酪氨酸激酶Syk基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的　探讨酪氨酸激酶Syk基因表达与乳腺癌生成及转移的关系 ,以及与雌激素受体(ER)、孕激素受体 (PR)、p5 3、HER2 /neu基因的关系。方法　用半定量逆转录聚合酶链反应检测 4 0例乳腺癌患者癌组织及癌旁正常乳腺组织以及 15例良性乳房纤维瘤组织中SykmRNA的表达 ,并用免疫组化方法检测 4 0例乳腺癌组织中ER、PR、p5 3、HER2 /neu的表达的情况。结果　所有正常乳腺组织都有Syk基因的表达 ,而 4 0例乳腺癌组织中只有 9例表达 ,正常乳腺与乳腺癌组织中Syk基因表达率差异有显著意义 (χ2 =4 7 4 ,P <0 0 5 ) ,且乳腺癌组织中SykmRNA含量明显低于正常乳腺组织 (t =3 4 1,P <0 0 5 )。有淋巴结转移的 18例乳腺癌组织中 ,1例有Syk基因表达 ,有淋巴结转移的乳腺癌SykmRNA的表达率和表达水平显著降低 (χ2 =3 77,P <0 0 5 ,t=2 74 ,P <0 0 5 )。SykmRNA表达与 p5 3基因的表达呈正相关。 结论　Syk基因的表达在抑制乳腺癌的生长及转移过程中可能起着重要的作用     

酪氨酸激酶Syk在肝癌中的表达及与血管生成的关系

目的探讨酪氨酸激酶Syk在肝细胞性肝癌中的表达及对肿瘤微血管生成的影响。方法采用RT-PCR检测Syk mRNA在肝细胞性肝癌及癌旁正常组织中的表达,免疫组化SABC法检测标本中CD34的表达反映肿瘤的微血管密度（MVD）。结果24例癌旁正常组织中Syk mRNA均表达阳性,32例肝细胞性肝癌中Syk mRNA表达率为46.9％（15／32）,其中低分化组阳性表达率23．1％（3／13）,明显低于高分化组阳性表达率63．2％（12／19）（P〈0．05）。肿瘤微血管密度（MVD）检测：低分化组（Ⅲ级Ⅳ级为49．2±3.6,54±4.3）,明显高于高分化组（Ⅰ级Ⅱ级为13．6±4．5,32.3±3．2）与正常组织（5．9±1．7）,有显著统计学意义（P〈0．05）。Syk mRNA的表达与CD34的表达明显负相关（r=-0.97）。结论肝细胞性肝癌中Syk基因的缺失对癌组织血管的生成起重要的作用。     

大肠癌bcl-2基因表达和重排的研究

应用ＡＢＣ免疫组化及半巢式ＰＣＲ法分别对６４例大肠癌中ｂｃｌ－２的蛋白表达及重排进行了检测。结果：ｂｃｌ－２基因异常表达与重排在肠肠癌早期即已出现,随着病程演变,发生率显著增加;ｂｃｌ－２基因的重排在有淋巴结转移者亦明显多于无淋巴结转移者。两法联合应用相比较,以重排列能反映大肠癌分子特性。本提示：ｂｃｌ－２基因参与大肠癌发生发展过程的调节,并在大肠癌细胞的增殖、进展及转移中起重要作用;研究大肠癌ｂ     

大肠癌中P53基因mRNA表达的定量研究

以反转录－０聚合酶链反应定量技术分析３６例大肠癌及３０例正常大肠粘膜中Ｐ５３基因ｍＲＮＡ转录表达。结果发现，大肠癌中Ｐ５３表达显著高于正常大粘膜；肿块直长大于５ｃｍ组Ｐ５３表达显著高于小于５ｃｍ组；ＤｕｋｅｓＤ期中Ｐ５３表达均非常显著高于ＤｕｋｅｓＡ期、Ｂ期。     

p16基因在大肠癌中表达的免疫组织化学研究

抑癌基因的缺失和功能丧失在肿瘤发生发展中起着十分重要的作用，本实验选择了新发现的多肿瘤抑制基因ｐ１６，利用免疫组化ＡＢＣ法检测了结肠癌３１例、直肠癌２２例和正常大肠组织２８例中ｐ１６抑癌基因表达情况。一、材料与方法１．标本来源：（１）实验组：收集第四...     

