青蒿琥酯诱导人胃癌细胞凋亡的分子机制研究

目的探讨青蒿琥酯对人胃癌HGC27细胞凋亡的影响及可能的分子机制。方法将HGC27细胞分为正常对照组、20 mg·L-1青蒿琥酯组、80 mg·L-1青蒿琥酯组、160 mg·L-1青蒿琥酯组,采用CCK8分别检测青蒿琥酯作用24、48和72 h后对HGC27细胞增殖的影响,流式细胞术检测青蒿琥酯对HGC27细胞凋亡的影响,Western blot检测青蒿琥酯对HGC27细胞中β-catenin、GSK-3β、c-Myc以及Caspase-3表达的影响。结果青蒿琥酯能抑制HGC27细胞增殖,与对照组相比,青蒿琥酯各浓度组的增殖抑制率显著升高(P0.05),且具有浓度-时间依赖性。青蒿琥酯能诱导HGC27细胞凋亡,与对照组相比,青蒿琥酯各浓度组的细胞凋亡率显著升高(P0.05),且具有浓度依赖性。Western blot检测发现青蒿琥酯能显著上调GSK-3β和Caspase-3的蛋白表达(P0.05),抑制β-catenin和c-Myc的蛋白表达(P0.05)。结论青蒿琥酯能明显抑制HGC27细胞的增殖,诱导细胞凋亡,这可能与其抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。     

羟基喜树碱对人胚肺成纤维细胞HFLl生长的影响

目的观察羟基喜树碱（HCPT）对体外培养的人胚秭成纤维细胞（HFLI）的增殖抑制和促凋亡作用。,方法采川四甲块偶氮唑蓝法（MTT）检测不同浓度的HCVF对HFI．1细胞作用24h、48h、72h的增殖抑制效果,计算细胞生长抑制率和半数抑制量（IC50）,确定HCPT抑制HFL1细胞增殖的最佳给药浓度和最佳作用时间;姬姆萨染色观察细胞形念学变化;流式细胞仪分析细胞周期;琼脂糖凝胶电泳观察捌亡细胞的DNA梯度。对所得数据用SPSS15．0软件进行统计分析。结果HCPT对HFL1细胞增殖有明显的抑制作用,在0．008-32mg／L范围内呈时间和剂量依赖性;与对照组比较,各实验组24h、48h、72hA值及细胞生长抑制率差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）HCPT作用HFL1细胞48h时的IC50为0．466mg／L,故确定48h、0．5mg／L为最佳作用时间和最佳给药浓度;0．5mg／I．HCPT作用HFL1细胞24h后,Cu,／G．期细胞所占比例为（50．46±3．91）％;作用72h后,G0／G．期细胞所占比例为（88．19±2．13）％,怀对照组比较,其余各组各期细胞所占比例差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;姬姆萨染色显示,HFLI细胞形态发生明显变化;琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯度带形成。结论HCVF对体外培养的HLI细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,可能是一种潜在的抗肺纤维化的药物。     

