SmaRT快速克隆多药耐药基因（MDR1）cDNA产物

肿瘤细胞在化疗中会对许多药物产生耐药性 ,称多药耐药 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ＭＤＲ) ,导致ＭＤＲ的一个重要机制就是细胞膜上一种分子量为170ＫＤａ的Ｐ 糖蛋白 (Ｐ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ,Ｐ ｇｐ)的过度表达[1] 。Ｐ ｇｐ主要由位于人第 7号染色体 ｑ2 1 1的多药耐药基因ＭＤＲ1编码。研究ＭＤＲ多在信使核糖核酸 (ｍＲＮＡ)和蛋白质水平。ＭＤＲ1ｃＤＮＡ长4 669ｂｐ ,第 179～ 384 0ｂｐ之间为可读区 ,共编码12 80个氨基酸残基 ,其中第 185密码子被认为是编码影响Ｐ ｇｐ药物结合位点的氨基酸残基。把包含185…     

P—糖蛋白与环孢素Ａ的药学动学

ＭＤＲ(多药耐药 )基因及其编码的Ｐ 糖蛋白与多重耐药及抗性肿瘤细胞发生发展有关 ,Ｐ 糖蛋白是一种ＡＴＰ 依赖泵 ,主要的生理功能是减少细胞内药物蓄积 ,增加抗性肿瘤细胞的数目[1] 。随着对Ｐ 糖蛋白其他多种生理功能的研究 ,Ｐ 糖蛋白在药动学及药效学方面的调节作用得到关注。本文综述Ｐ 糖蛋白对免疫抑制剂环孢素Ａ药动学方面的影响。1　Ｐ 糖蛋白的生理功能Ｐ 糖蛋白在正常组织中均有表达 ,分布在消化道、肾、血脑屏障、睾丸、胎盘、造血细胞等 ,主要功能是分泌外源性或排泄内源性的有害物质。但最新研究表明ｍｄｒ 基因敲除小鼠并…     

用^99mTc—甲氧基异丁基异腈预测体内肿瘤多药耐药的研究进展

多药耐药（ＭＤＲ）是影响肿瘤化疗成功的重要。早期发现ＭＤＲ，从而选择３较敏感的治疗药物，具有临床实用价值。最近发现，＾９９ｍＴｃ－早氧基异丁基异腈（ｍｅｔｈｏｘｙ ｉｓｏｂｕｔｙｌｉｓｏｎｉｔｒｉｌｅ，简称ＭＩＢＩ）和某些的同为ｍｄｒ１基因表达的Ｐ糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）的作用底物，Ｐｇｐ能将它们转运出细胞，使化疗无效，也使肿不表现放射性浓集。从而提示可以用简便、无创的核医学显像方法，于化疗之前预测体内     

血脑屏障上的P-糖蛋白与药物转运功能

目的：综述脑毛细血管内皮细胞上的Ｐ－糖蛋白药物外排功能。方法：根据对有关的资料的分析,归纳,总结得出Ｐ－糖蛋白与脑内药物转运的关系。结果：血脑屏幕上的Ｐ－糖蛋白具有ＡＴＰ依赖性的药物外排泵的功能,能降低脑内药物的浓度。结论：利用多药耐药性逆转剂有可能提高脑内的药物转运或者降低药物的通透性减少中枢神经系统的不良反应。     

血脑屏障上的P—糖蛋白

Ｐ－糖蛋白是由多药耐药性基因编码的一个ＡＴＰ依赖性的药物外排泵，首先在肿瘤细胞上发现，也存在于脑毛细血管内皮细胞的腔面，使用体外培养的脑毛细血管内皮细胞、体内脑灌流技术、脑微透析技术和ｍｄｒ１ａ基因缺失鼠模型研究表明，Ｐ－糖蛋白主动排出许多化合物，如长春新碱、环孢素Ａ、秋水仙碱等，使它们的脑通透性降低，给予Ｐ－糖蛋白逆转剂可增加它们的脑浓度。因此，详细了解这个外排泵的作用机制，对研究靶药到脑或减少     

