SEC_1酶免疫电极的研究

以酶、抗体相结合作为生物传感器的识别元件进行抗原的检测，不仅在临床医学上，而且在生化战剂的侦检中都有着广阔的应用前景。本文所研究的是将镀铂玻碳电极以化学吸附和交联的方式固定化葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ），然后进一步耦联葡萄球菌肠毒素Ｃ１型抗体（Ａｎｔｉ－ＳＥＣ１），从而构成一种新型的电流型ＳＥＣ１酶免疫传感器。当抗原（ＳＥＣ１）与抗体发生免疫反应而形成抗原－抗体络合物后，使与抗体耦联的酶的活性受到调制，电极的响应信号发生变化，从而达到检测抗原的目的。实验表明，以化学吸附和交联两种方式制得的酶免疫电极在检测抗原时，与响应电流存在很好线性关系的浓度范围分别为２０～１００μｇ／Ｌ、３～１８μｇ／Ｌ。     

酶联免疫吸附法检测罂粟碱研究Ⅲ测试盒指标的确立及验证

目的:研究能检测食品中罂粟碱含量的酶免测试盒。方法:利用研制的罂粟碱抗体,罂粟碱酶标抗原以及相关的ELISA其它试剂,进行测试盒的各项技术指标的确证。结果:结果表明:测试盒的最低检测限:0.1ng/ml;定量检测范围:0.1～20ng/ml;精密度(批内CV%):5.7%～9.1%;样品加标回收率79%～123%;与类似生物碱的交叉反应率很低(<1.7%);测试盒4℃下保存期可达6个月以上;与HPLC法和免疫胶体金法对比实验表明,有良好的一致性。结论:研制的罂粟碱酶免测试盒能定性定量检测食品中的罂粟碱含量。     

酶标雌二醇的制备及三种凝胶层析的结果比较

目的：制备辣根过氧化物酶标雌二醇复合物，并比较不同孔径葡聚糖凝胶对复合物纯化的效果。酶标雌二醇既保留一部分酶活性又可与雌二醇抗体结合，而且这种免疫活性可被自由的雌二醇竞争。方法：我们在国内首次用雌二醇－１７－半琥珀酸与氯甲酸异丁酯在三正丁胺存在下生成活化酯衍生物，然后与辣根过氧化物酶的游离氨基缩合，制备出复合物，再分别经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０，Ｇ－７５，Ｇ－２００分离纯化，得到使用效果满意的酶标雌二醇复合物。结果：用三种凝胶均可将游离的雌二醇除去，Ｇ－２００纯化所得酶标物在同样的工作浓度（５ｍｇ／Ｌ）下，较Ｇ－７５及Ｇ－５０纯化的酶标物计数高。结论：本实验室在国内首次制备出了Ｅ２－１７－Ｈｅｍｉ－ＨＲＰ，经酶联鉴定使用效果令人满意，本文就不同孔径大小的凝胶对纯化的影响做了详细的论述     

磁分离酶联免疫测定技术中性激素质控的探讨

磁分离酶联免疫技术是瑞士Serono诊断中心发明的一种非同位素免疫检测的先进技术，称为磁性抗体免疫技术（MAIM）。使双抗体夹心酶联免疫技术在游离型标记抗体和标记抗原抗体复合物分离中具有分离完全和快速的优点。其方法操作简单，结果准确性高，重复性好。我室自2004年1月起采用美国SEROZYME-I系统对我院妇科、生殖中心及内分泌科的标本进行了检测，利用试剂盒中的质控品进行质量控制，效果如下。     

合成肽检测巨细胞病毒酶联免疫方法的建立及应用

目的：应用合成肽建立检测人巨细胞病毒（HCMV）特异敏感的酶联免疫方法，并用于临床检测患者血清中HCMV－IgM。方法：根据人巨细胞病毒PP150氨基酸序列，利用计算机辅助设计。决定含HCMV PP150国强抗原决定簇的单链多肽序列，合成肽作抗原，建立检测抗HCMV－IgM的酶联免疫吸附试验（ELISA）法，并用聚合酶链反应（PCR）方法检测全血中HCMV DNA，比较ELISA与PCR两种方法的相关性。结果：本实验所建立的检测抗HCMV－IgM的ELISA方法具有较好的特异性，正常孕妇血清中抗HCMV－IgM阳性率与HCMV DNA存在相关性。结论：本研究所建立的以合成多肽作抗原检测巨细胞病毒酶联免疫方法具有较好的特异性，简单，快速，适用与临床标本的检测。     

