保肝颗粒中胡芦巴碱的含量测定

目的:建立高效液相法测定保肝颗粒中胡芦巴碱含量的方法.方法:以胡芦巴碱的含量为检验指标,AgilentZORBA×NH2柱色谱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相水-甲醇-乙腈(20∶40∶40),流速1 mL· min-1,检测波长265 nm,进样量10μL,柱温40℃.结果:胡芦巴碱在进样量5～25 μL(r =0.999 9),线性关系良好,平均回收率为98.3％(n=9),RSD％1.63％.结论:该方法操作简单、快速、专属性强,其含量测定可为保肝颗粒的质量控制提供科学依据.     

黄柏中黄柏碱和木兰花碱含量的反相高效液相色谱法测定

目的 反相高效液相色谱法测定黄柏药材中黄柏碱和木兰花碱的含量.方法 采用Phenomenex RP-C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),乙腈-0.05 mol·L-1磷酸水溶液(10:90,每100 ml加二乙胺0.2 ml)为流动相,流速1.0 ml·min-1,柱温30℃,检测波长225 nm.结果 黄柏碱,木兰花碱分别在0.338 4 ～2.030 4 μg,0.307 2～1.843 2μg范围内线性关系良好；平均回收率(n=6)分别为100.85％,100.35％.结论 该方法为黄柏药材的质量控制提供实验依据,该方法具有简便、快速、准确、重现性好的特点.     

UPLC法测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷的含量

目的:建立以超高效液相色谱(UPLC)法测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷含量的方法.方法:色谱柱ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm× 50 mm,1.7 μm),流动相水-甲醇不同比例梯度洗脱,柱温30℃,流速0.5 mL· min-1,检测波长254 nm.结果:尿苷在2.033 ～ 20.33 mg·L-1线性关系良好,回归方程为y=16 788X-3 556(r=0.999 9),平均回收率98.65％,RSD 2.12％;鸟苷在1.098 ～ 10.98 mg·L-1线性关系良好,回归方程为y =25 378X-325(r =0.999 9),平均回收率98.21％,RSD 2.32％;腺苷在0.201 2～2.012 mg·L-1线性关系良好,回归方程为Y=30800X-59(r=0.9999);平均回收率98.54％,RSD l.91％.结论:该方法准确、快速、可靠,能有效地测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷的含量.     

HPLC测定不同基原陈皮药材中橙皮苷含量

目的:采用高效液相色谱法测定不同基原陈皮药材中橙皮苷含量,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法.方法:采用高效液相色谱法,Baseline C18色谱柱(4.60 mm x250 mm,5 μm),流动相甲醇-水(1％乙酸溶液)(50:50),检测波长283 nm,等度洗脱,流速1.0 mL·min -1,柱温室温,进样量20μL.结果:橙皮苷质量浓度在0.002 -0.040 g·L-1呈良好的线性关系(r =0.9999),平均回收率102.3％ (n =9),RSD 1.6％.含量测定结果表明,同一产地不同基原陈皮药材中橙皮苷含量存在显著差异.结论:该方法简单、可行,适用于不同基原陈皮药材中橙皮苷的含量测定以及质量评价.     

藏药材珠芽蓼中β-谷甾醇含量的超高液相色谱-蒸发光散射检测法测定

目的 测定藏药材珠芽蓼中β-谷甾醇含量,来控制珠芽蓼药材质量.方法 采用超高液相色谱-蒸发光散射检测法( UPLC - ELSD).色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEHC18( 100 mm ×2.1 mm,1.7 μm),以甲醇-水为流动相,体积流量0.4 ml/min;柱温40℃;蒸发光散射检测器参数为漂移管温度40℃,载气(压缩空气)体积流量为2.5 L/min.结果 β-谷甾醇在进样量0.3～3 μg的范围内线性关系良好,r=0.999 7,回收率为98.1％(n=9).结论 采用UPLC - ELSD法测定藏药材珠芽蓼中β-谷甾醇的方法简便、高效、准确,可用于控制珠芽蓼药材质量,且该方法比HPLC-ELSD法测定节省时间和溶剂.     