Ⅰ组亲代谢型谷氨酸受体配基不影响6-羟基多巴胺诱导的PC12细胞死亡及谷氨酸的释放

黑质致密部多巴胺能神经元大量缺失是帕金森病(Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｓｄｉｓｅａｓｅ,ＰＤ)的一个重要特征。近年来 ,研究者对ＰＤ的发病机制提出了兴奋性氨基酸 (ＥＡＡ)的神经毒性学说。中枢神经系统中的主要ＥＡＡ是谷氨酸 (ｇｌｕｔａｍａｔｅ,Ｇｌｕ) ,其受体分为两大类 :亲离子型受体 (ｉｏｎｏｔｒｏｐｉｃｇｌｕｔａｍａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ,ｉＧｌｕＲｓ)和亲代谢型受体 (ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃｇｌｕｔａｍａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ,ｍＧｌｕＲｓ)。已发现的ｍＧｌｕＲｓ被分为三组 ,即ＧｒｏｕｐⅠ (ｍＧｌｕＲ1和ｍＧｌｕ…     

Xenova公司推出新的抗癌药物

最近Ｘｅｎｏｖａ公司宣布它的Ｐ 糖蛋白 (Ｐ ｇｐ)泵抑制剂ＸＲ9576对多药抗性癌症有阳性结果。Ｐ ｇｐ等蛋白泵能引起一些药物细胞外流 ,从而使药物失效。在癌症病人中 ,Ｐ ｇｐ过度表达是抗药性的最主要表现形式。化疗药物中加入Ｐ ｇｐ抑制剂可保证药物在细胞中并起效达 2 4ｈ。Ｘｅｎｏｖａ公司已成功地进行了ＸＲ9576与紫杉醇合用治疗卵巢癌的Ⅱ期试验。在最近的试验中 ,对12例患有不同实体瘤的病人评价了ＸＲ9576与多柔比星的相互作用 ,结果两药之间没有明显的药代动力学相互作用 ,说明ＸＲ9576可与一系列细胞毒药物合用。公司希望在…     

开发治疗阿尔茨海默病的药物

近年来 ,已有两种治疗阿尔茨海默病 (ＡＤ)的药物开发失败 :Ｅｌａｎ/Ｗｙｅｔｈ公司的ＡＮ 12 72 9(Ｂｅｔａｂｌｏｃ)和ＮｅｏＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ公司的ｌｅｔｅｐｒｉｎｉｍｐｏｔａｓｓｉｕｍ(Ｎｅｏｔｒｏｆｉｎ) ,对ＲｅＧｅｎＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ公司的Ｃｏｌｏｓｔｒｉｎｉｎ的警告也使人们希望能有更有效的治疗方案。但通过对该类药物研究领域的回顾揭示 ,仍有许多有效候选药物在开发中 ,至少有 2 6家制药公司在开发可能对ＡＤ有治疗效果的药物 ,预计下一个 5年药品销售额将从 10亿美元上升到 70亿美元。试验了许多不同…     

HIV融合抑制剂Enfuvirtide

Ｅｎｆｕｖｉｒｔｉｄｅ(ｐｅｎｔａｆｕｓｉｄｅ,Ｔ 2 0 ,Ｒ 698,ＤＰ 1 78,商品名Ｆｕｚｅｏｎ)是一种新型抗逆病毒药物 ,可结合于ＨＩＶ 1膜糖蛋白ｇｐ41亚单位而阻止ＨＩＶ 1进入宿主细胞 ,抑制ＨＩＶ 1复制。体外研究表明 ,本品可减少病毒ｐ2 4的产生和ＨＩＶ 1ＲＮＡ水平 ;体内实验亦表明 ,本品可降低血浆ＨＩＶ 1ＲＮＡ拷贝数和平均病毒负荷 ,增强ＨＩＶ 1感染病人的免疫力。本品药动学特性显示 ,1日 2次给药为上佳治疗方案。迄今为止的临床研究证实 ,本品是治疗成年和儿童ＨＩＶ 1阳性病人的安全而有效的药物 ,仅在注射部位出现轻微…     

