生、炙淫羊藿对肾阳虚小鼠耐寒能力和交配能力研究

目的:比较淫羊藿油炙前后及分别组成二仙汤后对氢化可的松所致肾阳虚模型小鼠耐寒能力和交配能力的影响。方法:采用氢化可的松造成小鼠肾阳虚模型,淫羊藿油炙前后及分别组成二仙汤后的水提浓缩物灌胃,交配实验考察指标为红外摄像记录30min内小鼠的跨骑潜伏期和跨骑次数,耐寒实验考察指标为40min后缺氧、-18℃寒冷条件下的存活时间。结果:与正常组比较,淫羊藿炙品高剂量组能明显提高交配能力(P0.05),二仙汤炙品组皆能明显提高交配能力(P0.05或P0.01),淫羊藿生品中剂量组能明显缩短潜伏期(P0.05);淫羊藿炙品中、高剂量组能明显提高耐寒能力(P0.05或P0.01),二仙汤炙品组中、高剂量皆能明显提高耐寒能力(P0.01)。结论:淫羊藿油炙后能改善肾阳虚小鼠的交配能力和耐寒能力。     

基于体内自组装胶束形成机制探究羊脂油炙淫羊藿对大鼠温肾助阳的增效作用

淫羊藿传统炮制方法为羊脂油炙,具有增强淫羊藿温肾助阳的作用。该文采用腹腔注射氢化可的松法建立大鼠肾阳虚模型,以大鼠体征,血清睾酮、皮质酮含量,组织病理学检查等为评价指标,研究在辅料羊脂油的作用下,淫羊藿总黄酮在体内自组装形成胶束后对肾阳虚大鼠的增效作用。肾阳虚大鼠灌胃淫羊藿总黄酮和总黄酮胶束后,2组大鼠与模型组相比,体征及各项生化指标趋于正常,下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴功能紊乱得到有效改善。实验结果表明,淫羊藿总黄酮及其自组装胶束都具有温肾壮阳的作用,其中以炙淫羊藿增强效果为佳。证明在羊脂油作用下,淫羊藿总黄酮可在体内自组装形成胶束,改善下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴及主要性腺组织睾丸的病理状况,发挥增强淫羊藿温肾助阳的功效,进一步揭示了淫羊藿炮制辅料羊脂油的增效机制。     

淫羊藿炮制前后对正常和肾阳虚小鼠肾上腺V_C水平的影响

目的比较淫羊藿炮制前后降低正常和肾阳虚小鼠肾上腺维生素C(VC)的作用。方法采用氢化可的松建立肾阳虚模型,比较淫羊藿炮制前后对正常和肾阳虚小鼠肾上腺VC水平的影响。结果淫羊藿生品对正常小鼠未表现出显著的降低肾上腺VC水平作用,对肾阳虚小鼠仅在高剂量(3.33 g/kg)时有降低肾上腺VC水平的作用(P<0.05);淫羊藿羊脂油制品对正常小鼠在高剂量(3.33 g/kg)时表现降低肾上腺VC水平的作用(P<0.05),对肾阳虚小鼠在中剂量(1.67 g/kg)表现出降低肾上腺VC水平的作用(P<0.05),在高剂量(3.33 g/kg)时表现出显著的降低肾上腺VC水平的作用(P<0.01)。结论淫羊藿经过羊脂油炮制后其降低肾上腺VC水平作用不仅起效剂量降低,且作用强于生品。     

