慢性乙型肝炎患者HBV DNA前C区突变株的分析

ＨＢＶＤＮＡ基因经聚合酶链反应 (ＰＣＲ )、分子克隆及序列分析等检测手段可发现其突变 ,以前核心区尤为显著。我院与复旦大学医学院附属中山医院 ,复旦大学遗传学研究所于 1999年 3月对 1996年 6月～ 1997年 10月收集的 5 9例慢性乙型肝炎的标本作前Ｃ区基因分析研究 ,现报告如下。材料与方法一、病例选择1996年 6月～ 1997年 10月我院住院及门诊随访的慢性乙型肝炎患者 5 9例 ,男 46例 ,女 13例 ,年龄 7～ 70岁 (2 5～ 5 0岁占 86 % ) ,其中肝炎后肝硬化 18例。诊断按 1995年 5月北京第五次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的标准。二…     

234例慢性乙型肝炎患者HBV前C/BCP区突变分析

目的调查慢性乙型肝炎患者血清HBV前C/基本核心启动子（BCP）区的突变情况,分析各种突变对HBeAg表达的影响。方法抽提患者血清DNA,采用改进的巢式PCR技术,扩增HBV前C/BCP区基因,对PCR产物进行DNA测序。用NTI软件比对结果,根据文献报道,选取1753、1762、1764、1862、1896和1899共6个位点进行突变分析,并重点分析不同突变对患者血清HBeAg阳性率和病情的影响。结果在234例中6个位点均无突变者为74例（31.6%）,其血清HBeAg阳性率为74.3%（55/74）。在234例中6个位点检出至少1种突变的病例为160例（68.4%）,突变形式包括4种单一位点突变和21种组合形式的突变;检出G1896A突变73例（31.2%）,其中36例检出有共存未突变序列,37例仅检出突变序列,后者血清HBeAg的阳性率为18.9%（7/37）。检出G1896A以外其他形式突变的有87例,HBeAg阳性率为63.2%（55/87）;其中以A1762T＋G1764A最为常见,HBeAg阳性率为69.4%（34/49）。在1753、1862位点上检出4种特殊碱基突变,前C区有基因片段插入或缺失的有2例。结论多数慢性乙型肝炎患者在HBV前C/BCP区可检出突变,突变形式多样,其中G1896A突变样本血清HBeAg阳性率显著下降,而其他突变对其影响较小。应用DNA序列测定法分析HBV前C/BCP区基因突变,获得的信息全面,对临床评估病情进展和实施抗病毒治疗有参考价值。     

乙型肝炎患者HBV前C区A83点突变与临床关系

为探索ＨＢＶ前Ｃ区Ａ８３点突变与临床关系,采用错配ＰＣＲ（ｍｐ－ＰＣＲ）与限制性长度多态性分析（ＲＦＬＰ）相结合的方法,对６６例乙肝患者的血清标本,进行了ＨＢＶ前Ｃ区Ａ８３点突变的检测,结果：６６例患者中,３６例（５４．５％）检出Ａ８３点突变,慢肝中度,重度,肝炎肝硬变组明显高于ＨＢＶ携带者（Ｐ〈０．０５）,抗－ＨＢｅ阳性组的检出率为７３．２％,明显高于ＨＢｅＡｇ阳性,而这些病例中９１．６％发生了     

乙型肝炎患者HBV前C区突变及干扰素抗体的临床研究

分别以PCR及ELISA方法检测86例慢性HBV感染患者血清中HBV前C区突变株及干扰素抗体。结果 ALT〉100IU／L组突变株检出率（40．4％）显著高于ALT≤100IU／L组（8．8％）;38例CHB接受干扰素治疗,突变株组和野生株组对干扰隶近期应答率相似,但变异株组复发率（70．0％）显著高于野生株组（23．1％）;干扰素抗体阳性组的近期应答率（38．5％）显著低于阴性组（72．0％）。     

慢性乙型肝炎前C区和基本核心启动子突变的临床意义

乙型肝炎病毒（HBV ）全球有高流行率,超过20亿人感染过HBV ,其中约4亿人为慢性 HBV感染,约占世界人口的5％,每年有50万人因肝硬化或肝癌死亡［1-2］,这些表明 HBV具有高度传染性是全球的公共卫生问题。     

