减压内部沸腾法提取黄精多糖的工艺

目的研究减压内部沸腾法提取黄精中多糖类成分的最佳工艺参数。方法采用单因素试验,以黄精多糖的得率为评价指标,研究提取压力、提取温度、提取时间、提取次数、解吸液种类、液料比等因素对提取效果的影响,并与传统水提法等进行比较研究。结果最佳工艺为以60%乙醇溶液为解吸液,解吸30 min,提取压力-0.074 MPa,提取温度75℃,液料比14∶1,提取时间8 min,提取2次。结论该方法具有快速、高效、低成本等优点,提取效果优于传统提取方法。     

叶下珠中没食子酸的定性定量方法研究

目的建立叶下珠中没食子酸的定性定量方法。方法用薄层色谱法对叶下珠有效成分没食子酸进行定性分析,采用高效液相色谱法测定没食子酸的含量。以KromosilODSC18柱为固定相,流动相为甲醇-0.1%磷酸(13∶87),检测波长272 nm,柱温为室温。结果没食子酸在0.10~0.67μg的范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率97.43%;RSD1.31%。结论本方法灵敏、准确可靠,重复性好。     

叶下珠提取工艺探讨

用双波长薄 层扫描法测定了 叶下珠常温 水浸 法,煎 煮法,５５ ％ 乙 醇渗 漉提 取法 及５５ ％ 乙 醇回 流提取法４ 种提 取工艺及提取液 中有效成分的 含量。提示,用渗 漉法提取最佳     

解吸—减压内部沸腾法提取黄芩苷的工艺研究

目的研究解吸-减压内部沸腾法提取黄芩苷的工艺。方法采用单因素考察法,以浸膏得率、黄芩苷得率及纯度为评价指标,研究解吸-减压内部沸腾法提取黄芩苷的工艺参数,并与常规水煎煮提取法、乙醇回流提取法进行比较。结果最佳工艺为药材粗粉加入2.5倍70%乙醇溶液,解吸30 min,再加入15倍50℃热水,提取压力-0.04 MPa,提取温度50℃,提取时间10 min,提取2次。结论该方法具有快速、节能、高效等优点,提取效果优于传统提取方法,有进一步推广应用的价值。     

叶下珠提取工艺的研究

目的优选叶下珠的提取工艺.方法采用正交试验法,以总黄酮含量为检测指标优选叶下珠提取工艺的最佳条件.结果影响提取的主次因素为D＞A＞B＞C(A为乙醇浓度,B为乙醇用量,C为提取时间,D为提取次数).最佳提取条件为7倍量70%乙醇,提取3次,每次2 h.结论优选得到的工艺稳定可行.     

内部沸腾法提取分离葛根中的葛根异黄酮和大豆异黄酮

目的:采用正丁醇为提取溶剂的内部沸腾法提取葛根异黄酮和大豆异黄酮。方法:用少量乙醇溶液润湿葛根粉末使其中的葛根异黄酮充分解吸,然后加入一定温度的含水正丁醇溶液,使渗透到葛根组织内部的乙醇沸腾,强化提取过程。由于大豆异黄酮与葛根异黄酮在丁醇中的溶解度有较大差异,因此浓缩过程中可采用分步蒸发浓缩结晶,浓缩除去部分溶剂后,结晶分离出大豆异黄酮,最后蒸干结晶母液,得到葛根异黄酮。结果:在80mL60%乙醇、解吸时间20min、含水量20%的600mL正丁醇温度90℃时,总黄酮得率可达到11.3%。当浓缩除去90%的溶剂时,大豆异黄酮与葛根异黄酮的质量比为1∶3。经液相检测,葛根异黄酮中葛根素含量可达46.0%;大豆异黄酮中大豆苷的含量为6.12%。结论:内部沸腾提取及溶剂蒸发结晶分离的工艺简单,为从葛根中同时提取大豆异黄酮与葛根异黄酮的工业化生产提供了依据。     

景天三七中没食子酸的提取

本文运用不同溶剂对景天三七中没食子酸进行提取,同时测定其中没食子酸的含量。方法采用高效液相色谱法进行分析。色谱条件为流动相为甲醇-磷酸水溶液(pH3.0)(9010),检测波长271nm,流速1.0ml.min-1。结果表明没食子酸含量在0.3430μg~1.200μg范围内呈良好线性关系(r=0.9997)。     

内部沸腾法提取槐米中的芦丁及其动力学和热力学研究

目的采用内部沸腾法提取槐米中的芦丁,并对其提取过程中的动力学和热力学进行研究。方法内部沸腾法提取槐米中的芦丁,通过单因素实验进行优化,并计算提取过程中的传质系数k,活化能及热力学函数ΔH,ΔS和ΔG。结果当乙醇体积分数为80%,解吸液料比为2.4 m L/g,解吸时间为30 min,提取剂乙醇体积分数为10%,提取液料比为16 m L/g,提取温度为80℃~90℃,芦丁内部沸腾法提取过程在200 s内完成,提取速率比乙醇回流法快24倍;内部沸腾法提取过程的传质系数k在0.004 9~0.006 9 s-1,大于乙醇回流提取的7.00×10-4s-1;提取过程的活化能和热力学参数,ΔE为35.65 k J/mol,ΔH为168.05 k J/mol,ΔS为481.33 J/(mol·K),ΔG为-4.34 k J/mol(85℃)。结论内部沸腾法的提取过程是吸热熵增加的过程,ΔG小于零,为自发过程。     

