HPV16感染与新疆哈萨克族食管癌发病及临床病理学研究

背景与目的:人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)作为食管癌发生重要的环境因素备受许多学者的关注,但其相关性未得到一致性公认,尤其对于高发的新疆哈萨克族食管癌.本研究探讨HPV16感染与新疆哈萨克族食管痛发生、发展的相关性.方法:采用半巢式聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测100例新疆哈萨克族食管癌患者癌组织和100例新疆哈萨克族正常人食管正常黏膜组织HPV16 E6的感染情况.结果:新疆哈萨克族食管癌患者HPV16 E6感染率为46%,明显高于新疆哈萨克族正常人群感染率的22%(P<0.001,OR=3.020);HPV16 E6感染与新疆哈萨克族食管癌患者的发病年龄、性别、肿瘤生长部位、淋巴转移、分化程度无明显相关性(P均>0.05).结论:HPV16 E6感染与新疆哈萨克族食管癌发病密切相关,是其发病的重要因素之一.     

食管癌中HPV16、18感染与多癌基因产物表达的研究

目的：探讨高危型ＨＰＶ１６、１８感染、多个癌基因激活在食管癌发生机制中的作用。方法：采用免疫组化技术,检测本地区人口食管鳞癌、食管鳞状上皮不典型性增生和食管粘膜慢性炎症组织中ＨＰＶ１６、１８Ｅ６蛋白,Ｐ５３,ｐ２１ｒａｓ,ｃ－ｍｙｃ和ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白的表达情况,结果：癌组中Ｅ６、ｐ５３、ｐ２１ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－２和不典型性增生组中Ｅ６、ｐ５３、ｐ２１ｒａｓ癌基因蛋白的阳性     

新疆哈萨克族ESCC组织LOXL2表达及临床意义

目的 哈萨克族食管癌属于新疆地区特高发疾病,其发病率及死亡率均高于全国平均水平.近来越来越多的研究表明,赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase-like 2,LOXL2)与肿瘤的侵袭、转移及不良预后有密切关系.本研究探讨LOXL2在新疆哈萨克族食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者中的表达与临床病理特征相关性及与预后的关系.方法 检索Oncomine数据库中LOXL2 mRNA在ESCC患者中的表达情况,收集2009-03-01-2012-03-31新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科80例新疆哈萨克族ESCC患者手术切除标本,免疫组织化学检测LOXL2在80例新疆哈萨克族ESCC患者中蛋白表达,并分析其表达与临床病理特征及总生存时间(overall survival,OS)的关系.结果 Oncomine数据库中共有2个研究涉及ECT2在ESCC组织和正常组织中mRNA表达,2组微阵列数据集中,LOXL2 mRNA在ESCC组织中的转录水平均显著高于正常组织,P=3.95×10-16,P=6.87×10-7.80例ESCC组织标本及癌旁组织LOXL2蛋白阳性表达率分别为55.0％和28.7％(x2 =4.665,P=0.031),且LOXL2蛋白表达与ESCC的肿瘤分化程度(x2=9.126、P=0.010)、淋巴结转移(x2=4.393、P=0.036)及TNM分期(x2=6.519、P=0.011)呈正相关,与患者性别、年龄、浸润深度及CEA水平无明显相关性,P＞0.05.LOXL2阳性表达阴性表达的患者5年OS分别为6.7％和35.8％,差异有统计学意义,x2 =4.612,P=0.032.结论 LOXL2蛋白在新疆哈萨克族ESCC组织中表达明显增高,其蛋白阳性表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关,LOXL2在新疆哈萨克族ESCC的发生发展中起重要作用,可以作为反映新疆哈萨克族食管癌生物学行为及预后的有效指标.     