大蒜新素对人巨细胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞凋亡的影响

目的 研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)诱导感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)凋亡的动态变化及凋亡调控基因bcl-2和fas mRNA表达的影响。方法 用流式细胞术测定HELF在高、低感染复数(MOI分别为2．5、0．25)HCMV感染后1、12、24、36、48、72、96h凋亡细胞比率；大、中、小剂量大蒜新素(9、6和3μg／mL)处理正常的和感染的HELF细胞(MOI为2．5)后上述各时间点凋亡细胞比率。用原位杂交法检测大剂量大蒜新素处理感染细胞(MIO为0．25)72h后bcl-2和fas mRNA表达强度变化，并与正常细胞和感染细胞对比分析。结果 正常细胞凋亡比率保持恒定低水平(凋亡率平均2．68％)；低、高感染复数感染细胞随时间延长凋亡细胞逐渐增多，凋亡率峰值分别达8．85％(96h)和25．63％(72h)；各剂量大蒜新素处理的正常细胞凋亡率增加，呈剂量依赖性，峰值分别为4．88％、6．47％和8．35％；但各剂量药物处理感染细胞后却使细胞凋亡比率下降，大剂量药物处理72h时效应最为明显，凋亡细胞比率由25．63％降至16．24％。正常细胞高表达bcl-2，低表达fas基因；感染HCMV后，bcl-2表达显著下调，fas表达明显增强；大蒜新素处理感染细胞后使bcl-2表达强度明显高于感染细胞，fas表达水平明显低于感染细胞，但仍未恢复到正常细胞水平。结论HCMV是HELF凋亡的强诱导剂；病毒可通过下调凋亡抑制基因bcl-2和上调凋亡促进基因fas而发挥致凋亡作用。大蒜新素本身可诱导HELF凋亡，但却能明显抑制HCMV诱导的细胞凋亡，其抑制作用可能与药物干扰HCMV影响凋亡调控基因bcl-2和fas表达有关。     

青蒿琥酯对热化疗诱导人结肠上皮细胞损伤的保护机制研究

目的:探讨青蒿琥酯对热化疗诱导人结肠上皮细胞损伤的保护作用,并对其作用机制进行初步研究。方法:体外原代培养人结肠上皮细胞,并将其分为正常对照组、热化疗组、热化疗+不同浓度青蒿琥酯组,利用顺铂联合温热(43℃)处理人结肠上皮细胞30 min,采用CCK8试剂检测不同浓度青蒿琥酯对人结肠上皮细胞增殖情况的影响,流式细胞仪检测青蒿琥酯对人结肠上皮细胞凋亡的影响,免疫印迹技术检测青蒿琥酯对ERK/P53信号通路蛋白及Bax、MDM2蛋白表达的影响。结果:热化疗导致人结肠上皮细胞发生凋亡,其中p-ERK、p-P53、Bax及MDM2蛋白表达水平均高于对照组(P0.05)。不同浓度青蒿琥酯作用热化疗处理的人结肠上皮细胞后,人结肠上皮细胞相对存活率显著升高并表现出药物浓度依赖性,细胞凋亡率降低呈剂量依赖性,同时p-ERK、p-P53、Bax及MDM2蛋白表达水平也显著降低。结论:青蒿琥酯对热化疗损伤人结肠上皮细胞具有保护作用,其作用机制可能与抑制ERK/P53信号通路活化和抑制促凋亡基因Bax及MDM2的表达有关。     

敏咳清颗粒对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡的影响

目的：通过观察敏咳清颗粒对体外培养的肺成纤维细胞（lung fibroblast,LFB）增殖、凋亡的影响,探讨敏咳清颗粒治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制。方法：将常规培养LFB分为空白组、模型组、对照组、敏咳清高浓度组、敏咳清低浓度组、养阴清肺糖浆高浓度组、养阴清肺糖浆低浓组、地塞米松组,加入肝素刺激后分别加入对应的含药血清,采用MTT法检测LFB增殖,TUNEL法检测LFB凋亡。结果：①各组含药血清均可以不同程度地抑制肝素刺激下LFB的增殖,以敏咳清颗粒高剂量组抑制LFB增殖的作用最强,48h的抑制作用强于24h,呈剂量依赖性;②各组均出现不同程度细胞凋亡的形态改变,以敏咳清高剂量组诱导LFB凋亡细胞最多。结论：敏咳清颗粒能显著抑制LFB增殖,诱导LFB凋亡。     

