儿童EB病毒感染的分子生物学诊断及临床分析

目的探讨儿童EB病毒感染的临床特征及多系统损害情况,提出分子生物学诊断对临床早期诊断、合理用药的重要意义。方法应用荧光定量PCR技术检查患儿呼吸道分泌物EB-DNA,并结合其他实验室检查进行回顾性分析。结果确诊68例EB病毒感染的患儿临床表现多样,多数患儿有并发症,明确诊断后进行抗病毒治疗,效果良好。结论应用荧光定量PCR技术进行EB病毒检测,在确诊EB病毒感染和指导临床治疗方面具有良好的应用前景。     

成人呼吸道合胞病毒下呼吸道感染临床特征和预后分析

目的 分析成人呼吸道合胞病毒(RSV)下呼吸道感染患者的临床特征及预后.方法 以2016年8月至2019年11月入住中日友好医院呼吸科或重症监护病房(ICU)的RSV核酸阳性患者148例为研究对象,同时取甲型流感病毒(FluA)核酸阳性的下呼吸道感染患者266例为对照组,根据是否合并免疫功能低下,分为免疫功能正常组和免...     

成人呼吸道合胞病毒的电镜和免疫电镜研究

本研究主要探讨呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）成人感染的电镜诊断。应用常规电镜和金标记电镜技术观察９７例ＲＳＶ阳性患者鼻咽部脱落细胞。一些标本的脱落上皮细胞表面在常规电镜下查见ＲＳＶ形态特征的病毒颗粒，免疫电镜可见金颗粒特异性标记。提示，ＲＳＶ是成人呼吸道感染的病原之一。     

2009-2016年广州市呼吸道合胞病毒感染的流行特征及临床特点分析北大核心CSCD

目的分析急性上呼吸道感染患者中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的流行特征及临床特点。方法以南方医科大学珠江医院2009年11月至2016年6月收治的具有发热呼吸道症状患者为研究对象,采集鼻拭子标本3446份,提取标本RNA,采用qRT-PCR方法进行RSV检测,并对RSV阳性标本进行临床上常见的7种(14个亚型)呼吸道病毒的检测,以了解混合感染情况。结果共检测患者标本3446份,其中RSV阳性标本672份,总阳性率为19.5%。4个季节中RSV检出率差异具有统计学意义(χ2=133.184,P<0.001),并以春节最高,冬季次之,夏秋两季最少。RSV感染患者随着年龄的增长检出率逐渐降低,并以3岁及以下儿童检出率最高,占RSV阳性标本数的90.8%(610/672),儿童患者检出率明显高于成年患者(χ2=266.433,P<0.001),男性患者检出率明显高于女性患者(χ2=4.940,P=0.026),住院患者检出率明显高于门诊患者(χ2=60.433,P<0.001)。混合感染标本160份,其中双病毒感染标本143份,3种病毒混合感染16份,4种病毒混合感染1份,并以鼻病毒和呼吸道合胞病毒混合感染率最高,住院患者混合感染率高于门诊患者(χ2=20.896,P<0.001)。与非RSV感染者相比,RSV感染者咳嗽、咳痰、气促/呼吸困难等临床症状发生率均较高(χ2_(咳嗽)=108.934,χ2_(咳痰)=60.626,χ2_(气促/呼吸困难)=38.139,均P<0.001),而咽喉痛、头痛、乏力、寒战/畏寒和肌肉酸痛等发生率相对较低(χ2_(咽喉痛)=46.499,χ2_(头痛)=29.516,χ2_(乏力)=16.972,χ2_(寒战/畏寒)=9.616,χ2_(肌肉酸痛)=8.801,均P<0.001)。此外,RSV感染组与非RSV感染组在临床诊断上也存在统计学差异(χ2=212.157,P<0.001)。结论RSV是引起3岁以下儿童呼吸道病毒感染的主要病原体,也是引起3岁以下儿童呼吸道病毒感染住院的主要原因,咳嗽、咳痰及气促/呼吸困难的发生率较高,临床上应加强对该年龄段儿童的防护。     

上呼吸道感染144例临床分析

本文对上呼吸道感染(上感)的临床表现及实验室检查结果进行分析,并进行分组比较,以探讨该病对人体及不同时期所造成的不良影响。1资料与方法1.1一般资料选择来我院就诊并确诊为上感患者144例,病程1~14d,年龄4~54岁。将≥18岁患者作为成人组,78例,其中男43例,女35例;平均40.7岁;     

