改善免疫功能。结论ES具有抗辐射损伤作用。     

金钗石斛的茎段组织培养与植株再生

目的：为了有效加速贵重药用植物金钗石斛的人工繁殖。方法：以带侧芽的金钗石斛茎段作外殖体；不同种类的培养基、同种培养基用于不同配比的激素进行培养，结果：以MS培养基附加6－BA（0.5mg/L）、NAA（0.2mg/L）诱导分化最佳，附加6－BA（3．0mg/L）、NAA（0．5mg/L），增殖最适，附加IBA（0．3mg/L）、NAA（0．1mg/L）对生根最适（生根率95％）。生根小苗在以椰渣，碎火山石块，碎砖块（1：1：1）的基质中覆以蕨长势良好，结论：为确保金钗石斛资源的保持和可持续利用提供有效途径。     

天山雪莲愈伤组织提取物对人成骨肉瘤细胞MG-63增殖及分化的影响

目的研究天山雪莲愈伤组织提取物(extract from callus of Saussureainvolucrate,ESI)对人成骨肉瘤细胞MG-63增殖及分化的影响,探讨ESI抗骨质疏松的作用及机制。方法以MG-63为研究对象,采用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)法检测ESI对成骨细胞增殖的影响,相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性和羟脯氨酸(Hyp)水平,茜素红染色法观察对矿化骨结节形成的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测骨保护素(OPG)和核因子-κB活化因子受体配体(RANKL)基因表达水平;Western blotting法检测OPG/RANKL蛋白水平;检测p38特异性抑制剂SB203580对ESI作用于成骨细胞增殖、分化、矿化以及OPG/RANKL表达的影响。结果 ESI低于125μg/mL对成骨细胞无细胞毒性,31.25、62.5μg/mL对成骨细胞生长有促进作用;ESI显著提高ALP活性、Hyp水平以及矿化骨结节形成;显著上调MG-63细胞OPG mR NA水平,下调RANKLmR NA水平,上调OPG/RANKL蛋白水平;SB203580显著抑制ESI对成骨细胞增殖、ALP活性、矿化结节形成的促进作用以及对胶原蛋白积累量和OPG/RANKL值的提高作用。结论 ESI能够促进成骨细胞增殖、分化和矿化,其机制可能与调节OPG和RANKL基因表达有关,并且可能通过p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路进行信号转导。     

天山雪莲亲水凝胶缓释骨架片主要活性成分体外释放影响因素的研究

 目的 制备天山雪莲缓释骨架片,考查主要活性成分体外释药的影响因素。方法 以羟丙甲纤维素(HPMC)为缓释骨架材料,采用湿法制粒、压片,制备天山雪莲缓释骨架片。测定天山雪莲缓释片中主成分绿原酸、芦丁在不同时间点的释放度,通过对体外释放曲线、2,6,12 h累积释放度的综合评分K值及释放曲线相似因子f₂的综合比较,考查2种主成分体外释药的影响因素。结果 骨架材料HPMC黏度和填充剂淀粉用量是影响绿原酸、芦丁释药速率的主要因素,HPMC的粒径、黏合剂及制片压力等因素对二者释放的影响不大;微晶纤维素（MCC）可以增加二者后期的释放量。结论 HPMC K15M 能有效控制天山雪莲缓释骨架片中2种主成分的释放。
     

雪莲内酯类成分的研究

目的:研究雪莲的化学成分.方法:应用各种色谱方法进行分离;应用现代波谱学分析方法鉴定化合物.结果:从雪莲的乙醇提取物的石油醚萃取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1),三十二烷酸(2),hexacosan-4-olide(3),(+)-11α,13-二氢去氢木香内酯(4),8α-acetoxydehydrocostus lactone (5),zaluzanin C(6),11,13α-dihydrozaluzanin C (7),8β-hydroxy-11β-11,13-dihydrodehydrocostuslactone(8).结论:化合物2～7均为首次从该植物中分离得到.     

滇龙胆丛芽高效诱导与植株再生体系的建立

目的以滇龙胆Gentiana rigescens带叶茎尖、带芽茎段、叶片、根为外植体,建立滇龙胆高效、稳定的丛芽诱导体系,筛选出适宜的植株再生途径。方法以MS为基本培养基,在单因素实验的基础上,通过L16(45)正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果带芽茎段为间接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养10 d、节上腋芽开始萌发后,基部可诱导出再分化能力极强的愈伤组织,得愈率为97.73%;15 d后愈伤组织开始分化出绿色丛芽,分化率100%;30 d后不定芽分化系数达18.65,增殖系数可达63.58。带叶茎尖为直接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5mg/L中培养30 d后,增殖系数亦可达44.36。2种材料培养获得的试管苗茎细瘦弱,不利于生根培养,试管苗在MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L+PP333 10 mg/L中培养60 d后可获得健壮度大为改善的复壮苗。复壮苗生根则在1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。再生苗移栽成活率达95%以上。结论建立的滇龙胆无性快速繁殖体系,为保护滇龙胆野生资源、优质种苗繁育提供了有效途径,也为其遗传转化研究奠定了实验基础。