腺病毒载体在肿瘤靶向性治疗中应用的研究进展

肿瘤已经成为威胁人类健康和生命的重大疾病之一，有效地治疗肿瘤是当前医学研究的迫切任务。基因治疗在肿瘤治疗中的应用正在快速发展。肿瘤基因治疗常用的病毒载体有腺病毒载体、逆转录病毒载体及腺病毒相关病毒载体。腺病毒在体内能有效地感染肿瘤细胞，已经在肿瘤的基因治疗研究与实践中显示出了较好的应用前景，本文对其研究进展综述如下。[第一段]     

重组腺病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用

腺病毒载体转导目的基因具有效率高、滴度高、在体内不与宿主细胞染色体整合等优点,使腺病毒载体在肿瘤的基因治疗研究与实践方面得以广泛运用。本文就三代腺病毒载体的构建与改进,腺病毒载体介导的肿瘤基因治疗策略及其应用进展进行了简要地综述,并讨论了在肿瘤基因治疗中仍需解决的安全问题和面临的挑战。     

含CD基因的腺病毒载体制备及体外抑瘤效果观察

目的：制备含胞嘧啶转氨酶（CD）基因的重组腺病毒（Ad-CD)并进行体外肿瘤的自杀基因治疗。方法：构建含CD或LacZ基因的重组腺病毒载体。在293细胞内重组包装后,体外感染小鼠结肠癌细胞株C26,并给予不同浓度的前药氟胞嘧啶（5-FC）进行肿瘤杀伤效果观察。结果：重组腺病毒载体构建成功。用制备的Ad-CD液感染C26细胞,并予以不同浓度5-FC后,肿瘤细胞生长受不同程度抑制,而对照组细胞和原位转LacZ基因的C26细胞的生长未出现明显的变化。结论：应用腺病毒载体转CD基因进行体外肿瘤治疗效果明显,为自杀基因应用于体内结肠癌的基因治疗研究奠定基础。     

腺病毒载体介导的CD自杀基因体外抑瘤效果观察

目的:构建含CD基因的腺病毒载体pAd-CD, 进行肿瘤的自杀基因治疗.方法:分别构建了含CD基因和LacZ基因的重组病毒质粒载体,同质粒pJM17共转染293细胞同源重组后包装为感染性腺病毒颗粒,经滴度测定后,体外分别感染小鼠前胃癌肿瘤细胞MFC.结果:感染Ad-LacZ的细胞可被X-gal染成蓝色,感染Ad-CD的细胞予前药5-FC可见肿瘤细胞杀伤效果明显.结论:腺病毒载体可有效地转CD和LacZ基因进入肿瘤细胞,C D基因作为自杀基因进行体外肿瘤治疗效果明显,本实验构建的新载体及结果为下一步应用于体内肿瘤基因治疗研究提供了基础.     

腺病毒及其研究进展

本文从腺病毒的分类、结构和受体等方面对腺病毒进行了介绍,同时对腺病毒的感染和致病性做了综述,并进一步介绍了抗腺病毒治疗研究进展和腺病毒载体的应用.对腺病毒多方面进行较全面的了解,有助于促进抗腺病毒药物的研发和加强腺病毒载体在基因治疗中得到更好的应用.     

肿瘤基因治疗的病毒载体研究进展

肿瘤基因治疗是通过载体将遗传物质转移入宿主细胞,使肿瘤细胞凋亡,包括原发瘤和转移瘤。目前,应用于肿瘤基因治疗的载体分为病毒载体和非病毒载体,病毒载体的转移效率高,其中腺病毒载体、腺病毒相关病毒载体、反转录病毒载体和疱疹病毒载体等已广泛应用于基础研究和临床试验。     

人B7-1基因的cDNA克隆及其重组腺病毒载体制备

目的：构建并制备含人B7-1基因的重组腺病毒（Ad-B7-1)载体,为后续的肿瘤基因治疗研究提供实验基础。方法：应用逆转录-套式PCR方法从人骨髓细胞中克隆B7-1的cDNA后,将其克隆至小片段腺病毒载体pCI′中,后与pHBG10在293细胞内重组包装产生腺病毒,感染SGC7901细胞。结果：成功克隆了人B7-1的cDNA并构建Ad-B7-1载体,且经过酶切鉴定和测序验证,感染Ad-B7-1的细胞经PCR鉴定,表明B7-1基因已整合入细胞基因组。结论：本实验构建的腺病毒载体可有效地转B7-1基因进入肿瘤细胞,该结果为下一步应用于体内肿瘤基因治疗研究提供了实验基础。     

腺病毒载体纯化及在肿瘤基因治疗中的应用

腺病毒是一种线性无包膜的双链DNA病毒,用于载体构建的主要是人类2型和5型腺病毒.现在通过对腺病毒的改造,已经成功构建出第一代、第二代、第三代和条件复制型腺病毒载体.随着腺病毒载体在蛋白质表达中的广泛使用,对高产量、高纯度腺病毒载体的需求量逐渐增大,因此近年来在传统纯化腺病毒载体的基础上发展出各种纯化新方法.同时,由于腺病毒载体自身的一些优点,使其在疫苗和肿瘤基因治疗中也得到了较为广泛的应用.     

腺病毒载体的细菌内同源重组系统的建立和初步应用

肿瘤的基因治疗是近年的研究热点。理想的基因治疗应具有目的基因高效性、靶向性转移和可控性表达的特点。目前的关键问题是新型载体的构建。复制缺陷性腺病毒具有感染细胞范围广、滴度高,而且可在细胞周期的任何时段感染的优点,因此被越来越多地应用于基因治疗的研究中。哺乳动物包装细胞293或911内的同源重组是产生重组腺病毒的传统方法,但繁琐、低效,限制了腺病毒载体的更广泛应用。现在已经有一种新的载体系统[1],利用了细菌中高效的同源重组机制代替哺乳动物细胞,同时利用在同源重组时整合入腺病毒骨架中的绿色荧光蛋白(GFP)可以直接…     

腺病毒载本的细菌内同源重组系统的建立和初步应用

肿瘤的基因治疗是近年的研究热点。理想的基因治疗应具有目的基因高效性、靶向性转 移和可控性表达的特点。目前的关键问题是新型载体的构建。复制缺陷性腺病毒具有感染细 胞范围广、滴度高,而且可在细胞周期的任何时段感染的优点,因此被越来越多地应用于基 因治疗的研究中。哺乳动物包装细胞293或911内的同源重组是产生重组腺病毒的传统方法, 但繁琐、低效,限制了腺病毒载体的更广泛应用。现在已经有一种新的载体系统［1］ ,利用了细菌中高效的同源重组机制代替哺乳动物细胞,同时利用在同源重组时整合入腺 病毒骨架中的绿色荧光蛋白（GFP）可以直接观察转染与感染的效率,大大方便了腺病毒的 重组与纯化。我们应用该细菌同源重组系统构建了携带GFP的重组腺病毒载体,并在感染后 的Hepa1-6细胞中观察到了GFP的表达,为该系统在基因治疗中的进一步应用提供了实验依 据。