人非小细胞肺癌与外周血淋巴细胞表达ERCC1的相关性研究

目的 探讨切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementation group 1,ERCC1)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer NSCLC)癌组织和外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL)中的表达及其相关性,以期建立临床实用简便的肿瘤学指标.方法 采用间接二步法免疫荧光化学染色检测47例Ⅱ期、Ⅲ期NSCLC患者癌组织和PBL中ERCC1的表达及健康人PBL中ERCC1的表达.结果 ERCCI在癌组织、NSCLC患者PBL和健康人PBL中的表达分别为53.19%(25/47)、48.94%(23/47)和20%(4/20),其中癌组织的ERCC1表达与NSCLC患者PBL的表达呈正相关,20例健康人PBL的ERCC1表达阳性率显著低于NSCLC患者.ERCC1的表达与临床病理类型无关.结论 检测NSCLC患者PBL的ERCC1表达可间接反应癌组织的ERCC1表达状况.     

非小细胞肺癌患者癌组织与外周血淋巴细胞p53蛋白表达相关性研究

目的 探讨p53蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织和外周血淋巴细胞(PBL)中的表达及其相关性,以期建立更为实用简便的化疗敏感性预测指标.方法 采用免疫荧光化学染色法检测49例手术NSCLC患者癌组织和PBL中突变p53蛋白的表达,并以健康人PBL中突变p53蛋白表达作为阴性对照.结果 p53蛋白在癌组织、NSCLC患者PBL和健康人PBL中的表达分别为63.26%(31/49)、59.18%(29/49)和5%(1/20),其中癌组织的p53蛋白表达与NSCLC患者PBL的表达呈正相关,20例健康人PBL中p53蛋白表达阳性率显著低于NSCLC患者(P＜0.01).p53的表达在NSCLC不同临床病理类型及分期间差异无统计学意义(P>0.05),而在有无淋巴结转移患者间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 检测NSCLC患者PBL中p53蛋白表达可间接反应癌组织的p53蛋白表达状况.     

非小细胞肺癌LRP、c-erbB-2蛋白表达与辅助化疗疗效相关性的研究

目的:研究非小细胞肺癌肺耐药相关蛋白(LRP)、c-erbB-2蛋白表达与辅助化疗疗效之间的相关性。方法:收集61例非小细胞肺癌的病理标本,通过免疫组化检测LRP、c-erbB-2的表达,61例患者均接受4～6个周期化疗,其中19例采用MVP(MMC加VDS加DDP)方案,17例采用NP(NVB加DDP)方案,25例采用TP(TXL加DDP)方案,对疗效与免疫组化结果进行统计学处理。结果:化疗前LRP表达阳性者的化疗有效率为35.29%,与阴性者(为77.78%)相比具有显著的统计学差异(P<0.05)。化疗前c-erbB-2蛋白表达阳性者的化疗有效率为38.93%,与阴性者(为62.50%)相比也具有显著的统计学差异(P<0.05)。结论:在肺癌的辅助化疗中,LRP、c-erbB-2蛋白的表达与疗效有着重要的关联,在化疗之前对LRP及c-erbB-2蛋白的检测有助于预测化疗疗效及预后。     

晚期非小细胞肺癌组织中 LRP 表达与铂类耐药性及预后的相关性研究

目的探讨晚期非小细胞肺癌（NSCLC）组织中肺耐药蛋白（LRP）的表达与铂类化疗耐药及其预后的关系。方法采用免疫组织化学SP法对89例晚期NSCLC碏块进行免疫组织化学染色,检测LRP的表达水平,并分析其与患者的性别、年龄、吸烟史、组织分型、分化程度、远处转移、淋巴结转移及含铂化疗方案疗效的关系。结果在NSCLC患者组织中,LRP的阳性表达率为77.5％,与年龄、吸烟史、组织分型、分化程度和淋巴结转移无关（ P均＞0.05）,而LRP表达阳性组和阴性组的含铂类方案化疗疗效、有效率、总反应率、无进展生存时间和总生存时间比较差异无统计学意义（ P均＞0.05）。女性患者肿瘤组织LRP表达阳性率（95.5％）高于男性患者（71.6％）（P＝0.043）;在远处转移的患者中,LPR阳性表达率为87.3％,而无远处转移的患者LRP阳性表达率为61.8％,差异有统计学意义（ P＝0.005）。结论 LRP基因的阳性表达与远处转移有关,且LRP阳性表达患者无疾病进展时间及总生存时间均低于LRP阴性表达患者,提示其可能作为判断预后指标。     

