双氢青蒿素通过调控TGF-β1/Smad信号通路抑制AngⅡ诱导大鼠心肌纤维化

目的 探讨双氢青蒿素对心肌成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响。方法 取1-3天的SD乳鼠心肌成纤维细胞分为对照组、双氢青蒿素组、TGF-β1组。采用MTT比色法对各组细胞增殖情况进行计算,使用PCR法检测TGF-β1mRNA的相对表达量,应用荧光法检测TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达。结果 双氢青蒿素组各时间点的细胞增殖活力均低于TGF-β1组。与TGF-β1组比较,双氢青蒿素组的TGF-β1mRNA表达及蛋白水平均低。双氢青蒿素组的Smad2、Smad3蛋白表达低于TGF-β1组。结论 双氢青蒿素对SD乳鼠的心肌成纤维细胞具有抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

TGFβ／Smads通路中信号转导蛋白Smad2与Smad3的差异性研究进展

转化生长因子β（transforminggrowthfactor-β,TGFβ）分布于多种组织细胞中,在调节细胞增殖、分化、代谢和迁移等功能中均有重要作用。研究显示许多恶性脑胶质瘤分泌大量的TGFβ,且与肿瘤的恶性程度呈正相关,即恶性程度越高,肿瘤分泌的TGF β越多。     

枸杞多糖通过TGFβ1/Smad3信号通路改善慢性心衰大鼠心肌纤维化

目的 观察枸杞多糖对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用腹主动脉缩窄法(ACC)建立慢性心衰大鼠动物模型,建模成功后,随机分为模型组(CHF组)、枸杞多糖加模型组(LBP组),另建立假手术组(sham组),LBP组给予枸杞多糖100 mg/Kg灌胃,CHF组和sham组给予等量生理盐水灌胃...     

TGF-β/Smad信号转导通路在肝纤维化发病及诊治中的意义

肝纤维化是细胞外基质（ECM）合成和降解失衡，引起过多的ECM在肝脏沉积所致。现已证实肝纤维化发生的关键是肝星状细胞（HSC）的激活及其激活后ECM异常表达。转化生长因子β（TGF-β）是一类调节细胞生长和分化的多肽，具有活化HSC，促进肝脏胶原基因表达，促进ECM合成等作用，是最重要的促肝纤维化因子之一。     

β2肾上腺素受体通过TGF-β1/Smad3信号通路调控创面愈合中纤维增生的作用

目的：探讨β2肾上腺素受体（ADRB2）在创面愈合过程中对纤维增生的调控机制。方法：小鼠背部皮肤注射非特异性敲减ADRB2基因的腺相关病毒（AAV-ADRB2组）和对照病毒（AAV-NC组）21天后,在背部建立全层皮肤缺损创面愈合模型。记录术后1、3、5、7天创面愈合率;采用H-E染色、Masson染色和免疫组化观察创面组织结构、纤维化程度及α-SMA表达;定量PCR检测ADRB2、基质金属蛋白酶（MMP）mRNA水平;western blot检测COL1a1、COL3a1、TGF-β1、Smad3蛋白表达水平。结果：术后第5、7天,AAV-ADRB2组创面愈合率显著下降（P<0.05）,伴随表皮增厚、炎症增多、纤维细胞减少、胶原沉积降低;α-SMA水平显著下降（P<0.05）;I型/III型胶原比例减少（P<0.05）;ADRB2 mRNA水平显著降低（P<0.01）,MMP-1和MMP-8 mRNA水平升高（P<0.01）;TGF-β1/Smad3蛋白水平显著下降（P<0.05）。结论：ADRB2敲减通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路,减少创面纤维化反应和结缔组织含量,提高MMP mRNA水平,降低I型/III型胶原比例。     