比较以不同品质的羊脂油炙淫羊藿的温肾阳作用

目的: 对比以不同品质的羊脂油炙淫羊藿对肾阳虚证小鼠的温肾阳作用。方法: 采用肌肉注射(im)大剂量氢化可的松建立肾阳虚证小鼠模型。以生品淫羊藿和不同品种(山羊、绵羊)、不同性别(公、母绵羊)、不同部位(绵羊肚子、尾巴油)的6种羊脂油炙淫羊藿为供试品以淫羊藿总黄酮为阳性对照,加设阴性和模型对照。造模同时给药,其中阴性和模型对照组小鼠ig等体积的生理盐水(N.S),阳性对照组小鼠ig淫羊藿总黄酮提取物0.46 g·kg^-1(含淫羊藿总黄酮0.23 g·kg^-1),各供试品组小鼠ig剂量相当于生药18 g·kg^-1,ig容量均为15 mL·kg^-1,1次·d^-1,连续9 d。以肾阳虚小鼠症状体征(体重、体表温度、自主活动次数),动物抓力、凝血时间,血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量为指标,考察各供试品对肾阳虚证小鼠的影响。结果: 与阴性对照组比较,模型对照组小鼠体重、体表温度、自主活动、血清SOD 含量显著下降,MDA含量升高,差异均有显著性(均P<0.01),此外,抓力和凝血时间亦呈降低趋势,提示造模是成功的。与模型对照组比较,各供试品明显延缓或抑制小鼠体重下降(惟山羊油炙淫羊藿对体重减轻的抑制作用不明显),提高小鼠体表温度,增加小鼠自主活动次数,差异均有显著性(P<0.01或P<0.05);各供试品均可提高小鼠血清SOD水平、降低MDA含量,其中,以山羊油、绵羊油、肚子油、尾巴油炙淫羊藿作用显著(P<0.01或P<0.05);各供试药组小鼠抓力呈增强趋势,但无统计学显著性;除绵羊油炙淫羊藿具有延长模型小鼠凝血时间的作用趋势外,其余各组未见明显影响。与生品比,6种不同品质的羊脂油炙淫羊藿均可不同程度地改善肾阳虚证(如体重下降、自主活动减少、抓力下降)的虚弱状态,差异多具有显著性;而各炙品之间在温肾阳作用上有一定差异,但是差异多不具有显著性。结论: 炙淫羊藿炮制品温肾阳作用优于生品淫羊藿;不同品质的羊脂油对炙淫羊藿的温肾阳药效有一定影响,但差异多不具有显著性。     

生淫羊藿与炙淫羊藿对肾阳虚证水肿模型大鼠的影响

目的:研究生品与炮制后的淫羊藿对肾阳虚水肿模型大鼠的作用,为阐明炮制前后淫羊藿治疗肾阳虚水肿的作用机制。方法:用氢化可的松联合盐酸多柔比星复制肾阳虚水肿大鼠模型,即造模第1,8天分别尾静脉注射盐酸多柔比星(3. 5 mg·kg-1),与此同时,连续14 d腹腔注射强化可的松注射液(3. 75 mg·kg-1·d-1)进行造模,造模结束后将造模成功的大鼠分为模型组,生淫羊藿组(204. 86 mg·kg-1),炙淫羊藿组(204. 86 mg·kg-1),同时设立正常组,各组大鼠分别给予相应药物(10 m L·kg-1),正常组和模型组给予同体积蒸馏水,连续灌胃14 d。给药结束后,大鼠代谢笼法测24 h尿量,采用紫外分光光度法测定尿液中尿蛋白的含量;血清中指标的测定,采用全自动生化分析仪测血浆白蛋白(ALB),血清总蛋白(TP),血清肌酐(SCr),血清尿素氮(BUN)含量;采用酶联免疫测定(ELISA)检测环磷酸腺苷(c AMP),环磷酸鸟苷(c GMP),三碘甲状腺原氨酸(T3),甲状腺素(T4),雌二醇(E2),睾酮(T)指标含量,取肾脏适量做苏木素-伊红(HE)染色病理切片。结果:与正常组比较,模型组大鼠从外观指标,生化指标,病理切片指标上均证明模型组大鼠处于肾阳虚水肿状态(P 0. 05,P 0. 01);与模型组比较,生淫羊藿给药组与炙淫羊藿给药组对肾阳虚水肿的外观指标与病理切片指标均有回调作用,且在生化指标上,生、炙淫羊藿给药组均能回调尿量,尿蛋白,SCr,BUN,c AMP/c GMP,E2,T指标(P 0. 05,P 0. 01),但是回调强度有所不同。生淫羊藿给药组极显著性回调尿量,尿蛋白,SCr,BUN(P 0. 01);炙淫羊藿给药组极显著性回调c AMP/c GMP,E2,T(P 0. 01)。此外,生淫羊藿给药组还可以回调ALB,TP(P 0. 05,P 0. 01),而炙淫羊藿给药组对这2个指标没有回调作用,炙淫羊藿给药组可以回调T3,T4,肛温(P 0. 05,P 0. 01),而生淫羊藿给药组对这2个指标没有回调作用。结论:生淫羊藿与炙淫羊藿给药组均可以治疗肾阳虚水肿,机制可能与改善阿霉素所致的肾小球足细胞损伤有关。生淫羊藿与炙淫羊藿治疗肾阳虚水肿侧重点有所不同,生淫羊藿性寒,更侧重于加强肾阳虚水肿大鼠的肾脏排泄功能来治疗肾阳虚水肿。炙淫羊藿经羊油炮制后产生了淫羊藿苷等物质,药性由寒转温,偏重改善肾阳虚水肿大鼠肾阳虚状态来治疗肾阳虚水肿。     

