端粒及端粒酶变化在肿瘤发生中的作用

端粒位于真核染色体的末端，由串联重复排列的ＴＴＡＧＧＧ序列组成，端粒酶为一核蛋白反转录酶，以其酶内部的ＲＮＡ组分为模板，合成端粒重复序列，目前研究资料表明，端粒及端粒酶参与细胞增殖，老化过程，端粒酶活化与肿瘤发生相关，预示端粒酶不仅可作为肿瘤诊断和预后的标志物，同时端粒酶活性抑制有可能成为肿瘤治疗领域中的重要手段。     

端粒、端粒酶与再生

端粒位于真核细胞染色体末端，起保护染色体末端的作用。端粒酶位于端粒末端，作用是合成端粒DNA序列，以抵消或延缓端粒随细胞分裂的不断缩短。端粒酶活性的表达在一定程度上意味着细胞分裂、组织增生，甚至可以看作是损伤修复、再生的迹象。     

端粒、端粒酶与恶性肿瘤

随着分子生物学的发展,人们在肿瘤基因/肿瘤抑制基因和细胞凋亡的水平认识肿瘤并力图从这角度进行治疗。分子生物学近几年对端粒(Telomeres)和端粒酶(Tolemarase)的认识为人们开僻了又一个肿瘤学的新概念,孕育了着眼于端粒酶的全新的治疗手段。1 端粒和端粒酶 50年前Miller和Mc Clintock首先观察到哺乳动物的端粒,并发现其对染色体稳定的重要性。近年分子生物学进展发现端粒是染色体末端的重复基因序列。各种不同的生物有其独特的端粒序列为     

端粒、端粒酶与滋养细胞疾病

随着肿瘤分子生物学的发展 ,研究表明端粒酶激活在细胞癌变中发挥重要作用 ,消除端粒酶活性是进行肿瘤基因治疗的理想靶点。本文旨在对端粒酶在滋养细胞疾病中的表达及其对恶性滋养细胞的早期预测及预后估计作一综述。1　端粒与端粒酶早在 30年代Ｍｕｌｌｅｒ和ＭｃＣｌｉｎｔａｃｋ分别发现了染色体末端的一种特殊序列 ,名之端粒。 1985年Ｂｌａｃｋｂｕｍ和Ｇｒｅｉｄｅｒ首次在四膜虫中发现并鉴定了端粒酶的存在。端粒 (Ｔｅｌｏｍｅｒｅ)是真核细胞染色体末端的一种特殊结构 ,由端粒ＤＮＡ和端粒蛋白质组成。在脊椎动物中其核酸部分由富…     

端粒、端粒酶及hTERT基因研究在乳腺癌基因治疗中进展

端粒酶通过维持端粒的长度使细胞永生化,为抗衰老提供了光明前景,也为乳腺肿瘤治疗提供了新的希望。乳腺肿瘤在治疗上一般首选手术治疗,术后再辅以放疗、化疗。但是这种传统治疗创伤大,对肿瘤的敏感性差,副作用多。而对端粒酶的研究,为乳腺癌基因治疗打开了一扇新的大门。乳腺癌是全球妇女最常见的恶性肿瘤,也是女性恶性肿瘤发病率较高的一种疾病,尤其是在经济发展中国家,自2008年以来,全世界有1 383 500例新增乳腺癌患者,死亡458 400例。现在端粒酶在肿瘤监测中的作用及研发端粒酶抑制州作为治疗乳腺肿瘤的创新药物,已成为近年医学研究的热点。本研究通过查阅相关文献,对端粒、端粒酶研究及应用进展做一综述。     

端粒、端粒酶系统与白血病的关系

造血细胞增殖、分裂和失控是白血病生物学的重要特征之一。端粒长度、端粒酶活性与各阶段造血细胞无限增殖有着密切的关系。正常造血细胞与恶性血液肿瘤细胞的端粒长度及其端粒酶活性存在着明显的差异[1] 。这一发现为揭示血液系统肿瘤的发病机制、诊断和治疗提供了重要的理论依据。1　端粒、端粒酶的结构功能1 1　端粒的结构、功能　端粒是真核生物线性染色体的一种特殊的异质化结构 ,也是由简单重复的富含Ｇ碱基的ＤＮＡ序列与多种相关蛋白质组成的结构和功能单位。由于染色体ＤＮＡ的 3’端粒被ＲＮＡ的引物覆盖 ,不能有效地作为复制模板…     

端粒酶与消化性肿瘤研究进展

近几年来 ,端粒酶已成为肿瘤分子病理学研究中的一个热点 ,其在消化系肿瘤中的研究和应用更为深入。1　端粒、端粒酶的结构和功能端粒 (Ｔｅｌｏｍｅｒｅ)是真核细胞线型染色体末端的一种特殊结构 ,由串联排列重复ＤＮＡ序列和端粒结合蛋白(Ｔｅｌｏｍｅｒｅｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ)共同构成 ,是染色体末端的一种保护结构 ,能防止染色体发生降解、端端融合和重组。人的端粒ＤＮＡ序列]?7例伴淋巴结转移的标本中端粒酶活性均呈阳性 ,而在19例未伴随淋巴结转移的病人中仅有 12例检出端粒酶活性 ,其活性检出率为 6 3 15 % ,差异有非常显…     

