三氧化二砷对人宫颈癌Hela细胞生长增殖的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用及对增殖细胞核抗原（PCNA）和凋亡相关蛋白bcl-2表达的影响。方法MTT法观察生长抑制作用；膜联蛋白V（Annexinv）-异硫氰酸荧光素（FITC）＋碘化丙啶（PI）双参数流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡，FCM测定细胞周期及PCNA、bcl-2表达。结果As2O3可显著抑制Hela细胞生长增殖，且剂量一效应关系显著（r=0.98，P〈0.01），其48h的IC50值为5．59μmol／L。Hela细胞经As2O3处理后可发生凋亡。As2O3能显著下调PCNA表达并使细胞周期阻滞于G3／M期（P〈0.01），但对bcl-2表达无影响（P〉0．05）。结论As2O3在体外可显著抑制人宫颈癌Hela细胞生长并诱导凋亡，其机制可能与细胞周期阻滞及降低PCNA蛋白表达有关。     

三氧化二砷对人宫颈癌Hela细胞的放射增敏作用

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人宫颈癌Hela细胞的放射增敏作用及其机制。方法:MTT法确定As2O3对Hela细胞的半数致死浓度(ID50);克隆形成法观察20%ID50的As2O3对Hela细胞的放射增敏作用;流式细胞仪测定细胞周期。结果:细胞生长抑制率随As2O3浓度增加而增高;As2O3+照射组的细胞存活率、D0值和Dq值均小于单纯照射组(P<0.05);存活曲线肩区(Dq)变小,放射增敏比(SER)为1.39;As2O3和γ-射线均能使细胞阻滞在G2/M期,联合应用比单独应用抑制作用显著(P<0.01)。结论:As2O3对宫颈癌Hela细胞株有明显的放射增敏作用;可能与As2O3改变细胞周期有关。     

姜黄素与顺铂联合对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡作用

目的：研究姜黄素、顺铂和两者联合应用对人肺癌A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法：采用MTT法观察姜黄素和顺铂对人肺癌A549细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测姜黄素、顺铂和两者联合应用对人肺癌A549凋亡和细胞周期的影响。结果：①姜黄素及顺铂能抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,并呈浓度及时问依赖性;姜黄素10,15,20μmol/L分别与顺铂1,2 mg/L联合24,48,72 h的抑制率显著高于单用顺铂、姜黄素组（均为P〈0.05）,两者呈现出相加的抗瘤效果。②姜黄素和顺铂均可在一定程度上诱导细胞凋亡,并且凋亡率与浓度呈正相关。两种药物联用后,诱导细胞凋亡作用显著增强。③姜黄素将细胞周期阻滞在G2/M期（P〈0.01）,顺铂将细胞周期阻滞在S期（P〈0.01）。结论：姜黄素、顺铂均可抑制人肺癌A549细胞的增殖、诱导细胞的凋亡,在一定浓度范围内,呈量-效关系,而且两者联合应用具有相加或协同作用。     

无花果浆液对肝癌细胞增殖抑制作用研究

目的探讨无花果浆液（Fig fruit latex,FFL）对肝癌细胞SMMC7721及正常肝细胞L-02增殖、凋亡等生物学行为的影响。方法采用MTT法、克隆形成试验、Brdu掺入试验,Hoechst33342染色、流式细胞术检测FFL作用后,SMMC7721、L-02细胞增殖、凋亡和细胞周期分布的变化,并通过RT-PCR观察其诱导凋亡的机制。结果用FFL处理后,肝癌细胞增殖活性降低（P〈0.05）,克隆形成下降（P〈0.05）,Brdu标记指数降低（P〈0.05）,Hoechst33342染色凋亡细胞增多（P〈0.05）;细胞周期分布改变,凋亡指数升高（P〈0.01）,G0/G1期细胞数增加（P〈0.01）,S期细胞数减少（P〈0.01）,在一定剂量内对正常细胞无明显影响。RT-PCR检测ADPRTL基因表达增强。结论与正常肝细胞比较,FFL通过上调ADPRTL基因诱导肝癌凋亡,促进肝癌细胞周期阻滞,抑制肝癌细胞DNA合成等作用,抑制肝癌细胞增殖。     