生、炙品淫羊藿不同溶剂提取物对前列腺增生小鼠干预作用的比较

目的比较淫羊藿生品和炙品的不同溶剂提取物对良性前列腺增生(BHP)小鼠模型的治疗作用。方法测定灌服淫羊藿不同提取物及羊脂油后BHP小鼠的前列腺系数,制作前列腺病理切片进行观察。同时测定不同提取物中淫羊藿苷的含有量,探究其与疗效的关系。结果与模型组相比,淫羊藿炙品水提物可显著降低前列腺增生小鼠的前列腺系数,而淫羊藿生品50%和75%乙醇提取物及羊脂油可显著增加前列腺增生小鼠的前列腺系数。病理切片显示,与模型组相比,生品水提取物和炙品水提取物可使腺上皮乳头状突起明显减少,腺上皮细胞层明显变薄;其他用药组与模型组相比无明显差异。含有量测定结果显示,淫羊藿生品水提取物中淫羊藿苷的含有量较高;淫羊藿炙品水及50%、75%乙醇提取物中的淫羊藿苷含有量相近,95%乙醇提取物中含有量较低。结论炙淫羊藿水提取物可显著降低前列腺增生小鼠模型的前列腺系数,淫羊藿苷可能为其活性成分之一。同时,羊脂油可促进小鼠前列腺增生。     

二仙汤雌激素样作用的实验研究

目的通过不同的实验方法来确定二仙汤及其拆方中是否在ICR小鼠体内有雌激素样作用。方法采用子宫增重实验、ELISA实验法，通过对幼龄小鼠子宫湿重和血清中相关激素的影响，观测是否具有雌激素的作用。结果子宫增重实验中，淫羊藿组和茅二组可使动物子宫系数明显升高。在血清雌激素与睾酮含量水平测定实验中可以看出，四温组明显能升高小鼠的血清雌激素水平（P〈0．01），巴茅组的雌激素水平反而降低（P〈0．05）。与正常组相比，二仙汤组、四温组、茅二组、淫羊藿组血清睾酮水平明显低于正常组（P〈0．01）。结论初步验证了二仙汤及其部分拆方的雌激素样作用。二仙汤各拆方组中，含有淫羊藿剂量大的组对小鼠子宫增重的幅度和雌激素水平明显大于淫羊藿剂量小和不含淫羊藿组，所以二仙汤的雌激素作用很可能是淫羊藿所发挥的．     

韭菜子不同炮制品对正常和肾阳虚小鼠交配能力的影响

目的比较韭菜子炮制品对正常小鼠和氢化可的松所致肾阳虚模型小鼠的交配能力的影响。方法韭菜子生品、盐炙品和酒炙品的含水乙醇提取物对正常和用氢化可的松造成肾阳虚小鼠灌胃,对照组给予生理盐水,用红外摄像记录30min内小鼠的跨骑潜伏期和跨骑次数。结果生品及盐炙品仅对肾阳虚小鼠交配能力的提高有统计学差异(P<0.05),酒炙品对正常和肾阳虚小鼠交配能力的提高均存在统计学差异(P<0.05)。结论韭菜子在提高阳虚小鼠交配能力上,酒炙品优于生品和盐炙品。     