放射治疗与端粒酶活性的关系

自 1 98 9年Ｍｏｒｉｎ[1 ] 首次在人肿瘤细胞中检测出端粒酶(ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ)活性以后 ,端粒酶与肿瘤关系的研究颇多 ,成为近年肿瘤研究的热点。研究内容涉及肿瘤的发生、发展及治疗[2 ] ,也包括与肿瘤各种治疗手段如手术、化疗、中药治疗等的关系[3 ,4] 。端粒酶用于肿瘤的诊断 ,特别是早期诊断 ,以及指导临床治疗和评估患者预后已成为临床研究的重点[5,6] 。但有关放射治疗与端粒酶关系的研究 ,无论是在基础领域 ,还是在临床方面 ,国内外开展均较少。笔者将有关方面综述如下 ,并展望今后的研究方向。一、端粒酶与肿瘤1 端粒酶是以…     

银染端粒重复扩增技术检测乳腺癌组织端粒酶活性的研究

目的 探讨应用银染端粒重复扩增技术（ＴＲＡＰ）检测乳腺癌组织端粒酶活性。方法 用银染ＴＲＡＰ法对３６例乳腺癌组织和２４例乳腺良性病变组织进行端粒酶活性检测。结果 ３６例乳腺癌外科手术切除组织中，３３例检测到端粒酶活性（９１．７％），而其它良性乳腺病变组织无１例阳性，两组有非常显著性差异（Ｐ〈０．０１）。结论 端粒酶激活在乳腺癌的发生中起着重要作用，端粒酶活性检测可望成为乳腺癌诊断的有用标志物。     

人贲门癌,食管癌细胞端粒酶RNA和端粒酶活性检测

目的：检测人贲门组织、贲门癌组织和食管组织、食管癌组织端粒酶ＲＮＡ组分表达及端粒酶活性，探讨其在贲门癌和食管癌中的作用。方法：采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和端粒重复扩增法（ＴＲＡＰ）检测了人贲门组织、贲门癌组织和食管组织、食管癌组织端粒酶ＲＮＡ组分及端粒酶活性。     

端粒，端粒酶与肿瘤的关系及意义

１　端粒的结构及功能端粒位于所有真核细胞染色体的末端，其结构和功能与主要染色体臂明显不同，它与ＤＮＡ的复制、染色体的稳定及基因组的完整、染色体在核内的定位有关，并可能参与特定基因表达的调节［１］。大多数物种的端粒由小量核苷酸的简单重复ＤＮＡ序列及相关蛋白组成，富含ＧＣ，并对于Ｇ的分布有链倾向性。富Ｇ链位于５－３’方向链，对着染色体末端，并在此端形成一约１２－１６ｂｐ的富Ｇ的单链突出结构，它对于端粒酶的识别及定位，从而使端粒延长有重要作用。在广大的物种范围内，端粒ＤＮＡ重复序列并不一致，但有高度的…     

电离辐射诱导端粒延长作用的研究

目的观察人细胞系A549照射后端粒酶活性的变化及其对端粒长度的影响。方法采用端粒重复序列扩增法（TRAP）检测照射前、后不同时间点细胞端粒酶活性，端粒限制性片段平均长度分析法（耵谭）检测端粒长度。结果在1—5Gy剂量范围内A549端粒酶活性表达呈剂量和时间依赖性增强；照射后TRF延长，照射剂量越高，TRF延长出现越早，随着时间的延长，较低剂量组耵谭也明显延长，表明这种诱导作用与端粒酶表达增强有相近似的剂量效应和时间效应。结论端粒放射损伤可通过端粒序列的合成（延长端粒）进行修复；端粒酶可能在端粒放射损伤修复中起到重要作用。     

RNA干扰抑制端粒酶对受照后端粒长度的影响

目的 探索RNA干扰体内表达质粒抑制端粒酶表达的作用,以及端粒酶抑制后射线对端粒长度的影响.方法 构建RNA干扰体内表达质粒,脂质体介导转染A549细胞系,TRAPELISA法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测hTERTmRNA表达,端粒限制性片段平均长度分析法检测端粒长度.结果 pPUR/hTERT质粒在A549转染株内表达可下调hTERT mRNA表达,抑制端粒酶活性;A549照射后端粒明显延长,而pPUR/hTERT表达株照射后未见端粒延长,抑制了射线诱导端粒延长作用.结论 RNA干扰体内表达质粒可抑制端粒酶表达及照射后端粒延长,表明射线诱导端粒延长可能是端粒酶在端粒断裂端合成端粒序列的结果.     