LRP在非小细胞肺癌中的表达及其临床相关性研究

目的:探讨肺耐药相关蛋白(lungresistance-relatedprotein,LRP)在非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)中的表达及其临床相关性。方法:用SP免疫组化方法检测62例术前均未进行化疗及放疗的NSCLC组织中LRP的表达。同时,用原位杂交方法检测21例新鲜肺癌组织中LRPmRNA的表达。结果:在NSCLC中LRP蛋白及mRNA表达的阳性率分别为75.8%(47/62例);61.9%(13/21例)。LRP蛋白表达与LRPmRNA的表达呈一致性(P<0.05)。LRP蛋白表达与分化程度相关(P<0.05)。结论:LRP与NSCLC的耐药明显相关,是一个有效判断预后的敏感指标。     

非小细胞肺癌患者治疗前后外周血淋巴细胞绝对计数的表达差异及与CEA、SCC的相关性

目的 探讨中晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）患者化疗前后外周血中CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、NK淋巴细胞绝对计数和CD4⁺/CD8⁺水平的变化及其与肿瘤标志物癌胚抗原（carcinoembryonic antigen, CEA）、鳞状上皮细胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen, SCC）的相关性。方法 选择收治的未经治疗的确诊为NSCLC的患者82例作为病例组,病例组分为培美曲塞组和吉西他滨组,另选取同期60例健康人作为对照组。对比分析各组CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、NK淋巴细胞绝对计数及CD4⁺/CD8⁺水平的变化,分析病例组化疗前后各指标与肿瘤标志物CEA、SCC的相关性。结果 病例组化疗前和化疗后的CD3⁺、CD4⁺淋巴细胞的绝...     

非小细胞肺癌患者肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白的表达及其临床意义

目的 检测肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况.并探讨其临床意义.方法 采用免疫组化方法对术前未经化疗、术后病理诊断明确的92例肺癌组织标本并以20常肺组织作为对照进行了多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）表达的检测.并对病理类型、分化程度、临床分期、预后等进行统计学分析.结果 （1）92例肺癌组织中MRP、LRP及其两者共表达的阳性率分别为53%、52%和45%,均显著高于正常肺组织中的表达水平（P〈0.05）.（2）MRP、LRP蛋白表达在不同病理类型、不同分化程度之间具有统计学差异（P〈0.05）,而在不同年龄、性别、临床分期、淋巴结转移情况等均无明显差异.另外,MRP、LRP蛋白的表达与患者预后密切相关,且随着耐药蛋白表达种类的增加,生存曲线水平下降.结论 NSCLC中MRP、LRP的表达可能在肺癌的原发性多药耐药中起不同程度的作用,检测NSCLC中MRP、LRP在判断患者预后.指导肿瘤化疗方面具有重要的临床意义.     

肺癌患者化疗前后外周血淋巴细胞MRP1的表达

目的:探讨肺癌患者化疗前后外周血淋巴细胞(PBL)多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达,寻找检测肺癌多药耐药的新途径。方法:应用流式细胞免疫学方法,检测10 例健康人和30 例肺癌患者化疗前后PBL的MRP1表达,并比较了肺癌患者化疗前后PBL的MRP1表达;根据化疗疗效评价标准将肺癌患者分为有效组和无效组,比较了两组患者化疗前后PBL的MRP1表达。结果:健康人PBL的MRP1表达为(2.01±0.68)%;肺癌患者化疗前与化疗后PBL的MRP1表达相比差异有统计学意义( t=-4.051, P<0.05);有效组化疗前后PBL的MRP1表达差值与无效组的比较差异无统计学意义( t=-1.145, P>0.05)。结论:(1)流式细胞免疫法检测PBL的MRP1表达具有简便、可操作性;(2)化疗后肺癌患者PBL的MRP1表达与化疗前相比有增高趋势,提示存在化疗后的继发耐药;(3)PBL的MRP1表达与化疗疗效无关,尚不能预测化疗疗效。     

非小细胞肺癌外周血淋巴细胞CD54、LRP的表达及其意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSELE)外周血淋巴细胞CD54和LRP表达的意义.方法用流式细胞术检测初治50例非小细胞肺癌患者治疗前后外周血淋巴细胞CD54及LRP的表达,对照组为20例健康献血者.结果 CD54在Ⅳ期NSELE表达显著高于Ⅲ期(P<0.01).在NC PD患者中CD54及LRP的表达显著高于CR PR患者(P<0.01).治疗前CD54的表达显著高于治疗后(P<0.01).CD54及LRP的表达与肿瘤直径、病理类型、分化程度等无显著关系(P>0.05);LRP在临床分期、治疗前后的表达,差异无显著性(P>0.05).结论 CD54及LRP表达均与近期疗效有效率呈负相关,可作为非小细胞肺癌预后评估的指标.     

