优选大黄总蒽醌结肠定位壳聚糖微球的制备工艺

目的优选大黄总蒽醌(RTA)壳聚糖(CS)口服结肠定位微球的制备工艺。方法以包封率和粒径为考察指标,CS为载体材料,采用乳化-交联法制备RTA壳聚糖微球(RTA-CMS),并用正交试验优选最佳制备工艺,再采用肠溶材料Eudragit S100进行包衣。结果优选的最佳工艺为CS质量分数为2.5%,RTA与CS质量比为1∶4,液体石蜡与二氯甲烷的比例为1∶1,司盘-80用量为2%,微球包封率为64.5%,粒径为(248.8±54.2)μm,包衣后粒径为(269.3±172.7)μm。结论根据优选工艺制备的RTA-CMS包封率较高,微球形态良好,可用于RTA结肠定位CMS的制备。     

大黄总蒽醌对大鼠远端结肠AQP2表达的调节效应

目的：探讨大黄总蒽醌对大鼠远端结肠水通道蛋白2(aquaporin2，AQP2)表达的调节作用。方法：32只SD大鼠随机分为正常组，大黄总蒽醌低、中、高剂量组(0.14,2.5, 4.5 g·kg^-1·d^-1，灌胃)，正常组给予生理盐水灌胃。大鼠 5 d后麻醉处死，取全段结肠内粪便，干燥后检测粪便含水量；留取远端结肠，运用免疫组织化学、Western blot及RT-PCR检测远端结肠AQP2表达的变化。结果：低剂量组大鼠没有出现泻下现象，其远端结肠AQP2表达无显著差异；中剂量组(2.5 g·kg^-1·d^-1)大鼠出现软便及稀便，高剂量组(4.5 g·kg^-1·d^-1)大鼠出现稀便和水样便，粪便含水量显著性增加，其远端结肠AQP2表达亦显著降低(P＜0.01)。结论：大黄总蒽醌能抑制大鼠远端结肠AQP2的转录与翻译、增加粪便的含水量，这可能是其泻下效应产生的机制之一。     

大黄总蒽醌对人肾小管上皮细胞毒性作用及相关机制研究

目的:探讨在大黄总蒽醌对人肾小管上皮细胞毒性作用及相关机制。方法:以MTT法检测细胞毒性;CPE观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率。结果:大黄总蒽醌对HK-2细胞增殖有直接的抑制作用,呈一定的量效关系,并使细胞形态发生相应改变。大黄总蒽醌能抑制HK-2细胞S期向G2/M期的转化,引起细胞凋亡,尤其在较低剂量(3.75 mg/L)下就可以引起晚期凋亡/坏死,当药物浓度在30 mg/L以下剂量时,其抑制细胞增值作用和对细胞周期的阻滞作用相对较弱,在30mg/L增加到60 mg/L时的过程中,抑制细胞增值和细胞周期的阻滞作用增加明显,甚至出现了明显的晚期凋亡/坏死,高浓度时凋亡率大于50%。结论:大黄总蒽醌对HK-2细胞具有一定的毒性作用,其毒性作用可能与影响细胞周期和凋亡相关。     

大黄总蒽醌含药血清对LoVo的AQP4表达的调节效应

目的:探讨大黄总蒽醌含药血清对体外培养LoVo细胞的水通道蛋白基因(AQP4)表达的调节效应.方法:16只SD大鼠随机分为正常组,大黄总蒽醌低、中、高剂量组(1.4,2.5,4.5 g·kg~(-1)·d~(-1),灌胃),7 d后麻醉处死取血制备含药血清.体外培养LoVo细胞并给予不同剂量大黄总蒽醌含药血清培养液24 h,采用Western blot及半定量RT-PCR检测AQP4蛋白及mRNA的表达.结果:结果显示,4.5 g·kg~(-1)·d~(-1)大黄总蒽醌含药血清培养液可抑制LoVo细胞的AQP4蛋白及mRNA的表达(P＜0.01).结论:大黄总蒽醌含药血清可抑制LoVo细胞AQP4基因转录与翻译,提示大黄的泻下作用可能与调节AQP4表达有关.     