MTHFR基因1298 A→C多态与新疆哈萨克族食管癌风险关系的研究

目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因1298A→C多态及其和生活习惯相互作用与新疆哈萨克族食管癌风险的关系。方法:收集经组织病理学确诊的哈萨克族食管鳞癌新发病例88例外周血液标本,提取DNA;72名健康哈萨克族人群作为对照,同时调查每个研究对象的吸烟、饮酒情况。用PCR-RFLP技术检测研究对象的MTHFR1298A→C基因多态性。结果:病例组MTHFR1298AA、AC和CC基因型分别为63.64%、34.09%和2.27%,与对照组的72.22%、27.78%和0相比差异无统计学意义,χ2MH=2.57,P=0.276。MTHFR1298AA、MTHFR1298AC基因型与哈萨克族食管癌的发生无显著相关性,P>0.05。病例组与对照组1298C等位基因频率分别为0.19和0.14,两组间差异无统计学意义,P>0.05。与携带MTH-FR1298AA基因型的不吸烟者相比,携带MTH-FR1298C等位基因且有吸烟习惯者的性别、年龄以及饮酒习惯调整OR值为2.353(95%CI为0.892～6.210)。与携带MTHFR1298AA基因型的不饮酒或不常饮酒者相比,携带MTHFR1298C等位基因并伴有经常饮酒的习惯者发生食管癌的危险性也显著增高,其性别、年龄以及饮酒习惯调整OR值为1.860(95%CI为0.585～5.915)。结论:叶酸摄入不足是新疆哈萨克族食管癌的危险因素;MTHFR1298AC和CC基因型对吸烟、饮酒习惯增加食管癌发生风险作用有放大效应。     

新疆哈萨克族与汉族食管鳞癌中smad4基因启动子甲基化的状态及意义

目的 研究新疆汉族与哈族(哈萨克族)食管鳞癌中smad4基因启动子区的甲基化水平及意 义。方法 收集哈族食管癌组织37例和正常对照组织33例;汉族食管癌组织31例和正常对照组织 33例。应用Mass ARRAY甲基化DNA定量分析技术对食管组织中smad4基因启动子区的甲基化水平 行定量分析。结果 汉族与哈族食管癌组和对照组中smad4基因启动子区的平均甲基化率分别为 3.4%和2.8%、 3.4%和2.5% ,差异均无统计学意义(P>0.05)。smad4基因启动子区CpG-15、CpG-27 在汉族食管癌中的平均甲基化率(4.7%、4.9%)明显高于对照组 (2.8%、3.5%);CpG-1、CpG-16-19、 CpG-27-28、CpG-31-33在哈族食管癌中的平均甲基化率(1.7%、4.5%、4.9%、6.8%)明显高于哈族对照 组(0.7%、2.2%、3.0%、5.5%),CpG-6在哈族食管癌和正常组织中的平均甲基化水平(1.9%、 1.1%)均 明显高于汉族食管癌组(0.4%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 (1)smad4基因启动子区的高甲基 化可能参与了食管癌的发生。(2)smad4基因启动子区CpG-15、CpG-27的高甲基化可能与汉族食管癌 发生关系密切;而CpG-1、CpG-16-19、 CpG-27-28、CpG-31-33的高甲基化可能 是新疆哈族食管癌高发的原因;smad4 基因启动子区CpG-6的高甲基化可能导 致哈族食管癌较汉族食管癌高发。     

新疆哈萨克族食管鳞癌中HLA-G的表达及其意义

目的 探讨人类白细胞抗原G(human leucocyte antigen,HLA G)在新疆哈萨克族食管鳞癌中的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法对30例哈族食管鳞癌及20例癌旁正常组织中HLA-G的表达进行检测.结果 哈族食管鳞癌组织中HLA-G的表达率为66.7％,明显高于癌旁正常组织20.0％,差异具有统计学意义(P＜0.05);HLA-G的表达与哈族食管癌浸润深度和临床分期关系密切(P均＜0.05),而与患者年龄、性别、食管癌发生部位、分化程度和淋巴结转移无明显相关性(P均＞0.05).结论 HLA-G的高表达可能在新疆哈族食管鳞癌的发生发展中起重要作用.     