Cyr61、CTGF和Nov基因在肝细胞癌中的表达及与临床病理特征的关系

目的 探讨CCN家族成员Cyr61、CTGF和Nov基因在肝细胞癌中的表达及其与肝癌的病理特征和侵袭转移的关系。方法 采用半定量的RTPCR方法分析31例肝癌组织和癌旁肝组织中Cyr61、CTGF和Nov基因的表达，并分析其表达与肝细胞癌的临床病理特征的关系。结果 31例肝癌组织中Cyr61和CTGF基因表达量均较癌旁组织高（P〈0．01）。镜下存在静脉浸润的HCC组织中Cyr61基因和CTGF基因表达量明显高于镜下无静脉浸润的HCC组织，Edmondson分级Ⅲ～Ⅳ的HCC组织中CTGF基因表达量明显高于Edmondson分级Ⅰ～Ⅱ的HCC组织的表达量（P〈0.05）。结论 Cyr61、CTGF基因可能在肝癌的发生过程中起重要作用，在肝细胞癌部分病理特征方面存在表达上的差异，提示其可能与肝细胞癌的侵袭转移相关。     

PCNA表达在大肠癌肝转移的意义

作者对手术切作的癌合并肝转移病人２３例和无肝转移的大肠癌病人３０例进行增殖细胞核抗原免疫组化检测和病理特征分析观察，结果表明：（１）大肠癌组织内ＰＣＮＡ阳性细胞均有表达。但其表达程度或数量在两组间有明显差异，在肝转移组中主要以阳性表达为主占６５．２１％，而对照组强阳性表达占２０％。原发癌灶与转移癌灶ＰＣＮＡ阳性细胞表达程度基本一致，两者无明显差别；（２）大肠癌镜下侵犯肠壁深度在肝转移组多浸润至深肌     

自杀基因联合化疗药物治疗结肠癌的体外研究

目的 研究胞嘧啶脱氨酶基因（CD）联合化疗药物对结肠癌的治疗作用。方法 以重组腺病毒AdCMVCD为载体转移CD基因，在体外研究病毒感染对顺铂（CDDP）、丝裂霉素（MMC）敏感性的影响，化疗药物对AdCMVCD/５-FC直接杀伤作用及“旁观者效应”的影响。结果 病毒感染并不影响Lovo细胞对CDDP、MMC的敏感性；低剂量CDDP、MMC即可明显增强AdDMVCD/5-FC系统的直接杀瘤作用，５-FC的IC50明显降低（P＜0．05），并且增强AdCMVCD/5-FC系统的“旁观者效应”。结论 化疗药物可以增强自杀基因系统对结肠癌的治疗作用，自杀基因和化疗药物有望联合应用于结肠癌的治疗。     

8型腺相关病毒介导的TRAIL基因促结肠癌细胞凋亡的实验研究

目的观察8型腺相关病毒介导的TRAIL基因对结肠癌HCT116细胞凋亡的诱导作用并探讨其作用机制.方法采用三质粒磷酸钙共沉淀方法转染HEK293细胞,制备出携带TRAIL基因的8型重组腺相关病毒;重组病毒感染结肠癌细胞及正常人肝细胞,利用台盼蓝染色计数法测定细胞生长活性;光镜下观察病毒感染后细胞大体形态改变;Hoechst染色荧光显微镜下观察细胞核形态的改变;DNA凝胶电泳观察细胞凋亡的发生;蛋白印迹检测凋亡相关基因caspase-3,caspase-8蛋白表达的变化.结果携带TRAIL基因的8型重组腺相关病毒能够激活caspase通路,促进结肠癌细胞凋亡,有效抑制结肠癌细胞的生长,而对正常人肝细胞的生长没有影响.结论8型腺相关病毒介导的TRAIL基因能够抑制结肠癌细胞HCT116的体外生长,对正常细胞没有毒性.     

脾酪氨酸激酶基因甲基化与结直肠癌临床病理特征之间的关系

目的探讨脾酪氨酸激酶（Syk）基因甲基化、表达水平与结直肠癌患者临床病理特征及预后之间的关系。方法收集2001年1～12月间经手术治疗的120例结直肠癌标本．采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分析Syk基因的甲基化状态和表达情况，并分析Syk基因甲基化失表达与结直肠癌临床病理特衙和生存预后之间的关系。结果（1）120例结直肠癌患者中，48例肿瘤组织未检测到Syk基因的表达，而正常组织Syk基凶均表达；差异有统计学意义（X^2=60，P=0．000）。（2）发生甲基化的37例肿瘤组织中，Syk基因均失去表达。未发生甲基化的83例中，仅11例失表达；而癌旁匹配的正常组织均有表达。（3）Syk基因的甲基化状态与结直肠癌的淋巴结转移状态、病理分期密切相关，而与其他临床参数无关。（4）术后随访资料表明，Syk基因甲基化组患者的3年生存率明显低于未甲基化组（73．5％比95．7％，P=0．007）；而术后复发转移率明显高于未甲基化组（32．4％比8．4％，P=0．02）。结论Syk基因过甲基化失表达参与了结直肠癌的发生，导致结直肠癌侵袭性增强，患者术后复发转移率升高，3年生存率降低。     