p53基因在茉莉酸甲酯诱导HepG2细胞凋亡过程中表达变化的实验研究

目的探讨p53基因在茉莉酸甲酯诱导HepG2细胞凋亡过程中的表达变化.方法 RT-PCR检测HepG2细胞中p53mRNA表达,免疫细胞化学检测HepG2细胞p53蛋白表达.结果 MeJA作用HepG2细胞48h后：p53 mRNA表达水平明显下降（P〈0.01）;p53蛋白表达水平明显降低（P〈0.01）.结论 MeJA通过下调mtp53及其蛋白的表达,相对增加了wtp53的比例,使细胞周期相关蛋白的表达发生改变,引起细胞周期阻滞和细胞凋亡,从而发挥抗肝癌作用.     

IL-33及其受体ST2对人卵巢癌ES-2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的探讨白细胞介素-33（IL-33）及其受体磺基转移酶（ST2）对人卵巢癌ES-2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用MTT实验检测IL-33和si-ST2对ES-2人卵巢癌细胞存活率的影响;分为对照组、IL-33组、si-ST2组以及IL-33+si-ST2组,检测各组吸光度值;用流式细胞术检测IL-33和si-ST2对ES-2人卵巢癌细胞凋亡的影响,统计各组细胞凋亡数目;用细胞迁移和侵袭实验检测IL-33和si-ST2对ES-2人卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响。结果IL-33组、si-ST2组、IL-33+si-ST2组以及对照组的细胞存活率的比较差异有统计学意义（P < 0.01）。其中IL-33组细胞存活率高于对照组,si-ST2组细胞存活率低于对照组,IL-33+si-ST2组细胞存活率显著高于si-ST2组,IL-33组细胞存活率显著高于si-ST2组,差异均有统计学意义（P < 0.01）。IL-33组细胞凋亡率低于对照组;si-ST2组细胞凋亡率高于对照组和IL-33组;IL-33+si-ST2组细胞凋亡率低于si-ST2组,高于IL-33组。IL-33组、si-ST2组、IL-33+si-ST2组以及对照组的细胞迁移率、侵袭率的比较,差异有统计学意义（P < 0.01）。其中IL-33组细胞迁移、侵袭均低于对照组,si-ST2组迁移、侵袭均高于空白对照组,IL-33+si-ST2组迁移、侵袭均高于IL-33组,低于si-ST2组,差异均有统计学意义（P < 0.01）。结论IL-33可促进卵巢癌ES-2细胞增殖并抑制其凋亡、迁移、侵袭;沉默ST2可抑制卵巢癌ES-2细胞增殖并促进其凋亡,使其迁移和侵袭能力下降;IL-33通过ST2途径参与影响卵巢癌ES-2细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。     

新木脂素VB-1对人卵巢癌CoC1细胞生长的影响

目的研究新木脂素（VB-1）对人卵巢癌CoC1细胞生长的影响。方法 MTT还原法测定细胞活性;琼脂培养集落形成法检测细胞集落形成能力;碘化丙啶（PI）染色、流式细胞术分析细胞周期;Western Blotting法分析CDK2、CDK4和p21WAF1/CIP1蛋白表达。结果 VB-1显著抑制CoC1细胞活性（P〈0.01）,呈浓度依赖性,VB-1以浓度依赖方式抑制CoC1细胞集落形成能力（P〈0.01）,VB-1阻滞CoC1细胞周期于G1期（P〈0.05）。VB-1下调CDK2和CDK4蛋白表达（P〈0.05）,同时上调p21WAF1/CIP1蛋白表达P〈0.05）。结论 VB-1具有抑制CoC1细胞生长作用,其作用机制可能与阻滞细胞周期进展相关。     