CTLA—4基因工程药物研究进展

ＣＴＬＡ－４（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ａｎｔｉｇｅｎ－４，ＣＤ１５２）是在毒性Ｔ淋巴细胞ＤＮＡ文库中发现的第４个特有基因表达产物，因其与ＣＤ２８是同源基因并且两者能竞争性结合Ｂ７家族分子，故在免疫信号传导中发挥重要作用。研究其在自身免疫性疾病、抗移植排斥及肿瘤免疫中的作用机制，对开发基因工程药物及相关化学合成药物具有深远的现实意义。     

老年性痴呆治疗的药物与临床应用

老年性痴呆 (ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅ,ＡＤ)是老年人常见病之一。其病因尚不清楚 ,但研究发现 ,患者脑内皮层及海马区的病变比较明显 ,前脑基底核胆碱能神经元破坏最多 ,脑皮层及海马内胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱酯酶 (ＡｃｈＥ)水平降低 ,突触前胆碱受体数目减少 ,脑血流量显著降低等。ＡＤ治疗的药物就是以这些病理及生理变化为依据 ,通过药物作用于不同的神经递质传递系统 ,增强中枢神经系统的高级活动 ,从而治疗ＡＤ症状或延缓ＡＤ病程。1　神经组织功能改善剂1.1　ＡｃｈＥ抑制剂　他克林 (ｔａｃｒｉｎｅ)是一种中枢神经…     

药物不良反应与药物不良事件

药物不良反应 (ａｄｖｅｒｓｅｄｒｕｇｒｅａｃｔｉｏｎｓ ,ＡＤＲ) ,世界卫生组织的广义定义是 :为预防诊断或治疗疾病或为改善生理功能而用的适量药物引起的任何有害和非预期反应。如果药物相互作用的情况与临床后果符合世界卫生组织的定义 ,则可以将它归类于不良反应。本文排除了治疗失败、意向性和意外性药物中毒与药物滥用。药物不良事件 (ａｄｖｅｒｓｅｄｒｕｇｅｖｅｎｔ ,ＡＤＥ) ,它是使用药物而产生的一种损害 ,与ＡＤＲ定义不同 ,ＡＤＥ包括了药物应用错误[1] 。以前的教科书对药品质量问题或用药不当所引起的有害反应 ,称为广…     

抗肿瘤药苯达莫司汀

药效学　苯达莫司汀 (ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ)是双功能基烷化剂 ,体外对人卵巢癌和乳腺癌有细胞毒性 ,体外与环磷酰胺、美法仑 (ｍｅｌｐｈａｌａｎ)、卡莫司汀 (ｃａｒ ｍｕｓｔｉｎｅ)和顺铂有部分交叉耐受。对乳腺癌细胞系ＭＣＦ7抑制细胞生长的ＩＣ50 为 138μｍｏｌ·Ｌ- 1,对顺铂抗药性卵巢癌细胞系Ａ2 780 ＣＰ2的ＩＣ50 为 15 7μｍｏｌ·Ｌ- 1,对多柔比星抗药性乳腺癌细胞系ＭＣＦ7ＡＤ的ＩＣ50 为 187μｍｏｌ·Ｌ- 1。在等毒性浓度 (ＩＣ50 ｓ)下 ,苯达莫司汀比美法仑、环磷酰胺或卡莫司汀引起更多的ＤＮＡ双螺旋断裂 ,比卡…     

