己酮可可碱对人肝癌细胞株Hep3b的放射增敏作用

目的观察己酮可可碱(PTX)对人肝癌细胞株Hep3b的放射增敏作用。方法以Hep3b人肝癌细胞株为研究对象,应用MTT法检测PTX的药物毒性;应用克隆形成实验(colony forming assay)观察PTX对Hep3b细胞株的放射敏感性的影响;流式细胞仪(FCM)技术测定照射后Hep3b细胞株细胞周期的再分布并观察PTX能否去除放射引起的细胞周期阻滞。结果不同浓度的PTX作用于人肝癌Hep3b细胞株48 h后,其细胞毒性呈剂量依赖性,最适浓度为2 mmol/L。PTX能明显降低放射后Hep3b细胞的克隆形成率,其放射增敏比为2.68±0.24(P>0.05)。FCM实验结果显示,照射明显导致Hep3b细胞株G2期阻滞,Hep3b细胞在照射后20 h G2/M期比例分别为86.8%和14.8%(P<0.05),PTX能够去除放射引起的Hep3b细胞G2期阻滞。结论PTX对Hep3b细胞株有放射增敏作用,其作用机制可能与PTX去除放射引起的G2期阻滞有关。     

放射线对体外培养鼻咽癌细胞细胞周期阻滞、凋亡和抑癌基因p57kip2表达的影响

目的研究放射线对鼻咽癌CNE细胞细胞周期阻滞、凋亡和抑癌基因p57^kip2蛋白表达的影响。方法运用流式细胞术检测放射线诱导的细胞周期阻滞、凋亡；运用免疫组织化学法检测抑癌基因p57^kip2蛋白的表达。结果CNE细胞经照射后，G1期无明显阻滞，S期出现短暂堆积，G2／M期阻滞程度具剂量和时间依赖性，G2／M期阻滞在12h与24h时与照射剂量呈正相关（P〈0．01），随照射后时间延长而增强，峰值出现于12Gy24h；细胞凋亡发生率与照射剂量和照射后时间均呈正相关（P〈0．01）。照射后p57^kip2蛋白表达随照射剂量增加和照射后时间延长而上调（均P〈0．01）。结论G2／M期阻滞、细胞凋亡率和p57^kip2蛋白均能反映及预测鼻咽癌细胞的放射敏感性。     

薏苡仁酯对人鼻咽癌细胞的放射增敏作用

目的：探讨薏苡仁酯（ＣＸＬ）对人鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ辐射效应的影响。方法：以＾６０Ｃｏ为放射源,采用微量细胞克隆形成法检测ＣＮＥ－２Ｚ对γ射线的敏感性。结果ＣＸＬ使ＣＮＥ－２Ｚ的放射－存活曲线左移,Ｄｏ和Ｄｑ值下降。不同浓度的ＣＸＬ（１０＾－７－１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）使辐射剂量减少７．４５％－１７．３１％（在Ｄ３７水平）,其增敏比（ＳＥＲ）：Ｄｏ比值１．１１－１．４６,Ｄｑ比值１．０２－１．１１     

薏芯仁酯对辐射诱导的人鼻咽癌细胞凋亡的促进作用

目的：探讨薏苡仁酯（coixenolide,CXL)对辐射诱导的人鼻咽癌细胞（CNE－2Z凋亡的影响。方法：以60Co为放射源,采用形态学（荧光染色）方法和流式细胞术观察CNE－2Z细胞的凋亡和药物作用,结果：CNE－2Z经照射后,凋亡细胞数增加,并与放射剂量和观察时间成正相关。加入CXL,可使放射量效曲线和时效曲线左移,流式细胞仪分析也得到相似的结果。辐射也诱导正常细胞凋亡,但CXL并没有加强此作用,结论：CXL能选择性地促进射线所致的细胞凋亡。     

复方苦参注射液对鼻咽癌CNE-2细胞的放射增敏作用

目的：观察复方苦参注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法：常规体外培养人鼻咽癌CNE-2细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测不同浓度复方苦参注射液分别处理CNE-2细胞24、48和72 h后时细胞增殖抑制率,计算复方苦参注射液对CNE-2细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）。CNE-2细胞分为对照组（不照射、不给药）、放射组（给予剂量为2和4 GyX射线照射）和联合组（给予不同浓度复方苦参注射液处理后再接受X射线照射）。MTT法检测各组CNE-2细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组CNE-2细胞凋亡率,克隆形成试验检测各组CNE-2细胞存活率。结果：不同浓度复方苦参注射液处理CNE-2细胞24、48和72 h后,细胞增殖抑制率较未经复方苦参注射液处理的CNE-2细胞升高（P<0.05）,且呈剂量依赖性;复方苦参注射液处理48 h时细胞增殖抑制率高于24 h时（P<0.05）。放射组CNE-2细胞凋亡率高于对照组（P<0.05）,联合组CNE-2细胞凋亡率较放射组升高（P<0.05）;联合组CNE-2细胞存活率低于放射组（P<0.05）。结论：复方苦参注射液能促进放射线诱导的鼻咽癌CNE-2细胞凋亡,从而对CNE-2细胞具有放射增敏作用。     

