HPLC测定生姜对小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷溶出的影响

目的:研究配伍生姜对小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷在水煎液中溶出的影响。方法:采用水煎煮法,以HPLC测定柴胡皂苷a和黄芩苷的含量,考察配伍生姜对小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷溶出的影响。结果:配伍生姜对小柴胡汤中黄芩苷的溶出没有显著性影响(P>0.05),而不配伍生姜组的柴胡皂苷a的含量高于配伍生姜组,且两者存在显著性差异(P<0.05)。结论:配伍生姜对黄芩苷的溶出无影响,而对柴胡皂苷a的溶出有影响,且生姜降低小柴胡汤中柴胡皂苷a的含量。     

生姜对小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷肠道吸收的影响

目的研究配伍生姜对小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷在大鼠肠道吸收的影响。方法采用大鼠在体单向肠灌流,用质量法校正灌流液体积,通过HPLC法测定柴胡皂苷a和黄芩苷的含有量,考察配伍生姜对柴胡皂苷a和黄芩苷在肠道吸收的影响。结果配伍生姜的小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷的吸收速率常数和表观吸收系数均高于不配伍生姜组,且两组间有显著性差异(P<0.05);结论生姜可促进小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷在肠道的吸收。     

麻杏石甘汤的拆方和抗平喘之间相关性研究

目的 研究麻杏石甘汤的不同配伍的平喘效果和对麻黄碱含量的影响,探讨该方的配伍规律.方法 采用L8(27)正交设计安排配伍各组实验,用致喘豚鼠作为药理模型,以spss 10.0软件分实验数据,以HPLC法测定配伍各组中麻黄碱的含量.结果 原方的平喘效果优于其它各配伍组,与对照组差异有显著性(P＜0.05),各配伍组间差异无显著性;石膏和甘草的交互作用对麻黄碱含量的影响差异有显著性(P＜0.05).结论 虽然共煎药液中麻黄碱含量降低了,但从平喘效果看,原方配伍最佳.     

柴胡皂苷-白芍总苷对大鼠肝微粒体CYP450酶活性及肝功能的影响

目的研究柴胡皂苷-白芍总苷对大鼠肝微粒体CYP450酶活性及肝功能的影响。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、柴胡皂苷组(500 mg/kg)、白芍总苷组(500 mg/kg)、柴胡皂苷-白芍总苷配伍组(柴胡皂苷、白芍总苷各500 mg/kg)、苯巴比妥组(80 mg/kg)。除苯巴比妥组连续4 d腹腔注射给药外,其他各组均连续15 d灌胃给药。采用Cocktail探针底物与肝微粒体体外温孵法,HPLC测定肝微粒体中各探针底物的代谢消除率,评价各组对肝微粒体CYP450酶活性的影响;检测肝功能相关指标ALT、AST水平,测定肝组织内MDA、SOD水平。结果与空白组比较,柴胡皂苷组CYP2E1活性显著升高(P0.05),而柴胡皂苷-白芍总苷配伍组CYP450各同工酶的活性均无显著变化;柴胡皂苷组、白芍总苷组、柴胡皂苷-白芍总苷配伍组血清ALT、AST水平显著增高,且肝组织内MDA水平增加,SOD水平下降(P0.05)。结论柴胡皂苷可升高CYP2E1的活性,柴胡皂苷-白芍总苷配伍后可影响柴胡皂苷提高CYP2E1活性的作用,柴胡皂苷、白芍总苷单独或配伍给药均有不同程度的肝功能损伤。     

黄芩汤不同配伍对芍药苷溶出率的影响

建立黄芩汤各配伍煎液中芍药苷的HPLC含量测定方法,研究配伍对芍药苷溶出率的影响。方法:采用L8(27)正交设计法,以RP-HPLC法测定各配伍样品中芍药苷含量。结果:甘草对芍药苷的含量差异影响具显著性(P&lt;0.05),黄芩、大枣以及三者两两交互作用无显著影响。结论:甘草使芍药苷含量下降。     

蒽醌类成分在三承气汤复方配伍中变化规律

目的:研究复方配伍对三承气汤中君药大黄的有效成分蒽醌类溶出率的影响.方法:分别采用RP-HPLC法和比色法,测定大黄单味水煎液及三承气汤的不同煎煮方法、不同配伍的水煎液中游离大黄酸、大黄酚和结合型大黄酸、大黄酚的含量及游离总蒽醌和结合型总蒽醌的含量.结果:与大黄单味水煎液相比,多数水煎液中游离蒽醌与结合型蒽醌含量存在显著性差异.煎方中无论是结合性大黄酸,还是结合性蒽醌的含量均按如下顺序减少:大承气汤＞小承气汤＞调胃承气汤.结论:大黄与不同药材配伍、不同煎煮方法,是使三承气汤中的游离蒽醌、结合性蒽醌含量变化的重要原因.三承气汤中结合性大黄酸、结合性总蒽醌含量变化顺序与其泻下作用一致.     