大黄总蒽醌提取与纯化工艺的研究

目的：研究大黄提取纯化的工艺条件及参数。方法：以大黄总蒽醌的提取率及洗脱率为考察指标，考察大黄的提取奈件及大孔吸附树脂富集、纯化大黄总蒽醌的吸附性能和洗脱参数。结果：大黄加水重沸煎煮3次，每次加水15倍量，20min／次，有效成分可提取完全。通过大孔吸附树脂富集与纯化，用70%乙醇洗脱，总蒽醌的洗脱收率在80％以上，总固物收率明显降低至6．45%。结论：该实验所确定的提取及纯化工艺对大黄总蒽醌的富集是切实可行的。     

大孔吸附树脂富集纯化大黄总蒽醌的工艺研究

目的：筛选纯化大黄总蒽醌的最佳树脂，确定树脂纯化大黄总蒽醌的工艺参数。方法：以大黄中总蒽醌含量为指标，研究大孔吸附树脂富集、纯化大黄总蒽醌的吸附性能和洗脱参数。结果：X-5型树脂对大黄总蒽醌有良好的吸附性能。洗脱剂为60％乙醇，用量为6倍量树脂柱体积，大黄总蒽醌富集于60％乙醇洗脱液部分，且除杂质效果好。结论：通过X-5型大孔吸附树脂富集、纯化后，大黄总蒽醌的洗脱率在90％以上。总蒽醌的含量提高到35．4％。说明采用本法富集、纯化大黄总蒽醌是可行的。     

SD大鼠经口给予大黄总蒽醌的基因表达差异和肾脏毒性靶点研究

 目的通过对肾脏基因的差异表达研究,对大鼠口服大黄总蒽醌肾脏毒性作用靶点提供科学推论。方法SD大鼠大黄总蒽醌4 500 mg·kg^-1·d^-1灌胃给药13周,选用大鼠全基因组芯片检测肾脏基因差异表达,使用荧光定量PCR手段对10条关键基因进行了差异表达确认。实验分为给药组和正常组(n=4),对基因芯片检测结果进行按生理通路聚类分析。结果研究发现有143条基因在给药组中发生上调,101条基因发生了下调。上调的基因中与糖脂代谢相关的有29条,免疫相关的有13条,肾脏解毒功能相关的有15条,与细胞周期调控、信号传导、内分泌调节相关的有24条,未知功能的有26条;下调的基因中与糖脂代谢相关的有12条,免疫相关的有11条,细胞周期调控、信号传导相关的有20条,肾功能相关的有25条,功能未知的为39条。结论大黄总蒽醌给药组基因芯片分析结果显示,caspase3和p53通路并不是造成细胞凋亡的主要原因。研究发现,p38 MAPK通路中,MAPK激酶6可能是某种程度上造成细胞损伤的原因。细胞周期调节相关通路研究表明,周期蛋白D1和周期素依赖性蛋白激酶1的下调可能是造成真核细胞周期调控受阻,进而产生增殖抑制作用的原因。     

大黄蒽醌衍生物对大鼠结肠及LoVo细胞水通道蛋白4表达的调节效应

目的 探讨大黄总蒽醌对SD大鼠的泻下效应及对结肠水通道蛋白4(aquaporin4, AQP4)表达的影响及大黄酸、大黄素对体外培养LoVo细胞AQP4的调节效应。 方法 雄性SD大鼠24 只随机分为正常对照组、大黄总蒽醌泻下剂量组及高剂量组,分别予大黄总蒽醌悬液或蒸馏水灌胃5 天,观察大鼠结肠粪便含水量;应用Western blot、RT PCR方法观察其近端结肠AQP4表达的变化。体外培养LoVo细胞并予不同浓度大黄酸/大黄素含药培养液作用24 h及大黄酸/大黄素含药培养液(20 mg/L)不同时间作用,采用Western blot及RT-PCR检测AQP4蛋白及mRNA的表达。 结果 大黄总蒽醌泻下剂量组及高剂量组作用后,大鼠结肠内粪便含水量明显增加,同时其近端结肠AQP4表达降低且表现为量效关系。大黄酸/大黄素能够显著下调体外培养LoVo细胞的AQP4蛋白及mRNA表达,且表现为剂量－效应及时间－效应关系。 结论 大黄总蒽醌在发挥泻下作用的同时,能够有效下调大鼠近端结肠AQP4的表达;大黄酸、大黄素可抑制体外培养LoVo细胞AQP4的表达,可能是大黄泻下作用机制之一。     

