桃红内异散对大鼠子宫内膜异位病灶MicroRNA-126的影响

目的探讨活血化瘀软坚散结法对大鼠子宫内膜异位病灶microRNA-126的影响。方法选择SD雌性大鼠作为实验动物并分为假手术组、模型组、桃红内异散组、孕三烯酮组,建立子宫内膜异位症模型后,假手术组及EMs模型组给予生理盐水干预、桃红内异散组给予中药75 g~(-1)·kg~(-1)·d~(-1)干预;孕三烯酮组给予孕三烯酮0.25 g~(-1)·kg~(-1)·w~(-1)干预。连续干预4周后,采用RT-PCR技术检测EMs模型大鼠异位病灶组织中microRNA-126水平。结果与模型组比较,桃红内异散能够显著升高EMs模型大鼠microRNA-126水平(P0.01)。结论桃红内异散可显著升高microRNA-126从而抑制异位子宫内膜的微血管生长,这是桃红内异散治疗子宫内膜异位症的分子机理之一。     

蔡氏内异方调控TRIM24/NLRP3炎症小体介导大鼠异位子宫内膜细胞焦亡的机制研究

目的探讨蔡氏内异方是否通过作用于TRIM24/NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡而干预子宫内膜异位症。方法采用子宫内膜自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型。SD雌性大鼠随机取6只为正常对照组,6只为假手术组,其余大鼠造模成功后,再随机分为模型组、孕三烯酮组(0.25 mg/kg)、蔡氏内异方低剂量组(11.4 g/kg)、蔡氏内异方高剂量组(22.8 g/kg),每组6只。灌胃3周后,将各组大鼠的子宫内膜组织进行HE染色以观察组织形态,并采用IHC染色检测TRIM24的表达,Western blot法检测TRIM24及NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡相关蛋白的表达,ELISA法检测组织上清液中IL-1β、IL-18的浓度。结果与正常对照组比较,假手术组的子宫内膜组织形态、TRIM24的表达、NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡相关蛋白的表达及IL-1β、IL-18的浓度均无明显差异。与假手术组比较,模型组的组织上皮层增厚且不规则,TRIM24的表达显著降低(P0.001),NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡相关蛋白的表达明显升高,IL-1β、IL-18的浓度显著升高(P0.001)。与模型组比较,孕三烯酮组和蔡氏内异方高剂量组的组织上皮层变薄且规则,TRIM24的表达显著升高(P0.001,P0.01),NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡相关蛋白的表达明显降低,IL-1β、IL-18的浓度显著降低(P0.001)。与孕三烯酮组比较,蔡氏内异方低剂量组的上皮细胞增多,蔡氏内异方高剂量组的间质细胞增多。与蔡氏内异方低剂量组比较,蔡氏内异方高剂量组的组织上皮层变薄,间质中TRIM24的表达明显增加,Pro-IL-1β蛋白的表达明显降低(P0.01)。结论高剂量蔡氏内异方可显著上调异位子宫内膜组织中TRIM24的表达,并明显抑制NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡。     

归芪聪志汤对VD模型大鼠海马神经元Claudin-1,TGF-β表达的影响

目的:研究归芪聪志汤对血管性痴呆(varscular dementia,VD)模型大鼠学习记忆和海马神经元紧密连接蛋白1(Claudin-1)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠120只,按随机数字表选10只大鼠作为假手术组,其余大鼠制备VD模型,选成功模型大鼠随机分为5组,分别为模型组、阳性组和归芪聪志汤低、中、高剂量组。归芪聪志汤低、中、高剂量组给药量分别为9.9,19.8,39.6 g·kg-1·d-1。阳性组给予脑复康吡拉西坦胶囊0.3 g·kg-1·d-1。假手术组、模型组给予等量水。每日1次。连续灌胃治疗28 d后,Morris水迷宫予以行为学检测,实时荧光定量PCR(Real-time PCR),免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组海马组织Claudin-1,TGF-β基因和蛋白表达。结果:灌胃治疗28 d后,与假手术组比较,VD模型组大鼠的平均逃避潜伏期明显延长、跨原平台次数明显减少(P0.01),大鼠海马的Claudin-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),大鼠海马的TGF-βmRNA及蛋白表达水平明显降低(P0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠逃逸潜伏期均缩短,跨原平台次数均增多(P0.01),大鼠海马的Claudin-1 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P0.05),大鼠海马的TGF-βmRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),归芪聪志汤中剂量组与脑复康吡拉西坦胶囊组优于其他组(P0.05)。结论:归芪聪志汤能够显著改善VD大鼠的学习记忆能力,可能与调节脑组织细胞间黏附作用、抑制炎性因子表达等有关。     