miRNA-224-5p通过TGF-β/Smad4信号通路调控甲状腺乳头状癌细胞凋亡

目的探讨miRNA-224-5p通过TGF-β/Smad4信号通路对甲状腺乳头状癌细胞凋亡的调控作用。 方法选取2015年7月至2017年11月新疆维吾尔自治区人民医院手术切除所得甲状腺乳头状癌组织及相应的癌旁组织冻存标本各60份。通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测60例甲状腺乳头状癌组织及60例癌旁组织中miRNA-224-5p的相对表达量,二者比较采用配对资料t检验。将miRNA-224-5p（miRNA-224-5p组）与miRNA-224-5p抑制剂（miRNA-224-5p抑制剂组）分别转染到甲状腺乳头状癌细胞株GLAG-66中,通过RT-PCR检测两组中GLAG-66细胞内miRNA-224-5p的相对表达量,应用流式细胞仪检测两组GLAG-66细胞转染48 h后凋亡率,应用Western blot实验检测两组GLAG-66细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase3、TGF-β1、Smad4蛋白的相对表达量,并采用两个独立样本t检验进行比较。 结果miRNA-224-5p在甲状腺乳头状癌组织中的相对表达量与癌旁组织比较明显升高,差异具有统计学意义［（4.175±0.523）vs（1.236±0.236）,t=9.675,P=0.001）］。miRNA-224-5p抑制剂组GLAG-66细胞中miRNA-224-5p的相对表达量与miRNA-224-5p组比较明显下降,差异具有统计学意义［（0.381±0.078）vs（1.000±0.023）,t=19.785,P<0.001）］。miRNA-224-5p抑制剂组GLAG-66细胞转染48 h后的凋亡率与miRNA-224-5p组比较明显增高,差异具有统计学意义［（18.66%±0.98%）vs（3.78%±0.36%）,t=17.561,P<0.001］。miRNA-224-5p抑制剂组和miRNA-224-5p组比较,GLAG-66细胞中Bcl-2、TGF-β1和Smad4蛋白的相对表达量明显降低,差异具有统计学意义［（0.197±0.008）vs（0.278±0.013）,t=8.259,P=0.001;（0.117±0.013）vs（0.227±0.012）,t=13.269,P<0.001;（0.268±0.012）vs（0.439±0.016）,t=9.897,P=0.001］;Bax、Cleaved-Caspase3蛋白的相对表达量明显升高,差异具有统计学意义［（0.286±0.011）vs（0.159±0.009）,t=12.569,P<0.001;（0.128±0.009）vs（0.083±0.010）,t=7.693,P=0.002］。 结论miRNA-224-5p在甲状腺乳头状癌组织中表达增高,下调miRNA-224-5p可以促进甲状腺乳头状癌细胞的凋亡,其作用机制可能与TGF-β/Smad4信号通路有关。     

Wnt／β-catenin信号通路与恶性血液病

Wnt／β-catenin信号通路是Wnt通路中最重要并且研究最为清楚的信号通路,它与许多实体肿瘤的发生、发展密切相关。最近有研究发现,Wnt／β-catenin信号通路也可能参与恶性造血,在许多恶性血液病中异常激活,本文就Wnt／β-catenin信号通路与恶性血液病（多发性骨髓瘤、慢性髓系白血病、慢性淋巴细胞白血病及急性白血病）关系的最新研究进展作一综述,以揭示其在恶性血液病发生中的相关机制,并为恶性血液病的靶向治疗提供新思路。     

SARA、TGF-β/Smad信号通路与腹膜纤维化的基因治疗

长期腹膜透析可导致腹膜纤维化,其主要特征是间皮细胞剥落和细胞外基质（ECM）的异常积聚所致的腹膜增厚,使腹膜透析效率降低。腹膜纤维化的产生是多种因素作用的结果,多种促纤维化细胞因子具有重要的调节作用,其中作用最为关键的是转化生长因子-β1（TGF-β1）。最近的研究显示,     

TGF-β1对皮肤组织特异性Smad4基因敲除小鼠组织培养影响的研究

目的应用组织块培养的方法，观察TGF-β1及其受体抑制剂SB-431542对皮肤组织特异性Smad4基因敲除小鼠与野生型小鼠表皮细胞增殖的影响。方法皮肤组织特异性Smad4基因敲除小鼠与野生型小鼠，制成背部烫伤模型。伤后5d取创面边缘皮肤组织，剪成1mm×2mm皮块，行组织块培养。实验分为6组，分别是：（1）Smad4基因敲除组（A组）；（2）Smad4基因敲除＋SB431542组（B组）；（3）杂合子组（C组）；（4）杂合子＋SB431542组（D组）；（5）野生型组（E组）；（6）野生型＋SB431542组（F组）。B、D、F组加入5×10^-4 MSB431542，作用1h。各组均加入5ng／ml TGF-β1，于37℃，5％C02条件下培养。于培养的第0、8、16、24、32、40、48小时，加入10μM BrdU标记液，标记1h。10％中性甲醛固定。病理切片，免疫组化染色，计算BrdU阳性率。结果TGF-β1可以降低杂合子和野生型小鼠表皮细胞PCNA阳性率和BrdU掺入率，TGF-β1作用于野生型小鼠16h，表皮细胞BrdU掺入率即有明显降低，但对基因敲除组小鼠无该作用，在皮肤组织块培养条件下，预先应用受体抑制剂SB431542作用1h，则TGF-β1的这种作用不再存在。结论TGF-β1对表皮细胞生长具有抑制作用，其受体拮抗剂SB-431542能拮抗这种抑制作用。     