拓扑替康、顺铂和泰素对宫颈癌HeLa细胞的抑制及放射增敏作用

目的研究拓扑替康（TPT）对宫颈癌HeLa细胞的杀伤作用和放射增敏作用,并与顺铂（DDP）和泰素（TAX）进行对比分析。方法采用MTT法检测TPT、DDP和TAX对宫颈癌HeLa细胞增殖能力的影响,细胞克隆形成法研究三种化疗药物的放射增敏作用,并应用单击多靶模型计算放射增敏比。结果TPT、DDP和TAX作用HeLa细胞24、48和72h半数抑制浓度分别为8．0、2．6和0．8μg／mL,2．4、0．7和0．1μg／mL,0．3、0．1和0．0μg／mL。三种化疗药物的放射增敏组肿瘤细胞凋亡率均明显高于单放射组和单独化疗组（P〈0．05）;放射增敏实验中,TPT作用24h和48h后放射增敏比分别为1．167和1．344,DDP为1．314和1．538。TAX为1．076和1．316。结论TPT、DDP和TAX对宫颈癌HeLa细胞具有明显抑制作用,且呈时间和浓度依赖性。三种化疗药物具有放射增敏作用,DDP的放射增敏作用最强,TAX最弱。     

马蔺子素对鼻咽癌患者远期生存的影响

目的评价马蔺子素(安卡)在鼻咽癌放射治疗中的应用价值。方法158例经病理证实为鼻咽癌的患者被随机分为马蔺子素联合放射治疗组(治疗组)和单纯放射治疗组(对照组),两组放射治疗方法、剂量相同,治疗组在放射治疗的同时服用安卡110mg/次,每天2次,直至放射治疗结束。结果治疗组远期生存率明显高于对照组,两组差异有显著意义(χ2=3.9378,P<0.05);治疗组复发率17.95%,明显低于对照组的32.50%(χ2=4.4228,P<0.05);治疗组死于局部复发者亦明显低于对照组,分别为11.10%和28.75%(χ2=5.0172,P<0.05);而两组远期后遗症的发生率无明显差异。结论马蔺子素联合放射治疗鼻咽癌,能明显提高鼻咽癌的局部控制率,减少了局部复发和提高了远期生存率,同时未增加正常组织的放射损伤,是一个较理想的放射增敏剂。     

拓扑替康、顺铂和泰素对宫颈癌HeLa细胞的抑制及放射增敏作用

目的 研究拓扑替康(TPT)对宫颈癌HeLa细胞的杀伤作用和放射增敏作用,并与顺铂(DDP)和泰素(TAX)进行对比分析.方法 采用MTT法检测TPT、DDP和TAX对宫颈癌HeLa细胞增殖能力的影响,细胞克隆形成法研究三种化疗药物的放射增敏作用,并应用单击多靶模型计算放射增敏比.结果 TPT、DDP和TAX作用HeLa细胞24、48和72 h半数抑制浓度分别为8.0、2.6和0.8 μg/mL,2.4、0.7和0.1μg/mL,0.3、0.1和0.0μg/mL.三种化疗药物的放射增敏组肿瘤细胞凋亡率均明显高于单放射组和单独化疗组(P<0.05);放射增敏实验中,TPT作用24 h和48 h后放射增敏比分别为1.167和1.344,DDP为1.314和1.538,TAX为1.076和1.316.结论 TPT、DDP和TAX对宫颈癌HeLa细胞具有明显抑制作用,且呈时间和浓度依赖性.三种化疗药物具有放射增敏作用,DDP的放射增敏作用最强,TAX最弱.     

紫杉醇敏放射对培养的胶质母细胞瘤细胞凋亡和增殖活性的影响

探讨紫杉醇增敏放射对胶质母细胞瘤细胞凋亡和增殖活必的影响。方法采用人胶质母细胞瘤细胞系ＢＴ３２５。（１）细胞经紫杉醇照射处理后，每６ｈ收集一批细胞，至４８ｈ结束。行流式细胞术细胞凋亡分析。     

miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响及其机制

目的：观察miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法：乳腺癌T47D和MDA-MB-361细胞分别给予0.0、2.5和5.0 Gy γ射线照射,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程,实时定量PCR法检测72 h内细胞中miRNA-21表达水平。T47D和MDA-MB-361细胞分别转染anti-miRNA-21序列（anti-miRNA-21组）和阴性对照序列（阴性对照组）,并设置未转染细胞为空白对照组,实时定量PCR法检测各组细胞中miRNA-21表达水平;经0.0和5.0 Gy γ射线照射后,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程。结果：经5.0 Gy γ射线照射后,T47D细胞存活率明显高于MDA-MB-361细胞（P<0.05）;与0.0 Gy照射组比较,5.0 Gy照射组T47D和MDA-MB-361细胞G₂/M期细胞百分率均明显升高（P<0.05）,miRNA-21表达水平均明显升高（P<0.05）。与空白对照组比较,anti-miRNA-21组T47D和MDA-MB-361细胞中miRNA-21表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）;给予5.0 Gy γ射线照射后,anti-miRNA-21组T47D和MDA-MB-361细胞存活率均明显降低（P<0.05或P<0.01）,T47D细胞G₂/M期细胞百分率明显降低（P<0.05）,而subG₁期细胞百分率明显升高（P<0.05）。结论：miRNA-21表达下调能够增强乳腺癌细胞的放射敏感性,其机制可能与抑制细胞周期G₂/M期阻滞有关。     

褪黑素对离体培养的小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期进程的影响

目的:研究褪黑素对体外培养的小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期进程的影响. 方法:小鼠胸腺细胞体外培养前预先加入不同浓度褪黑素,培养4 h后,应用流式细胞术检测其凋亡小体百分率和细胞周期各时相细胞百分率的变化. 结果:小鼠胸腺细胞培养后其凋亡小体百分率明显升高,为培养前的6.9倍(P<0.001);G0/G1和S期细胞百分率与培养前相比未见明显变化,G2+M期细胞百分率呈增高趋势.预先加入2.0 mmol*L-1 褪黑素可使凋亡小体百分率明显降低(P<0.01),G2+M期细胞百分率明显增高(P<0.05). 结论:褪黑素可以减轻体外培养的小鼠胸腺细胞凋亡,并可诱导细胞发生G2阻滞.     

Study on Taxol in Inhibiting Human Leukemia Cell Proliferation andInducing Apoptosis

Objective: To explore the effects of Taxol in inhibiting human leukemia k562 cell proliferation and inducing apoptosis in vitro. Methods: Human leukemia K562 cells were treated with Taxol of different concentrations for 12-72 hrs. Cell proliferation was evaluated by MTT assay and morphological changes of apoptosis were examined by microscopy. Cell apoptosis was determined by flow cytometry (FCM) and DNA gel electrophoresis. Results: Growth of K562 cells was inhibited by Taxol with an IC50 value of 0. 84μg/ml. Typical nuclear condensation and apoptosis bodies were observed as early as 24 hrs after a 0.5μg/ml Taxol treatment; Apoptotic rate of the Taxol-treated K562 cells increased from 3.7% to 24.0% in 24 hrs. No DNA ladder was observed by DNA gel electrophoresis. Conclusion: Taxol could inhibit K562 cell growth and induce apoptosis in vitro.     

Arsenic Trioxide Inhibits Proliferation in K562 Cells by Changing Cell Cycle and Survivin Expression

To study the mechanisms involved in the inhibition of chronic myeloid leukemic cells (K562) proliferation induced by arsenic trioxide (As2O3) and to explore the potential role of Survivin, an inhibitor of apoptosis protein, in the regulation of As203 induced cell apoptosis, K562 cells were cultured with As203 of different concentrations. Cells were collected for proliferation analysis by MTT assay. Cell cycle distribution and cell apoptosis were analyzed by flow cytometry. Expression of Survivin protein and mRNA were detected by flow cytometry and RT-PCR, respectively. Our results showed that As2O3 (2-10/μmol/L) inhibited K562 cells growth effectively, but it did not induce cells apoptosis significantly. The percentage of K562 cells at G2/M phase increased in proportion to As2O3 concentrations, and the expression of Survivin mRNA and content of Survivin protein was up-regulated accordingly. It is concluded that As2O3 inhibited K562 cells growth by inducing cell cycle arrest mainly at G2/M phase. Over-expression of Survivin gene and protein might be one of the possible mechanisms contributing to K562 cells‘ resistance to As2O3-induced apoptosis.     