HPLC测定关黄柏中生物碱的含量

目的:采用HPLC同时测定黑龙江省10个不同产地关黄柏中小檗碱、药根碱、巴马汀的含量.方法:HPLC色谱条件,Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相乙腈-0.1％磷酸溶液(25∶75,每100 mL加0.10g十二烷基硫酸钠),流速1 mL· min-1,检测波长345 nm,柱温30℃.结果:盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀分别在12.08 ～ 144.96 mg·L-1(r =0.9993),1.60 ～25.60 mg·L-1(r =0.9993),7.26 ～87.12 mg·L-1(r =0.9993)线性关系良好,3种生物碱的平均回收率(n＝9)分别为102.51％,103.47％,102.89％.结论:方法简便准确,重复性好,适用于黄柏类药材小檗碱、药根碱、巴马汀的含量测定;不同产地关黄柏中生物碱含量差异较大.     

UPLC-DAD技术快速分析黄芪药材及制剂中主要黄酮成分

目的:采用UPLC-DAD技术快速测定黄芪及其制剂中主要黄酮类成分的含量.方法:采用超高效液相色谱仪,用ACQUITY UPLC TMBEH C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流动相由甲醇-0.2％甲酸水溶液线性梯度洗脱;流速0.5 mL·min -1,检测波长200～400 nm,柱温30℃.结果:毛蕊异黄酮苷、芒柄花素苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的线性范围分别为0.1313～1.313 g·L-1(r=0.9997),0.1186～1.186 g·L-1 (r=0·9994),0.0206～0.206 g·L-1(r=0.999 5),0.015 0 ～0.150 g·L-1(r =0.999 5);平均同收率分别为97.07％,97.26％,97.45％,96.97％.结论:本方法快速、准确、可靠,可以作为控制黄芪药材及制剂质量的方法.     

HPLC测定不同产地辣蓼中槲皮素的含量

目的:建立RP-HPLC测定辣蓼药材中槲皮素的的含量,测定10个产地辣蓼中槲皮素的含量.方法:Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.4％磷酸(50∶ 50)等度洗脱,流速1 mL·min-1,室温,检测波长365nm,进样量20 μL.结果:槲皮素标准曲线回归方程为A=73185C-21.47(r =0.9995),在0.004～0.014 g·L-1线性关系良好,平均回收率为99.29％,RSD 1.30％.结论:所用方法分离效果好,简便、准确,可用于辣蓼药材的质量控制.     

钩藤药材中异钩藤碱含量的超高效液相色谱和高效液相色谱法测定

目的 比较钩藤中异钩藤碱含量测定方法.方法 采用高效液相色谱(HPLC)方法进行转换并优化为超高效液相色谱(UPLC)方法.高效液相色谱方法色谱柱为Alltech prevail C18柱(4.6mm×250 mm,5 μm),流动相:乙腈-水(含三乙胺,冰醋酸调pH 7.5),流速:1 ml·min-1,检测波长:246 nm,柱温:25℃.超高效液相色谱方法色谱柱为Waters ACQUITY UPLCTM T3 C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相:乙腈-水(含三乙胺,冰醋酸调pH 8.0),流速:0.6 ml·min-1,检测波长:246 nm,柱温:50℃.结果 两种方法所得含量测定结果一致.结论 超高效液相色谱方法能够替代高效液相色谱分析方法测定钩藤药材中异钩藤碱含量,既加快了分析速度,达到了样品分析的高通量,减少有机溶剂的使用,又得到更高的分析灵敏度.     

微波萃取-UPLC同时测定虎杖中5种主要活性成分的含量

目的:建立同时测定虎杖药材中虎杖苷、白藜芦醇、蒽苷B、大黄素和大黄素甲醚5种活性成分含量的微波萃取与超高效液相色谱(UPLC)分析方法,为完善虎杖的质量标准提供科学依据.方法:采用MDS-8型多通量密闭微波化学工作站,以甲醇为溶剂,160 ℃微波萃取制备供试品溶液;UPLC分析条件为Waters Acquity H Class UPLC系统,BEH C18色谱柱(2.1mm×100 mm,1.7 μm),乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1,柱温30℃,检测波长226 nm.结果:5种活性成分采用微波萃取10 min可提取完全;经UPLC分析可在12 min内完全分离,且在线性范围内均呈良好的线性关系(r≥0.999 6),平均加样回收率为97.00％ ～ 103.7％ (n =6),RSD≤2.2％.16个产地的虎杖药材中,每种被测成分的批次间含量差异都比较大,但5种成分的总量相对稳定(3.683 3％ ～7.103 1％).结论:微波萃取-UPLC法同时测定虎杖中多个活性成分的含量,方法快捷、分离效果及重现性好,可以用于虎杖的质量控制与评价.     