青蒿琥酯抑制鸡胚尿囊膜血管生成作用的研究

 目的观察青蒿琥酯对新生血管生成的影响。方法采用鸡胚绒毛尿囊膜方法,检测青蒿琥酯对正常鸡胚绒毛尿囊膜微血管生成抑制作用,对肿瘤细胞诱导的鸡胚绒毛尿囊膜微血管生成的敏感性以及对MCF-7细胞、白血病K562细胞生长和浸润的影响。结果青蒿琥酯有较强的抗肿瘤细胞和浸润作用,以及抑制血管增殖作用,并且呈剂量依赖性。结论青蒿琥酯具有抑制新生血管增殖作用。     

基因芯片技术分析青蒿琥酯抑癌作用机制

目的利用基因芯片检测青蒿琥酯作用于K562细胞后的基因表达情况,从基因水平上探讨青蒿琥酯抑制K562细胞增殖的作用机制。方法K562细胞经不同浓度青蒿琥酯处理24h,倒置光显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期变化。提取总RNA,逆转录生成cDNA,cDNA与基因芯片杂交,扫描仪检测杂交结果。结果倒置光显微镜观察到青蒿琥酯处理的K562:细胞出现不同程度的皱缩,核分裂相减少,细胞密度下降,漂浮细胞增多。荧光显微镜观察到青蒿琥酯处理的K562:细胞染色质高度浓缩、边缘化,凝聚成明亮的团块,即凋亡小体。流式细胞仪检测青蒿琥酯处理K562细胞G2期细胞的比例明显增加。扫描信号,分析数据显示10条基因表达有差异,p21、chk1表达上调,cyclinB1、cyclinE1、E2F1、DNA-PK、hTERT、bcl-2、jnk、VEGF表达下调。结论青蒿琥酯可以抑制K562细胞增殖,作用机制与改变细胞周期某些调控物质的基因表达、诱导K562细胞凋亡有关。     

苦参碱对人胚肺成纤维细胞增殖和凋亡的干预作用

目的：观察苦参碱对人胚肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响。方法：选择苦参碱为干预药物,以不同浓度梯度作用于体外培养的人胚肺成纤维细胞,采用MTT法检测细胞增殖,用流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率。结果：MTT结果显示,各干预组对HFL-1细胞生长均有显著抑制增殖作用,其强度呈时间-剂量依赖性。苦参碱作用于HFL-1细胞48 h后,各干预组细胞总凋亡率均明显高于对照组（P〈0.05）;与对照组比较,苦参碱各浓度组HFL-1细胞G0/G1期百分率显著上升（P〈0.05）。结论：苦参碱可在一定程度上抑制人胚肺成纤维细胞增殖,并诱导其凋亡。     

青蒿琥酯抗结肠癌药理机制研究进展

结肠癌在消化道肿瘤中的发病率较高,其发病原因与表观遗传、微生物环境、饮食习惯和生活方式等诸多因素相关。青蒿琥酯(ART)是从菊科植物黄花蒿中提取的青蒿素衍生物,作为抗疟药物广泛应用于临床。现有研究表明,ART可通过干预Wnt通路、线粒体通路、脂肪酸合成途径等方式抑制肿瘤细胞增殖或诱导肿瘤细胞凋亡,发挥抗结肠癌作用。现阶段运用ART抗结肠癌的临床报道较少,药物毒副作用研究尚缺,推荐剂量尚未统一。未来可从以上几点出发设计临床研究,规范临床用药标准,以期更好地将ART运用于结直肠癌的治疗。     

黄芪对体外人胚肺二倍体成纤维细胞抗衰老作用的研究

近年来,由于世界人口年龄结构迅速趋于老化,衰老机理和抗衰老药物的研究日益为人们所重视,成为老年医学研究的重要课题之一。中药是祖国医学的宝库,有些药物已经在医疗实践中显示出了抗衰老效应。但究竟是个体自然长寿还是服药后寿命延长,目前尚缺乏有力的证据,同时它们的作用机理还有待于运用科学的方法进一步的探讨和证实。首都医学院宣武医院孙晓莉等对此项工作进行了研究和探讨。人胚肺二倍体成纤维细胞是研究衰老的理想的体外模型,其衰老特征和黄芪抗细胞衰老研究已有零星报道,但一般集中在细胞寿命方面,均缺乏多方面、动态系统的观察。本研究     