化橘红对糖尿病心肌病心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用

目的观察化橘红对糖尿病心肌病（DCM）大鼠心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用。方法（1）构建DCM大鼠模型,将40只大鼠用链脉佐菌素处理后,15只血糖浓度<16.7 mmol/L的大鼠纳入空白对照组,剩余的25只血糖浓度>16.7 mmol/L的大鼠随机分为DCM组（n=11）与化橘红组（n=14）。化橘红组大鼠给予化橘红400 mg/(kg·d)灌胃,DCM组和对照组给予等量生理盐水灌胃。测量各组大鼠不同时间点血糖（1、8、16、22周）;测量心功能相关指标;光镜下观察心肌形态学改变,电镜下心肌纤维化定量分析;测定心肌胶原总量;免疫组化测定心肌胶原;Western印迹检测心肌细胞TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白含量;RT-PCR检测TGF-β1、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白的mRNA表达。（2）构建心肌成纤维细胞增殖模型,随机分为两组,化橘红预处理组为血清培养基加0.5 mmol/L化橘红,而对照组为等量血清培养基。检测两组一氧化氮变化、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白,iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况。结果化橘红组的大鼠各时间点血糖、心肌纤维化、心肌胶原总量及各型胶原较DCM组显著下降,心收缩、舒张功能明显改善（P<0.05）,TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1蛋白的表达明显下调（P<0.05）,相关蛋白的mRNA表达也明显抑制（P<0.05）。化橘红预处理组一氧化氮、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白,iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况较对照组相比明显下降（P<0.05）。结论化橘红对DCM中TGF-β1/Smad通路起到了抑制作用,从而调控其下游的MMPs/TIMPs等通路,改善DCM的心肌纤维化进程,抑制心肌肥厚,减少心肌的损伤。     

Toll样受体4信号传导通路与支气管哮喘的关系

支气管哮喘是常见的、反复发作的气道免疫炎症性疾病,其特征表现为气道高反应,往往由各种因素所诱发。Toll样受体(TLR)属于固有免疫病原模式识别受体,TLR信号传导通路的激活会加重气道炎症及气道高反应性,引起炎症因子释放,抑制TLR4信号通路可有效降低相关炎性细胞因子的表达。该文对TLR4与哮喘的关系及哮喘的靶向治疗进行综述。     

转化生长因子β／Smad信号传导通路与中药抗肾间质纤维化

目的：总述转化生长因子β／Smad信号传导通路研究相关进展及中药干预肾间质纤维化的可行性和优势。资料来源：检索Medline 1996-01／2006—06与转化生长因子β／Smad信号传导通路与中药抗肾间质纤维化相关的文献，检索词“TGF-β／Smad signaling,traditional Chinese medicine,renal interstitial fibrosis”，并限定：艾章语言种类为英语。同时检索中国期刊全文数据库2001—01/2006-06与转化生长因子β信号传导通路与中药抗肾间质纤维化相关的文章，限定文章语言种类为中文，检索词“转化生长因子β／smad信号传导通路，中药，肾间质纤维化”。资料选择：对资料进行初审，选择与转化生长因子β／Smad信号传导通路与中药抗肾间质纤维化相关的文献。排除重复性研究。资料提炼：共收集到54篇关于转化生长因子β／Smad信号传导通路与中药抗肾间质纤维化的文献，13个实验或临床研究符合纳入标准。排除的41篇为重复性研究。资料综合：转化生长因子β／Smad信号传导通路可能是肾间质纤维化的最后的共同途径，干预转化生长因子β／Smad信号传导通路对阻断肾间质纤维化有着积极的意义。中药复方具有多组分的物质基础，理论上具有多途径与多靶点的作用特点，针对转化生长因子β／Smad信号传导的复杂网络可发挥综合作用优势。结论：以转化生长因子β／Smad信号转导途径为基础，研究有效中药和中药复方及其化学成分对活性信号分子与信号转导途径影响的作用机制，对研制开发安全有效的抗肾间质纤维化中药具有重要意义。     

TGF-β1/Smad3信号通路在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征大鼠认知障碍中的作用