半夏醇提取液逆转多药耐药细胞系K562/A02的耐药性

目的:观察非细胞毒性浓度(抑制率≤5％)半夏醇提取液对耐阿霉素的人白血病细胞系K562/A02多药耐药性的逆转作用,并探讨其逆转机制.方法:将细胞悬液接种于72孔培养板中,细胞数为2 ×108个/L,半夏醇提取液(2.5,5,10,20,40μg·L-1)处理K562/A02细胞72 h后,采用MTT法测定半夏醇提取液的细胞毒性及其对K562/A02细胞敏感性的影响,用流式细胞仪检测非细胞毒性浓度的半夏醇提取液处理后K562/A02细胞膜表面糖蛋白p170表达的变化与细胞内柔红霉素的浓度,应用SPSS 16.0软件包对实验结果进行统计学处理.结果:半夏醇提取液对K562/A02细胞有一定的细胞毒作用,其非细胞毒性质量浓度为6.5 μg·L-1,非细胞毒性浓度半夏醇提取液可显著降低阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制浓度( IC50),使K562/A02细胞的IC50由原来的(30.9±0.11) μg·L-1降低至(10.1±0.21) μg·L-1,其逆转倍数为3.06倍;半夏醇提取液作用于K562/A02细胞后,细胞膜糖蛋白p170的表达从91.21％下调至45.12％ (P ＜0.01);柔红霉素外渗试验显示,半夏醇提取液作用于K562/A02细胞后,可使细胞内化疗药物的浓度明显增加.结论:半夏醇提取液可部分逆转多药耐药细胞系K562/A02细胞对阿霉素的耐药性,半夏醇提取液逆转白血病细胞耐药性是通过下调了白血病细胞膜糖蛋白p170的表达,使其将化疗药物泵出细胞外的功能受到了抑制,从而使化疗药物在白血病细胞内能达到有效浓度,从而可以杀灭耐药的白血病细胞系.     

UPLC快速分析穿心莲药材及制剂中内酯成分

目的:建立UPLC-PDA技术快速测定穿心莲药材及制剂中主要内酯类成分含量的方法.方法:采用超高效液相色谱仪,用Acquity BEH Shield RP C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流动相甲醇(A)-水(B),梯度洗脱(0～2 min,40％A;2 ～4 min,40％ ～45％ A;4 ～ 10 min,45％ ～50％ A;10 ～15 min,50％A);流速0.5 mL· min -1,检测波长226 nm,柱温30℃.结果:在15 min内可以完成药材和制剂中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的分析,分离度良好,线性范围分别为0.0286 ～0.286 g·L-1(r=0.9996,n=6),0.0940～0.940 g·L-1(r =0.9993,n=6);平均加样回收率分别为97.32％,97.11％.结论:该方法快速、准确、灵敏度高,可用于穿心莲药材及制剂的质量控制.     

半夏总生物碱含量的动态变化

目的 :测定半夏不同生长期总生物碱的含量 ,为确定合理的采收期提供依据。方法 :采用氯仿提取 ,依据酸性染料比色法的原理 ,在 4 17nm波长下测定 ,并作方差分析。结果 :获得良好的线性关系 (r =0 9989)和回收率 ( 10 0 1% ) ,RSD为 2 3%。半夏不同生长期总生物碱含量差异显著 (F =12 789,P <0 0 1)。结论 :测定方法简单快速 ;半夏不同生长期总生物碱含量以全苗期最高 ,每株平均总生物碱产量以集中倒苗期最高 ,半夏最佳采收期以集中倒苗期为宜     

HPLC-ELSD测定盾叶薯蓣中伪原薯蓣皂苷的含量

目的:建立盾叶薯蓣中伪原薯蓣皂苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),Dikma C18色谱柱(4.6 mn×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(30:70),流速1.0 mL· min-1;蒸发光散射检测器参数:漂移管温度60℃,气压4.5 kPa.结果:伪原薯蓣皂苷在10 ～40 μg(r =0.9998)线性关系良好,平均回收率98.7％ (RSD 1.6％,n=6).结论:该方法简便、快速、灵敏、准确,可作为盾叶薯蓣的质量控制方法.     