辣根过氧化物酶／吲哚乙酸自杀基因系统联合放射对Hep-2细胞的生长抑制作用

目的：研究辣根过氧化物酶（HRP）/吲哚乙酸（IAA）自杀基因系统联合放射对人喉鳞癌Hep-2细胞株的生长抑制作用,观察HRP/IAA系统是否具有放射增敏性。方法：将构建成功的pcDNA3.1-HRP转染Hep-2细胞,RT-PCR及Western blotting分别在mRNA和蛋白质两个水平检测其表达;分别以0.5 mmol/L IAA、2 Gyγ-射线及两者联合作用于转染HRP后的Hep-2细胞,实验分为4组：A、对照组;B、加药组;C、放射组;D、加药及放射组。克隆形成实验观察HRP/IAA系统对细胞存活分数的影响,通过拟合生存曲线计算放射增敏比SERSF2;流式细胞仪分析各组细胞周期时相的变化;AnnexinV-FITC试剂盒比较各组细胞凋亡率。结果：转染pcDNA3.1-HRP的Hep-2细胞,RT-PCR和Western blotting能检测到HRP的表达;加药及放射组比单纯放射组细胞存活分数降低,SERSF2为1.302;与A组相比,B、C、D组G2/M期细胞比例升高,S期细胞比例降低,细胞凋亡率均显著增高（P〈0.01）;D组与B组相比,G2/M期细胞比例升高,S期细胞比例百分比降低,凋亡率增高（P〈0.01）;D组与C组比较,G0/G1期、G2/M期细胞比例升高（P〈0.05）,S期细胞比例百分比降低,凋亡率增高（P〈0.01）。结论：HRP/IAA系统与放射联合应用能更有效地抑制Hep-2细胞生长、诱导其凋亡,HRP/IAA系统具有放射增敏性。     

放射线对体外培养鼻咽癌细胞细胞周期阻滞、凋亡和抑癌基因p57kip2表达的影响

目的研究放射线对鼻咽癌CNE细胞细胞周期阻滞、凋亡和抑癌基因p57^kip2蛋白表达的影响。方法运用流式细胞术检测放射线诱导的细胞周期阻滞、凋亡；运用免疫组织化学法检测抑癌基因p57^kip2蛋白的表达。结果CNE细胞经照射后，G1期无明显阻滞，S期出现短暂堆积，G2／M期阻滞程度具剂量和时间依赖性，G2／M期阻滞在12h与24h时与照射剂量呈正相关（P〈0．01），随照射后时间延长而增强，峰值出现于12Gy24h；细胞凋亡发生率与照射剂量和照射后时间均呈正相关（P〈0．01）。照射后p57^kip2蛋白表达随照射剂量增加和照射后时间延长而上调（均P〈0．01）。结论G2／M期阻滞、细胞凋亡率和p57^kip2蛋白均能反映及预测鼻咽癌细胞的放射敏感性。     

槲皮素对人肺癌细胞株A-549细胞增殖的抑制作用

目的：观察槲皮素对人肺癌细胞株A-549细胞增殖和凋亡的影响。方法以不同浓度槲皮素培养人肺腺癌细胞株A-549细胞后,采用MTT法检测槲皮素对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化;通过倒置显微镜、Heochst33258荧光染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态学改变;Western blot方法检测凋亡抑制蛋白Survivin的表达情况。结果不同浓度槲皮素作用于人肺腺癌细胞株A-549细胞24h后,细胞存活率显著降低,且与剂量呈依赖关系。15、30、60μmol/L的槲皮素作用于人肺腺癌细胞株A-549细胞24h后,细胞阻滞发生在G2/M期;凋亡率分别为（7.24±1.73）%、（12.57±2.7）%和（26.02±1.67）%,与浓度为0的凋亡率[（2.67±2.32）%]比较,差异均有统计学意义（均P＜0.01）;从形态学上观察到肺癌细胞发生凋亡或坏死。通过Western blot检测发现,随着槲皮素作用浓度的增加Survivin蛋白的表达逐渐降低。结论槲皮素对人肺癌细胞株A-549细胞株有抑制其增殖及诱导凋亡的作用,其机制可能与细胞周期阻滞及抑制凋亡抑制蛋白Survivin的表达有关。     