抗菌药物的不良反应及其防治

据卫生部原药品不良反应 (ａｄｖｅｒｓｅｄｒｕｇｒｅａｃｔｉｏｎ,ＡＤＲ)监察中心报告 ,我国住院患者中 ,每年有 1 9.2万人死于ＡＤＲｓ,ＷＨＯ统计资料表明 ,全球有 1 7的死亡患者不是因自然界固有的疾病 ,而是因ＡＤＲｓ和不合理用药引起的。ＡＤＲｓ引起的死亡人数为主要传染病死亡总人数的 1 0倍以上。 1 990年 ,我国聋哑儿童 1 82万人 ,其中因滥用抗菌药物造成中毒性耳聋者逾百万 ,并以每年 2～ 4万人递增[1 ] 。1　ＡＤＲ定义合格药物在疾病预防、诊断、治疗或调节生理功能的正常用法用量时出现的有害的和意料之外的反应。不包括无意或故意超剂量用药引起的反应以及用药不当引起的反应。2　抗菌药物的ＡＤＲｓ抗菌药物对机体可以产生广泛的ＡＤＲ ,几乎涉及全身各组织、器官 ,最主要的有毒性反应、变态反应、二重感染和细菌耐药性的产生等。2 .1　毒性反应　抗菌药物的毒性反应是指药物引起的生理、生化等功能异常和 (或 )组织、器官等病理改变 ,其严重程度随剂量增大和疗程延长而增加 ,机制可为药物的刺激、人体细胞蛋白质合成或酶系功能受阻等 ,也可因宿主原有的遗传缺陷或病理状态而诱发。2 .1 .1　肾脏...     

甲状腺过氧化物酶与Graves病

1944年Ｄｅｍｐｓｅｙ用组织化学方法首先在甲状腺滤泡中发现了甲状腺过氧化物酶 (ＴＰＯ)。ＤｅＲｏｂｅｒｔｉｅｓ于 1946年在甲状腺组织的胶体中也发现了ＴＰＯ。当时认为ＴＰＯ对碘化物在甲状腺内容易被过氧化物氧化成酚类衍生物起催化作用 ,同时推测这一催化反应在甲状腺激素合成中占重要地位 ,后来证明ＴＰＯ是甲状腺激素生物合成的关键酶 ,并研究发现Ｇｒａｖｅｓ病 (ＧＤ)时ＴＰＯ活性升高数倍。ＧＤ又称为毒性弥漫性甲状腺肿 ,是一种伴甲状腺激素 (ＴＨ)分泌增多的自身免疫性疾病 (ＡＩＴＤ)。目前文献报道甲状微粒体抗原(ＴＭＡｇ…     

应用PCR—直接测序法测定结核分支杆菌rpsL基因突变的研究

目的：了解我国结核分支杆菌耐链霉素（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ,ＳＭ）分离株ｒｐｓＬ基因突变情况,建立快速检测结核分支杆菌耐药基因型的分子药敏试验方法。方法：通过聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ,ＰＣＲ）－单链构象多态性（Ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄＣｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＳＳＣＰ）、ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＦｒａｇｍｅｎｔＬｅｎｇｔｈＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＲＦＬＰ）和ＰＣＲ－直接测序法（ＤｉｒｅｃｔＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ,ＤＳ）分析３８株结核分支杆菌耐ＳＭ分离株的ｒｐｓＬ基因。结果３８株耐ＳＭ分离株中,２５株ＳＳＣＰ异常、不被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析４３位密码子ＡＡＧ→ＡＧＧ突变;１株ＳＳＣＰ异常、可被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析３３位密码子ＧＴＡ→ＡＴＡ突变;１２株ＳＳＣＰ正常、可被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析未见异常;未发现８８位密码子突变。结论：大多数结核分支杆菌耐ＳＭ是由于其ｒｐｓＬ基因４３位密码子突变所致,采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＤＳ方法可快速测定部分结核分支杆菌ＳＭ耐药基因型。     

