硫嘌呤甲基转移酶遗传多态性检测在6-MP个体化治疗中的意义

目的：研究硫嘌呤甲基转移酶活性和基因型检测对6-巯基嘌呤（6-MP）的个体化治疗的意义。方法-94例口服6-MP维持治疗的白血病患者，19例口服6-Mp后出现血液系统危象的为观察组，同时服用6-MP没有出现血液系统损害的75患者为对照组，采用高效液相色谱法测定硫嘌呤甲基转移酶（TPMT）活性，等位基因特异性PCR和限制性片段长度多态性（RFLP）的方法检测TPMT＊2、TPMT＊3A、TPMT＊3B和TPMT＊3C的等位基因频率。通过临床白细胞记数和骨髓象检查及临床表现判定巯嘌呤的疗效和不良反应。结果：观察组TPMT活性是（6．1±2．1）U·mL^-1 pRBCs显著低于对照组（15．3±2．3）U·mL^-1 pRBCs，而观察组的基因突变率10．7％高于对照组1．2％。结论：TPMT活性低下和／或TPMT基因突变型个体，在服用标准剂量的巯嘌呤后，发生不良反应的危险较高，应及时发现此类患者并积极调整剂量实现安全有效的治疗。     

硫嘌呤甲基转移酶基因多态性的硫唑嘌呤个体化用药临床研究分析

硫唑嘌呤属于硫嘌呤类药物,是一种免疫抑制药。硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine S-methyltransferase,TPMT)是参与硫唑嘌呤代谢的重要酶,TPMT的基因多态性是导致个体间用药差异的重要因素。TPMT基因遗传多态性导致酶活性存在个体差异,从而使接受硫唑嘌呤治疗的人群表现出不同的疗效和药物不良反应。TPMT的遗传多态性能够影响到TPMT酶的活性,而不同TPMT活性的患者在服用硫唑嘌呤后的药效学不同。越来越多的研究证实,在服用硫唑嘌呤之前进行基因型检测,针对不同TPMT活性的患者进行硫唑嘌呤个体化用药指导,可以有效地提高疗效,降低药物不良反应。本研究综述了基于TPMT基因多态性的硫唑嘌呤个体化用药治疗现状,通过讨论TPMT基因型指导下对不同患者服用硫唑嘌呤后的临床结局的影响,以及精准用药的建议,尤其关注了中国人群中TPMT用药的研究现状,以期为不同人群进行硫唑嘌呤治疗提供用药建议。     

TPMT遗传多态性对硫嘌呤类药物疗效和毒性影响的研究进展

目的:总结硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)遗传多态性对硫嘌呤类药物疗效和毒性影响的研究进展,为该药的个体化应用提供参考。方法:通过检索Pub Med和相关专业学术期刊全文数据库近10年来有关TPMT遗传多态性对硫嘌呤类药物疗效和毒性影响的研究文献,对TPMT遗传药理学研究进展作一整理归纳。结果和结论:TPMT是被研究得最早也是最多的一个硫嘌呤类药物代谢酶。TPMT遗传多态性和酶活性的个体差异可以部分解释患者服用硫嘌呤类药物后疗效和不良反应的不同。但目前其与硫嘌呤类药物所致的不良反应之间的关系尚没有统一的结论。对于TPMT遗传多态性对硫嘌呤类药物个体化应用的影响有待于多中心大样本的前瞻性研究以证实。     

硫嘌呤甲基转移酶分子机制研究进展

硫嘌呤甲基转移酶（TPMT）在硫嘌呤类药物的体内代谢中起着关键作用，其活性水平与药物效应及毒副作用密切相关。TPMT活性具有遗传多态性和种族差异。TPMT酶活性降低或缺乏与其基因突变密切相关。对TPMT遗传多态性分子基础的研究具有重要意义。本文综述有关TPMT基因表达调控和TPMT基因突变的分子机制的研究进展。     

中国新疆维吾尔族硫嘌呤甲基转移酶基因突变研究

目的 研究硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine S-methyltransferase，TPMT)在新疆维吾尔族中的基因突变频率。方法 用等位基因特异性的PCR方法和限制性片断长度多态性的方法检测4种常见的导致酶活性降低的突变类型：TPMT*2、TPMT*3A、TPMT*3B和TPMT*3C。结果 在160名维吾尔族中发现了1例TPMT*3A(A719G／G460A)杂合子、5例TPMT*3C(A719G)杂合子，TPMT*3A和TPMT*3C的等位基因频率分别是0．3％和1．6％。结论 维吾尔族总的TPMT突变等位基因频率(1．9％)同中国其他民族相近；TPMT*3C是维吾尔族最主要的突变类型。     

巯基嘌呤甲基转移酶在嘌呤类药物代谢中的作用及其多态性的研究进展

对巯基嘌呤甲基转移酶在巯嘌呤类药物体内代谢过程中的作用、其活性水平与药物活性物质在体内的浓度与药效、药物的毒副作用的关系、酶活性多态性种族差异及基因遗传多态性关系进行综述. 为指导临床合理用药,避免药物不良反应及个体化用药提供参考.     