内异方调控NF-КB p65改善大鼠子宫内膜异位症的机制研究

目的:探讨内异方改善大鼠子宫内膜异位症(Endometriosis,EM)的作用机制。方法:构建大鼠EM模型,随机分成假手术组、模型组、内异方24. 8 g/kg、49. 6 g/kg、99. 2 g/kg组、孕三烯酮0. 25 mg/kg组,灌胃21天后剖解观测内异灶,ELISA法检测腹腔冲洗液中TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6的水平,qP CR、Western-blot法检测NF-κB p65基因、蛋白表达和磷酸化,免疫组化法检测NF-κBp65入核情况。结果:EM大鼠给予内异方治疗后,明显抑制內异灶的生长,改善盆腔粘连;显著降低了腹腔冲洗液TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6的含量;明显抑制NF-κB p65的基因、蛋白表达和磷酸化;显著抑制NF-κB p65核表达。结论:內异方可能通过抑制NF-κB p65的表达和活化,进而抑制炎症反应,抑制异位内膜的生长和黏附而改善EM。     

内异方对子宫内膜异位症大鼠的治疗作用以及对异位内膜VEGF、HIF-1α、NF-κB和PTEN表达的影响＊

目的 本研究通过观察内异方对子宫内膜异位症（endometriosis,EM）大鼠的治疗作用，并进一步阐明可能的作用机制。方法 清洁级雌性成年（9-10周龄）未孕SD大鼠，体重190-210 g，随机分为假手术组、模型组、内异方治疗组和阳性对照组，每组最终纳入10只大鼠。大鼠在第3个动情期时采用子宫内膜自体移植法建立EM大鼠模型。造模成功后，内异方治疗组给予内异方水煎剂灌胃，阳性对照组给予达那唑溶液灌胃，假手术组和模型组大鼠给予同体积生理盐水灌胃，各组连续给药4周。治疗结束后，解剖异位内膜，采用HE染色观察异位内膜的病理形态学改变情况；采用Western blot检测异位内膜中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、第10号染色体缺失的磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)与核转录因子-Kappa B(nuclear factor-Kappa B,NF-κB)蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示，内异方改善EM大鼠的异位内膜病理学结构改变。Western blot结果显示，内异方抑制EM大鼠的异位内膜组织的VEGF、HIF-1α和NF-κB蛋白表达水平，但促进PTEN蛋白表达水平。结论 内异方具有改善大鼠EM的作用，这种作用可能与抑制异位内膜组织中VEGF、HIF-1α和NF-κB蛋白表达并促进PTEN蛋白表达相关。     

内异方对子宫内膜异位症ICAM-1的影响

目的:探讨内异方对大鼠子宫内膜异位症细胞间黏附分子1(ICAM-1)的影响。方法:采用自体子宫内膜移植法制备大鼠子宫内膜异位症模型,将其分为内异方高、中、低剂量组(予内异方药液干预,给药剂量分别为15 g/kg、7. 5 g/kg、3. 75 g/kg),阳性组(予达那唑胶囊药液干预,给药剂量为36 mg/kg),模型组和假手术组(均灌胃等体积溶媒),灌胃4 w。采用光镜观察异位内膜的病理组织变化,并评价病变分级,采用免疫组化法检测异位内膜组织的ICAM-1阳性表达。结果:模型组大鼠异位内膜体积大,腺体数量较多,间质层丰富,有大量炎性细胞浸润;内异方各剂量组大鼠的异位内膜有不同程度的萎缩,体积均较模型组显著缩小,间质炎性细胞数量较少。与模型组相比,内异方各剂量组病变分级程度均明显减轻,异位内膜组织的ICAM-1表达均明显降低,差异有统计学意义(P <0. 01)。结论:内异方具有治疗子宫内膜异位症的作用,其作用机制可能与抑制异位子宫内膜在盆腹腔处的黏附等有关。     