EphA2蛋白在新疆哈萨克族与汉族食管鳞癌组织及血清中的表达及意义

背景与目的：哈萨克族食管癌发病率高于汉族。EphA2是在促红细胞生成素产生肝细胞(erythropoietin-producing human hepatocellular,Eph)中发现的具有酪氨酸酶活性的基因编码产物,与多种恶性肿瘤有关。本研究拟采用免疫组化法及酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测EphA2蛋白在哈萨克族和汉族食管鳞癌患者肿瘤组织及血清中的表达,从而探讨EphA2蛋白在新疆哈萨克族和汉族食管鳞癌组织和血清中表达水平的差异及其与临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组织化学法检测EphA2蛋白在100例新疆哈萨克族和汉族食管鳞癌组织(患者组)及其对应的癌旁食管组织(对照组,距瘤>5 cm)中的表达;并采用ELISA法测定患者组血清中EphA2蛋白含量及60名体检健康者(健康对照组)血清中EphA2蛋白表达水平。结果：EphA2蛋白在哈萨克族患者食管鳞癌组织及对应癌旁组织中阳性表达率分别为72.0%和28.0%,在汉族中分别为62.0%和26.0%,在两民族中该蛋白在食管鳞癌组织及对应癌旁组织中的表达差异均有统计学意义(P=0.000)。EphA2蛋白在哈萨克族患者组及健康对照组血清中的表达水平分别为(58.36±12.60)和(29.39±7.34) pg/mL,在汉族中分别为(58.79±13.29)和(29.39±7.34) pg/mL,该蛋白在患者组及健康对照组血清含量差异均有统计学意义(P=0.000)。在两民族食管癌组织中,EphA2蛋白的表达水平与淋巴结转移、TNM分期及肿瘤浸润深度有关(P<0.05)。在两民族食管鳞癌患者血清中,EphA2蛋白的表达水平与TNM分期均有关(P<0.05),而在哈萨克族食管癌患者血清中,该蛋白表达水平还与肿瘤的浸润深度有关(P=0.001)。EphA2蛋白在哈萨克族和汉族食管鳞癌组织标本和血清中的表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论：EphA2蛋白的高表达可能促进哈萨克族和汉族食管癌的发生、浸润及转移。EphA2蛋白在食管癌患者组织及血清中的高表达可能与原发灶浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关。另外EphA2蛋白在哈萨克族食管癌患者外周血中的高表达可能与其浸润深度有关。     

ＴＢＸ-２１基因启动子区多态性与食管鳞癌易感及临床病理特征的相关性研究

目的　探讨中国汉族人群中肿瘤免疫调节基因ＴＢＸ-２１启动子区单核苷酸多态性与食管鳞癌的遗传易感及临床病理特征的关联性。方法　提取２５７例食管鳞癌患者及２８１例健康者外周血基因组ＤＮＡ,采用ＰＣＲ-ＲＦＬＰ法检测两组人群ＴＢＸ-２１基因启动子区-１４９９、-１５１４两个多态性位点的基因型;以非条件Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归校正混杂因素,并进行多态性与食管鳞癌患者风险的关联分析,以及与食管鳞癌临床病理学特征的相关性分析。结果　通过校正性别、年龄、吸烟、饮酒、肿瘤家族史等因素后,Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析显示,-１４９９Ｇ／Ａ位点多态性基因型频率在食管鳞癌组较健康对照组高,具有显著性差异（ＧＡ：Ｐ＝０.００９,ＯＲ＝１.８７,９５％ＣＩ：１.１７～２.９９;ＡＡ：Ｐ＝０.００６,ＯＲ＝３.１２,９５％ＣＩ：１.３９～７.０２）;而-１５１４Ｔ／Ｃ位点在两组间无显著性差异。与食管鳞癌临床病理学的相关性分析显示,ＴＢＸ-２１基因启动区-１５１４Ｔ／Ｃ多态性与食管鳞癌的侵袭性特征明显相关,其中与淋巴结转移状态有相关性（Ｐ＝０.０２５,ＯＲ＝２.３６,９５％ＣＩ：１.１１～５.０１）,与远处转移的相关性更好（Ｐ＝０.００６,ＯＲ＝２.４４,９５％ＣＩ：１.３０～４.６０）。结论　ＴＢＸ-２１基因启动子区-１４９９Ｇ／Ａ多态性增加了中国汉族人群食管鳞癌的易感风险,而-１５１４Ｔ／Ｃ多态性的改变与食管鳞癌患者的淋巴结及远处转移密切相关。     