兰州地区成人急性呼吸道感染常见病毒IgM抗体检测

目的 了解冬春季节兰州地区成人急性呼吸道感染患者病毒病原学状况。方法2003年11月1日至2004年4月30日，对兰州地区3家三级甲等医院呼吸科年龄16岁以上急性呼吸道感染患者467例，采用间接酶联免疫吸附实验（ELISA，定量法）就流感病毒A（Flu A）、流感病毒B（Flu B）、呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、副流感病毒（PIV）血清中病毒特异性IgM抗体进行检测。结果 ①174例（174／467，37．3％）检出病毒特异性抗体阳性。其中FluA132例（132／467，28．3％）；Flu B80例（80／467，17．1％）；RSV68例（68／467，14．6％）；ADV22例（22／467，4．7％）；PIV7例（7／467，1．5％）。②少数患者（58／467，12．4％）存在两种或两种以上病毒同时感染情况，其中有27例（15．5％）合并细菌感染，27例中有14例（14／27，51．9％）有基础疾病。结论 ①病毒是成人急性呼吸道感染的重要病原体之一。其中流感病毒（FluA、Flu B）是兰州地区成人冬春季节急性呼吸道感染最重要的病毒病原体，其次为呼吸道合胞病毒（RSV）。腺病毒（ADV）和副流感病毒（PIV）少见。②存在两种或两种以上呼吸道病毒同时感染的现象，少数病例有继发细菌感染。③有基础疾病者感染呼吸道病毒风险增加。     

多重实时荧光定量PCR对下呼吸道感染病原体检测分析

目的比较多重实时荧光定量PCR(multiplex real-time polymerase chain reaction, MRT-PCR)和间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay, IFA)对成人呼吸道病毒及非典型病原体检测结果。 方法收集2014年1月至2017年12月间呼吸内科210例成人呼吸道感染的标本,采用MRT-PCR检测8种常见呼吸道病原体,同时应用IFA检测血清8种病原体IgM抗体,并全部进行PCR及测序分析,比较两种方法的特异性及敏感性,评估MRT-PCR的临床应用价值。 结果210例下呼吸道感染标本经MRT-PCR和IFA检测,阳性率分别为58.57%和38.10%,混合感染率分别为7.62%和4.76%。两种方法的灵敏度分别为94.74%和35.96%,特异度分别为84.38%和59.38%。灵敏度和特异度差异有统计学意义(P<0.05)。 结论与IFA相比,MRT-PCR灵敏度、特异度好,检测性能优于IFA。     

2665例急性上呼吸道感染患儿的病原学及临床特征

目的 分析急性上呼吸道感染儿童患者的病原学及临床特征。方法 以南方医科大学珠江医院2009年11月至2015年9月收治的2 665例急性上呼吸道感染儿童为研究对象,采用qRT-PCR方法检测临床上常见的8种呼吸道病毒(流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒、人类博卡病毒、人类冠状病毒、人类偏肺病毒、鼻病毒)。结果 共检测患儿标本2 665份,其中阳性标本1 566份,总阳性率为58.8%。四个季节中8种呼吸道病毒检出率存在明显差异,并以春季最高,夏冬季次之,秋季最低。儿童呼吸道病毒感染率随着年龄增加而逐渐降低,并以0~1岁婴幼儿病毒检出率最高64.5%。男童呼吸道病毒感染率高于女童,住院患儿呼吸道病毒检出率高于门诊患儿。混合感染标本260份,占阳性标本数的16.6%,主要集中于0~3岁儿童患者标本中,并因季节而异,秋冬季节较少,而春夏季节较为普遍。咳嗽为呼吸道病毒感染的主要临床症状,咳痰和流涕次之,临床症状在8种呼吸道病毒感染患儿中存在差异。结论 本调查分析了急性上呼吸道感染患儿中8种常见呼吸道病毒的病原学及临床特征,为指导临床治疗及防控提供相关数据。     

3965例儿童病例七项呼吸道病毒抗原检测结果分析

目的了解宿州地区住院患儿急性呼吸道感染病毒病原学特征及流行趋势,为临床治疗及疾病防控提供参考依据。方法选取皖北煤电集团总医院2017年3月至2018年2月儿科住院患者的鼻咽分泌物,用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、副流感病毒1、2、3型(PIV1、2、3)、流感病毒A、B型(IFVA、IFVB)等七种呼吸道病毒抗原。结果 3 965例患儿中检出592例病毒感染,阳性检出率为14.93%。各种呼吸道病毒检出情况,RSV阳性率最高占57.94%,其次是IFVA 15.03%、PIV3 13.34%。本地区呼吸道病毒感染有明显的季节性,冬季检出率最高27.73%,其次是秋季13.91%。结论儿童急性呼吸道感染的病毒病原体,以冬季检出率最高,呼吸道合胞病毒(RSV)是本地区儿童急性呼吸道感染的最主要病毒性病原,其次是甲型流感病毒。     