不同溶剂对黄芩-柴胡药对中的药效成分提出的影响

目的:考察水提、醇提对黄芩-柴胡药对中的药效成分黄芩苷、柴胡皂苷a、d提出率的影响.方法:采用RP-HPLC法,测定各提取液中黄芩苷及柴胡皂苷a、d的含量.结果:水提、醇提对黄芩苷提出率影响不大,但对柴胡皂苷的提出率影响较大,对柴胡皂苷a的提取,醇提优于水提2.4～4.7倍,且水提不能将柴胡皂苷d提出.结论:提取溶剂对黄芩苷的提出含量影响不大,但对柴胡皂苷的提出率影响较大,本实验结果为临床合理用药和提高药材利用率提供了依据.     

当归-桃仁药对配伍特点及其效应物质基础研究

目的:探讨当归-桃仁药对不同配比的应用特点及其效应物质基础。方法:基于自建的中医方剂数据库,采用关联规则分析方法,挖掘归纳出当归-桃仁药对在方剂中的配伍特点;采用HPLC法分析当归-桃仁药对共煎液与单煎液不同配比中苦杏仁苷、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸的含量变化;采用凝血时间、抑制血小板聚集和清除DPPH自由基实验评价配伍效应及其作用特点。结果:挖掘归纳出当归-桃仁药对在方剂中的配伍特点及其出现频度;实验结果表明当归-桃仁配伍有利于苦杏仁苷、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸等效应成分的溶出;桃仁当归配伍比同等生药量的桃仁单味药材凝血时间延长,血小板聚集率抑制率增加,DPPH清除率增加;当归桃仁配伍比同等生药量的当归单味药材血小板聚集率抑制率增加,说明两者配伍具有一定的科学性和合理性。结论:当归-桃仁药对具有合理性,有利于两味药中芳香酸类化合物绿原酸、咖啡酸、阿魏酸及苷类化合物苦杏仁苷的溶出;配伍后凝血时间延长,血小板聚集率抑制率增加和DPPH清除率增加,但各配伍比例之间差异不明显。     

柴胡皂苷对芍药苷在Caco-2细胞模型中 吸收转运的影响

目的:研究柴胡皂苷a,d对芍药苷在Caco-2细胞模型中转运的影响。方法:用超高压液相法测定药物浓度,计算表观渗透系数,比较不同浓度芍药苷溶液、及芍药苷配伍柴胡皂苷a,d后在Caco-2细胞模型中双向转运的差别;电阻仪测定电阻,比较试验前后细胞电阻的差异。结果:芍药苷通过Caco-2细胞单层的转运量4 h内随时间延长呈线性增大,其吸收渗透系数较小,浓度为20,50,100μmol.L-1时,吸收渗透系数分别为(0.98±0.10)×10-6,(0.92±0.09)×10-6,(0.89±0.04)×10-6cm.s-1;芍药苷与柴胡皂苷a,d配伍后,吸收渗透系数与单体比较分别增加了2.37,2.54倍,且试验后细胞电阻有显著降低。结论:柴胡皂苷a,d能促进芍药苷的肠道吸收,可能与柴胡皂苷能打开Caco-2细胞间的紧密连接有关。     

方药配伍对白芍中没食子酸溶出率的影响

目的建立UPLC方法测定白芍不同配伍煎液中没食子酸含量,研究配伍对没食子酸溶出率的影响。方法采用Waters Acquity UPLC BEHC18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱;以乙腈-0.5%醋酸为流动相(2∶98,V/V);流速:0.3ml/min;柱温:40℃;检测波长271 nm;进样量:3μl,分析白芍不同配伍煎液中没食子酸含量。结果 UPLC方法快速、灵敏、准确,可靠,重复性好。白芍不同配伍煎液中没食子酸含量大小为:四逆散>芍药甘草汤>白芍单煎液,结果有显著性差异(P<0.01)。结论 方药配伍对其白芍的活性成分没食子酸的溶出率有显著影响。     