家族史阳性和阴性食管癌患者癌组织中FHIT和BRCA2及MLH1的表达变化

目的:探讨FHIT、BRCA2及MLH1在河南食管癌高发区家族史阳、阴性食管癌患者癌组织中的表达变化,及其与食管癌遗传易感性之间的关系。方法:采用ABC法检测河南省食管癌高发区林州市74例食管癌患者(其中33例家族史阳性,41例家族史阴性)手术切除标本癌组织FHIT、BRCA2及MLH1蛋白表达情况。结果:FHIT[56%(18/33)]、BRCA2[67%(22/33)]和MLH1[73%(24/33)]在家族史阳性食管癌患者癌组织中阴性表达率,显著高于家族史阴性食管癌患者[27%(11/41)、37%(15/44)和27%(16/41)],P值均<0·05。结论:FHIT、BRCA2和MLH1蛋白可能是影响食管癌遗传易感性的重要分子事件之一。     

Association between high-risk HPV types, HLA DRB1* and DQB1* alleles and cervical cancer in British women

Cervical scrapes from 116 British women referred with cervical cancer were tested for the presence of high oncogenic risk human papillomavirus (HPV) genotypes (HPV(hr)). Ninety-four per cent of the scrapes had one or more of these virus types and 66% were HPV16-positive. HPV18 was more frequent in adenocarcinoma. No evidence was found for an increased cancer risk associated with the HPV16 E6 350G variant. The HLA DRB1* and DQB1* alleles in these women and in 155 women with normal cytology and negative for HPV(hr) DNA were compared. DQB1*0301 alone (2P = 0.02) and in combination with DRB1*0401 (2P = 0.02) was found to be associated with cervical cancer. This was more marked in cancers positive for HPV types other than HPV16. In contrast, DRB1*1501 alone and in combination with DQB1*0602 was not significantly elevated in cancers overall, but did show some excess in HPV16-positive cancers (2P = 0.05), associated with HPV16-positive cervical cancers. Taking all cancers together, a marginally significant protective effect was found for DQB1*0501 (2P = 0.03) but no protective effect could be seen for DRB1*1301.     

新疆哈萨克族食管鳞癌中人乳头状瘤病毒感染的检测

目的: 检测新疆哈萨克族食管鳞癌患者中人乳头状瘤病毒(HPV)DNA的总感染率,通过统计学分析,探讨HPV感染与新疆哈萨克族食管鳞癌的相关性。 方法: 采用聚合酶链反应(PCR)技术检测了318例新疆哈萨克族食管鳞癌(ESCC)石蜡包埋组织中HPVDNA的感染情况,其中117例用直接裂解法制备样本DNA,201例用酚-氯仿-异戊醇提取DNA;PCR产物双向测序,测序结果应用BLAST在线分析,统计处理采用χ²检验,分析HPV与新疆哈萨克族食管鳞癌发生的相关性。 结果: 在新疆哈萨克族食管鳞癌组织中,HPVDNA总检出率为64.5%(205/318),其中直接裂解法组HPVDNA检出率为82.9%(97/117),酚-氯仿-异戊醇提取DNA组HPVDNA检出率为53.7%(108/201),二者之间差异有统计学意义(P<0.05)。按照病理分化程度对哈萨克族ESCC样本DNA中HPV总感染率进行分析发现,高分化ESCC中HPV阳性率为63.2%,中分化ESCC中HPV阳性率为69.8%,低分化ESCC中HPV阳性率为50.0%,三者之间差异无统计学意(P>0.05)。 结论: HPVDNA感染与新疆哈萨克族食管鳞癌存在相关性,可能是新疆哈萨克族食管癌发生的重要因素之一。     

梅州市客家人食管癌与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的 探讨梅州市客家人地区食管癌的发病与人乳头状瘤病毒(HPV)感染的关系.方法 采用PCR/导流杂交法检测56例新鲜客家人食管癌组织、癌旁组织及正常食管黏膜组织HPV的表达.结果 食管癌组织HPV阳性率为19.6%,癌旁组织HPV阳性率为23.2%,正常食管黏膜组织HPV阳性率为3.6%.结论 梅州市客家人食管癌组织中存在HPV感染,HPV感染可能与食管癌的发生、发展有关.     