基因芯片检测HBV基因突变的临床意义--81例慢性乙型肝炎患者HBV前C区和BCP区突变的临床资料分析

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因组前C区变异和基本核心区启动子(basic core promoter.BCP)变异的临床意义以及基因芯片在慢性乙型肝炎(慢乙肝)临床检测中的应用.方法:用基因芯片法检测HBV DNA阳性慢乙肝患者的血清标本,根据HBV血清标志物的实验结果将受试者分为HBeAg( )组和HBeAg(-)组,比较分析两组患者的临床资料,并根据变异在不同类型慢乙肝患者中的检出状况,以评定HBV前C区和BCP区变异的临床意义.结果:81例血清HBV DNA阳性患者中检出前C区变异51例,突变检出率为63.0%,检出BCP区变异60例,突变检出率为74.1%,其中HBeAg(-)者变异的检出率均明显高于HBeAg( )者,突变株的检出以慢性重型肝炎最高,其次是慢乙肝重度、中度患者,慢乙肝轻度患者最低,表明HBV前C区突变与病情轻重及e系统血清标志有关,而与性别、年龄无关.结论:基因芯片定量检测HBV基因突变高效可靠,对于判断慢乙肝患者病情轻重、预后好坏和指导用药,具有一定临床参考价值.     

52例慢性乙型肝炎 HBV 前C区基因突变研究

本文采用多聚酶链反应－－单链构象多态分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术检测了５２例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎口才的ＨＢＶ前Ｃ区基因突变。结果有前Ｃ区突变株感染３２例,突变株检出率为６１．５％;突变株的检出以慢性下肝炎最高,其次是慢性乙肝重度、中度口才慢性乙肝轻度患者量低;抗－ＨＢｅ阳性２１前Ｃ区突变株检出率高于ＨＢｅＡｇ阳性患者。表明ＨＢＶ前Ｃ区突变与病情轻重及ｅ系统血清标志有关。     

慢性重型乙型肝炎前C区及BCP区基因突变的临床意义

应用基因芯片杂交技术检测慢性重型乙型肝炎（慢重肝）及非重型肝炎（包括慢乙肝及肝硬化）患者血清中HBV前C区A1896、A1899及BCP区T1762/A1764联合突变的发生率,比较慢重肝好转或治愈患者及恶化或死亡患者前C区及BCP区基因突变情况。结果慢重肝前C区A1896、A1899,BCP区T1762/A1764联合突变率及两区多位点突变率与慢乙肝或肝硬化患者比较均有显著统计学差异（P均〈0.01）;慢重肝好转或治愈患者A1896、A1899及多位点变异率与恶化或死亡患者比较均有统计学差异（P均〈0.05）。提示HBV前C区及BCP区基因变异为慢重肝的重要发病机制之一。     

慢性乙型肝炎患者HBV C基因启动子变异的临床意义

目的:探讨慢性乙型肝炎中C基因启动子(BCP)变异的临床意义。方法:采用错配PCR与限制性长度片段多态性分析(RFLP)相结合,检测35例慢性乙型肝炎患者BCP区核苷酸(nt)1762碱基A→T和1764G→A联合突变及前C区nt1896G→A终止变异。结果:在35例慢性乙型肝炎中检出BCP区T1762A1764变异8例(23％),其中6例血清HBeAg( ),2例抗HBe( ),而7例前C区A1896变异中HBeAg( )2例,抗HBe( )5例,未见T1762A1764变异和A1896变异同时出现者。结论:提示HBV毒株BCP区T1762A1764变异可能与前C区A1896变异不同,它的出现不足以导致HBeAg(—)型的慢性肝炎。     

慢性乙型肝炎HBV前C区基因突变研究(摘要)