桂枝茯苓胶囊对子宫内膜炎大鼠的影响

目的：观察桂枝茯苓胶囊对子宫内膜炎大鼠的治疗作用,探讨其作用机制。方法：复制大鼠子宫内膜炎模型,造模15天后,随机分为假手术组,模型组,桂枝茯苓胶囊低、中、高剂量组（0.5、1.0、2.0 g·kg-1）和妇科千金胶囊组（1.2 g·kg-1）。各治疗组灌胃给药28 天,观察大鼠子宫内膜的病理变化,测定大鼠血清单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素10（IL-10）含量,免疫组织化学法检测各组大鼠子宫组织转化生长因子-β1（TGF-β1）蛋白表达。结果：桂枝茯苓胶囊能明显改善子宫内膜炎大鼠子宫内膜病变程度,与假手术组相比,模型组大鼠血清IL-10 含量显著降低,MCP-1、IL-1茁含量明显升高,子宫组织中TGF-β1蛋白表达显著升高。经桂枝茯苓胶囊治疗后,与模型组比较,治疗组大鼠血清IL-10明显增高,MCP-1、IL-1β含量明显降低,子宫组织中TGF-β1蛋白表达显著降低。结论：桂枝茯苓胶囊对子宫内膜炎症具有治疗作用,作用机制可能与调节炎症细胞因子有关。     

活血消异方对子宫内膜异位症盆腔粘连大鼠TGF-β/Smads信号通路相关因子的影响

目的观察活血消异方对子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)盆腔粘连大鼠TGF-β/Smads信号通路相关因子的影响。方法将造模大鼠自体子宫内膜移植于肠系膜上建立EMs盆腔粘连大鼠模型,随机分为模型组(简称C组),术后第1天中药给药组(简称D1组),术后第3天中药给药组(简称D2组),术后第5天中药给药组(简称D3组),术后第1天西药给药组(简称E1组),术后第3天西药给药组(简称E2组),术后第5天西药给药组(简称E3组)。中药组予活血消异方灌胃,西药组予促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)肌肉注射。连续给药28天后,开腹进行盆腔粘连评分,再分别取造模大鼠粘连腹膜组织、空白组(简称A组)和假手术组(简称B组)正常腹膜组织,采用免疫组化、反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)检测腹膜组织中TGF-β1、TGF-β3、Smad3、Smad7蛋白和mRNA表达。结果与B组比较,C组盆腔粘连评分显著升高(P0.05),与C组比较,D1、D2、D3、E1、E2、E3组盆腔粘连评分均显著降低(P0.05);D1、D2组盆腔粘连评分显著低于D3组(P0.05);E1组显著低于E2、E3组(P0.05);C组大鼠TGF-β1、TGFβ3、Smad3、Smad7 mRNA及蛋白表达量显著高于B组(P0.05);D1、D2、D3、E1、E2、E3组TGF-β1、Smad3 mRNA和蛋白表达均显著低于C组(P0.05),TGF-β3mRNA和蛋白表达均高于C组(P0.05),Smad7 mRNA和蛋白表达均与C组相当(P0.05);D1、D2、D3组间TGF-β1、TGF-β3mRNA和蛋白表达量差异有统计学意义(P0.05),E1、E2、E3组间TGF-β3mRNA和蛋白表达量差异有统计学意义(P0.05)。结论 EMs可导致大鼠严重、广泛的盆腔粘连;活血消异方能过调控TGF-β/Smads信号传导通路相关因子的表达,改善EMs盆腔粘连程度,且中药干预越早,改善盆腔粘连程度疗效越显著。     