纤维素酶辅助提取叶下珠黄酮的工艺优选

目的:优选纤维素酶辅助提取叶下珠黄酮提取工艺条件,为叶下珠的高效利用提供依据。方法:采用单因素试验研究料液比、提取温度、提取时间和酶浓度对叶下珠黄酮提取得率的影响,通过正交试验优选纤维素酶辅助提取叶下珠黄酮的工艺条件。结果:纤维素酶辅助提取叶下珠黄酮的最佳工艺条件为酶质量浓度4.25 g.L-1,提取温度40℃,料液比1∶30,提取时间1.5 h。在此条件下,黄酮的提取得率为1.51%。结论:采用纤维素酶辅助提取叶下珠黄酮,提取效果较好,该方法具有较好的应用前景。     

叶下珠总黄酮的半仿生提取工艺

目的 研究半仿生法提取叶下珠总黄酮的工艺条件.方法 利用正交实验对叶下珠总黄酮的半仿生法提取工艺进行了优选,以黄酮提取得率为考察指标,考察提取温度、提取时间和料液比三因素对总黄酮提取得率的影响.结果 实验得到的最佳提取工艺条件为,料液比1∶20,在85℃下每次提取1.5h,分别以pH 2.0、7.5、8.3的水溶液为提取溶剂各提取一次.在此条件下,黄酮的提取得率较高,均值为1.505％.结论 研究结果可为进一步开发利用叶下珠植物资源提供科学依据.     

叶下珠高效液相色谱指纹图谱研究

目的:建立叶下珠药材的高效液相色谱指纹图谱.方法:采用反相高效液相色谱法,以柯里拉京为内参比峰.色谱条件为Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5μm),流动相乙腈-体积分数为0.1％的磷酸水,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长280 nm.采用SPSS 16.0软件进行系统聚类分析;采用国家药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2009版)进行相似度评价.结果:在色谱指纹图谱中,确立了21个共有峰,指认了其中6个色谱峰,系统聚类分析将14批叶下珠药材分为两类,建立了叶下珠药材的共有模式,在14批叶下珠药材中有12批样品的指纹图谱相似度在0.90以上.结论:该方法简便、准确、重复性好,为评价叶下珠药材的质量提供了依据.     

Effects of Phyllanthus urinaria extract on HepG2 cell viability and oxidative phosphorylation by isolated rat liver mitochondria

Ethnopharmacological relevance

Phyllanthus urinaria is widely used as anti-inflammatory, anti-diarrheal and hepatoprotective medicines in Asian countries such as India, China and Thailand. In Thailand, Phyllanthus urinaria is traditionally used as an adjuvant or alternative medicine for cancer patients, including liver cancer. However, there is limited scientific evidence supporting its use in cancer particularly hepatocellular carcinoma.

Aim of the study

To investigate the cytotoxic effect of Phyllanthus urinaria extract on human hepatocellular carcinoma HepG2 cells and the effect on oxidative phosphorylation by isolated rat liver mitochondria.

Materials and methods

HepG2 cells and isolated rat liver mitochondria were treated with the 50% methanolic extract of Phyllanthus urinaria. Cytotoxicity of the extract was assessed by trypan blue exclusion and MTT assay. Rates of oxygen consumption of isolated mitochondria were determined with a Clark oxygen electrode.

Results

It was found that the hydromethanolic extract induced cell death of HepG2 cells in a dose-dependent fashion. The IC₅₀ of Phyllanthus urinaria extract measured by trypan blue exclusion and MTT assay were 431 ± 65 μg/ml and 445 ± 62 μg/ml, respectively. Morphological changes of the cells were also observed. With isolated rat liver mitochondria, the extract slightly stimulated mitochondrial state 4 respiration but profoundly depressed state 3 respiration and respiratory control ratio.

Conclusions

The extract impairs energy metabolism by acting as inhibitor of oxidative phosphorylation and weak mitochondrial uncoupler. These mitochondrial effects may play a role in the cytotoxic action of Phyllanthus urinaria extract on HepG2 cells. These results provide preliminary experimental evidence supporting the use of Phyllanthus urinaria against hepatocellular carcinoma and open the possibility of considering this plant an adjunctive medicine for the treatment of this deadly disease.     

白花檵木中没食子酸和总酚提取工艺

目的:建立白花檵木中没食子酸和总酚的最佳提取工艺.方法:以没食子酸和总酚含量为考察指标,筛选回流、渗漉、索氏、超声4种不同提取方法,正交试验优选溶媒、料液比、提取时间及提取次数4个工艺参数.结果:最佳提取工艺为采用回流提取法,8倍量60％乙醇提取3次,每次2h.结论:采用该方法提取没食子酸和总酚,具有提取效率高、稳定性好等特点,适应于工业生产.     

