基于“玄府-络脉”理论探讨糖尿病视网膜病变血-视网膜屏障损伤

目前,针对恢复血-视网膜屏障（Blood-retina Barrier, BRB）损伤的治疗手段十分有限,而中医从BRB角度认识并以此指导治疗糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy, DR）也很少述及。BRB位于血液与视网膜神经组织间,是物质交换、信息交流的场所。BRB受损是DR的关键病理机制,是导致患者失明的关键原因。玄府与络脉是人体结构中最普遍的微观结构,承担着流通气血津液、津血互渗及运转神机的功能。文章针对BRB与玄府-络脉的形态、结构、功能进行相关性分析,并基于“玄府-络脉”理论提出玄府闭塞、玄府破损与目络瘀阻失荣是BRB受损的重要病机,从而确定“和玄”、通络、补虚的基本治疗原则。文章还总结了虫类药、辛味药等在治疗BRB损伤中的特色治疗作用。     

从血论治糖尿病性视网膜病变

目以视物、辨色为用。诸脉皆上注于目,目为气血之宗,当养血之源充和,侧目生发长养功全而可发挥其功能,亏滞则百病从生。故目得血而能视,然而其前提却取决于血脉的充盈与畅通。精血旺盛才有血可用,放血脉充盈是基础,而脉络畅通则是血上行于目的条件,二者缺一不可。糖尿病性视网膜病变是糖尿病的眼部并发症。由于久患糖尿病,耗伤精血,致使体内阻虚血少,血虚则脉络空虚,阴津亏乏使血粘稠不能在络中畅行,二者均使血脉处于淤滞状态,目失血养而变生视网膜病变,故血虚血瘀是致病的主要因素。如不能及时调养,还可使病情不断恶化…     

针刺对糖尿病大鼠视网膜病变病理形态的影响

目的：探讨针刺治疗糖尿病视网膜病变的有效性和可能作用机制。方法：将STZ诱发的DM大鼠46只，随机分为模型对照组22只，针刺治疗组24只，同时设同批次同种属大鼠9只作为空白对照组。针刺组给予电针治疗，模型组与空白组不予治疗。结果：（1）针刺可提高STZ诱发DM大鼠的生存质量，其体重与模型组比较有显著性差异（P＜0．05）；（2）针刺治疗后DM大鼠的血糖降低与模型组比较有极显著性差异（P＜0．01），但仍高于正常组,两者有极显著性差异（P＜0．01）；（3）针刺治疗可改变周细胞核的形态和减少其衰亡。治疗组周细胞数目明显高于模型组，两者有极显著性差异（P＜0．01），但仍低于正常组。结论：针刺治疗糖尿病视网膜病变的疗效显著，可能是通过抑制周细胞衰亡而发挥作用。     

水蛭对糖尿病大鼠视网膜微血管形态的影响

目的：探讨水蛭对糖尿病大鼠视网膜微血管形态的影响，方法：40只SD大鼠随机分成正常对照组，链脲佐菌素糖尿病模型组与水蛭干预组，将水蛭（每天1．67g/kg)混入普通饲料给药，180天后测血液流变指标，血浆一氧化氮（NO）水平，丙二醛（MDA）含量以及全血谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX），组织型纤溶酶原激活物（t-PA)及纤溶酶原激活抑制剂（PAI）活性等，对视网膜血管铺片进行光镜及透射电镜观察。结果：病程6个月的模型组大鼠的血液存在明显的高凝，高粘现象，并出现了周细胞减少，微血管瘤，无细胞毛细血管及影周细胞等早期糖尿病视网膜病变的特征性改变，水蛭干预组视风膜病变与模型组相比明显减轻，结论：水蛭过早期糖尿病大鼠视网膜变具有良好的防治作用。可能与其能减轻氧自由基损伤，提高抗脂质过氧化作用，增强纤溶性及改善血流变学指标有关。     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及鉴定

目的:探索体外分离培养及纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stromal cells,MSCs)的方法.方法:采用贴壁分离和消化控制相结合的方法,分离纯化3～4周龄大鼠MSCs,免疫细胞化学法鉴定其活性和表型.结果:原代培养的MSCs呈圆形、梭形、多角形等,24 h内即可见少量细胞体贴壁伸展,7～8 d左右可达90%融合,纯化后的MSCs呈均匀一致的长梭形,24h内细胞贴壁率99%,传代周期为7d左右.免疫细胞化学检测显示CD34表达阴性,CD44表达阳性.结论:贴壁分离和消化控制相结合能有效分离纯化成年大鼠MSCs,细胞纯度较高,细胞活力强,生物学性状稳定,是目前一种比较理想的分离纯化方法.     

活血化瘀法对糖尿病视网膜病变血-视网膜屏障的保护作用及应用研究进展

糖尿病是以微血管病变、神经系统并发症多见的一种慢性代谢性疾病,其并发症糖尿病视网膜病变(DR)成为眼部致盲的主要原因.中医通过辨证论治,从"瘀"论治DR,改善了患者视力.通过阐述活血化瘀法对DR中血-视网膜屏障的保护作用及应用研究进展,以期为DR的治疗提供思路.     