Detection of Human Papillomaviral Infection on Kazakh Patients with Esophageal Squamous Cell Carcinoma in Xinjiang

OBJECTIVE To investigate the detection rate of human papilloma virus (HPV) DNA in the Kazakh esophageal carcinoma (EC) patients of Xinjiang.METHODS We detected the prevalence of a HPV gene in tumor tissues from 318 esophageal squamous cell carcinoma (ESCC).Tumor tissues were kept in formalin and embedded in paraffin.One hundred seventeen samples used crude cell suspension, while the other 201 used the method of DNA extraction with phenol-Tris/chloroform. We analyzed the relevance to EC of Kazakh's in Xinjiang.RESULTS In the ESCC samples of Kazakh's in Xinjiang, total detection rate for HPV DNA was 64.5% (205/318). The positive rate of HPV in group of crude cell suspensions was 82.9% (97/117) compared with the rate of 53.7% (108/201) in the group of DNA extraction. The results in the two groups showed significant diffference (X2 = 5.711, P < 0.05).CONCLUSION HPV DNA infection may be one of the most important factors related to EC of Kazakh's in Xinjiang.     

EB病毒感染及抗凋亡基因Bc1—2与鼻咽癌关系的研究

作者应用免疫组化ＳＰ法观察了４６例鼻咽癌组织中抗凋亡基因Ｂｃ１－２和ＥＢ病毒潜在膜蛋白（ＬＭＰ－１）的表达。结果显示ＬＭＰ－１的表达率为５２．２％，其中以低分化癌的阳性率较高（８２．６％）；Ｂｃ１－２蛋白在鼻咽癌中出现异常高表达（阳性率为８２．６％），Ｂｃ１－２的表达率与鼻咽癌组织学分级无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；Ｂｃ１－２表达与ＬＭＰ－１的阳性率无明显相关（Ｐ＞０．０５）。表明Ｂｃ１－２异常表达和ＥＢ病毒感染均可能与鼻咽癌发生有关。     

HPV、HSV和CMV感染与宫颈癌的关系

背景与目的： 探讨宫颈癌前病变和宫颈癌的发生发展与人乳头状瘤病毒及单纯疱疹病毒(Herpes Simplex Virus,HSV)、巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)的关系。 材料与方法： 对81例不同宫颈病变组织进行HPV16/18和HPV6/11原位杂交,同时对103例不同宫颈病变组织用DNA扩增法检测HPV、HSV和CMV。 结果: 病毒DNA原位杂交信号的分布与HE染色中挖空细胞的分布一致。 HPV16/18与不同宫颈病变组织原位杂交阳性率平均为51.1 ％,HPV6/11的则为64.7 ％。经PCR检测,HPV16/18 、HPV6/11、HSV、CMV在不同宫颈病变组织中的阳性率分别为21 ％、4 ％、23 ％、0 ％。 结论： HPV感染具有特定的组织学部位,HSV可协同HPV16/18恶性转化宫颈上皮细胞。     

宫颈病变与人乳头状病毒感染的相关性及干预性预防的研究

目的 :探讨HPV感染与宫颈病变的关系。方法 :分析 1996年 1月 1日～ 1998年 6月 30日在法国马塞市Conception医院妇产科进行的 2 18例宫颈锥型切除术的病理结果与HPV感染情况。结果 :HPV总阳性率为 52 75% ,CIN 3的HPV阳性率最高 ,而CIN 2的HPV阳性率比CIN 1高。结论 :宫颈癌前病变与HPV感染极相关 ,宫颈癌者HPV感染的组织病理学诊断率低 ,应积极预防宫颈癌的发生。     