鼻咽癌组织中miR-634水平及其对鼻咽癌细胞生长的影响及机制研究

目的 研究鼻咽癌组织中miR-634水平及其对鼻咽癌细胞生长及MEK/ERK信号通路的影响,探讨miR-634在鼻咽癌中的作用机制。 方法 收集鼻咽癌组织标本60例和鼻咽部非癌组织标本60例。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞中miR-634水平。将人鼻咽癌CNE-1细胞分为空白对照组、阴性对照组和过表达miR-634组。采用MTT测定细胞增殖,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,采用Western blotting测定鼻咽癌细胞细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(p-MEK)蛋白水平。 结果 鼻咽癌组织中miR-634水平低于癌旁组织(P<0.05)。鼻咽癌细胞中miR-634水平低于正常鼻咽部上皮细胞(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,过表达miR-634组鼻咽癌细胞中miR-634水平和细胞凋亡率升高(P<0.05);p-ERK、p-MEK蛋白水平降低(P<0.05)。转染3 d和5 d,3组细胞OD值比较差异有统计学意义(P<0.05),与空白对照组和阴性对照组比较,过表达miR-634组细胞OD值降低(P<0.05)。 结论 鼻咽癌组织中miR-634水平降低,过表达miR-634可抑制鼻咽癌增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与MEK/ERK信号通路有关。      

调强适形放疗对鼻咽癌患者血清TGF-β1、IL-8和T淋巴细胞亚群水平的影响

目的 探讨调强适形放疗(IMRT)对鼻咽癌患者血清TGF-β1、IL-8和T淋巴细胞亚群水平的影响。 方法 将115例鼻咽癌患者按照放疗方式分为对照组(57例)与观察组(58例),分别采用常规二维放疗与IMRT治疗。比较2组患者5年生存率及复发情况、不良反应发生情况、治疗前后血清TGF-β1、IL-8与T淋巴细胞亚群水平的变化情况。 结果 ①观察组患者无区域复发生存率、无瘤生存率均显著高于对照组(P＜0.05),观察组患者局部复发率显著低于对照组(P＜0.05),观察组患者无远处转移生存率略大于对照组(P＞0.05);②对照组患者放疗过程中不良反应总发生率为40.35%(23/57),观察组为34.48%(20/58),2组不良反应发生率差异无统计学意义(P＞0.05);③2组患者治疗后血清TGF-β1及IL-8水平较治疗前均显著下降(P＜0.05),且观察组上述指标水平下降幅度均显著大于对照组(P＜0.05);④2组患者治疗后CD3、CD4及CD4/CD8水平较治疗前均显著升高(P＜0.05),治疗后CD8水平较治疗前均显著下降(P＜0.05)。 结论 IMRT对鼻咽癌的疗效显著,可能是通过改善患者血清TGF-β1、IL-8及T淋巴细胞亚群水平来实现的。      

Effect of Quercetin on Proliferation and Apoptosis of Human Nasopharyngeal Carcinoma HEN1 Cells

The effect of quercetin （Que） on proliferation and apoptosis of human nasopharyngeal carcinoma HEN1 cells was investigated. Inhibition rate of quercetin on HEN1 was assayed by MTT method, apoptosis by flow cytometry （FCM）, and the caspase-3 expression of each group by colorimetry set respectively. Quercetin inhibited HEN1 cells in in a dose-（r=0.709, P〈0.01） and time-dependent manner （r=0.703, P〈0.01）. The ratio of apoptotic and necrosis cells was increased in the cells treated with quercetin. Cell cycle was specificly arrested in G2/M phase. Apoptosis cusp was revealed by FCM. The activity of caspase-3 was significantly up-regulated in 5 groups treated with quecetin as compared with control group （P〈0.05）. It was concluded that the growth inhibition of quercetin was highly related to cell cycle arrest at the G2/M phase and induction of caspase-dependent apoptosis in human nasopharyngeal carcinoma HEN 1 cells.     