穴位注射骨髓间充质干细胞对心肌梗死模型大鼠心功能影响

目的:探讨穴位注射骨髓间充质干细胞对心肌梗死模型大鼠心功能影响。方法:60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、心肌注射干细胞组、穴位注射干细胞组,采用结扎左冠状动脉前降支方法复制心肌梗死模型,穴位注射干细胞组造模成功72h后心俞、至阳、膻中每穴位注入骨髓间充质干细胞0.3mL(1×1010/L),4周后以超声测量心功能,取血测血清脑钠肽水平。结果:心肌注射组、穴位注射干细胞组左室短轴缩短率、射血分数较模型组升高,左室舒张末期内径、左室收缩末期内径较模型组降低,心肌注射干细胞组和穴位注射干细胞组间差异无统计学意义。结论:穴位注射干细胞能够改善模型动物心功能。     

红参对糖尿病大鼠视网膜微血管病变细胞外基质的影响

目的探讨红参对糖尿病大鼠视网膜微血管病变细胞外基质的影响.方法用链脲佐菌素(65mg/kg)一次性腹腔注射的方法建立糖尿病大鼠模型,30只SD大鼠随机分成对照组、模型组和红参干预组.红参粉末(每日1.5g/kg)灌胃给药.210天后处死动物摘除眼球,进行血管铺片形态学观察及纤连蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)在视网膜血管的表达,用图像分析仪测定免疫组化显色强度,进行定量分析.结果7个月糖尿病大鼠视网膜毛细血管细胞外基质增生明显,FN和LN均呈高表达(P＜0.05).红参干预后FN表达比模型组明显降低(P＜0.05),LN表达比模型组降低,但组间对比差异不显著.结论红参可抑制细胞外基质成分过度表达,从而减轻毛细血管基底膜的损伤.     

水血同治法治疗糖尿病视网膜病变

糖尿病视网膜病变是糖尿病常见且严重的并发症,眼底表现出多种渗出、出血等病变,不外"痰""瘀".本文对痰瘀在糖尿病视网膜病变中的作用机理、成因进行了探讨,并对运用水血同治法对其治疗进行总结.     

基于“痰瘀虚”理论探讨糖尿病视网膜病变

糖尿病视网膜病变是糖尿病慢性并发症之一,西医认为糖尿病视网膜病变多因糖尿病病程进展,长期高血糖并高血脂、高血压等对眼视网膜微血管造成长期的慢性损害所引起的并发症,易造成眼部组织、神经、血管微循环改变以及眼部营养和视功能的损坏。中医对此病也早有记载,称之为“消渴目病”,认为其发病的主要病机为阴虚内热,耗气伤津,导致痰瘀互结,进一步加重病情的发展。文章主要基于“痰瘀虚”理论探讨糖尿病视网膜病变的病因病机以及治疗原则,为该疾病的防治提供参考。     

针刺对糖尿病视网膜病变影响的实验研究

目的：通过观察针刺对实验性糖尿病大鼠视网膜病变的影响。进一步证明针刺对糖尿病视网膜病变的治疗及预防作用。方法：选择大鼠建立糖尿病动物模型，分别以针刺及胰岛素治疗，并设正常对照组及模型对照组，于3个月及6个月取大鼠血清及视网膜，检测血糖，胰岛素含量，电镜观察视网膜变化，结果：血糖、胰岛素含量，针刺组、胰岛素组及正常组在统计学上差异无显著性意义，与模型 对照组相比，差异有显著性意义；电匀观察针刺组视网膜微血管病变得以改善。结论：针刺可以有效地预防和治疗糖尿病网膜病变。     

小鼠骨髓间充质干细胞的体外培养及鉴定

目的：建立成年小鼠骨髓间充质干细胞（MSC）的分离和培养方法，并对其表面标志进行鉴定，为其应用提供实验依据。方法：应用体外细胞培养技术将小鼠MSC自股骨、胫骨中分离、纯化和培养，倒置显微镜观察其生长过程，流式细胞仪检测MSC表面抗体的表达。结果：使用全骨髓贴壁分离方法分离、扩增的MSC贴壁后形态较均一，生长良好，细胞表达CD29，CD44，但CD34和CD45表达阴性。结论：可以用全骨髓贴壁法从小鼠骨髓分离培养出MSC，在体外进行有效扩增，为以小鼠为模型研究MSC在组织工程、细胞移植、基因治疗等领域的运用提供实验基础。     

龟板对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化的影响

目的探讨益肾中药龟板对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外向成骨分化的影响.方法使用密度梯度法分离成年大鼠骨髓间充质干细胞,观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSCs的成骨变化.应用形态学、碱性磷酸酶组织化学染色、Von Kossa 染色、骨钙素测定等方法观察细胞成骨活性.结果形态学表明,MSCs贴壁细胞呈集落生长,有成纤维细胞外观.龟板组碱性磷酸酶、钙化结节、骨钙素明显升高,与对照组比较具有显著性差异(P<0.05).结论 MSCs受龟板诱导高效地向成骨细胞分化,可以为体内骨组织工程提供种子细胞.     