人乳头状瘤病毒感染与食管癌发生关系的研究

为了探索人乳头状瘤病毒(HPV)与食管癌发生的关系,对食管鳞癌、癌旁鳞状上皮及乳头状瘤进行组织病理学研究,并用生物素标记的HPV_(16)DNA探针进行原位杂交。结果:癌旁鳞状上皮有凹空细胞等HPV感染的组织形态学改变者为65.2%(15/23),HPV_(160)DNA检出率为56.5%(13/23);食管鳞癌有凹空样癌细胞者为27.8%(10/36),HPV_(16)DNA检出率为50.0%(18/36);6例乳头状瘤均检出HPV_(16)DNA(100.0%)。不同分化程度的食管鳞癌(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级)HPV_(16)DNA检出率分别为100.0%(6/6),60.0%(9/15)和20.0%(3/15)。研究结果提示,HPV感染与食管鳞癌发生有关,并与其分化和某些组织学特征有关。     

子宫肿瘤HPV16/18DNA感染与TNF表达的相关性研究

目的 :探讨子宫肿瘤人乳头瘤 (HPV) 16/ 18DNA病毒感染与TNF表达是否存在相关性。方法 :分别应用非同位素原位杂交技术及免疫组化方法选择性对 3个传代的细胞系及 96例宫颈标本和75例子宫内膜标本进行了HPV16/ 18DNA感染及TNF表达的研究。结果 :SiHa、W 12细胞系HPV16/18DNA感染为阳性 ,NCx细胞系为阴性 ;正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅢ、宫颈鳞癌阳性表达分别为 2例、5例、9例、2 7例 ,四组差异有极显著性 (P <0 .0 1) ;正常子宫内膜组织均为阴性 ,子宫内膜癌阳性表达 10例。正常宫颈组织、正常内膜组织TNF蛋白、TNFmRNA均未有阳性表达。宫颈癌 2 5例 ,子宫内膜癌 13例TNF蛋白为阳性 ,宫颈癌 2 2例 ,子宫内膜癌 16例TNFmRNA为阳性。宫颈癌HPV16/ 18感染与TNF蛋白表达两者均为阳性的为 2 2例 ;HPV16/ 18阴性、TNF蛋白阳性的 3例 ;子宫内膜癌两者均阳性的为 8例 ;HPV16/ 18阴性、TNF蛋白阳性的 5例。结论 :HPV16/ 18阳性者TNF蛋白表达明显高于阴性者 ,以宫颈鳞癌最为显著 (P <0 .0 1)。     

K-ras Mutation,HPV Infection and Smoking or Alcohol Abuse Positively Correlate with Esophageal Squamous Carcinoma

The Ras/Raf/MEK/ERK (MAPK) signal transduction cascade is an important mediator of a number of cellular fates including growth, survival and apoptosis. The aim of this study was to determine the incidence of B-raf, Kirsten-ras (K-ras) and Neuroblastoma-ras (N-ras) gene mutations in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) in the Greek population. DNA was extracted from 30 ESCC and 32 normal esophageal specimens and screened for V600E B-raf, and K-ras/N-ras codon 12 mutations, by PCR-RFLP based analysis. Among the genes tested, only the heterozygous K-ras mutation was detected in 5 out of the 30 ESCC specimens (16%), whereas no mutation was found in the normal esophageal tissue (P < 0.022). The normal samples were screened negative for N-ras and V600E B-raf mutations. The increased risk of esophageal cancer was correlated with tobacco use (OR = 3.5, P < 0.023) and alcohol abuse (OR = 7.22, P < 0.001), accompanied with the high incidence of the k-ras codon 12 mutation (22%, OR = 1.77 and 21%, OR = 1.52), respectively. A similar positive association was seen in human papilloma virus (HPV)-infected patients (OR = 5.66, P < 0.003). Our overall findings demonstrate that the mutational activation of the K-ras gene, HPV infection and tobacco or alcohol abuse, can be considered independently or in combination as high risk factors for ESCC development.