非小细胞肺癌患者外周血中肺表面活性蛋白CmRNA的表达及临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中肺表面活性蛋白C mRNA(SP-C mRNA)在病理确诊后的表达及其意义。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术来检测44例非小细胞肺癌患者外周血中SP-C mRNA的表达,并以20例肺良性病变患者和10名健康人作为对照。结果:44例肺癌患者外周血SP-C mRNA表达阳性率为59.1%;20例肺良性病变患者和10名健康人的外周血中无SP-C mRNA表达。结论:通过检测非小细胞肺癌患者外周血,SP-C mRNA可能是良好的微转移分子标志物。     

非小细胞肺癌患者纵隔淋巴结和外周血中MUC1基因的检测及意义

目的探讨非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)患者纵隔淋巴结和外周血中黏蛋白-1基因(MUC1mRNA)作为肺癌微转移标志的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,首先检测30例肺良性病变患者的外周血及其67枚纵隔淋巴结,以及30枚病理报告为NSCLC的纵隔淋巴结的MUC1mRNA,以证实RT-PCR技术的敏感度和特异度;然后检测158例NSCLC患者的外周血和97例手术患者的病理报告阴性的296枚纵隔淋巴结的MUC1mRNA的表达,以了解和比较NSCLC患者的外周血和纵隔淋巴结肺癌微转移情况。结果在30例肺良性病变患者外周血中未检测到MUC1mRNA,158例NSCLC患者有49例在外周血中检测到MUC1mRNA,阳性率为31.0%,两者差异显著(P<0.01);经χ2检验,Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者的外周血中MUC1mRNA阳性率无明显差异(P>0.05),Ⅰ期或Ⅱ期与Ⅲ期间差异显著(P<0.05),与Ⅳ期间差异明显(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ期间差异显著(P<0.05)。对Ⅲa期以下的97例手术患者,术中所取的296枚病理报告为阴性的淋巴结进行MUC1mRNA检测,结果显示112枚为MUC1mRNA阳性,阳性率37.8%;30例肺良性病变的67枚淋巴结中有1枚MUC1mRNA阳性,假阳性率为1.5%,与前者比较阳性率的差异有统计学意义(P<0.01)。结论用RT-PCR法对患者淋巴结和外周血中MUC1mRNA的检测具有较高的敏感度和特异度,可作为肺癌微转移的一个诊断标准,同时与预后相关。     

CEA mRNA及CK19mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及其与临床病理参数的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中癌胚抗原mRNA(CEA mRNA)及细胞角蛋白19 mRNA(CK19mRNA)的表达及与临床病理参数(病理类型、分期、细胞分化程度、淋巴结转移)之间的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测48例NSCLC患者、15例肺良性疾病(BLD)患者和10例健康人外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA的表达。结果 NSCLC患者外周血中CEAmRNA及CK19 mRNA的阳性表达率分别为58.33%(28/48)、68.75%(33/48),在BLD患者中的阳性表达率分别为6.67%(1/15)、13.33%(2/15),而健康对照组均无表达,差异有统计学意义(P<0.05)。其中Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA阳性表达率分别为27.78%(5/18)、83.33%(10/12)及44.44%(8/18)、75%(9/12)。外周血CEA mRNA及CK19 mRNA的阳性表达与临床分期及淋巴结转移密切相关,而与病理类型及分化程度无关。结论 NSCLC患者早期(Ⅰ、Ⅱ期)外周血中也有微转移的存在,说明微转移可能是NSCLC预后不良的原因之一。CEAmRNA与CK19 mRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物,联合检测有助于提高检测的准确度。     