葛根素生物黏附微球的制备及评价

目的制备葛根素生物黏附微球。方法乳化-溶剂挥发法制备黏附微球。在单因素试验基础上,以葛根素加入量、乙基纤维素黏度、乙基纤维素与卡波姆934P比例、搅拌速度为影响因素,包封率及载药量为评价指标,正交试验优化制备工艺。溶解测定仪测定不同时间点葛根素含有量,绘制体外释放曲线。再通过测定胃黏膜上的滞留率来评价其生物黏附性。结果最佳条件为葛根素加入量200 mg,乙基纤维素黏度45 mPa·s,乙基纤维素与卡波姆934P比例2∶1,搅拌速度1 200 r/min,载药量59.7%,包封率90.8%。所得微球呈球形或类球形,载药后微球粒径增大,形态饱满,可在体外持续释放药物9 h,生物黏附性良好,在大鼠胃黏膜的滞留率达92.6%。结论该方法稳定可靠,可为葛根素生物黏附微球的工业化生产和应用提供实验依据。     

肠溃宁生物黏附结肠定位微片成型工艺的研究

目的研究肠溃宁(苦参,吴茱萸,乌梅,椿皮)生物黏附结肠定位微片成型工艺。方法采用正交试验,以黏附时间与苦参碱和氧化苦参碱的释放度为指标,以CP934P和HPC两种黏合剂的比例、含药量和填充剂用量为考察因素,优选片芯的成型处方。以苦参碱和氧化苦参碱的释放度为指标,对包衣材料Eudragit S100与增塑剂DEP的比例、包衣增重进行考察。结果片芯的最佳成型处方为CP934P和HPC的比例为1∶3,药粉的比例为35%,Eudragit S100与DEP的比例为85∶15,喷入质量分数为5%的包衣液以使药片增重8%。结论该成型工艺可使肠溃宁生物黏附结肠定位微片显示出良好的结肠定位和释放作用。     

大孔吸附树脂富集纯化大黄总蒽醌的工艺研究

目的:筛选纯化大黄总蒽醌的最佳树脂,确定树脂纯化大黄总蒽醌的工艺参数。方法:以大黄中总蒽醌含量为指标,研究大孔吸附树脂富集、纯化大黄总蒽醌的吸附性能和洗脱参数。结果:X-5型树脂对大黄总蒽醌有良好的吸附性能。洗脱剂为60%乙醇,用量为6倍量树脂柱体积,大黄总蒽醌富集于60%乙醇洗脱液部分,且除杂质效果好。结论:通过X-5型大孔吸附树脂富集、纯化后,大黄总蒽醌的洗脱率在90%以上,总蒽醌的含量提高到35.4%。说明采用本法富集、纯化大黄总蒽醌是可行的。     

盐制对大黄中蒽醌类成分的影响

目的：考察盐制对大黄中蒽醌类成分的影响。从而提示盐制大黄的炮制机理。方法：采用分光光度法,测定了生大黄、淡盐水制大黄、浓盐水制大黄中蒽醌类成分的含量。结果：2种盐制大黄中的蒽醌含量与生大黄中的蒽醌含量无明显性差异。结论：盐制对大黄中蒽醌类成分无影响。提示大黄的盐制机理值得商榷。     

大黄配伍前后水解型鞣质及蒽醌类成分的含量变化研究

目的研究大黄分别与甘草、炙甘草、黄连、黄芩配伍前后水解型鞣质及蒽醌类成分的含量变化。方法采用HPLC法测定大黄配伍前后各提取物中没食子酸、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。结果配伍后水解型鞣质的含量降低较少,游离蒽醌及总蒽醌的含量均有不同程度的降低,其中以与黄连降低幅度最大。结论大黄经配伍后蒽醌类成分含量发生显著变化。     