基于UPLC-Q-TOF-MS分析雷公藤配伍甘草治疗肾病综合征大鼠的尿液代谢组学

目的:考察雷公藤配伍甘草对肾病综合征大鼠尿液中内源性代谢产物的影响,通过尿液代谢组学技术探讨该药对的作用机制。方法:大鼠随机分为4组,分别为空白组、模型组、雷公藤单独给药组(TPW组)和雷公藤配伍甘草给药组(TPW-GLY组)。采用UPLC-Q-TOF-MS,结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),对尿液样品的代谢物图谱进行模式识别及生物标记物的筛选与鉴定。结果:空白组,模型组,TPW组及TPW-GLY组的代谢轮廓有明显差异,筛选并鉴定出空白组与模型组间具有显著性差异的生物标记物29个,其中受TPW-GLY组回调的生物标记物14个,受TPW组回调的生物标记物11个;TPW-GLY组和TPW组显著差异物7个,分别为N-乙酰谷氨酸,二羟基粪甾烷酸,烟尿酸,12-酮脱氧胆酸,甘油三酯(16∶0/16∶0/20∶4),泛醌Q2和1,3,7-三甲基尿酸。结论:雷公藤与甘草配伍给药后,可能通过改善肾病综合征大鼠体内的氨基酸代谢、胆汁酸代谢、脂肪及脂肪酸代谢、能量代谢及嘌呤代谢等过程,改善了疾病状态,进而起到减毒增效的作用。     

血清同型半胱氨酸与高血压病不同中医证型的相关性研究

摘 要 目的:探讨血清同型半胱氨酸（Hcy）与高血压病不同中医证型的相关性。方法:选取180例原发性高血压病患者作为研究对象,根据中医辨证分型的不同分为四组:气血亏虚组、肝肾阴虚组、痰浊上蒙组、风阳上扰组,对所有患者进行血清Hcy及血脂检测,对比不同证型患者的Hcy、血脂水平,分析血清Hcy与中医证型的关系。结果:四组的血清Hcy及各项血脂指标比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。痰浊上蒙组的血清Hcy水平＞气血亏虚组＞肝肾阴虚组＞风阳上扰组;痰浊上蒙组的TC、TG、LDL C水平均显著高于另外三组（P＜0.05）。四组的H型高血压占比比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,痰浊上蒙组的H型高血压占比＞气血亏虚组＞肝肾阴虚组＞风阳上扰组（P＜0.05）。结论:血清Hcy与高血压病中医证型密切相关,各证型的血清Hcy水平有一定差异,临床可将血清Hcy水平检测作为高血压病中医辨证及治疗的一项参考指标。     

泻心汤不同配伍抗炎作用比较研究

目的对泻心汤不同配伍抗炎作用进行研究,以阐明该方的配伍原理。方法采用脂多糖(LPS)小鼠急性炎症模型,以血清NO浓度变化作为炎症指标,观察ig泻心汤生药18g/kg对血清NO浓度经时变化的影响;ig泻心汤生药4.5、9、18g/kg对血清NO浓度的影响;按正交设计,观察ig泻心汤不同配伍,即大黄、黄连、黄芩、大黄 黄连、大黄 黄芩、黄连 黄芩、全方(全方组生药18g/kg,其余各组按照在全方中的等量生药剂量给药)对血清NO浓度的影响。结果泻心汤给药后小鼠血清NO浓度均较对应时间点模型组低,6h差异显著,12、15h差异非常显著;泻心汤各剂量组小鼠血清NO浓度均较模型组低,高剂量组差异显著;不同配伍结果显示,除黄连组外,各给药组血清NO浓度与模型组相比差异显著;正交分析表明,在抗炎方面,大黄为该方第一要药,黄芩其次,黄芩与大黄有协同作用,黄连无明显作用及影响。结论在抗炎方面,泻心汤中大黄为第一要药,黄芩其次,黄芩与大黄有协同作用。     

黄连与人参配伍后生物碱的含量变化

目的:探讨黄连与人参不同配伍剂量对水煎液中盐酸小檗碱、盐酸药根碱含量的影响。方法:人参黄连分别按1∶0,2∶1,1.5∶1,0.5∶1比例配伍,煎煮制备水煎液,采用HPLC测定不同配伍剂量水煎液中黄连生物碱的含量。结果:人参-黄连不同配伍样品中盐酸小檗碱质量分数分别为36.68,39.41,44.33 mg·g-1,盐酸药根碱分别为8.607,8.349,10.790 mg·g-1,二者含量随人参用量的减少而增加。结论:黄连-人参配伍后不利于盐酸小檗碱和盐酸药根碱的溶出,按0.5∶1配伍时黄连中2种生物碱含量均最高。     