非小细胞肺癌患者口腔粘膜细胞中MT-1A、2A、3、4mRNA的表达及意义

目的检测金属硫蛋白（MT）1A、2A、3、4 mRNA在非小细胞肺癌患者口腔粘膜的表达情况,探讨其作为肺癌分子生物学标志物的可行性。方法分别选取30例非小细胞肺癌及30例肺良性病变患者作为实验组,将其分为鳞癌组、腺癌组、结核球组及炎性假瘤组,30例非小细胞肺癌根据转移情况分为：转移组和未转移组,12例肺裂伤患者作为正常对照组,利用RT-PCR方法检测所选患者口腔粘膜细胞中MT-1A、2A、3、4 mRNA的表达情况。结果在口腔粘膜细胞中,与正常对照组比较,各肿瘤组MT-1A、2A、3、4 mRNA在口腔粘膜细胞中的表达均上调,除鳞癌组MT-4 mRNA外,其余各组差异均有统计学意义：结核球组MT-2A、4mRNA及炎性假瘤组MT-2AmRNA〈0.05,其他〈0.01;与鳞癌组相比,结核球组MT-2A mRNA表达上调（〈0.05）;其余组表达变化无统计学意义。结论口腔粘膜细胞中MT-2A mRNA有望成为鳞状细胞肺癌与结核球的辅助鉴别诊断标志物之一。     

非小细胞肺癌组织Bcl-2蛋白的表达和多药耐药检测

目的:观察非小细胞肺癌组织(NSCLC)中Bcl-2蛋白的表达及其化疗耐药性.方法:应用MTT法,观测91例未经化疗的NSCLC组织对环磷酰胺、阿霉素、顺铂 氟尿嘧啶3种用药方案的药物敏感性.用免疫组织化学方法检测NSCLC组织中Bcl-2蛋白的表达,并将其表达情况与化疗耐药性进行相关分析.结果:91例中53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂 氟尿嘧啶耐药.其中,19例(20.9%)对3种用药均敏感,27例(29.8%)对3种用药均耐药.91例中Bcl-2蛋白总的阳性表达率为52.7%,其表达与组织学类型和分化程度无关(P＞0.05),但与3种化疗用药方案耐药性均有关(P＜0.05).结论:NSCLC存在固有的化疗耐药性,Bcl-2蛋白参与介导了NSCLC化疗耐药的机制.     

Gelsolin蛋白与非小细胞肺癌转移的关系

目的：探讨凝溶胶蛋白（Gelsolin）在预测非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）临床病理特征、癌细胞转移和患者预后中的价值。方法：采用SP免疫组化法检测63例有完整资料的NSCLC患者癌组织标本及63例癌旁组织标本Gelsolin蛋白表达,分析Gelsolin与NSCLC患者临床病理特征和转移、预后的关系。结果：Gelsolin蛋白在63例癌旁组织中均为弱阳性表达,在肺癌细胞中的阳性表达率为31.7%（20/63）;Gelsolin蛋白阳性表达与NSCLC组织学类型、肿瘤分化程度、肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移有关（P〈0.05）;Kaplan-Meier生存分析显示Gelsolin蛋白阳性患者生存率较Gelsolin蛋白弱阳性或阴性患者为低（P〈0.05）;Cox风险比例模型显示淋巴结转移及Gelsolin蛋白阳性可显著增加NSCLC患者的死亡风险（P〈0.05）。结论：Gelsolin基因在NSCLC发生发展中起重要作用,与NSCLC转移及低生存率有关,可作为临床早期发现NSCLC转移及预测预后的指标。     

非小细胞肺癌患者外周血LUNX mRNA表达及临床意义

目的：通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者化疗前后外周血中肺特异性X蛋白（LUNX）mRNA的表达,探讨其对NSCLC微转移的诊断价值。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法,对54例NSCLC患者化疗前后、非肺癌恶性肿瘤患者36例、肺良性疾病患者16例及健康志愿者15例的外周血进行LUNX mRNA检测。结果：54例NSCLC患者化疗前后外周血LUNX mRNA的阳性表达率分别是48.1%（26/54）和25.9%（14/54）,差异比较有统计学意义（P〈0.05）;非肺癌恶性肿瘤患者、肺良性疾病患者及健康志愿者外周血LUNX mRNA的阳性表达率均为0,与NSCLC组比较均有统计学意义（P〈0.01）;LUNX mRNA的阳性表达率在化疗前后均随TNM分期增加而升高（P〈0.05）,与患者年龄、性别、病理类型及分化程度无明显相关性（P〉0.05）;NSCLC外周血LUNX mRNA表达与化疗近期疗效无关（P〉0.05）。结论：LUNX mRNA是一种检测NSCLC外周血微转移较好的特异性标志物;化疗后NSCLC外周血LUNX mRNA的表达比化疗前显著降低,表明有效化疗可消灭NSCLC患者的微转移癌细胞。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变与放射敏感性的相关性