抗抑郁药奥氮平对大鼠海马神经细胞凋亡和细胞周期的影响

目的：探讨抗抑郁药物奥氮平对谷氨酸（Glu）损伤的大鼠海马神经元凋亡、坏死和细胞周期的影响,阐明奥氮平神经保护作用的机制。方法：采用体外原代培养的大鼠海马神经元,复制Glu损伤模型,细胞分为正常对照组、Glu损伤组和奥氮平+Glu损伤组,在体外通过流式细胞术测定各组神经元细胞凋亡率、坏死率和细胞周期的改变。结果：与正常对照组比较,其他组细胞凋亡率增加 (P<0.01);与Glu损伤组比较,10.0 μmol/L奥氮平+Glu损伤组细胞凋亡率降低（P<0.01 )。与正常对照组比较,Glu损伤组神经元坏死率升高2.9倍 (P<0.05);与Glu损伤组比较,100.0和200.0 μmol/L奥氮平+Glu损伤组神经元坏死率降低(P<0.05或P<0.01)。与正常对照组比较,Glu损伤组G0/G1期细胞百分数增加 (P<0.01）,S期细胞百分数下降（P<0.01）,G2 + M期变化不明显;而与Glu损伤组比较,
50.0和100.0 μmol?L-1奥氮平+Glu损伤组G0/G1期细胞比例下降为Glu损伤组的79.9%和62.6% (P<0.05或P<0.01);S期细胞比例上升为Glu损伤组的2.5和3.8倍 (P<0.05或P<0.01)。结论：奥氮平能够抵抗Glu诱导的神经元凋亡和坏死,改变细胞周期进程。     

苦参碱改构体X抑制鼻咽癌细胞CNE2增殖作用的实验研究

目的：探讨苦参碱改构体X对人鼻咽癌细胞株CNE2的增殖抑制作用及其可能的机制。方法：本实验分5组,即实验组、阴性对照组、正常细胞对照组、溶剂组、空白对照组（调零孔）;倒置光学显微镜下观察细胞形态;采用MTT实验检测药物抑制率;流式细胞仪检测细胞周期的分布和凋亡情况。结果：加药细胞组形态变圆、变小、胞内可见空泡;MTT检测可见药物对人鼻咽癌细胞株CNE2有显著的抑制作用（P〈0.05）,抑制率最大可达到97.9%,但是对人脐静脉内皮细胞没有表现出相应的抑制作用,抑制率最大仅达到7.7%;流式细胞仪检测结果可见CNE2细胞的周期阻滞在S期和有浓度依赖性的明显凋亡,凋亡率最大可达89.71%。结论：苦参碱改构体X可通过细胞周期S期阻滞和诱导细胞凋亡来抑制鼻咽癌细胞的增殖分裂。     

红景天苷对人胃癌细胞SGC-7901抑瘤作用的体外实验研究

目的 研究红景天苷对体外培养的人胃癌细胞SGC-7901增殖及生长的影响,并探讨其抗肿瘤作用的可能机制。方法 实验分为对照组、0.50 mg/mL红景天苷组、1.00 mg/mL红景天苷组及2.00 mg/mL红景天苷组。通过MTT比色法、核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)染色、流式细胞技术、细胞划痕实验的方法检测不同浓度红景天苷对SGC-7901细胞增殖、AgNOR表达、细胞周期、细胞凋亡及细胞迁移作用的影响。结果 与对照组相比,不同浓度的红景天苷组SGC-7901细胞增殖及AgNOR表达均受到明显抑制(P<0.05),结果呈明显的浓度-时间-效应依赖关系;细胞停滞在S期的比例减少、G₂/M期的比例增加(P<0.05);细胞凋亡率升高,迁移率降低(P<0.05)。结论 红景天苷能抑制SGC-7901细胞增殖,并能阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡,降低胃癌细胞的迁移能力。     