广东连南汉族和瑶族儿童硫嘌呤甲基转移酶研究

目的本文对硫嘌呤甲基转移酶(Thiopurine S-methyltransferase,TPMT)在广东连南地区健康汉族儿童(n=87)和瑶族儿童(n=1 26)中的活性分布和4种常见TPMT基因突变的等位基因频率进行研究.方法采用高效液相色谱法测定红细胞的TPMT活性;采用等位基因特异性的PCR(allelespecific PCR,ASPCR)方法和限制性片断长度多态性(PCR-restrictionfragmentlength polymorphism,RFLP)的方法检测TPMT*2(G238C)、TPMT*3A(A719G/G460A)、TPMT*3B(G460A)和TPMT*3C(A719G)的等位基因频率.结果健康汉族儿童和瑶族儿童的TPMT活性都呈正态分布,活性的平均值分别为13.01±2.80U.ml-1pRBC和13.54±3.89U.ml-1 pRBC,两者的差异无显著性.在健康汉族儿童中只找到1例TPMT*3C杂合子(该汉族儿童的TPMT活性为12.36U.ml-1 pRBC),没有找到TPMT*2、TPMT*3A和TPMT*3B,汉族儿童总的TPMT基因突变频率是0.6%.在健康瑶族儿童中没有找到这几种突变.结论广东连南地区汉族和瑶族儿童TPMT的活性分布和总的TPMT基因突变频率没有显著性差异.     

中国维吾尔族和哈萨克族人硫嘌呤甲基转移酶活性的分布

目的研究硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)在中国新疆维吾尔族和哈萨克族人中的分布。方法运用改良的RP-HPLC法,测定红细胞中TPMT活性。结果160名维吾尔族成年人TPMT活性呈正态分布,活性均值为(11．57±3．52)U·mL-1 RBC (3．35-29．07 U·mL-1RBC)。327名哈萨克族成年人的TPMT活性呈正态分布,TPMT活性均值(12．27±3．42)U·mL-1 RBC (3．29-24．67 U·mL-1RBC)。在中国新疆维吾尔族和哈萨克族中没有发现酶缺乏者,TPMT活性不存在性别差异。维吾尔族、哈萨克族成年人与汉族TPMT活性相比较,两者差异无统计学意义。结论中国新疆维吾尔族和哈萨克族人TPMT活性呈正态分布。     

硫嘌呤类药物遗传药理学研究进展

临床上硫嘌呤类药物应用广泛,但在此类药物的使用过程中,血液毒性、肝脏毒性、胰腺炎等不良反应的发生率较高。研究发现,硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine S-methyltransferase,TPMT)的活性和遗传多态性,以及三磷酸肌苷焦磷酸酶(inosine triphosphate pyrophosphatase,ITPA)的遗传多态性与硫嘌呤类药物不良反应的发生密切相关。本文综述了TPMT活性和基因多态性,以及ITPA基因多态性的研究进展。     

中国哈萨克族人硫嘌呤甲基转移酶活性分布和基因多态性

目的 研究硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)在中国哈萨克族的活性分布和4 种常见TPMT基因突变等位基因频率。方法 用高效液相色谱法测定TPMT 活性;用等位基因特异性聚合酶链反应检测TPMT*2;用限制性片段长度多态性 检测TPMT*3A、TPMT*3B和TPMT*3C的等位基因频率。结果 哈萨克族T PMT活性呈正态分布,活性的均值为(12．27±3．42)U·mL-1 Rbc,其中发现6 例TPMT*3C杂合子和2例TPMT*3A杂合子,总TPMT基因突变频率是1．2％。 结论 中国哈萨克族TPMT活性呈正态分布,总TPMT基因突变频率同汉族相 比差异无显著性。     

影响硫嘌呤类药物个体化应用的相关转运体遗传多态性的研究状况

硫嘌呤类药物作为一类常用的免疫抑制剂,其疗效和不良反应的差异与转运体的基因多态性的关系已成为研究热点,本文收集并分析了相关转运体的遗传多态性与硫嘌呤类药物疗效和不良反应的相关性报道,以期为临床硫嘌呤类药物个体化应用提供一定参考。     