重要耐药葡萄球菌的耐药特点及抗菌药物的应用

葡萄球菌是临床常见的致病菌 ,可引起多个部位感染 ,并且是重要的医院感染菌 ,其中金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )和表皮葡萄球菌是最常见的致病葡萄球菌。随着抗菌药物的大量使用 ,不断出现新的耐药菌株 ,细菌的耐药率也不断上升。现临床分离的金葡菌 90 %对青霉素耐药 ;葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｔＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ,ＭＲＳＡ)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｏａｇｕｌａｓｅｎｅｇａｔｉｖｅＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃ…     

哌嗪二酮衍生物的合成研究进展

哌嗪二酮衍生物 (ｄｉｋｅｔｏｐｉｐｅｒａｚｉｎｅｓ,ＤＫＰ)是结构最小的环二肽 ,最初在肽合成中尤其在固相肽合成中被视为副反应产物[1～ 4 ] 。生成的ＤＫＰ从固相载体上断裂 ,使肽合成无法继续。这不仅使反应收率下降 ,而且在载体上生成新的反应位点 ,从而引起其他的副反应。另一方面 ,ＤＫＰ骨架是稳定的六元环 ,有两个氢键给体和两个氢键受体。氢键是药物与受体相互作用的主要方式之一 ,因而ＤＫＰ在药物化学中是一个重要的药效团。现已发现许多有活性的天然产物中含有ＤＫＰ结构 ,如抑制哺乳动物细胞生长周期的化合物 1 ,2 [5～ 7] ,抑制谷胱甘肽 Ｓ 转移酶的3 [8] ,抑制血小板活化因子 (ＰＡＦ)的 4[9] (图 1 )。此外 ,ＣＣＫ Ｂ受体激动剂[1 0 ] ,局部异构酶抑制剂[1 1 ] 和具有细胞毒性的ｐｉｓｃａｒｉｎｉｅ[1 2 ] 和ｐｈｅｎｙｌａｈｉｓｔｉｎ (Ｉ) [1 3] 等分子中也含ＤＫＰ结构。Ｆｉｇｕｒｅ 1　Ｎａｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｄｉｋｅｔｏｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ　　ＤＫＰ有两种类型 ,即 2 ,5 ｄｉｋｅｔｏｐｉｐ...     

HPLC法测定克拉霉素片的含量

克拉霉素是新的大环内酯类抗菌素 ,是一种广谱抗菌药。其含量中国药典 2 0 0 0年版采用抗生素微生物效价测定法 ,费时且误差大 ,本文以ＨＰＬＣ法测定其含量 ,方法简便 ,准确可靠。1 仪器与试药　岛津ＬＣ - 9Ａ泵 ,ＳＰＤ - 6Ａ检测器 ,ＣＲ - 6Ａ积分仪。岛津ＬＣ - 10Ａ泵 ,ＳＰＤ -10ＡＤ检测器 ,ＣＬＡＳＳ - 10色谱工作站。Ｗａｔｅｒｓ 5 10泵 ,4 86检测器 ,717自动进样器 ,ＣＲ - 7Ａ积分仪。ＭｉｌｌｉｂｏｒｅＱ - ｐｌｕｓ超纯水系统。克拉霉素标准品 (中国药品生物制品检定所提供 ) ,样品 (厂家提供的原料药 ,批号 970 2 0 2、9…     

监控肿瘤化疗细胞毒药物的使用与管理

细胞毒药物（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｄｒｕｇｓ,ＣＤ）系指在生物学方面具有危害性影响的药品。据美国医院药师协会（ＡＳＨＰ）对细胞毒药物的划定,主要特征如下［１］：（１）生殖系统毒性;（２）致癌性;（３）致畸胎或损伤生育;（４）低剂量（对实验动物或治疗病人）时致系列器官的毒性表现。在商业上,有超过５０种的细胞毒药物可用于治疗肿瘤病人。临床和实验室已证明,这些药物中许多品种对人和动物是诱变剂、致癌物或致畸胎物。由国际癌症研究机构（ＩＡＲＣ）公布,最强的致癌剂是烷基化试剂（如环磷酰胺、盐酸氮芥）。ＡＨＳＰ认…