补肾填髓方对去势兔骨髓间充质干细胞钙化结节、骨钙素作用的研究

目的：探讨补肾填髓方促进去势兔骨髓间充质干细胞（MSCs）的成骨分化能力。方法：应用VanKossa染色法和ELISA法对比补肾填髓方和成骨诱导剂对MSCs钙化结节和骨钙素的影响。结果：补肾填髓方能显著提高去势兔MSCs钙化结节数量,与去势组比较,差异有非常显著性意义（P〈0．01）,但作用较成骨诱导剂弱（P〈0．05）,同时也能显著提高骨钙素含量,与去势组比较,差异有显著性意义（P〈0．05）,钙化结节数量和骨钙素含量的增多与补肾填髓方用药时间呈正相关（P〈0.01）。结论：补肾填髓方用于治疗骨质疏松症,与促进MSCs向成骨细胞分化相关,但其促进MSCs成骨的机制仍需进一步研究。     

玄参提取物对糖尿病视网膜病变微血管内皮细胞损伤的影响及其作用机制

目的：探讨玄参提取物抑制微小RNA-646（miR-646）改善微血管内皮细胞损伤缓解糖尿病视网膜水肿的影响及其作用机制。方法：根据简单随机化法将人视网膜微血管内皮细胞（HRMEC）细胞分为对照组、模型组（30 mmol/L葡萄糖）、观察组（30 mmol/L葡萄糖+100 μg/mL玄参提取物组）、模型+Anti-NC（转染Anti-NC+30 mmol/L葡萄糖）、模型+Anti-miR-646（转染Anti-miR-646+30 mmol/L葡萄糖）组;将30只小鼠根据简单随机化法分为对照组、模型组（60 mg/kg的链脲佐菌素）、观察组（60 mg/kg的链脲佐菌素+100 mg/kg-的玄参提取物）,每组10只。比较各组细胞增殖,迁移及miR-646、血管内皮生长因子A（VEGFA）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达;比较各组小鼠视网膜组织ICAM-1、CD31表达及视网膜组织水肿情况。结果：细胞实验结果显示,与对照组比较,模型组细胞miR-646、ICAM-1表达显著升高,VEGFA、CD31表达显著下降（均P<0.05）;与模型组比较,观察组细胞miR-646、ICAM-1表达显著降低,VEGFA、CD31表达显著升高（均P<0.05）;与模型+Anti-NC组比较,模型+Anti-miR-646组细胞增殖率、迁移细胞数及VEGFA表达显著增加,miR-646表达及凋亡率显著降低（均P<0.05）。动物实验结果显示,与对照组比较,模型组小鼠视网膜组织中miR-646、ICAM-1表达显著升高,VEGFA、CD31表达显著下降（均P<0.05）,同时小鼠视网膜组织水肿情况加重;与模型组比较,观察组小鼠网膜组织中miR-646、ICAM-1表达显著降低,VEGFA、CD31表达显著升高（均P<0.05）,同时小鼠视网膜组织水肿明显得到缓解。结论：玄参提取物可能通过miR-646/VEGFA机制调节HRMEC细胞增殖、迁移和凋亡,改善缓解糖尿病视网膜水肿。     

针药并用治疗糖尿病视网膜病变疗效观察

目的观察针刺配合中药治疗糖尿病性视网膜病变的有效性、安全性,寻找治疗初期糖尿病型视网膜病变的有效中医治疗手段。方法将64例初期糖尿病视网膜病变患者（109眼）随机分为治疗组和对照组,每组32例。治疗组采用针药并用治疗,对照组采用单纯针刺治疗,1个疗程后观察眼底变化及视力变化等疗效性指标。结果治疗组总有效率为97.7%,对照组为72.2%,两者比较差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论针刺与中药联合治疗是一种治疗糖尿病性视网膜病变的有效方法 。     

中医药治疗糖尿病视网膜病变研究简况

糖尿病视网膜病变（DR）西医以控制血糖和眼底视网膜激光光凝为主,可归属“内障”、“视瞻昏渺”、“暴盲”。本于阴虚燥热,脉络失养,本虚标实。中医临证,以人为本,谨守病机,辨证论治,标本谦顾,临床效果良好。     

接骨散含药血清对骨髓间充质干细胞增殖与成骨性分化影响

目的:研究接骨散含药血清对体外培养骨髓间充质干细胞(rBMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法:采用高、中、低剂量灌服大鼠制得接骨散含药血清,以灌服等体积生理盐水制得对照血清;采用贴壁筛选法培养大鼠骨髓间充质干细胞,并以3种不同浓度的含药血清干预第二代rBMSCs。MTT法检测细胞增殖情况;于干预后的第3天、6天、9天和12天分别测定细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、碱性磷酸酶阳性克隆数(CFU-FALP)、钙盐沉积量以及钙化结节数,并比较各组间差异。结果:中剂量接骨散含药血清强烈刺激细胞增殖活性并显著促进骨髓间充质干细胞成骨性分化,表现在该组的ALP活性、CFU-FALP、钙盐沉积量和钙化结节数显著高于对照组(P<0.05)。结论:接骨散含药血清具有促进rBMSCs增殖和成骨性分化活性。