附子与人参不同配伍对心肌细胞的减毒作用

目的:探讨附子配伍不同比例人参的减毒作用。方法:将原代培养6 d的心肌细胞分为空白(NC)组,不同比例的附子人参(AG)组,空白血清(BS)组。AG组加入含有不同配伍比例的附子人参的载药血清,观察药物对原代培养心肌细胞的自发搏动的影响,检测心肌细胞的细胞活力,测定原代心肌细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量,测定上清液中一氧化氮(NO)分泌量和乳酸脱氢酶(LDH)释放率,利用分光光度法检测半胱氨酸蛋白酶(Caspases-3)活性,Western blot法检测Bcl-2和Bax的蛋白表达,RT-PCR检测Bcl-2和Caspases-3 mRNA的表达。结果:与附子-人参按1∶0配伍的载药血清(AG1∶0)组比较,加入附子配伍不同比例人参载药血清后,心肌细胞自发搏动频率显著降低,心肌细胞内SOD活性显著升高,MDA含量,NO分泌量和LDH释放率显著降低,Caspases-3活性,Bax蛋白表达和Caspases-3 mRNA表达显著降低,Bcl-2蛋白表达和Bcl-2 mRNA表达显著升高,细胞活力在作用2~4 h显著升高,均为显著性差异(P0.05)。AG1∶0.5组对心肌细胞以上各项检测指标的影响与BS组比较不具有显著性差异。结论:附子配伍不同比例的人参可抑制附子对心肌细胞的毒性作用,其中附子-人参配比为1∶0.5时,人参可有效地抑制附子的毒性作用。     

虎杖不同配伍对糖尿病肾病大鼠糖、脂代谢及血液流变学指标的影响

目的: 观察虎杖分别与黄芪、益母草配伍对糖尿病肾病模型大鼠糖、脂代谢及血液流变学指标的影响,初步探讨其对糖尿病肾病早期干预作用机制。方法: 运用链脲佐菌素诱发SD大鼠糖尿病肾病(DN)模型。成模大鼠随机分为模型组、开博通组、虎杖-益母草配伍组、虎杖-黄芪配伍组。空白组10只,模型组15只,其余3组每组13只。虎杖与益母草配伍、虎杖与黄芪配伍合煎液灌服剂量为3 g·kg^-1,开博通组灌服博通剂量为6.25×10^-3g·kg^-1,模型组和空白组灌服同体积10 mL·kg^-1的生理盐水,每天给药1次,连续给药8周。以血糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(Chol)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-L)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血流变学等为观察指标。结果: 虎杖-黄芪组、虎杖-益母草组在用药第4,8周能明显降低DN模型大鼠血糖水平(P<0.05),明显降低TG水平(P<0.05),对模型大鼠全血黏度、血浆黏度有明显减轻作用,具有显著性差异。其中,虎杖-益母草组对血浆黏度减轻明显(P<0.01)。结论: 虎杖分别配伍黄芪、益母草①对糖尿病肾病糖、脂代谢及血流变具有调节作用;②可能通过降低血糖、甘油三酯等水平,降低全血与血浆黏度,改善微循环,发挥其对糖尿病肾病干预作用。     

不同配伍组方对麻黄细辛附子汤体外经皮渗透行为的影响

目的:探讨不同配伍组方对麻黄细辛附子汤(MXF)体外经皮吸收的影响,以阐明MXF外用的配伍机制,为其经皮给药提供科学依据,也为中药复方外用配伍机制研究积累数据。方法:采用Franz体外扩散池法,以含1%聚山梨酯-80的生理盐水溶液为接受液,采用麻黄生物碱类成分(盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱),附子生物碱类成分(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰乌头原碱)和细辛挥发油类成分(细辛脂素和甲基丁香酚)的12 h累积渗透量(Q12 h)和稳态渗透速率(Jss)为指标,考察麻黄组、附子组、细辛组、麻黄-附子组、麻黄-细辛组、附子-细辛组、麻黄-附子-细辛组(全方组)对大鼠背部的透皮吸收情况。结果:各成分的Q12 h和Jss比较,盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱排序均为全方组麻黄-细辛组麻黄组麻黄-附子组,且盐酸麻黄碱盐酸伪麻黄碱;苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰乌头原碱排序均为附子-细辛组附子组麻黄-附子组全方组,且苯甲酰新乌头原碱苯甲酰乌头原碱苯甲酰次乌头原碱;甲基丁香酚排序为细辛组麻黄-细辛组附子-细辛组全方组。各组中细辛脂素的Q12 h和Jss差异不大。结论:不同配伍组方对MXF中各指标成分的经皮吸收有影响,且对不同成分的影响程度不同;成分不同,经皮吸收效果也不同。细辛对盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰乌头原碱的经皮吸收具有一定的促进作用,附子对盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的经皮吸收均有一定抑制作用,麻黄和附子均会对甲基丁香酚的经皮吸收起到显著抑制作用。     