大黄不良反应古今论

总结古代本草对大黄毒性的论述以及现代大黄不良反应的研究进展，从而较为客观地理解大黄毒性的含义，从实验与临床实践研究中探讨大黄不良反应产生的原因，以期为大黄的研究与合理应用提供参考。     

大黄与酒大黄配方颗粒红外光谱研究

目的:建立大黄与酒大黄配方颗粒的红外光谱快速鉴别方法,为中药炮制品配方颗粒在不具备饮片形态的情况下真伪鉴别提供示范性研究.方法:采用一维红外光谱及二阶导数光谱法分别对大黄与酒大黄配方颗粒进行红外光谱分析.结果:大黄与酒大黄配方颗粒的一维红外光谱基本相似,仅在1 447,1 367,1 146,1 079,925,576 cm-1附近吸收峰的位置、强度、形状上存在一定的差异;其二阶导数光谱在1 800～500 cm-1峰位置和峰强度的变化较明显.结论:红外光谱技术快速、准确、简便,可用于大黄与酒大黄配方颗粒的鉴别和质量控制.     

大黄药材蒽醌苷元类成分的HPLC指纹图谱研究

目的 :应用HPLC法研究清热解毒注射剂中大黄药材蒽醌苷元类成分的指纹图谱。方法 :以大黄酸为参照物 ,应用HPLC色谱法 ,色谱柱 :μBondapak C18( 3 .9mm× 3 0 0mm ,10 μm) ,流动相 :乙腈 :0 .5 %磷酸 (梯度洗脱 ) ,柱温 :3 0°C ,检测波长 :43 0nm ,分析时间 :60min ,流速 :1.0mL。结果 :共标出大黄药材蒽醌苷元类成分 12个共有峰。结论 :方法稳定、可靠、重复性好。为大黄药材质量控制提供参考     

大黄饮片MEKC-DAD指纹图谱的研究

目的:建立大黄饮片MEKC-DAD指纹图谱分析方法,并对大黄及其炮制品的指纹谱进行比较.方法:选择胶束电动毛细管电泳分离模式,以25 mmol·L~(-1)硼砂～25 mmol·L~(-1) SDS-10%乙腈(pH 10.90)为运行缓冲液,分离电压12 kV,以大黄酸为参照物(IS),测定其指纹图谱,并作模糊聚类法分析和相似度评价.结果:初步建立了以11个共有峰为特征指纹信息的10批大黄地产药材MEKC-DAD指纹图谱;发现少数产地大黄药材的指纹图谱有一定差异,生品与其炮制品的指纹谱中共有峰相对峰面积差异显著.结论:方法准确可靠,重复性好,可作为大黄饮片内在质量评价的依据.     

配伍甘草对大黄泻下作用影响的研究进展

大黄是一味常用大宗药材,临床上配伍应用非常广泛。蒽醌类物质为其泻下作用主要活性成分,中医认为大黄泻下峻猛为大黄的毒性。有着"国老"美誉的甘草,一直被认为是解毒圣药,缓和药性,调和诸药。该文将大黄配伍甘草减毒作用分为煎煮过程、肠道代谢2个环节,分别从化学成分、肠道菌群、Ⅰ/Ⅱ相代谢、药物转运方面综述近年来大黄配伍甘草减毒的研究进展。二者配伍的物质基础和机制仍不完全清楚,甚至有相左的结果出现,有待深入研究。     

大黄中总大黄素成分含量测定条件优选

目的 :优选大黄中总大黄素成分含量测定条件。方法 :采用均匀设计法 ,HPLC测定其含量 ,对影响总大黄素含量的主要因素 :水解时间、酸的浓度、酸用量、氯仿提取次数及氯仿用量 5个因素进行考察 ,结果利用UROS系统软件回归处理 ,得出优化条件 :水解时间 9min ;氯仿用量 70ml;提取次数 2次 ;H2 SO4用量 10ml;H2 SO4浓度 1mol L经验证试验 ,重复性好 ,结果可靠。