目的：探讨TGF-β1/Smad3信号通路在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）所致认知功障碍中的作用及TGF-β1的调控作用。方法：应用慢性间歇性缺氧方式（CIH）建造OSAS模型,TGF-β1抑制剂选择Disitertid（别名P144）。成年雄性SD大鼠42只随机分为7组：正常对照组（N组）、CIH 1W组、CIH 2W组、CIH 3W组、CIH 4W组、CIH 4W+P144组、CIH 4W+DMSO组,每组6只;分别给予不同的缺氧时间,其中CIH 4W+P144组和CIH 4W+DMSO组于造模前分别腹腔内注射P144(70μg/kg)和二甲亚砜（1 ml/kg）,隔日1次。造模后,采用水迷宫实验检测大鼠学习及记忆能力,尼氏染色法观察各组大鼠海马CA1及CA3区的病理学改变,免疫印迹法对各组大鼠海马组织中TGF-β1、tSmad3、pSmad3蛋白定量检测。结果：OSAS模型大鼠出现白天嗜睡、烦躁等表现,缺氧期间相比复氧相间平均血氧饱和度下降>4%(P<0.05),造模成功。水迷宫实验中,与N组相比,CIH 2W、3W、4W时间点组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数...     

高迁移率族蛋白B1通过TGF-β/Smad3信号通路降低缺氧/复氧诱导的心肌细胞纤维化的机制

摘要 目的：探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞纤维化过程中的作用及机制。 方法：构建转染HMGB1-shRNA H9C2稳定细胞系沉默HMGB1的表达,行缺氧/复氧损伤处理,Western Blot检测纤维化相关蛋白的表达,同时检测TGF-β1、ERK及Smad3纤维化信号通路相关因子,明确下调HMGB1表达对心肌纤维化蛋白及纤维化信号通路蛋白表达的影响。使用TGF-β1抑制剂SB431542与H9C2心肌细胞共培养,行缺氧/复氧损伤处理,Western Blot 检测纤维化相关蛋白的表达,明确TGF-β1对心肌纤维化蛋白表达的影响。 结果：转染HMGB1-shRNA的H9C2细胞,行缺氧/复氧处理,HMGB1蛋白及纤维化相关蛋白TIMP2、MMP2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ表达水平下调,与对照组相比差异具有显著性意义（P<0.05）;TGF-β1、p-Smad3蛋白表达下调,与对照组相比差异具有显著性意义（P<0.05）。使用TGF-β1抑制剂SB431542,行缺氧/复氧处理,纤维化相关蛋白TIMP2、MMP2、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ表达水平下调,与对照组相比,差异具有显著性意义（P<0.01）。 结论：HMGB1影响缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞纤维化,其作用机制可以通过下调TGFβ1/Smad3信号通路蛋白的表达降低心肌纤维化。     

细胞外信号调节激酶1／2传导通路对增生性瘢痕的影响

目的：观察细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）传导通路对增生性瘢痕的影响。方法：用免疫组化方法和常规病理技术检测Ras、磷酸化ERK1／2和C－fos在14例增生性瘢痕和14例正常皮肤中的表达变化规律。结果：在正常皮肤中，Ras、磷酸化ERK1／2和C-fos蛋白表达较低，随着增生性瘢痕不断成熟，这3种蛋白表达逐渐增强。在成熟期瘢痕中，这3种蛋白阳性细胞率明显高于正常皮肤（P＜0．01）。结论：增生性瘢痕的发生和成熟可能与激活ERK1／2信号传导通路，促进C-fos转录因子表达有关。     

阻断Wnt/β-catenin信号通路对肝星状细胞活化的影响

目的：探讨活化的肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）内是否存在功能性Wnt／β-catenin信号通路的激活，以及阻断该信号通路对HSC活化的影响。方法：免疫细胞化学染色检测β-catenin在HSC-T6细胞内的表达。通过转染T细胞因子（T-cell factor，TCF）依赖的荧光素酶报告质粒（pTOPFLASH）测定HSC-T6细胞内的Wnt／β-catenin信号。将TCF的显性负性突变体（dominant negative TCF，dnTCF）表达质粒转染HSC-T6阻断Wnt／β-catenin信号的转导．用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及Ⅰ型胶原表达变化。结果：HSC-T6细胞的核内有β-catenin的表达，转染pTOPFLASH的细胞荧光素酶活性显著高于对照组（P〈0．01）。与对照组相比，转染dnTCF的HSC-T6细胞α-SMA及Ⅰ型胶原表达均显著下降（P〈0．05）。结论：活化的HSC中存在Wnt／β-catenin信号通路的激活．阻断该信号通路可抑制HSC的活化。     