四逆汤组方不同配伍毒效关系研究

目的: 从药效和毒性两个方面对于四逆汤处方配伍进行研究,为四逆汤复方配伍的合理性提供实验依据。 方法: 平行比较附子、四逆汤全方、附子配伍甘草、附子配伍干姜对小鼠急性毒性,测定其半数致死剂量（LD₅₀）。开展了附子、四逆汤全方、附子配伍甘草、附子配伍干姜对阿霉素导致大鼠心衰模型影响研究,观察了受试物对心衰大鼠颈总动脉血流量、心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、左室舒张末压（LVEDP）、左室内压力上升的最大速率（+dp/dt_max） 及左室内压力下降的最大速率（-dp/dt_max）的影响。 结果: 急性毒性实验结果显示,四逆汤处方配伍中附子配伍甘草对附子的减毒作用要优于附子配伍干姜,在减毒方面甘草起主要作用。四逆汤对阿霉素导致大鼠心衰模型试验结果显示,四逆汤全方、附子配伍甘草、附子配伍干姜和单用附子药效作用相似,均是通过增加心率、提高LVSP、增加+dp/dt_max,提高颈动脉血液流量起到治疗作用。附子配伍干姜对于附子的药效促进作用优于甘草,在增加处方药效方面干姜起主要作用。 结论: 四逆汤组方中甘草在减低处方的毒性方面起主要作用,干姜在增强附子药效方面起主要作用,从药效和毒性两方面阐明四逆汤处方配伍规律的合理性。     

戊己丸不同配伍组方体内对CYP1A2酶活性的影响研究及其临床意义

目的：研究戊己丸不同配比方对大鼠体内CYP1A2 酶活性的影响,从药动学角度探讨戊己丸配伍机理,为临床优化给药提供借鉴。方法：以非那西丁为CYP1A2 酶活性研究探针药,HPLC 测定大鼠体内非那西丁及代谢产物——对乙酰氨基酚的血药浓度变化,间接反映CYP1A2 酶活性的大小;以正交法设计戊己丸3 因素3 水平交互的9 个实验点,考察所选取实验点对应的9 种戊己丸配比方对CYP1A2 酶活性的不同影响。结果：9 种戊己丸配比复方,组成戊己丸的黄连、吴茱萸、白芍3 单味药及对照组动物中,CYP1A2 酶活性从高到低依次为：8# 方、白芍、9# 方、7# 方、6# 方、1# 方、2# 方、4#方、对照组、3# 方、黄连、吴茱萸、5# 方;随着复方中黄连剂量水平的增大,酶活性呈增高趋势,复方中引入小、中剂量水平的吴茱萸或白芍可以增高CYP1A2 酶活性,但高剂量吴茱萸或白芍对CYP1A2 酶活性有抑制作用。结论：戊己丸各因素水平变化均可能对CYP1A2 酶活性造成影响,此种影响有可能是戊己丸药效学差异的原因之一;根据本实验结果可以优化戊己丸的临床应用。     

灯盏细辛-赤芍组方配比及给药途径的脑保护作用

目的: 研究灯盏细辛与赤芍不同组方配比及给药途径对大鼠局灶性脑缺血的脑保护作用。 方法: 线栓法制作大鼠中动脉缺血再灌注损伤模型。SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物组、灯盏细辛与赤芍不同组方配比给药组。各组动物按各自不同的途径(iv,ig)给药,在预定时间测定神经行为学、脑梗死率等7个关键生物学指标。结果采用析因实验设计及分析方法(2×4),通过对各因素(途径、配方)下各个水平(4个不同配比处方)的全部组合进行实验。用SPSS 13.0统计学软件对数据进行分析处理,分析考察因素及其交互作用对指标影响的显著性,同时进一步考察各因素下水平间的显著性差异。 结果: 60%赤芍组静脉注射给药,对拟适应症相关的神经行为学、脑梗死率等7个关键生物学指标具有统计学意义。 结论: 60%赤芍组静脉注射给药,对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有一定的脑保护作用。