影响硫嘌呤类药物个体化应用的主要代谢酶遗传多态性的研究进展

硫嘌呤类药物作为一类常用的免疫抑制药,广泛应用于临床。然而其治疗窗窄,药动学个体差异大一直是困扰该类药物临床应用的难题。许多因素可影响硫嘌呤类药物的代谢及药理效应,但其代谢过程中涉及的代谢酶所具有的遗传药理学方面的个体差异被认为是主要因素。近年来各主要代谢酶的遗传多态性对硫嘌呤类药物药动学和药效学的影响也逐渐成为了关注的焦点。因此本文就相关代谢酶(TPMT,ITPA,GST,HPRT,XO,IMPDH及GMPS)的遗传多态性与硫嘌呤类药物疗效和不良反应的相关性进行综述,以期为临床硫嘌呤类药物个体化应用提供指导。     

肾移植受者硫嘌呤甲基转移酶基因多态性与硫唑嘌呤不良反应关系的研究

目的:探讨硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine S-methyltransferase,TPMT)表型和基因多态性与硫唑嘌呤(AZA)所致不良反应的关系。方法:应用高效液相色谱法(HPLC)测定150例肾移植患者红细胞TPMT活性,采用等位基因特异性的PCR和限制性片断长度多态性的方法检测TPMT*2、*3A、*3B和*3C四种基因型,分析TPMT活性和基因多态性与AZA所致不良反应的关系。结果:30例(20%)患者由于发生了不良反应而停用AZA或减少了AZA的用量,其中12例患者发生了血液毒性,另外18例发生了肝脏毒性。将未发生不良反应的患者作为对照组,其红细胞TPMT活性范围为16.63~68.25 U,平均为(38.43±11.59)U。发生了血液毒性的患者红细胞TPMT活性平均为(24.16±9.84)U,明显低于未发生不良反应的患者(P=0.0003)。另外18例发生了肝脏毒性的患者TPMT活性离散度较大,与对照组比较差异无统计学意义(P=0.145)。本研究未发现TPMT活性缺乏者。共发现7例(4.7%)TPMT*3C杂合子患者,这7例患者均为TPMT中等活性13.04~19.21 U,平均为(...     

环孢素、硝苯地平等5种肾移植受者常用药物对人体红细胞硫嘌呤甲基转移酶活性的影响

目的:研究肾移植受者中常与硫唑嘌呤(AZA)同时服用的药物如环孢素、泼尼松的活性代谢物氢化可的松、硝苯地平、卡托普利以及别嘌呤醇对硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性的影响。方法:应用高效液相色谱法(HPLC)测定健康受试者红细胞TPMT活性,其中中等活性和正常活性受试者各8例,计算药物各浓度对应的平均TPMT活性抑制率及有抑制作用药物的平均IC_(50)值。结果:环孢素、氢化可的松、卡托普利以及别嘌呤醇对TPMT活性抑制作用较弱。硝苯地平能明显抑制TPMT的活性,中等活性组的平均IC_(50)值为(24±17)μg/mL,正常活性组的平均,IC_(50)值为(12±10)μg/mL。结论:硝苯地平能明显抑制TPMT活性,当硝笨地平与嘌呤类药物同时服用时,应警惕可能发生不良相互作用。     

HPLC法检测人红细胞中巯嘌呤甲基转移酶的活性

目的:建立一种测定巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性的高效液相色谱法。方法:以S-甲基-14C-腺苷-甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体,6-硫鸟嘌呤(6-TG)作为反应底物,TPMT催化6-TG生成6-甲基硫鸟嘌呤(6-MTG),高氯酸沉淀后进样分析。采用Hypersil BDS C18(250mm×4.6 mm,5μm)柱;流动相为磷酸钾缓冲液-乙腈-四氢呋喃(94:4:2),流速1ml·min-1;荧光检测器激发波长:315 nm,发射波长:390 nm。结果:标准曲线方程为Y=0.093 3X-0.002 2,r=0.999 3,线性范围为7.5～300.0 pmol。日内RSD小于5.0%,日间RSD小于13.0%,高、中、低浓度的平均方法回收率分别为94.42%,99.90%,103.94%,平均提取回收率分别为94.42%,81.85%,91.62%。结论:该法操作简便,回收率稳定,灵敏度高,适于临床常规检测。     