辛伐他汀通过AMPK/mTOR信号通路及氧化应激对鼻咽癌细胞凋亡和侵袭转移的作用研究

目的：研究辛伐他汀对体外人鼻咽癌细胞CNE-2增殖抑制、细胞凋亡及侵袭转移的影响,并对其潜在作用机制进行研究探讨。方法：采用MTT实验测不同浓度梯度辛伐他汀(0、0.1、1、10mmol/L)对CNE-2细胞增殖抑制作用;细胞凋亡情况的检测采用流式细胞术,Transwell实验检验细胞侵袭迁移能力,Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、AMPK、pAMPK、mTOR蛋白表达水平,检测分析丙二醛量(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的前后变化。结果：与对照组相比,辛伐他汀对CNE-2细胞的增殖抑制率明显升高,凋亡率明显升高,且侵袭转移能力明显降低,具有明显的剂量和时间依赖关系,差异均具有统计学意义(P<0.05), 此外,与对照组相比,辛伐他汀能够显著增强Caspase-3的活性, 使得AMPK/pAMPK/Bax蛋白表达增加,mTOR/Bcl-2蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。辛伐他汀能够增加MDA含量,减少SOD活性,以上作用均具有剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：辛伐他汀对鼻咽癌细胞增殖抑制、诱导细胞凋亡和抑制侵袭转移的作用,可能与AMPK/mTOR通路及氧化应激有关。     

鼻咽癌组织中细胞凋亡的检测

采用ＤＮＡ原位末端标记法检测９７例不同生存期鼻咽癌患者的细胞凋亡情况并探讨其与鼻咽癌患者预后的关系。结果提示：凋亡细胞在鼻咽癌组织中数目甚少，与预后未见明显关系，不能作为估计鼻咽癌患者预后的指标。     

姜黄素诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡及对细胞生长周期的影响

目的研究中药姜黄素在体外诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡的机制及对细胞生长周期的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,用不同浓度的姜黄素（0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0μmol/L）刺激人肝癌HepG2细胞24、36和48h,MTT法及台盼蓝拒染法检测姜黄素对人肝癌HepG2细胞生长增值的影响并绘制生长曲线图,流式细胞术（FCM）检测其对细胞生长周期的影响。结果MTT法结果表明姜黄素对人肝癌细胞HepG2的生长具有抑制作用,2.0μmol/L浓度组在24h与对照组比较便具有统计学意义（P〈0.05）,16μmol/L浓度组与HepG2细胞作用48h后对HepG2细胞的生长抑制作用最强（54.78±2.35）%,台盼蓝拒染法发现细胞存活率与姜黄素浓度间具有剂量和时间效应;流式细胞仪检测结果表明8.0μmol/L姜黄素诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡,并对细胞生长的S期有明显的阻滞作用。结论姜黄素在体外能阻滞HepG2细胞的生长增值,诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡。     

香叶木素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及周期阻滞的机制研究

目的 研究香叶木素对人肝癌HepG2细胞的增殖、凋亡及周期阻滞的影响并揭示其分子机制.方法 MTT方法检测不同浓度香叶木素对肝癌HepG2的细胞活力的影响;流式细胞术检测不同浓度香叶木素处理对HepG2细胞周期阻滞及细胞凋亡的作用;Western blot检测香叶木素处理对细胞p53、Bcl-2、Bax、Cleaved-cas-pase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP、Bak、cdc2、cyclinB1、p21等细胞周期调节或细胞凋亡相关蛋白表达的调节.结果 香叶木素能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并且诱导细胞凋亡(P<0.05);流式细胞术对细胞周期检测示:香叶木素处理HepG2细胞,使G0/G1期细胞比例显著降低,而G2/M期细胞比例显著升高(P<0.05).香叶木素可下调HepG2细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、cdc2、cyclinB1的蛋白表达,上调p53、p21、Bax、Bak,Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP等促凋亡蛋白.结论 香叶木素在体外实验能通过激活p53/Bcl-2细胞凋亡通路抑制人肝癌HepG2细胞的增殖及促进细胞凋亡,同时通过上调p53、p21下调cdc2、cyclinB1诱导细胞G2/M周期阻滞.     

急性T淋巴细胞白血病细胞系JM分泌抑制因子在体外对T细胞凋亡及细胞周期的影响

目的　研究急性 T淋巴细胞白血病细胞系 JM分泌的抑制因子 (TL SFJM)在体外对 T细胞凋亡及细胞周期的影响 .方法　以 TL SFJM作用于有丝分裂原 PHA、蛋白激酶 C(PKC)活化剂 PMA和同种异体抗原 (alloantigen)活化的人或小鼠 T细胞 ,应用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期 .结果　 TL SFJM在体外可诱导 PHA/IL - 2活化的小鼠胸腺细胞的凋亡 .TL SFJM在体外可诱导 alloantigen活化的人外周血单个核细胞 (PBMC)的凋亡 ,且把细胞周期阻遏在 G1期 .TL SFJM对 PMA诱导的人 PBMC活化抗原 CD2 5的表达无明显影响 ,也不引起凋亡 .结论　 TL SFJM在体外可诱导 PHA、alloantigen活化的 T细胞凋亡 .