目的:观察HBV前C区变异与患者病情轻重及血清e系统的关系,探讨改进的聚合酶链反应一单链构象多态性分析(PCR—SSCP)银染技术用于筛选HBV前C区突变的可行性和效果。方法:用酚—氯仿抽提法提取血清HBV DNA,根据adr亚型HBV基因核苷酸序列,选择Pre-C起始密码上游及C区保守序列设计引物P_1、P_2进行聚合酶链反应(PCR),使全前C基因区段(876p)增幅,用甲酰胺     

慢性HBV感染者抗病毒治疗前HBV基本核心启动子及前C区突变的检测及意义

目的研究慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者抗病毒治疗前HBV基本核心启动子（BCP）突变和前C区（PreC）突变与HBeAg、HBV DNA水平和慢性肝病进展的关系。方法收集283例慢性HBV感染者抗病毒治疗前的血清标本,其中慢性乙型肝炎（CHB）185例,肝硬化（LC）98例。采用PCR后直接测序法检测HBV BCP和PreC区突变,同时确定基因型。结果在HBeAg阴性和HBeAg阳性CHB患者中,前C区A1896变异率分别为44.6%（37/83）和21.6%（22/102）（χ2=11.154,P=0.001）,LC患者分别为43.4%（23/53）和17.0%（8/47）（χ2=8.101,P=0.004）。在HBeAg阳性患者中,BCP T1762/A1764双突变率LC组和CHB组分别为89.4%（42/47）和70.6%（72/102）（χ2=6.310,P=0.012）。在单变量分析中,只有年龄（≥45岁）（χ2=27.861,P〈0.001）、BCP T1762/A1764双突变（χ2=8.675,P=0.003）和HBV DNA（≥105拷贝/ml）（χ2=20.499,P〈0.001）与LC进展有关。多因素Logistic回归分析（匹配年龄和性别）发现,BCP T1762/A1764双突变（OR=3.260,95%CI：1.401～7.586;wald=7.517,P=0.006）和HBV DNA（≥105拷贝/ml）（OR=4.640,95%CI：2.331～9.237;wald=19.089,P〈0.001）是LC进展的危险因素。结论前C区A1896突变与HBeAg的消失有关;年龄（≥45岁）、BCP T1762/A1764双突变和HBV DNA高载量（≥105拷贝/ml）与肝硬化进展有关。     

慢性乙型肝炎患者HBe系统与HBV DNA前C区基因突变的分析

目的研究HBV DNA前C区基因突变与HBe系统的关系.方法对88例慢性乙型肝炎患者进行HBVDNA基因检测(PCR法)、分子克隆及序列分析.结果88例患者中,血清HBV DNA阴性22例,阳性66例.从阳性患者中检出野生株感染22例,占33.3%;突变株感染44例,占66.7%.44例突变株感染者中38例属1898位点及/或1901位点突变,占86.4%;其他形式突变6例,占13.6%;66例血清HBV DNA阳性中,CHB 49例,LC 17例,突变株感染检出率分别为69.3%、58.8%,两者经统计学处理无显著性差异(P＞0.05).在HBe系统中,HBV DNA阳性患者属HBeAg(+)者44例,其中突变株检出率为75.0%(33/44),属抗HBe(+)者20例,其中突变株检出率为50.0%(10/20),两者经统计学处理有显著性差异(P＜0.05).结论①在HBe系统中,HBeAg(+)患者的突变株检出率高于抗HBe(+)患者(P＜0.05),提示其位点突变株在HBeAg(+)中占优势,与以往文献报道中关于1896位点突变株主要存在于抗-HBe(+)患者中的结论不尽相同.因此,应考虑HBeAg(+)患者也存在病毒突变的可能.②HBV慢性感染过程中,CHB患者与LC患者的突变株感染检出率无显著性差异(P＞0.05),表明在1898及/或1901位点的突变株感染与肝脏损害程度无平行关系.     