巯嘌呤甲基转移酶基因多态性联合硫鸟嘌呤核苷酸血药浓度监测在硫唑嘌呤治疗炎症性肠病治疗中的临床应用

目的：探讨巯嘌呤甲基转移酶（TPMT）基因多态性联合红细胞中硫鸟嘌呤核苷酸（6-TGNs）血药浓度监测在硫唑嘌呤治疗炎症性肠病中的临床应用,为实施个体化治疗方案提供参考。方法：选取临床确诊为炎症性肠病的患者,采用PCR扩增、焦磷酸基因测序法技术检测其TPMT基因第7外显子G460A和第10外显子A719G的2个多态性位点;应用高效液相色谱法测定患者红细胞（RBC）中6-TGNs浓度。结果：15例患者TPMT＊3基因均为野生型,未发现突变;首次检测的6-TGNs浓度为 147.31～875.26 pmol/L（8×10^8）RBC,服用相同剂量的患者个体差异较大。结论：TPMT基因多态性检测有助于预测硫唑嘌呤治疗炎症性肠病的骨髓毒副作用,6 TGNs浓度测定有助于药物剂量的调整,两者联合应用可为接受硫唑嘌呤治疗的炎症性肠病患者的个体化治疗提供参考依据。     

反相高效液相色谱法测定红细胞中巯嘌呤甲基转移酶的活性

目的:研究中国健康人群和急性白血病患者红细胞内巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性。方法:测定TPMT活性的基础是,应用非放射性S-腺苷蛋氨酸(SAM)作为甲基供体,6-MP经TPMT甲基化为6-MeMP。用反相高效液相色谱技术(RP-HPLC),样品经乙酸苯汞加合物(PMA)提取6-MeMP。色谱柱为Dopond C18(10 μm,4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-水(20:80),流速1.5 mL·min～1,检测波长303nm。结果:6-巯基嘌呤(6-MP)和甲基巯嘌呤(6-MeMP)的保留时间分别为3.9 min和5.2 min,日内和日间RSD均小于2％,重复性好。结论:本方法简便、快速、准确,适用于巯嘌呤类药物细胞内药理学研究。     

TPMT基因多态性与儿童ALL的6-MP个体化治疗

6-巯基嘌呤(6-MP)是儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)维持治疗阶段的关键化疗药物.巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)作为巯嘌呤类药物在体内代谢过程中的关键酶之一,其基因多态性及酶活性与急性淋巴细胞白血病患儿对6-巯基嘌呤的剂量耐受性有一定的相关性,从而进一步影响急性淋巴细胞白血病患儿服用6-巯基嘌呤后不良反应的发生程度和远期预后.此外,巯嘌呤甲基转移酶基因型也可能与继发恶性肿瘤有关.因此,检测巯嘌呤甲基转移酶活性或基因型,有助于预测巯嘌呤类药物不良反应的严重程度,及时调整给药剂量,制订安全合理的个体化用药方案.     

次黄苷三磷酸焦磷酸酶遗传多态性对硫嘌呤类药物疗效和不良反应影响的研究进展

硫嘌呤类药物作为一类常用的免疫抑制剂,广泛应用于临床.然而其治疗窗窄,药动学个体差异大一直是困扰该类药物临床应用的难题.尽管硫嘌呤甲基转移酶（thiopurine methyltransferase,TPMT）基因多态性被认为是影响硫嘌呤类药物药动学的主要遗传因素,但研究结论并不统一.而最近的一些研究将焦点集中到了次黄苷三磷酸焦磷酸酶（inosine triphosphate pyrophosphatase,ITPA）的遗传多态性上.因此,本文就ITPA遗传多态性对硫嘌呤类药物疗效和毒性影响的研究进展作一综述,以期为临床个体化应用硫嘌呤类药物提供理论指导.     

成人急性淋巴细胞白血病患者巯嘌呤甲基转移酶活性研究

目的应用简易的HPLC方法检测血红细胞中巯嘌呤甲基转移酶（TPMT）的活性,并研究健康汉族成年人群和成人急性淋巴细胞白血病（ALL）患者TPMT活性分布。方法以非放射性S-腺苷-L-甲硫氨酸（SAM）为甲基供体,完成6-巯基嘌呤（6-MP）向6-甲基巯基嘌呤（6-MeMP）的甲基化转变。6-MeMP经乙酸苯汞混和物抽提,采用高效液相色谱法分析。TPMT的活性用37℃时每小时每毫升红细胞生成多少纳摩尔的6-MeMP来表示。结果健康汉族成人和成人ALL患者TPMT活性均呈正态分布,男性和女性相比,TPMT活性没有显著性差异。健康汉族成人与成人ALL患者服用6-MP前TPMT活性相比没有显著性差异。而TPMT＊3C杂合子TPMT平均活性低于野生型TPMT基因（TPMT＊1）纯合子,差异有显著性。结论TPMT活性在健康汉族成人和成人ALL患者均呈正态分布,TPMT基因型和表型存在相关性,TPMT＊3C杂合子平均酶活性低于野生型TPMT基因（TPMT＊1）纯合子。在开始6-MP等药物维持治疗前检测TPMT活性对成人ALL患者有益。