超高液相色谱法测定白芷配方颗粒中欧前胡素和异欧前胡素的含量

目的:建立同时测定白芷配方颗粒中欧前胡素和异欧前胡素的超高效液相方法.方法:采用超高效液相色谱法,Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(2.1 mm ×100 mm,1.9 μm)柱,流动相甲醇-水(55∶45),流速0.2 mL·min-1,柱温30℃,检测波长300 nm.结果:欧前胡素在7.8 ～70.2 ng呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为98.82％,RSD 1.25％;异欧前胡素在5.04 ～ 45.36 ng呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为100.14％,RSD 1.16％.结论:以建立的方法简便准确、快速、重复性好,可作为有效的方法对白芷配方颗粒中所含欧前胡素和异欧前胡素进行含量测定.     

高效液相色谱法测定中药滴水珠中麻黄碱的含量

目的　测定中药滴水珠中麻黄碱的含量。方法　采用反相高效液相色谱法 ,以 Phenom enex ODS柱为分析柱 ,甲醇 -水 (加磷酸调 p H至 3.5 ) (6 5∶ 35 )为流动相 ,流速 :0 .6 m l· min- 1 ;检测波长为 2 13nm ,柱温 30℃。结果　在 2 0～ 10 0μg· ml- 1 范围内 ,色谱峰面积与对照品浓度呈良好的线性关系 ,r=0 .999;平均回收率为 :91.2 0 % ,RSD为 :1.2 (n=5 )。结论　该方法简易准确 ,重现性好 ,在本色谱条件及样品处理方法下 ,可以准确测出滴水珠中麻黄碱的含量     

HPLC测定急性子中总黄酮的含量

目的:建立HPLC测定急性子中总黄酮含量的方法.方法:采用Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇-0.4％磷酸水(55∶45),检测波长365 nm,柱温30℃,流速1.0 mL· min-1.结果:槲皮素、山柰酚、异鼠李素的线性范围分别为0.111 2～0.5560(r=0.9994),0.007 711 ～0.023 23(r =0.999 4),0.006 69～0.033 45 μg(r=0.999 2);平均加样回收率分别为98.5％(RSD 1.3％,n=6),97.3％(RSD 1.7％,n=6),97.6％ (RSD 1.6％,n=6).结论:该方法准确度高,重复性好,可用于急性子中总黄酮的含量测定.     

探究半夏不同炮制方法对半夏秫米汤治疗失眠的影响

目的:基于半夏不同炮制方法探究半夏秫米汤治疗失眠的效果,筛选出最佳疗效品种及剂量,并探究其作用机制。方法:实验分2轮进行,均采用对氯苯丙氨酸腹腔注射法复制大鼠失眠模型,后予以中药干预。第1轮实验结束后通过翻正实验筛选出最优疗效组进行第2轮实验,第2轮实验结束后检测翻正实验,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠脑组织中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、白介素-1β(IL-1β)的浓度。结果:第1轮筛选实验结果显示,雌雄大鼠体质量阳性组和姜半夏组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。睡眠潜伏期缩短时间及睡眠持续时间方面,雌性大鼠阳性组、姜半夏组、生半夏组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),其中阳性组>姜半夏组>生半夏组。雄性大鼠阳性组、姜半夏组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),其中阳性组>姜半夏组。第2轮剂量实验结果显示,雌性大鼠体质量阳性组、姜高组、姜中组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,阳性组、姜高组、姜中组可明显缩短大鼠睡眠潜伏期,延长睡眠持续时间,升高5-HT、IL-1β水平,降低NE水平,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),其中阳性组>姜高组>姜中组。结论:高剂量姜半夏组成的半夏秫米汤治疗失眠效果最优,其机制可能是通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴通路上神经递质的含量发挥作用。