基于TGF-β1/Smad3信号通路调控的温阳益气方对心梗后结构重塑的干预作用

目的:探讨温阳益气方改善心梗后心力衰竭大鼠肺结构重塑的作用和机制。方法:建立大鼠心力衰竭模型,分成6组,温阳益气方高、中、低(2.0,1.0,0.5 g·kg-1·d-1)剂量组,强的松组(0.1 g·kg-1·d-1),模型组和假手术组(以同等体积的蒸馏水灌胃),连续灌胃8周。灌胃结束后,彩色多普勒超声诊断仪测定左心室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVIDd),左心室收缩末期内径(left ventricular end systolic diameter,LVIDs),短轴缩短分数(fractional shortening,FS)和射血分数(ejection fraction,EF);测定湿肺/体质量和干肺/体质量,肺组织苏木素-伊红(HE)染色切片,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠肺组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1),胶原蛋白(Collagen),α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),p-Smad3蛋白家族(drosophila mothers against decapentaplegic,p-Smad3)蛋白表达量。结果:与模型组比较,温阳益气方高、中剂量组LVIDd,LVIDs明显升高,FS,EF明显降低(P0.05);与假手术组及强的松组比较,温阳益气方低剂量组LVIDd,LVIDs明显降低,FS,EF明显升高(P0.05);与模型组比较,温阳益气方高、中剂量组湿肺/体质量、干肺/体质量明显升高(P0.05);与假手术组及强的松组比较,温阳益气方低剂量湿肺/体质量、干肺/体质量明显降低(P0.05),模型组肺泡严重破化,淋巴细胞浸润明显;假手术组及强的松组未见明显肺泡破化,无淋巴细胞浸润,无胶原蛋白沉淀;温阳益气方高、中剂量组肺泡破化轻,胶原蛋白沉淀也较少;温阳益气方低剂量组淋巴细胞浸润明显,肺泡壁明显增厚;与模型组比较,温阳益气方高、中剂量组α-SMA,Collagen,TGF-β1,p-Smad3明显降低(P0.05),TGF-β1,p-Smad3 mRNA明显降低(P0.05);与假手术组及强的松组比较,温阳益气方低剂量组α-SMA,Collagen,TGF-β1,p-Smad3明显升高(P0.05)。TGF-β1mRNA与TGF-β1,p-Smad3 mRNA,α-SMA,Collagen;p-Smad3 mRNA与p-Smad3,α-SMA,Collagen正相关关系明显(P0.05)。结论:温阳益气方能阻断TGF-β1/Smad3通路信号传导,抑制α-SMA,Collagen,TGF-β1,p-Smad3蛋白的表达,进而抑制成纤维细胞的活化增殖,降低肺部胶原蛋白的沉淀,最终达到抑制肺部组织重塑的作用。     

抗纤灵方对肾纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路表达的影响

目的:研究抗纤灵方对5/6肾切除所致肾纤维化大鼠的治疗效果,并探讨其分子作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组(n=10),假手术组(n=10),5/6肾切除肾纤维化造模组(n=30)。将造模成功的大鼠随机分为模型组、抗纤灵组、氯沙坦钾组。氯沙坦钾组、抗纤灵方组每日分别给予氯沙坦钾(33. 3 g·kg-1)及抗纤灵方(21 g·kg-1)灌胃治疗,其余组都用等体积的生理盐水。持续8周灌胃后处死,检测各组大鼠血肌酐(SCr),尿素氮(BUN),24 h尿蛋白(24 h-Pro);苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理学改变;马松(Masson)染色观察肾脏纤维化程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测肾脏转化生长因子-β_1(TGF-β_1),Smad2,Smad3,Smad7蛋白和mRNA在肾脏组织中的表达。结果:与正常组和假手术组比较,模型组大鼠的SCr,BUN,24 h-Pro上升,纤维化面积和肾脏损伤评分增加,TGF-β_1,Smad2,Smad3 mRNA与蛋白表达升高,Smad7 mRNA与蛋白表达显著下降(P 0. 01)。与模型组相比,氯沙坦钾组、抗纤灵方组可减少纤维化面积,降低肾脏损伤评分,SCr,BUN,24 h-Pro,TGF-β_1,Smad2,Smad3 mRNA与蛋白的表达水平,Smad7mRNA与蛋白表达显著上调(P 0. 01),但低于正常组与假手术组的水平。结论:中药抗纤灵方可通过抑制TGF-β_1/Smad通路来延缓肾纤维化。     