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与非小细胞肺癌(NSCLC)放射敏感性的相关性及可能机制.方法 选取EGFR基因突变的NSCLC细胞株PC-9、H1975和EGFR野生型NSCLC细胞株A549.克隆成型实验检测放射敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测凋亡蛋白和修复蛋白表达.结果 PC-9、H1975细胞放射敏感性明显高于A549细胞,4Gy照射下克隆存活率分别为10.0％、5.5％和44.3％;4 Gy照射后48 h PC-9和H1975细胞凋亡率显著高于A549细胞,分别为18.300％、17.533％和11.733％.A549细胞发生G0/G1期阻滞显著高于PC-9、H1975细胞,4Gy照射后48 h G0/G1期细胞分别为74.480％、70.293％和57.016％.A549细胞在4Gy照射后促凋亡蛋白Bax表达缺失,凋亡蛋白Caspase-3、抗凋亡蛋白Bcl-2、修复蛋白DNA-PKcs在24 h仍有表达.而PC-9、H1975细胞在4Gy照射后Bax、Caspase-3表达增多,Bcl-2不表达,DNA-PKcs表达减少.结论 EGFR 19外显子缺失突变细胞PC-9和21外显子点突变细胞H1975,相对EGFR野生型细胞A549对放射线敏感,其机制与细胞周期G0/G1期阻滞、Bax表达增多、DNA-PKcs、Bcl-2表达降低有关.     

非小细胞肺癌患者外周血Th17和Treg表达的意义

 目的 研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血中辅助性T细胞17(T help cell 17,Th17)与调节性T淋巴细胞(T regular cell,Treg)表达及平衡关系的变化,探讨其在NSCLC发病机制中的作用。方法 应用流式细胞术检测60例NSCLC患者和31例健康对照外周血Th17和Treg的表达及平衡关系的变化。结果  NSCLC患者外周血Th17表达明显高于健康对照组［(3.40%±0.49%) vs. (2.16%±0.39%),P<0.001］,但腺癌与鳞癌组及进展期(Ⅳ期)与局限期(Ⅰ~Ⅲ期)组Th17无明显差异。NSCLC患者外周血Treg表达与健康对照相比也有显著升高［(7.76%±1.58%) vs. (4.40%±1.08%),P<0.001］,并且进展期较局限期组Treg表达明显升高［(8.16%±1.56%) vs. (6.97%±1.35%),P=0.005］。腺癌组与鳞癌组Treg表达无明显差异。NSCLC组Treg/Th17较健康对照组明显增高［(2.36±0.73) vs. (2.05±0.46),P=0.038］,并且进展期较局限期组进一步升高［(2.53±0.78） vs. (2.03±0.51),P=0.012］。结论  NSCLC患者可能存在Treg/Th17的失衡,而Treg/Th17比值的变化也与NSCLC的预后相关。     

Tim3 水平对非小细胞肺癌临床进展及预后的影响

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4+T 细胞表面T 细胞免疫球蛋白黏蛋白分 子3（Tim3）的表达, 及其与NSCLC 临床进展及预后的关系。方法 前瞻性收集2013 年9 月-2014 年9 月 于广西中医药大学附属瑞康医院肿瘤内科诊断的69 例NSCLC 患者作为NSCLC 组，同期进行健康体检的 65 例健康人员作为对照组。应用流式细胞仪检测CD4+T 细胞表面Tim3 表达水平。以NSCLC 组Tim3 水 平的中位数为截点分为Tim3 高表达组和Tim3 低表达组，进而分析CD4+T 细胞Tim3 水平与患者临床病 理特征及预后的关系。结果 与对照组患者比较，NSCLC 组患者外周血CD4+T 细胞表面Tim3 水平升高 （P <0.05）。Tim3 高表达与TNM 分期及淋巴结转移有相关性（P <0.05）。Tim3 低表达患者较高表达患者具 有更长的总生存期（P <0.05）。CD4+T 细胞表面Tim3 高表达是NSCLC 总生存期的独立预后因素（P <0.05）。 结论 外周血CD4+T 细胞Tim3 高表达与NSCLC 生存期相关，其可能是NSCLC 预后的生物指标。