生炙淫羊藿抗衰老活性比较及作用机制研究

目的：探究生、炙淫羊藿抗衰老作用差异,利用网络药理学预测淫羊藿抗衰老的作用机制。方法：通过观察秀丽隐杆线虫在生、炙淫羊藿作用下的寿命、热应激、产卵数、体弯曲等指标,评价生、炙淫羊藿对线虫抗衰老的作用差异。基于网络药理学技术筛选并构建淫羊藿活性成分-抗衰老靶点网络、蛋白质-蛋白质互相作用（PPI）网络,并对淫羊藿抗衰老基因进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果：与对照组相比,炙淫羊藿能够明显延长线虫的寿命（P<0.05）,生、炙淫羊藿都能增加老年线虫的体弯曲率（P<0.05）;与淫羊藿生品组相比,生、炙淫羊藿延长线虫寿命的差异具有统计学意义（P<0.05）,炙淫羊藿更能延长线虫寿命。网络药理学筛选得到淫羊藿6个抗衰老关键活性成分,10个关键蛋白及一系列生物功能和通路。结论：生、炙淫羊藿可以延缓线虫衰老,且炙淫羊藿延长线虫寿命作用优于生品。网络药理学预测显示淫羊藿活性成分为槲皮素等,通过作用于蛋白激酶B1 (Akt1)、细胞肿瘤抗原p53 (TP53)等靶点,参与对无机物的反应等生物过程及调控癌症通路等途径发挥抗衰老作用。     

二仙汤雌激素样作用的实验研究

目的 通过不同的实验方法来确定二仙汤及其拆方中是否在ICR小鼠体内有雌激素样作用.方法 采用子宫增重实验、EUSA实验法,通过对幼龄小鼠子宫湿重和血清中相关激素的影响,观测是否具有雌激素的作用.结果 子宫增重实验中,淫羊藿组和茅二组可使动物子宫系数明显升高.在血清雌激素与睾酮含量水平测定实验中可以看出,四温组明显能升高小鼠的血清雌激素水平(P＜0.01).巴茅组的雌激素水平反而降低(P＜0.05).与正常组相比,二仙汤组、四温组、茅二组、淫羊藿组血清睾酮水平明显低于正常组(P＜0.01).结论 初步验证了二仙汤及其部分拆方的雌激素样作用.二仙汤各拆方组中,含有淫羊藿剂量大的组对小鼠子宫增重的幅度和雌激素水平明显大于淫羊藿剂量小和不含淫羊藿组,所以二仙汤的雌激素作用很可能是淫羊藿所发挥的.     

补骨脂盐炙对肾阳虚、脾虚模型动物燥性影响研究

目的:探讨补骨脂盐炙对肾阳虚、脾虚模型动物燥性的影响。方法:以主要脏器指数、血清cAMP/cGMP、TNF-α、Na~+-K`+-ATP酶含量为评价指标,观察不同剂量补骨脂生品和盐炙品对氢化可的松所致肾阳虚模型大鼠及大黄所致脾虚腹泻模型大鼠燥性的影响。结果:不同剂量补骨脂生品和盐炙品对肝指数、肾指数、胸腺指数、血清cAMP/cGMP、TNF-α、Na~+-K~+-ATP酶均有显著性影响(P0.05);且补骨脂高剂量组盐炙前后功效比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:补骨脂盐炙后可缓和燥性,作用强度与剂量相关。     

羊脂油对淫羊藿炮制品提取物中宝藿苷Ⅰ在大鼠体内药动学特征的影响

目的 研究炮制辅料羊脂油对淫羊藿炮制品提取物中主要活性成分宝藿苷Ⅰ在大鼠体内药动学特征的影响.方法 大鼠分别ig给予相同剂量(15 g/kg)的淫羊藿生品提取液、加热品提取液、羊脂油炙品提取液,HPLC-ESI-MS法测定大鼠宝藿苷Ⅰ血药浓度,经DAS 2.0程序处理数据,比较宝藿苷Ⅰ药动学参数.结果 3种淫羊藿炮制品提取物在血液中的达峰浓度(Cmax)、药时曲线下面积(AUC)等药动学参数大小为油炙品＞加热品＞生品,均具有统计学差异.结论 羊脂油能促进淫羊藿提取物中宝藿苷Ⅰ的口服吸收,提高其生物利用度.     