温肾活血化湿方对肾间质纤维化大鼠肾组织TGF-β_1、smad7蛋白表达的影响

目的:观察温肾活血化湿方对单侧输尿管梗阻(UUO)法致肾间质纤维化大鼠肾组织TGF-β1、smad7蛋白表达的影响,初步揭示该方防治肾间质纤维化的作用机制。方法:将雄性SD大鼠(120只)随机分为假手术组、UUO组、氯沙坦组和温肾活血化湿方组,每组30只。采用UUO建立大鼠肾间质纤维化模型(假手术组只分离但不结扎输尿管),于造模后第2天开始灌胃,假手术组、UUO组给予生理盐水,氯沙坦组灌胃氯沙坦(10 mg·kg-1·d-1),温肾活血化湿方组灌温肾活血化湿方(9.8 g·kg-1·d-1)。于造模后第7、14、21天留取梗阻侧肾组织HE、Masson染色,观察肾组织病理变化,免疫组化法检测肾组织TGF-β1、smad7蛋白的表达。结果:造模后第14天温肾活血化湿方较模型组明显降低尿蛋白定量(P0.05),第21天温肾活血化湿方与模型组比较有极显著降低(P0.05)。温肾活血化湿方组与模型组相比较TGF-β1蛋白表达明显降低(P0.05)。温肾活血化湿方组与模型组相比较smad7蛋白表达明显增加(P0.05)。结论:温肾活血化湿方通过抑制TGF-β1,上调smad7蛋白表达,从而延缓肾间质纤维化的进程。     

荔枝核总黄酮对大鼠肝纤维化TGF-β/Smad信号通路的影响

目的:观察荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的肝纤维化大鼠肝脏组织转移生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路中关键信号传导分子TGF-β1,Smad3,Smad7表达水平的变化,探讨TFL抗纤维化的作用机制.方法:SD大鼠ip DMN 4周建立大鼠肝纤维化模型,以ig水飞蓟宾为阳性对照50 mg· kg-1组,用不同剂量的TFL(400,200,100 mg·kg-1·d-1)ig给药,造模当日开始分组给药,每日1次,共给药6周.于实验第6周末处死大鼠,抽取下腔静脉血检测天冬氨酸转氨酶(AST),丙氨酸转氨酶(ALT),留取肝脏同一部位行HE,Masson染色观察大鼠病理改变及肝纤维化程度,采用RT-PCR法检测TGF-β1,Smad3,Smad7 mRNA的表达.结果:与空白对照组比较,模型组大鼠的肝纤维化程度明显增加,血清AST,ALT均显著升高,肝组织TGF-β1,Smad3 mRNA的表达明显增强(P＜0.05),Smad7 mRNA的表达显著减弱(P＜0.05);与模型组比较,TFL各剂量组和水飞蓟宾组血清AST,ALT均明显低于模型组,肝脏TGF-β1,smad3的表达明显降低(P＜0.05),而smad7则有所升高.结论:荔枝核总黄酮可减轻实验性大鼠肝损伤及改善肝纤维化程度,其作用机制可能与抑制TGF-β1,Smad3 mRNA的表达,上调Smad7 mRNA的表达有密切关系.     

Study on the Effect and Mechanism of Bushen Huayu Recipe(补肾化瘀方)on Endometrial Fibrosis in Rats with Uterine Adhesion Based on TGF-β1/Smad Pathway