慢性乙型肝炎患者HBV基因耐药突变分析

目的 探讨慢性乙型肝炎患者HBV基因耐药突变情况。方法 收集2010年12月至2014年12月我院感染病科诊治的慢性乙型肝炎患者60例,均为使用拉米夫定或阿德福韦酯后出现病毒学突变的患者,采用荧光定量PCR法检测HBV DNA,采用ELISA法检测HBeAg和HBeAb定量,对血清HBV DNA直接进行基因测序。结果 在60例患者,发现rtl 180M阳性17%,rtm 204V阳性20%, rtn 236T阳性12%,rtA 181V/T阳性10%;rtl 180M阳性和rtm 204V阳性患者HBV DNA拷贝数较高,rtn 236T阳性患者较rtn 236T阴性患者ALT和HBV DNA拷贝数较低;rtA 181V/T阳性患者较rtA 181V/T阴性患者ALT水平高。结论 rtl 180M、rtm 204V、rtn 236T和rtA 181V/T变异多见于年龄大、病程长的患者,HBV DNA拷贝数升高先于ALT升高者,预后较差,其中rtl 180M和rtm 204V变异患者病情容易复发。     

慢性乙型肝炎HBV前C区基因突变与TNF-α的关系

对于慢性乙型肝炎ＨＢＶ前Ｃ区基因突变机制的研究,发现其与机体的免疫状态有关．本文通过对慢性乙型肝炎ＨＢＶ前Ｃ区基因突变与患者血清中ＴＮＦα水平的研究,进一步探讨细胞因子在ＨＢＶ前Ｃ区基因突变发病中的作用机制．１材料和方法１．１材料５２例ＨＢＶＤＮＡ...     

慢性乙型肝炎HBV前C区基因变异与e系统及肝功能的关系

1997年 3月～ 2 0 0 0年 3月 ,我们在承担国家“九五”中医药防治慢性乙型肝炎的攻关课题期间 ,对ＨＢＶ前Ｃ区基因变异与ｅ系统及肝功能的关系进行了研究 ,现报道如下。1　资料与方法1 1　研究对象　慢性乙型肝炎患者 6 1例 ,肝功能轻、中度损害 ,ＨＢＶ -ＤＮＡ阳性 ,其中男性 4 8例 ,女性 13例 ,年龄 18～ 6 0岁 ,平均年龄 30 1岁 ,诊断标准参照 1995年 5月北京第 5次全国传染病、寄生虫病学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》。1 2　检测方法　乙肝病毒标志物 (ＨＢＶ -Ｍ )采用酶联法 ,试剂盒购自中外合资上海实业科华生物技术有…     

慢性重型乙型肝炎患者T细胞免疫状态与HBV前C区基因变异的关系

ＨＢＶ前Ｃ区最常见的基因变异是第 1896位核苷酸Ｇ→Ａ突变 ,使第 2 8位密码子形成终止密码 ,导致ＨＢｅＡｇ合成终止。前Ｃ区变异被认为是免疫选择的结果 ,并与暴发性乙型肝炎有密切的关系 ,但尚没有直接证据表明前Ｃ区变异株病毒毒力增强 ,而且也不是所有感染前Ｃ区变异株的患者都会出现病情加重。我们对慢性重型乙型肝炎患者杀伤性Ｔ细胞 (Ｔｃ)和抑制性Ｔ细胞 (Ｔｓ)与ＨＢＶ前Ｃ区基因变异的关系进行了研究 ,现报道如下。材料与方法一、研究对象42例慢性重型乙型肝炎患者为武汉协和医院 1998年10月至 1999年 5月间的住院患者 ,男 39例…     

慢性乙型肝炎HBV前C区基因突变与中医虚实证的关系

目的:探讨慢性乙型肝炎HBV前C区基因突变与中医虚证和实证的关系。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)银染技术,对91例慢性乙型肝炎患者HBV前C区基因突变进行了研究。结果:53例慢性乙型肝炎实证患者,HBV DNA阳性36例,其中前C区基因突变26例,突变率为72.2％;38例虚证患者,HBV DNA阳性16例,其中前C区基因突变6例,突变率为37.5％。两组比较有显著性差异,P<0.01。实证突变组肝功能ALT、AST和SB水平显著高于虚证突变组及未突变组,P<0.01。结论:HBV前C区基因突变与中医虚证和实证有一定的关系,实证突变率高于虚证,且实证突变组的炎症活动较虚证组剧烈。