不同炼制温度和用量的羊脂油制淫羊藿对肾阳虚大鼠的影响

目的:考察不同炼制温度和用量的羊脂油制淫羊藿对肾阳虚大鼠的影响.方法:采用皮下注射皮质酮(CORT)建立肾阳虚大鼠模型,以淫羊藿总黄酮为阳性对照,以症状体征、动物抓力、组织病理学检查、血清睾酮含量等为评价指标,3种制淫羊藿(羊脂油炼制温度与加入量分别为250℃,30％;120℃,30％;120℃,20％)和生淫羊藿经水提取灌胃给药,考察不同样品对肾阳虚大鼠的药理作用.结果:3个炮制品均能不同程度地增强生品的温肾壮阳作用,其中以120℃,30％的制淫羊藿增强效果最佳.其作用机制可能与改善肾阳虚证大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴病理改变和功能抑制状态有关.结论:辅料羊脂油的炼制温度影响辅料质量,进而影响饮片药效.本试验结果为进一步阐明制淫羊藿炮制原理及建立炮制辅料的国家标准提供实验数据.     

巫山淫羊藿不同炮制品中脂肪酸成分的气相色谱-质谱联用分析

目的比较巫山淫羊藿不同炮制品及辅料羊脂油中的脂肪酸成分组成和相对含量变化。方法采用索氏提取法提取脂肪酸成分,用KOH-MeOH溶液甲酯化后,用气相色谱-质谱联用技术分析脂肪酸成分的组成,面积归一化法计算成分相对含量。结果巫山淫羊藿生品、清炒品、油拌品、油炙品和羊脂油中分别检测出16、14、17、19、18种化合物,油炙品与生品比较,含量升高的组分有6个,占油炙品脂肪酸成分总量的53.10%;降低的有4个组分,占总量的34.36%。结论巫山淫羊藿不同炮制品中脂肪酸成分的组成和相对含量有较大差异,成分变化与加入羊脂油和加热均有关。     

补骨脂不同炮制品对肾阳虚、脾虚大鼠的影响研究

目的:探讨补骨脂盐炙工艺对肾阳虚、脾虚模型动物作用的差异,以阐明补骨脂炮制工艺的药效差异。方法:以主要脏器指数、血清cAMP/cGMP、TNF-α、Na~+-K~+-ATP酶含量为评价指标,观察不同工艺的补骨脂炮制品即补骨脂生品、水炙品、盐炙品对氢化可的松所致肾阳虚模型大鼠及大黄所致脾虚腹泻模型大鼠的影响。结果:不同工艺的补骨脂炮制品对肝指数、肾指数、胸腺指数、血清cAMP/cGMP、TNF-α、Na~+-K~+-ATP酶均有显著性影响(P0.05);且补骨脂盐炙品与生品有显著性差异(P0.05)。结论:补骨脂给药组的燥性强度依次为生品组水炙品组盐炙品组,加热和盐处理都可缓和补骨脂生品的燥性。     

海马补肾丸滋阴补肾作用研究

目的采用多种实验模型评价海马补肾丸滋阴补肾作用,为临床提供实验依据。方法采用im氢化可的松致小鼠肾阳虚模型,观察海马补肾丸抗阳虚作用;采用ig甲状腺素加利血平致小鼠肾阴虚模型,观察海马补肾丸抗阴虚作用;采用im氢化可的松致大鼠肾阳虚模型,观察海马补肾丸对勃起功能的影响;采用去势雄性大鼠模型及正常幼龄雄性大鼠连续ig给药,观察海马补肾丸雄性激素样作用。结果给药10d,海马补肾丸1.1、2.2g/kg明显增加肾阳虚小鼠的自主活动次数,延长低温游泳时间,增加胸腺、脾脏的脏器指数;明显减少肾阴虚小鼠跳台错误次数、延长错误潜伏期,明显提高小鼠痛阈,增加小鼠胸腺、脾脏的脏器指数。给药2周,海马补肾丸0.56、1.12 g/kg明显增加大鼠bR/rR值、海绵体内压,明显改善勃起功能;明显增加去势大鼠血清睾酮(T)水平及前列腺、包皮腺、提肛肌的脏器指数;明显增加正常幼龄大鼠T、促卵泡激素(FSH)水平及精液囊的脏器指数。结论海马补肾丸具有明显的滋阴补肾作用。     