青蒿琥酯对人肝癌HEPG-2细胞增殖作用的研究

目的 研究青蒿琥酯(Artesunate,Art)对肿瘤细胞增殖抑制作用.方法 MTT法测定Art,与铁剂联用,以及与5-FU联用对人肝癌细胞系HEPG-2的增殖抑制作用.结果 Art能够明显抑制HEPG-2细胞的生长,并呈现明显的时间-剂量效应.24,48,72 h的IC50值分别为103.1,75.3,65.7 μg/m.当Art(10μg/ml)与5-氟尿嘧啶(5-Fu)(5μg/ml)联合使用时,表现出明显的协同作用.结论 Art对人肝癌细胞系HEPG-2细胞有显著的抑制作用,有可能开发为临床抗癌治疗的辅助药物.     

青蒿琥酯的抗炎作用及机制研究进展

炎症是许多疾病的基础病理过程,可以发生在身体的各个组织和器官,包括癌症在内的多种疾病都是由炎症引起的。迄今虽已有上千种抗炎药物上市,但是这些药物多具有胃肠道损伤的不良反应,甚至还会对机体造成更大的损伤。近年来,中药老药新用的研究方兴未艾,对抗疟特效药青蒿素的创新研究受到国内外学者的广泛关注。青蒿琥酯是青蒿素水溶性较好的衍生物,具有速效、低毒等特点。除对疟疾有显著的治疗作用外,青蒿琥酯还具有潜在的抗炎作用。该综述通过查阅相关文献,详尽地阐述了青蒿琥酯的抗炎作用及机制,发现青蒿琥酯在呼吸系统、肝损伤、骨关节炎、皮炎、肾脏炎症、结肠炎、神经炎症、甚至在新型冠状病毒肺炎（COVID-19）等方面都有良好的抗炎效果;并归纳出青蒿琥酯主要通过作用于核转录因子-κB（NF-κB）、核因子E₂相关因子（Nrf2）、磷脂酰激醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/肿瘤坏死因子受体相关分子6（TRAF6）、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）/晚期糖基化终产物（RAGE）等信号通路,参与凋亡信号转导、介导免疫调节、改善氧化应激等方式来发挥抗炎作用。通过对青蒿琥酯的抗炎作用及机制进行综述,以期为青蒿琥酯在抗炎方面的应用提供参考,为将来青蒿琥酯的进一步开发利用提供借鉴。     

青蒿琥酯临床新用途机制探析

青蒿琥酯是从传统中药青蒿中分离衍生出的一种有效抗疟成分,本文作者通过查阅文献资料,筛选并综述了青蒿琥酯抗疟之外的新用途及其作用机制,为青蒿琥酯新功效的研究与开发及其在临床方面的新用途提供参考.     

青蒿琥酯对人结肠癌细胞HCT-8细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:研究青蒿琥酯对人结肠癌HCT-8细胞凋亡和细胞周期的影响.方法:实验分为10,20,30 μmol·L-1青蒿琥酯处理组,阴性对照组和空白对照组.采用透射电镜和流式细胞仪检测青蒿琥酯对HCT-8细胞的凋亡诱导效果;采用流式细胞仪分析青蒿琥酯对HCT-8细胞周期的影响;采用Western blot印迹法检测青蒿琥酯对细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响.结果:经青蒿琥酯处理后,电镜下可见HCT-8细胞膜皱缩、染色质凝聚、核碎裂、凋亡小体形成.10,20,30 μmol·L-1青蒿琥酯处理组凋亡率分别为17.1％±3.8％,29.5％±5.1％,41.4％±5.8％,显著高于空白对照组5.1％±1.4％.P＜0.05.在20 μmol· L-1青蒿琥酯处理组,HCT-8细胞G0/G1期所占比例随着药物作用时间延长而增加,S期与G2/M期细胞所占比例则下降.10,20,30 μmol·L -1青蒿琥酯处理组Bax蛋白表达水平分别为0.20±0.03,0.40±0.05和0.50±0.08显著高于空白对照组(0.06 ±0.02),P＜0.05;Bcl-2蛋白表达水平未见明显变化,Bcl-2/Bax呈下降趋势.结论:青蒿琥酯可以抑制人结肠癌细胞HCT-8增殖,诱导细胞凋亡,其诱导凋亡作用机制可能与其阻滞结肠癌细胞周期和上调促癌基因Bax表达有关.     