圆果化香树中没食子酸的含量测定

目的:建立圆果化香树中没食子酸的HPLC含量测定方法。方法:Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.2%磷酸(3∶97),检测波长270 nm。结果:没食子酸进样量在0.096～0.48μg线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为97.8%,RSD 1.79%。结论:方法准确、简便、易行,可用于圆果化香树中没食子酸的含量测定树皮中含量较高。     

HPLC测定猴耳环不同部位中没食子酸和槲皮素的含量

目的:测定猴耳环药材不同部位没食子酸和槲皮素的含量,为合理开发利用猴耳环资源提供理论依据。方法:采用高效液相法,色谱条件:Kromosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸溶液梯度洗脱,流速1 mL.min-1,检测波长254 nm。结果:没食子酸和槲皮素的含量均是在叶中最高,幼枝中次之,茎干中含量最低,茎干中没有检测出槲皮素。结论:HPLC简便可行、重复性好,适用于猴耳环2种成分的同时测定,可用于猴耳环的质量控制。     

正交试验优选黔产铁苋菜中没食子酸的提取工艺

目的: 优选黔产铁苋菜中没食子酸的提取工艺。 方法: 采用HPLC测定铁苋菜中没食子酸含量,Diamonsil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-0.05% 磷酸(4:96),检测波长270 nm,柱温室温,流速1 mL·min^-1,进样量10 μL。以没食子酸转移率为指标,通过单因素试验筛选提取溶媒和提取方法,采用正交试验考察液固比、乙醇体积分数、提取温度、提取时间对提取工艺的影响。 结果: 选择乙醇为提取溶媒,采用回流法提取。最佳提取工艺条件为加30倍量70% 乙醇于90 ℃提取2次,每次4 h,没食子酸平均转移率7.888 mg·g^-1(RSD 1.60%)。 结论: 优选的提取工艺稳定可行,为黔产铁苋菜的开发利用提供实验依据。     

叶下珠化学成分研究

目的研究叶下珠Phyllanthus urinaria全草的化学成分。方法应用硅胶、Sephadex LH-20、RP_(18)、MCI-gel柱色谱和半制备HPLC等色谱方法对叶下珠的乙醇提取物进行分离纯化;根据理化性质和波谱学方法鉴定化合物的结构。结果从叶下珠95%乙醇提取物的石油醚和醋酸乙酯萃取部位中分离得到16个化合物,分别鉴定为没食子酸(1)、咖啡酸(2)、没食子酸乙酯(3)、没食子酸甲酯(4)、4-乙氧基苯甲酸(5)、邻苯二甲酸二异丁酯(6)、邻苯二甲酸二丁酯(7)、(4R,6R)-2,3-dihydromenisdaurilide(8)、(4R,6S)-2,3-dihydromenisdaurilide(9)、aquilegiolide(10)、menisdaurilide(11)、cassipourol(12)、(9Z,12Z)-nonadeca-9,12-dienoic acid(13)、亚油酸甲酯(14)、豆甾醇(15)、(8R,8'S,7S)-4'-(3"-methoxyrhamnopyranosyl)oxy-8'-hydroxy-3,3',4-trimethoxy-8-hydroxymethyl-lign-7,9'-lactone(16)。结论化合物5~7、10、11、13、14为首次从该植物中分离得到,化合物8、9、12、16为首次从该属植物中分离得到。     

余甘子对肿瘤细胞抑制作用及免疫调节的研究

目的 :运用中药血清药理学的研究方法,研究余甘子对S180荷瘤小鼠肿瘤存活率、主要免疫器官及红细胞免疫调节能力的影响。 方法 :余甘子采用鲜果榨汁经冷冻干燥保存。建立小鼠肿瘤模型,模型小鼠随机分组,小鼠末次给药后摘眼球取血,分离红细胞、淋巴细胞,进行肿瘤红细胞淋巴细胞混合花环实验;观察不同剂量给药组对小鼠肿瘤抑制率及脾、胸腺指数的影响。 结果 :与模型对照组比较,余甘子大剂量组红细胞促淋巴细胞黏附肿瘤细胞能力及抑制肿瘤存活率具极显著差异性;与阳性对照组比较,各剂量组对免疫器官的影响均具显著差异性。 结论 :余甘子在抑制肿瘤生长的同时,对免疫器官有极好的保护作用。     

HPLC测定地锦草中没食子酸、槲皮素及山柰素含量

目的:建立同时测定地锦草药材中槲皮素、山柰素和没食子酸含量的高效液相色谱法.方法:采用Agilent TCC18(4.6 mm×150mm,5μm)柱分离,以甲醇和0.4％磷酸水溶液进行梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL?min -1.结果:没食子酸在0.051 8 ～0.621 6μg线性关系良好,平均回收率在102.17％ (RSD2.83％),槲皮素在0.070 2 ～0.702 0 μg线性关系良好,平均回收率在97.80％( RSD 2.42％),山柰素在0.020 4～0.408 0μg线性关系良好,平均回收率在98.02％( RSD2.72％).结论:操作简便,准确度高,重复性好,可作为地锦草质量控制方法之一.