高价特异半抗原雌二醇抗体及酶标雌二醇复合物的研制

目的：制备出高价特异的半抗原雌二醇抗体和高纯度稳定的雌二醇－１７半琥珀酸－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）复合物。方法：主要使用材料包括半抗原载体复合物、半抗原活化体、ＨＲＰ及免疫用新西兰纯系家兔。具体方法为：（１）自行设计小分子半抗原的微量快速免疫方案，免疫全过程半抗原雌二醇的总使用体重量为３６７．５μｇ／ｋｇ，免疫时间为１１周。（２）首次建立活化４Ｂ珠与ＢＳＡ交联的反相快速亲合免疫吸附技术，以除去抗载体抗体，批次特异纯化了抗雌二醇抗体，（３）改进皮质醇－１７半琥珀酰胺－ＨＲＰ的标记法，建立了雌二醇－１７半琥珀酸－ＨＲＰ标记技术。结果：研制出高价特异的抗雌二醇抗体，效价１∶５万以上、抗体的活性达５ｍｇ／Ｌ；抗载体ＢＳＡ抗体的含量为０。首次制备出高纯度稳定的雌二醇－１７半琥珀酸－ＨＲＰ复合物；用ＥＬＩＳＡ法与自制固相Ｅ２抗体结合鉴定，复合物经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５纯化后Ａ４５０峰值与Ａ４０３及Ａ２８０基本吻合，复合物的活性为５ｍｇ／Ｌ。结论：本研究建立的半抗原雌二醇抗体及酶标雌二醇复合物的制备、纯化及分析鉴定技术简便、快速经济，效果满意     

巨细胞病毒IgM抗体捕捉酶标法的建立及应用

建立巨细胞病毒（ＣＭＶ）ＩｇＭ抗体捕捉酶标法（ＡＣ－ＥＬＩＳＡ）,并用该法调查１９１７例杭州市不同人群的巨细胞病毒感染情况。结果显示,抗原浓度、抗ＣＭＶ抗体酶结合物浓度对测定效果都有不同程度的影响,用量适的实验条件建立的ＡＣ－ＥＬＩＳＡ法检测杭州市不同人群,表明儿童组ＣＭＶ感染率高于成人组,工人组的感染率高于其他职业人群。以本方法测定ＣＭＶ－ＩｇＭ抗体的敏感性和特异性较高,可应用于流行病学调查及临     

异类Ig/Ig双特异性免疫复合物的检测及其意义

为研究独特型免疫网络的中间产物,以抗人ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ 分别为包被抗体,以异类酶标抗人Ｉｇ 为检测抗体,建立了检测由异类Ｉｇ 形成的Ｉｇ／Ｉｇ 双特异性循环免疫复合物（Ｔｗｏ － ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ －ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｉｍ ｍｕｎｅ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ,Ｉｇ／Ｉｇ － ＴＣＩＣ） 的ＥＬＩＳＡ 技术。采用该技术对健康人群进行检测,并按年龄组和性别组进行分析。结果发现,同一ＴＣＩＣ 的年龄组含量变化趋势依包被和酶标抗体不同而有明显差异,而不同ＴＣＩＣ 的年龄组含量变化趋势因酶标抗体相同而基本相同;ＴＣＩＣ 含量女性明显高于男性。提示,在检测免疫复合物的ＥＬＩＳＡ 中,所得结果与所用何种酶标抗体以及复合物的分子比有关。深入研究Ｉｇ／Ｉｇ － ＴＣＩＣ 对阐明免疫网络中间产物的免疫调节作用具有重要意义。     

胶体硒法与酶联免疫法检测HIV抗体结果比较

艾滋病病毒抗体检测是诊断HIV感染的常规方法。随着HIV抗体检测工作需求的扩大,除了经典的双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）以外,快速检测试剂以其操作方便快捷也得到了日益广泛的使用。2004年神农架林区艾滋病初筛中心实验室对胶体硒法与双抗原酶联免疫法检测艾滋病病毒抗体结果进行了比较,现报告如下。     

HFRS患者尿中病毒抗原检测的实验研究

目的建立和评价IEDA检测HFRS患者尿中病毒抗原的方法及敏感性和特异性。方法采用自行制备的免抗HFRSV多克隆抗体（Anti－HFRSVIgG）,运用免疫酶斑点法（IEDA）检测40例HFRS患者尿中的病毒抗原,同时采用传统的间接免疫荧光法（I－IFA）检测患者血清中抗流行性出血热病毒抗原的IgM型抗体（Anti－HFRSVIgM）作相关分析。结果应用IEDA检测尿中HFRS抗原的总阳性率为65％,早期（5日内）抗原检出率为83．33％,而应用I－IFA检测血清中Anti－HFRSVIgM阳性率为77．8％。结论IEDA与I－IFA检测的结果高度相关,且5病日内的早期诊断率为前者高于后者。