睾丸肿瘤组织中C－myc基因扩增和表达及其临床意义

为了探讨Ｃ－ｍｙｃ与睾丸肿瘤发生及预后的关系，应用核酸杂交方法检测２７例睾丸肿瘤组织中Ｃ－ｍｙｃ基因扩增。结果显示，仅２例睾丸肿瘤有Ｃ－ｍｙｃ基因扩增。同时用免疫组化方法检测睾丸肿瘤中Ｃ－ｍｙｃ蛋白表达水平，有１２例发现Ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性表达，并且与睾丸肿瘤的病理分级和临床分期有关。提示睾丸肿瘤中Ｃ－ｍｙｃ基因的扩增现象并不常见，但睾丸肿瘤恶性程度与Ｃ－ｍｙｃ蛋白表达具有明显相关性，Ｃ－ｍｙｃ蛋白表达可能成为睾丸肿瘤预后的指标。     

人γ-干扰素基因在大肠癌细胞中的表达研究

目的 探讨γ-干扰素用于基因治疗的有效途径。方法 将人γ-干扰素（huIFN-）全长cDBA经序列测定后克隆到真核表达质粒pcDNA-3-IFN-γ，利用阳离子脂质体Lipofectamine介导转传染人大肠癌细胞，用PCR、RT-PCR对该基因的整合和表达进行鉴定，并对细胞培养上清中γ-干扰素的活性进行检测。结果 该基因已经有效地进入人细胞内并实现了表达。结论 利用脂质体可以有效地将huIFN-γ基因悼入肿瘤细胞内，并获得稳定表达。     

温热疗法增强前药氟胞嘧啶对转基因结肠癌细胞株的杀伤作用

目的 探讨温热疗法能否增强前药5-氟胞嘧啶（5-fluorocytosine，5-FC）对转染组织特异性胞嘧啶脱氨基酶（cytosine deaminase，CD）基因的结肠癌细胞SW480的靶向性杀伤作用及其机制。方法 将转染G1CEACDNa之结肠癌SW480细胞接种到96孔细胞培养板中，同时加入含各种浓度梯度的前药5-FC。实验组以水浴加温法在43℃下热处理30min，对照组不加热。第8d去除培养液，以MTT法测定活细胞比率，分析前药5-FC联合温热疗法对转CD基因结肠癌SW480细胞的杀伤作用，并以流式细胞仪分析热化疗对肿瘤细胞周期的影响，透射电镜观察热化疗前后肿瘤细胞形态学改变。结果 实验组细胞的杀伤率明显高于对照组（P〈0．05，t=2．403，n=9）；流式细胞仪检测显示实验组S期细胞比例明显增高（P〈0．001，t=7．158，n=6）；透射电镜观察下显示实验组细胞膜微绒毛消失，边缘变平直，细胞核皱缩，染色质聚集在核模下。结论 温热疗法能明显提高转CD基因结肠癌SW480细胞对前药5-FC的敏感性；两者联用能使转CD基因结肠癌SW480细胞产生S期阻滞，从而促进细胞凋亡。     

结肠癌蛋白质组学研究进展

结肠癌是一种常见的致死性疾病,发病率逐年上升.蛋白质组学已经成为当今研究结肠癌发病机制、早期诊断、治疗及预后的热点之一,并取得了很大进展.近年来,运用蛋白组学技术发现了越来越多的结肠癌相关的生物标志物.本文就结肠癌蛋白质组学研究进展作一综述.     

反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞bcl-2基因的表达并增强凋亡的研究

目的　观察反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞bcl 2基因的表达并诱导凋亡和增强化疗的敏感性。方法　应用反义硫代寡核苷酸 (bcl 2SON)和顺铂共同处理结肠癌细胞系SW62 0 ,通过流式细胞仪观察其bcl 2蛋白表达的变化 ,并通过原位末端标记法 (TUNEL)染色和流式细胞仪检测细胞凋亡指数。结果　用bcl 2SON处理过的SW62 0细胞其bcl 2蛋白平均荧光强度 (MFI)为(40 .3± 8.7) %与空白对照及随机链对照组相比 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) ,表明导入反义bcl 2后可明显抑制结肠癌细胞的bcl 2蛋白的表达。经bcl 2SON和 1 0mg/L顺铂共同处理的SW62 0细胞凋亡指数为 (64 .7± 8.4) % ,显著高于单纯顺铂处理组的 (2 3 .6± 6 .3) % (n =5 ,P <0 .0 1 )以及单纯bcl 2SON处理组的 (2 7.5± 5 .1 ) % (n =5 ,P <0 .0 1 )。而未经处理的对照组SW62 0细胞凋亡指数则为 (8.5± 1 .2 ) % ,显著低于后两组 (n =5 ,P <0 .0 5)。结论　bcl 2SON可通过抑制结肠癌细胞 (SW 62 0 )bcl 2蛋白的表达 ,诱导其凋亡 ,增强对化疗药物的敏感性     