箭叶淫羊藿炮制前后对小鼠副性器官的影响

目的:观察箭叶淫羊藿炮制前后补益作用的强弱.方法:观察箭叶淫羊藿炮制前后不同提取液对去势雄性小鼠副性器官发育的影响.结果:生品和炮制品箭叶淫羊藿的水提取液和醇提液对去势小鼠副性器官的萎缩有明显的抑制作用,且生品和炮制品的作用强度无显著性差异.结论:生品和炮制品箭叶淫羊藿均具有补益作用,且作用强度无明显差异.     

蛤蚧补肾丸(胶囊)补肾壮阳作用的实验研究

目的 :研究蛤蚧补肾丸(胶囊)的补肾壮阳作用。方法 :采用去势大鼠制作肾虚模型 ,观察蛤蚧补肾丸(胶囊)补肾壮阳作用 ;观察蛤蚧补肾丸(胶囊)对氢化可的松诱发阳虚小鼠的保护作用及对大鼠交配能力的影响。结果 :蛤蚧补肾丸(胶囊)可提高肾虚(去势大鼠)包皮腺的脏器指数 ,并可延长肾虚大鼠阴茎勃起的持续时间 ;蛤蚧补肾丸(胶囊)对正常大鼠的交配能力有一定的提高作用 ,对正常大鼠提肛肌的脏器指数有明显的提高作用,同时使血清睾丸酮的水平也比正常对照组提高17.99 % -45.92% ,并对于氢化可的松造成小鼠阳虚症状表现体温、自主活动和耐寒能力的下降以及生殖器官精囊腺 +前列腺、提肛肌、包皮腺的脏器指数的下降 ,均有一定的保护作用。结论 :蛤蚧补肾丸(胶囊)具有补肾壮阳作用。     

基于黄酮成分吸收代谢的炙淫羊藿炮制机制研究

淫羊藿为传统补益类中药,经羊脂油炙后可增强温肾助阳的作用。以往文献对淫羊藿的炮制研究主要集中在化学成分变化和药理药效变化2个方面,本课题组创新性从黄酮成分吸收代谢角度,并基于活性成分转化-肠吸收屏障网络耦联作用研究炙淫羊藿的炮制机制。炙淫羊藿炮制作用分为炮制过程“热”和炮制辅料“羊脂油”的作用2个关键环节,课题组通过连续承担3项国家自然科学基金项目,从ADME角度着重阐明了炙淫羊藿炮制过程中“热”的作用与科学内涵,并首次提出基于“自组装胶束”体内形成机制阐述炮制辅料“羊脂油”的作用与增效机制。该文就课题组多年来对炙淫羊藿炮制机制的研究思路和成果进行总结,并对后续的研究方向和内容进行展望,以期为现代中药炮制机制研究提供新思路与新方法。     

淫羊藿不同提取物对D-半乳糖致衰老小鼠行为学及脏器指数的影响

目的:观察淫羊藿乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对D-半乳糖致衰老小鼠行为学和脏器指数的影响,探讨其抗衰老作用和功能药性部位。方法:采用D-半乳糖致衰老小鼠模型,分别灌胃给予53mg/kg、169mg/kg的淫羊藿乙酸乙酯提取物和85mg/kg、272mg/kg的淫羊藿正丁醇提取物,测试小鼠抓力、自主活动、悬尾及水迷宫的学习记忆成绩,并观察对脏器指数、骨骼重量和强度的影响。结果:淫羊藿乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物均可明显缩短水迷宫测试到达平台的时间和游泳总路程,对抓力、悬尾实验、骨骼重量和强度无明显影响;淫羊藿正丁醇提取物低剂量组可减少小鼠的自主活动并增加睾丸指数。结论:淫羊藿乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物能改善D-半乳糖致衰老小鼠的空间学习记忆能力,淫羊藿正丁醇提取物可增加睾丸指数。