基于西洋参总皂苷调控TGF-β1/Smad信号通路对压力性尿失禁大鼠模型盆底功能恢复的影响

目的 探究基于西洋参总皂苷调控TGF-β1/Smad信号通路对压力性尿失禁大鼠模型盆底功能恢复的影响。方法 选取65只SPF级SD大鼠,将建模完成的45只大鼠,随机分作模型组、西洋参总皂苷低、高剂量组各15只,剩余的15只未做任何处理的大鼠作对照组。低剂量西洋参总皂苷组及高剂量西洋参总皂苷组的大鼠分别依据50、100 mg/kg的用量进行灌服西洋参总皂苷,对照组、模型组实施同等量的生理盐水（15 mL）予以灌服。比较各组大鼠病理组织学、盆底功能相关指标、尿动力学有关指标、膀胱中内压有关指标、盆底肌肉表面电信号以及TGF-β1/Smad信号通路蛋白相对表达量。结果 与对照组对比,模型组、西洋参总皂苷低、高剂量组的大鼠尿道旋转角度、膀胱颈的活动度、残余尿量、排尿量、Smad2、Smad3表达升高,阴道静息压、收缩压、LPP、MBC、ALPP、排尿效率、Ⅰ类及Ⅱ类盆底肌纤维电位、TGF-β1、Smad7水平下降（P <0.05）;与模型组相比,西洋参总皂苷低、高剂量组大鼠的阴道静息压、收缩压、LPP、MBC、ALPP、排尿效率、Ⅰ类及Ⅱ类盆底肌纤维电位、TGF-β1、Smad7表达上升...     

中药及复方调控TGF-β/Smads信号通路治疗盆腔炎性疾病的研究进展

盆腔炎性疾病（pelvic inflammatory disease, PID）是临床常见的一种妇科感染性疾病,其后遗症严重影响着女性生殖健康。西医治疗此病虽可有效降低短期发病率,但有易复发、易耐药等弊端,而中医药具有标本兼治、不良反应小等独特优势,且随着研究的不断深入,中医药治疗PID受到了女性患者的广泛认可。TGF-β/Smads信号通路与此病密切相关,在促进组织纤维化及加速炎症反应方面起着重要作用,作者查阅国内外文献后发现TGF-β/Smads信号通路治疗PID已成为新的热点,但缺乏系统针对性地阐述,故作者通过整理中药及中药单体、中药复方参与下的TGF-β/Smads信号通路进行总结研究,以期为中医药防治PID提供参考依据及思路。     

TGF—β受体Ⅲ型与泌尿系肿瘤的研究进展

在肿瘤的分子致病机制研究中，TGF-β信号通路（trans—forming growth factor－β pathway）是受到全世界科研工作者广泛关注的通路之一。在该通路中活化的TGF-β配体通过与细胞表面特异性受体Ⅰ型（TβR1）、Ⅱ（TβR2）和Ⅲ型（TβR3）结合而发挥细胞生物学效应，该作用与人类肿瘤的发生、发展关系密切。     

电针对Aβ25—35致阿尔茨海默病模型大鼠cAMP／PKA／CREB信号转导通路的影响

目的探讨电针对Aβ25-35导致的阿尔茨海默病模型大鼠应用电针刺激后cAMP／PKA／CREB信号转导通路的变化。方法48只健康雌性SD大鼠随机分为AD模型组、电针组、假手术组和正常对照组各12只。模型组与电针组采用Aβ25-35建立AD模型后电针组给予电针刺激,模型组未给予电针刺激;假手术组双侧海马注射等量生理盐水;正常对照组不做任何处理。4组均采用Morris水迷宫实验检测大鼠记忆与空间探索能力,采用分光光度计法检测脑组织超氧化物歧化酶与丙二醛水平,采用放射免疫法检测海马cAMP水平,采用免疫组织化学法检测海马5-羟色胺1A受体、蛋白激酶A与p-CREB蛋白表达水平,采用Westernblot检测海马总Tau蛋白表达水平及Tau蛋白Ser396位点磷酸化情况。结果与模型组比较,电针组、假手术组与对照组逃避潜伏期缩短、跨越平台次数增多、目标象限停留时间延长（P〈0．05）,脑组织中超氧化物歧化酶、5-羟色胺1A受体、蛋白激酶A及p-CREB水平增高（P〈0．05）,丙二醛、总Tau蛋白、pTau—Ser396、c—los蛋白水平降低（P〈0．05）;电针组总Tau蛋白、c—los及PKA水平高于假手术组（P〈0．05）,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论电针可明显提高阿尔茨海默病大鼠学习记忆功能和空间探索能力,可能是通过拮抗cAMP／PKA／CREB信号转导通路相关蛋白的异常改变起作用。