青蒿琥酯抗肿瘤作用研究进展

青蒿琥酯是青蒿素的衍生物之一,具有水溶性好、抗疟活性高等特点。临床上用来治疗疟疾,取得了较好的疗效。近年来,有学者发现,青蒿琥酯除了具有较好的抗疟活性之外,还具有抗多种肿瘤细胞的作用,并且还具有毒性低,不存在交叉耐药,可以逆转肿瘤细胞的多耐药性等优势。故综述了近年来青蒿琥酯对人慢性粒细胞白血病细胞株K562、肝癌细胞、人皮肤鳞癌A431细胞、人前列腺癌PC-3细胞、肺腺癌A549细胞等细胞的活性作用,以期对其抗癌活性的研究有所帮助。     

青蒿琥酯抗肿瘤作用实验研究

目的:探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)的体内抗肿瘤活性。方法:接种S180肉瘤的小鼠随机分为模型组、5-氟尿嘧啶组(20mg/kg)、Art组(20mg/kg),每组10只,腹腔注射给药10天后,各组称体质量,计算抑瘤率、脾指数、胸腺指数。结果:Art组的瘤质量与模型组相比明显降低(P<0.01),抑瘤率达到43%。Art可提高脾指数和胸腺指数,对S180肉瘤所致的免疫器官功能低下有一定保护作用。结论:Art具备较好的体内抗肿瘤活性。     

青蒿琥酯紫外分析法的研究

建立青蒿琥酯的紫外分析方法，方法：探讨了青蒿琥酯水解温度、碱浓度以及水解时间对青蒿琥酯水解产物的影响，进行紫外测定法的方法学考察。结果：青蒿琥酯的最佳水解条件为：８３℃，０．１ｍｏｌ／Ｌ氨氧化钠，水解１ｈ可得到完全稳定的水解产物，并确定２３８ｎｍ为紫外最大吸收波长。     

青蒿琥酯抗肿瘤作用观察

目的:对抗疟药青蒿琥酯进行抗肿瘤活性实验研究.方法:采用体内抗肿瘤实验方法,观察青蒿琥酯对小鼠移植性肿瘤的抑制作用.结果:青蒿琥酯能明显的抑制小鼠移植性S180肉瘤的生长,延长艾氏腹水瘤小鼠的生存时间.结论:青蒿琥酯对小鼠移植性肿瘤具有明显的抑制作用.     

青蒿酯钠诱导人肿瘤细胞凋亡及其分子机制的探讨

目的 研究青蒿酯钠诱导人肝癌细胞凋亡作用及探讨青蒿酯钠诱导人肝癌细胞凋亡的分子机制.方法 肝癌细胞(BEL-7402)经药物处理后,用荧光显微镜,透射电镜和流式细胞仪分析诱导凋亡作用,采用Western blot检测p53,p21和bcl-2.结果 与对照组相比,经青蒿酯钠处理后,肝癌细胞中p53,p21蛋白表达水平无明显变化,而bcl-2蛋白表达水平降低.结论 青蒿酯钠可诱导人肝癌细胞(BEL-7402)凋亡,其凋亡的分子机制是p53非依赖性的,即与p53,p21无关,而与凋亡调节基因bcl-2下调有关.