端粒酶在肿瘤临床诊治中的应用前景

端粒酶与肿瘤关系密切。近年来,相关的实验研究为临床应用端粒酶作为肿瘤诊断的标志物、端粒酶抑制剂作为抗肿瘤药物、以及端粒酶作为放疗中的重要影响因素提供了更加清晰的线索和有用的资料。     

结直肠癌组织端粒酶活性表达的临床价值

端粒酶是一种核糖核酸蛋白酶。我们采用端粒重复序列扩增技术并加以改进,分别对４０例结直肠癌标本进行了端粒酶活性的检测,并结合患者的临床病理资料进一步探讨了端粒酶活性表达的临床意义。１材料与方法１．１标本检测组织取自手术切除标本,随机选取的４０例结直肠癌...     

胃黏膜端粒酶活化与细胞凋亡的关系

目的研究胃癌及胃癌前病变组织端粒酶催化亚单位的表达,探讨端粒酶活性与细胞凋亡的关系,以揭示端粒酶活化和细胞凋亡在胃癌发生中的作用。方法选择64例慢性胃炎及胃癌患者,其中慢性胃炎伴萎缩者16例,伴肠上皮化生者15例,伴中、重度异型增生者14例,胃癌19例。采用SP法检测hTERT蛋白表达,采用TUNEL染色法原位检测细胞凋亡。结果萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生和胃癌组织hTERT蛋白表达率分别为25.0%、46.7%、64.4%和78.9%,呈递增趋势,两两比较均有显著性差异(P<0.05)。萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生和胃癌组织细胞凋亡指数(%)分别为11.54±2.28、17.05±2.88、7.41±1.32和5.03±2.23,呈递减趋势,两两比较均有显著性差异(P<0.05)。hTERT蛋白阳性患者细胞凋亡指数为8.45%±5.30%,显著低于hTERT蛋白阴性患者(11.86%±4.24%,P<0.05)。结论胃癌前病变至胃癌的演化过程中,端粒酶激活并诱导细胞凋亡异常,二者同时存在,破坏了胃黏膜上皮的稳定性,这可能是胃黏膜细胞癌变的机制之一。     

应用生物标志对肿瘤辐射敏感性的研究

为了实现肿瘤放射治疗方案的个体化，确定肿瘤的辐射敏感性是一个重要内容。许多实验室从不同水平研究了应用单个生物标志和多个生物标志在预测肿瘤辐射敏感性时的作用。虽然目前尚无特异性的生物标志，但提供了良好的研究模式。     

hTERT基因转染对人胚胎成纤维细胞端粒长度、端粒酶活性及其亚单位的影响

为了探讨外源性人端粒酶蛋白催化亚单位 (hTERT)基因转染对人胚胎成纤维细胞 (hEFs)端粒长度、端粒酶活性及其亚单位的影响 ,采用基因重组技术构建hTERT全长cDNA正义荧光真核表达载体 ,并采用脂质体法将正义重组质粒pIRES2 EGFP hTERT及空载质粒pIRES2 EGFP分别转染原代培养hEFs,检测转染细胞端粒长度、端粒酶活性及端粒酶亚单位的变化。结果显示 ,外源性hTERT基因转染细胞 (hEF hTERT)端粒酶活性较未转染细胞 (hEFs)及空载体转染细胞 (hEF EGFP)显著增加 (P <0 0 1) ,hEF hTERT、hEFs及hEF EGFP端粒长度分别为 6 0kb、5 3kb及 5 4kb ,端粒酶亚单位中除hTERT在mRNA和蛋白水平表达均增加外 ,hTR和TP1mRNA无明显变化。以上结果提示 ,外源性hTERT基因转染能使原代培养的hEFs端粒酶活化 ,端粒长度不再继续缩短 ,hTERT在mR NA和蛋白水平表达增加     

利用端粒和端粒酶PCR芯片筛选易发/抗肺纤维化小鼠肺组织差异基因研究

目的 通过建立易发/抗放射性肺纤维化(RIPF)小鼠模型,利用端粒和端粒酶实时荧光定量PCR(RT-qPCR)芯片筛选易发/抗RIPF小鼠照射前后肺组织差异基因并初步验证。方法 采用20 Gy⁶⁰Co γ射线照射C57BL/6J和C3H/HeN小鼠胸部;通过HE、天狼星红染色,羟脯氨酸、转化生长因子β(TGF-β)和结缔组织生长因子(CTGF)含量检测等,比较这两种小鼠RIPF进程的差异;采用端粒和端粒酶RT-qPCR芯片,分别比较照射前、照射后3个月两种小鼠肺组织端粒和端粒酶相关基因的表达差异,并采用RT-qPCR对差异基因进行初步验证。结果 照射后3个月,C57BL/6J小鼠肺组织纤维化性病变较C3H/HeN小鼠更为明显;C57BL/6J小鼠肺组织中羟脯氨酸含量显著高于照射前和C3H/HeN小鼠(P<0.05),且其肺泡壁Ⅰ型胶原沉积显著多于C3H/HeN小鼠;C57BL/6J小鼠肺组织促纤维化细胞因子TGF-β和CTGF含量明显高于C3H/HeN小鼠(P<0.05)。端粒和端粒酶RT-qPCR芯片筛选发现,两种对照组小鼠肺组织差异基因48个;照射...