广州市传染性非典型肺炎260例临床分析

目的　了解传染性非典型肺炎 (AP)的流行病学、临床表现、实验室检查、X线表现等特点及治疗和预后。方法　对我院于 2 0 0 3年 2～ 4月上旬收治的 2 6 0例传染性非典型肺炎的流行病学及临床资料进行回顾性分析。结果　患者年龄从 2岁到 89岁 ,平均 ( 41± 18)岁 ,男 12 3例 ,女 137例。 6 7.3 %的患者有AP患者密切接触史或明确传染他人的证据 ,呈家庭及医务人员聚集现象。传播途径以近距离飞沫和密切接触为主。潜伏期为 1～ 14d ,平均 4.5d。以发热为首发症状 ( 10 0 %) ,伴有干咳 ( 72 .7%) ,气促 ( 31.2 %)、急性呼吸窘迫综合征 (ARDS ,占 13 .8%) ,腹泻 ( 2 4.2 %) ,重症患者 36例 ( 13.8%)。外周血白细胞正常或降低占 85 %,血清丙氨酸转氨酶 (ALT)升高 6 6 .9%,乳酸脱氢酶 (LDH)升高 46 .5 %。外周血CD3+、CD4+、CD8+明显降低。全部患者都有肺部病变 ,累及双肺占 73 .8%,肺部体征与X线胸片表现不一致。治疗以综合治疗为主 ,经验性使用抗生素、抗病毒药物 ,糖皮质激素对改善中毒症状、阻止病情进展有一定疗效。需要人工通气 36例 (均出现ARDS) ,其中有创机械通气 11例。死亡 11例 ,病死率 4.2 %。结论　非典型肺炎传染性强 ,有一定的病死率 ,虽无特效抗病原药物 ,但经综合治疗可取得较好疗效。     

COPD并呼吸衰竭患者院内感染不动杆菌分析

目的分析COPD并呼吸衰竭患者发生鲍曼不动杆菌所致医院获得性肺炎(HAP)临床耐药情况。方法收集COPD并呼吸衰竭患者发生HAP合格痰标本进行分离培养,进行鉴定和药敏试验。结果 COPD并呼吸衰竭患者分离到36例鲍曼不动杆菌所致HAP,对头孢类、氨基糖苷类、喹诺酮类等常用抗生素耐药率大于50%,对亚胺培南耐药率为25%。患者平均年龄79.5岁,近期应用抗生素、糖皮质激素、制酸剂、接受呼吸机辅助通气者比例高,多合并营养不良、多种合并症,死亡率为25%。结论 COPD呼吸衰竭患者并HAP,高龄,致病菌为鲍曼不动杆菌时,呈多重耐药,应评估危险因素,早期靶向治疗,规范使用抗生素,减少死亡率。     

广州地区严重急性呼吸道综合征的临床特点

目的　探讨当前流行的严重急性呼吸道综合征 (SARS)的若干临床特点。方法　回顾性统计分析广州南方医院收治的 85例SARS患者的临床资料。结果　 85例SARS患者的年龄在 4～ 87岁 ,平均 ( 38.2± 16 .7)岁 ,男 41例 ,女 44例。该病的潜伏期为 2～ 16d ,平均为 ( 7.4± 3 .8)d ;主要临床表现有发热 ( 97.6 %)、咳嗽 ( 81.2 %)、乏力 ( 74.1%)、头痛 ( 6 3 .5 %)、肌肉酸痛 ( 41.2 %) ;热程多为 4～ 12d( 81.9%) ,平均热程为 ( 7.8± 3.5 )d ;外周血白细胞计数正常或降低 ( 82 .4%) ,淋巴细胞计数减少 ( 2 7.1%) ;血液生化示丙氨酸转氨酶升高 ( 44 .7%) ,天门冬氨酸转氨酶升高 ( 5 7.6 %) ,乳酸脱氢酶升高 ( 49.4%) ,肌酸磷酸激酶升高 ( 2 0 %) ;肺部X线摄片主要表现为片状或斑片状炎症渗出( 85 .9%) ,少数表现为间质性炎症改变 ( 14.1%) ;炎症多位于双侧下肺 /中下肺 ( 5 1.8%) ,其次为单侧下肺 /中下肺 ( 36 .5 %) ;发病至肺炎症渗出完全吸收的平均时间为 ( 2 0 .3± 8.4)d ,热退后至肺炎症渗出完全吸收的平均时间为 ( 13 .1± 6 .9)d ;经验性治疗为 :病毒唑、对症支持治疗及应用广谱抗生素。结论　SARS具有传染性 ,发热、咳嗽、胸片示肺部炎症表现及外周血白细胞正常或降低是该综合征的临床特点。     

Recovery of infectious proviral DNA from mammalian cells infected with respiratory syncytial virus.