氯喹对体外培养人肝癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的：探讨氯喹对体外培养人肝癌细胞HepG2增殖和细胞周期的影响,为氯喹作为肝癌治疗药物的研究提供依据。方法： 对数生长期人肝癌HepG2细胞分为对照组、氯喹 (8.00、16.00、32.00、64.00和128.00 mmol•L^-1 )处理组,用MTT法检测不同培养时间（24、48和72 h）细胞增殖活性,用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率。结果：与对照组比较,32.00~128.00 mmol•L^-1氯喹处理HepG2细胞24 h和8.00~128.00　 mmol•L^-1氯喹处理HepG2细胞48 h~72 h,细胞增殖活性随着剂量和时间增加而逐渐下降( P< 0.01),以72 h、128.00 mmol•L^-1氯喹抑制作用最强( P< 0.01);与对照组比较,氯喹处理组（32.00~128.00 mmol•L^-1）G₂/M期细胞比率及细胞凋亡率随着剂量增加而上升( P< 0.01),以128.00 mmol•L^-1组最为明显。结论：氯喹具有抑制人肝癌HepG2细胞增殖作用,可诱导人肝癌HepG2细胞的凋亡,并可使人肝癌HepG2细胞周期阻滞在G₂/M期而抑制细胞活性,可能作为肝细胞癌的治疗药物。     

辛伐他汀通过AMPK/mTOR信号通路及氧化应激对鼻咽癌细胞凋亡和侵袭转移的作用研究

目的：研究辛伐他汀对体外人鼻咽癌细胞CNE-2增殖抑制、细胞凋亡及侵袭转移的影响,并对其潜在作用机制进行研究探讨。方法：采用MTT实验测不同浓度梯度辛伐他汀(0、0.1、1、10mmol/L)对CNE-2细胞增殖抑制作用;细胞凋亡情况的检测采用流式细胞术,Transwell实验检验细胞侵袭迁移能力,Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、AMPK、pAMPK、mTOR蛋白表达水平,检测分析丙二醛量(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的前后变化。结果：与对照组相比,辛伐他汀对CNE-2细胞的增殖抑制率明显升高,凋亡率明显升高,且侵袭转移能力明显降低,具有明显的剂量和时间依赖关系,差异均具有统计学意义(P<0.05), 此外,与对照组相比,辛伐他汀能够显著增强Caspase-3的活性, 使得AMPK/pAMPK/Bax蛋白表达增加,mTOR/Bcl-2蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。辛伐他汀能够增加MDA含量,减少SOD活性,以上作用均具有剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：辛伐他汀对鼻咽癌细胞增殖抑制、诱导细胞凋亡和抑制侵袭转移的作用,可能与AMPK/mTOR通路及氧化应激有关。     

腺病毒介导BMP-2和BMP-6对人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的作用研究

目的 研究骨形态发生蛋白(BMP)-2和BMP-6对人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的作用.方法 分别用重组腺病毒AdBMP-2、AdBMP-6和AdGFP感染骨肉瘤细胞MG63和U2OS,利用台盼蓝拒染法、TUNEL法、吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光双染法、Transwell小室和碱性磷酸酶(ALP)活性测定法分别检测细胞增殖、凋亡、迁移以及成骨分化能力的变化.结果 与感染AdGFP的相应骨肉瘤细胞株(对照组)相比,分别感染AdBMP-2和AdBMP-6的两种骨肉瘤细胞株的细胞存活率随时间延长逐渐降低,凋亡率逐渐增加,细胞穿膜数逐渐减少,ALP活性逐渐增加.结论 BMP-2和BMP-6可以抑制人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的增殖和迁移,并诱导它们凋亡和向成骨细胞分化.