Nucleolin在结肠癌中的表达变化及其临床意义

目的探讨Nucleolin蛋白在结肠癌组织中的表达及其临床病理学意义。方法选取2010年1月至2015年8月结肠癌病理组织标本70例(结肠癌组)和本院病理科既往收集的20例正常结肠组织(正常组)进行免疫组织化学检测,利用统计软件SAS9.1,分析Nucleolin蛋白与结肠癌患者的临床病理学特征和阳性率,组间比较采用χ~2检验,P值0.05表示差异有统计学意义。结果 70例结肠癌组织标本中,Nucleolin蛋白阳性表达54例(77.14%),正常组阳性表达2例(10.00%);结肠癌组Nucleolin蛋白阳性表达率显著高于正常组且差异有统计学意义(χ~2=29.833,P0.05)。是否发生淋巴结转移、不同Dukes分期、不同浸润深度的结肠癌患者癌组织中Nucleolin蛋白阳性表达率差异显著,具有统计学意义(P0.05),不同年龄、性别、病灶最大径的结肠癌患者癌组织中Nucleolin蛋白阳性表达差异不具有统计学意义(P0.05)。结论 Nucleolin蛋白在结肠癌组织中表达水平增高,并且与患者发生淋巴结转移、Dukes分期、浸润深度有关。     

上皮钙黏素1基因启动子甲基化对结肠癌上皮钙黏素和β-连接素表达的影响

目的 探讨上皮钙黏素基因(CDH1)启动子甲基化与结肠癌上皮钙黏素(E-cadherin)及β-连接素(β-catenin)的表达及临床病理特征的关系.方法 采用甲基化特异性PCR技术检测68例结肠腺癌组织、癌旁组织及正常黏膜组织中CDH1基因启动子甲基化的状况.采用免疫组织化学法检测E-cadherin及β-catenin蛋白的表达.结果 癌旁组织及癌组织中CDH1启动子甲基化的阳性表达分别为32.4%(22/68)、57.4%(39/68),正常组织均为阴性表达(P<0.05).E-cadherin在正常组织、癌旁组织及腺癌组织中阳性表达率分别为92.6%、66.2%和44.1%.正常组织中β-catenin均表达于细胞膜上,无胞质和(或)胞核表达,而β-catenin在癌旁组织及癌组织中胞质和(或)胞核表达分别为29.4%和50.0%.CDH1基因启动子甲基化阳性率与E-cadherin表达则呈负相关(r=-0.312,P=0.01),与β-catenin胞质和(或)胞核表达呈正相关(r=0.309,P=0.018).CDH1基因启动子甲基化及E-cadherin、β-catenin的异常表达均与结肠癌分化程度及转移密切相关(P<0.05).结论 CDH1基因启动子甲基化可能是导致结肠癌E-cadherin与β-catenin异常表达及肿瘤侵袭性增强的重要原因.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between methylation of the CDH1 gene promoter on the expression of E-cadherin and β-catenin, and to evaluate the correlation with clinicopathological characteristics of the colonic carcinoma. Methods Methylation specific PCR (MSP) was used to detect CDH1 gene promoter methylation in the cancer tissue, adjacent tissues and normal tissues in 68 patients. The expression of E-cadherin and β-catenin was determined by immunohistochemistry staining. Results The positive rate of CDH1 gene promoter methylation was 32.4% in adjacent tissues and 57.4% in cancer tissue, while no detectable methylation was found in all the normal tissues. The difference was statistically significant. The positive rate of E-cadherin was 92.6% in the normal tissues, 66.2% in the adjacent tissues and 44.1% in the cancer tissues. In all normal tissues, β-catenin was expressed only at the cellular membrane but not in the cytosol or nucleus, while the expression of β-catenin was present in the cytosol or nucleus in 29.4% of the adjacent tissues and 50.0% of the cancer tissues. The positive rate of CDH1 gene promoter methylation was negatively correlated with E-cadherin expression (r =-0.312,P =0.01) and positively correlated with β-catenin cytosolic/nucleus expression(r=0.309,P=0.018). The differentiation and metastasis of colonic carcinoma were associated with the aberrant expression of E-cadherin, β-catenin, and methylation of CDH1 promoter (P<0.05). Conclusion CDH1 gene promoter methylation may lead to aberrant expression of E-cadherin and β-catenin in colonic carcinoma, and may play an important role in promoting the invasion of tumor.