The DNA fraction from a line of bovine embryonic kidney cells originally exposed as primary cultures several months earlier to a temperature-sensitive (ts) mutant of respiratory syncytial (RS) virus could be used to transfect human HEp-2 cells with the production of infectious RS virus. The DNA donor cells, designated BEK/RS ts, retained their healthy fibroblastic appearance during continuous cultivation at a temperature (39 degrees) restrictive for growth of the original infecting mutant and showed no evidence for RS virus replication or viral antigen synthesis when directly examined for these activities by conventional methods. The infectious property of the DNA from BEK/RS ts cells was abolished by exposure of the nucleic acid preparation to DNase (but not RNase) or by pretreatment of recipient HEp-2 cells with actinomycin D or mitomycin C. The latter drug treatments substantially enhanced the replication of infecting wild-type RS virus in HEp-2 cells. Viral isolates derived from the progeny of a DNA transfection included clones possessing several genetic markers of the RS ts mutant originally used to infect BEK/RS ts cells and other virus clones that appeared to be either hybrid or wild-type for phenotypic properties such as their temperature sensitivity. An infectious proviral DNA was also detected in a line of virogenic HEp-2 cells (HEp-2/RS) persistently infected with respiratory syncytial virus after exposure to the wild-type strain 2 years earlier.     

广州地区医务人员严重急性呼吸综合征的临床特点

目的　探讨医务人员感染严重急性呼吸综合征 (SARS)的流行病学、临床表现、实验室及放射学检查、血清免疫学和恢复期的情况。方法　对我院 2 2例患SARS医务人员的临床资料及SARS血清免疫学 (IgM、IgG)抗体变化规律进行了回顾性的分析。 结果　年龄 2 3～ 53岁 ,平均 ( 3 2 .5± 7.0 )岁。潜伏期为 2～ 7d ,平均 ( 4 .1± 1.5)d。传播途径以呼吸道飞沫和近距离密切接触导致传播。最常见的临床表现是发热 ( 10 0 % )、畏寒 ( 68.2 % )、继之发生干咳 ( 72 .7% )和气促 ( 63 .6% )以及与之相关联的X线胸片浸润表现 ( 77.3 % )、外周血白细胞正常或减少 ( 90 .9% )、淋巴细胞减少 ( 4 5.5% )、血清丙氨酸转氨酶升高 ( 54.5% )。通过检测患者血清新型冠状病毒IgM和IgG抗体发现 ,发病两周时 ,两种抗体均已产生。 3个月后 ,IgM消失 ,而IgG仍维持在高水平。结论　SARS有高度传染性。发热和随之而来的呼吸道综合征是主要症状和体征 ,血清中检出IgM抗体 ,可认为近期感染 ;血清中检出IgG抗体 ,则表明曾感染过 ,并可能已产生免疫力     

Evaluation of alternative respiratory syndromes for specific syndromic surveillance of influenza and respiratory syncytial virus: a time series analysis

Background  

Syndromic surveillance is increasingly being evaluated for its potential for early warning of increased disease activity in the population. However, interpretation is hampered by the difficulty of attributing a causative pathogen. We described the temporal relationship between laboratory counts of influenza and respiratory syncytial virus (RSV) detection and alternative groupings of Emergency Department (ED) respiratory diagnoses.     

诺沃克样病毒广州地区分子流行病学分析

目的根据广州市多起由诺沃克样病毒引起的食物中毒患者粪便标本中检测到的Ⅱ型诺沃克样病毒序列,初步了解广州地区诺沃克样病毒的分子流行病学情况。方法用RT-PCR对病人粪便中的诺沃克样病毒核酸进行扩增,将阳性产物测序,并与GenBank中的序列相比较。结果归纳出4个代表性序列,并且相似率都不高。结论我国存在诺沃克样病毒引起的食物中毒,而其RNA复制酶的保守区段变异普遍较大。     

Molecular analysis of respiratory syncytial virus reinfections in infants from coastal Kenya

BACKGROUND: Individuals are reinfected with respiratory syncytial virus (RSV) repeatedly. The nature of reinfection, in relation to RSV genetic and antigenic diversity, is ill defined and has implications for persistence and vaccine control. METHODS: We examined the molecular relatedness of RSV causing primary and repeat infections, by phylogenetic analysis of the attachment (G) gene in 12 infants from a birth cohort in rural Kenya, using nasal wash samples collected during a 16-month period in 2002-2003, which spanned 2 successive epidemics. RESULTS: Six infants were infected during both epidemics, 4 with RSV-A in the first epidemic followed by RSV-B during the second epidemic and 2 with RSV-A during both epidemics, with no significant G gene sequence variability between samples. Two infants were infected and reinfected with different RSV-A strains during the same epidemic. Possible viral persistence was suspected in the remaining 4 infants, although reinfection with the same variant cannot be excluded. CONCLUSIONS: These are the first data that specifically address strain-specific reinfections in infancy in relation to the primary infecting variant. The data strongly suggest that, following primary infection, some infants lose strain-specific immunity within 7-9 months (between epidemics) and group-specific immunity within 2-4 months (during an epidemic period).