目的:观察补肾化瘀方对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜纤维化的改善作用,探究其作用机制.方法:采取机械+感染双重损伤法建立IUA大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组、补肾化瘀方组、补肾化瘀方+SRI-011381组、SRI-011381组,每组15只.另取15只大鼠作为假手术组.药物治疗21d后,观察大鼠子宫形态,HE染色观察子宫组织病理变化,计数子宫内膜腺体数量,Masson染色观察纤维化情况,ELISA试剂盒检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的水平,qRT-PCR检测子宫组织转化生长因子-β1(TGF-β1) mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA和Smad7 mRNA表达水平,Western blotting法测定TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7、p-Smad3、p-Smad4、p-Smad7水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠子宫组织增粗,腺体数量减少,纤维化面积增加,血清炎症因子水平升高,TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA表达及Smad3、Smad4磷酸化增加,Smad7 mRNA表达及磷酸化减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,补肾化瘀方组大鼠子宫腺体数量增加,纤维化面积减少,血清炎症因子水平降低,TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA表达及Smad3、Smad4磷酸化减少,Smad7 mRNA表达及磷酸化增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).SRI-011381可抑制补肾化瘀方的作用,促进纤维化,进一步激活TGF-β1/Smad通路(P＜0.05).结论:补肾化瘀方对IUA大鼠子宫内膜纤维化有改善作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smad通路有关.     

糖肾清1号对糖尿病肾病大鼠肾组织AngⅡ 及TGF-β1转录表达的影响

目的:观察中药糖肾清1号对糖尿病肾病肾组织局部AngⅡ及TGFβ1 mRNA转录表达及蛋白表达水平的影响。方法:建立糖尿病肾病大鼠模型,设空白组、模型组、阳性药对照组(卡托普利24 mg.kg-1.d-1)、糖肾清1号甲、乙、丙、丁的高、中、低剂量治疗组(甲组给药糖肾清1号有效成分A,高剂量组94 mg.kg-1.d-1,中剂量组47 mg.kg-1.d-1,低剂量组23.5mg.kg-1.d-1。乙组给药糖肾清1号有效成分B,高剂量组94 mg.kg-1.d-1,中剂量组47 mg.kg-1.d-1,低剂量组23.5 mg.kg-1.d-1。丙组用药为1/2A与1/2B配成,高剂量组94 mg.kg-1.d-1,中剂量组47 mg.kg-1.d-1,低剂量组23.5 mg.kg-1.d-1。丁组为糖肾清1号生药制剂,高剂量组用药为195 mg.kg-1.d-1,中剂量为97.5 mg.kg-1.d-1,低剂量组48.75 mg.kg-1.d-1),每组10只。分别采用RT-PCR,Western blot,ELISA等方法检测大鼠AngⅡ,TGF-β1 mRNA转录及蛋白表达水平,进行组织形态学观测。结果:糖肾清1号呈量效依赖性下调AngⅡ,TGF-β1 mRNA转录和蛋白表达(P<0.01或0.05),减少细胞外基质的沉积(P<0.05)。结论:糖肾清1号可通过调控AngⅡ,TGF-β1 mRNA转录和蛋白表达,抑制肾组织纤维化的发生发展。     

罗氏内异方含药血清对子宫内膜异位症合并不孕患者腹腔液细胞的影响

目的 探讨罗氏内异方对子宫内膜异位症合并不孕患者腹腔液细胞的影响。方法 分离、培养子宫内膜异位症不孕患者腹腔液细胞,采用罗氏内异方与内美通含药血清刺激6 h,荧光定量聚合酶链反应测定血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管内皮生长因子受体1(FLT-1)与血管内皮生长因子受体4(FLT-4)mRNA表达水平的变化。结果 与生理盐水组比较,罗氏内异方高剂量组TNF-α mRNA显著降低(P ＜ 0.01),高、中剂量组VEGF mRNA均显著降低(P ＜ 0.01),高、中、低剂量组FLT-1 mRNA均显著降低(P ＜ 0.05);高、中剂量组FLT-4 mRNA均显著降低(P ＜ 0.01)。结论 罗氏内异方治疗轻型子宫内膜异位症不孕症的机制可能是通过降低患者腹腔液细胞VEGF、TNF-α、FLT-1、FLT-4 mRNA的表达,改善腹腔内环境而实现的。     

基于调控HIF-1α表达探讨温经汤改善大鼠子宫内膜异位症的机制

目的:观察温经汤对子宫内膜异位症(EMs)大鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及线粒体超微结构的影响,探讨温经汤治疗EMs的作用机制。方法:采用自体内膜移植法复制大鼠EMs模型,小动物超声成像系统检测异位病灶体积,依据体积均衡原则随机分为模型组、温经汤低、中、高剂量组(4.85,9.7,19.4 g·kg~(-1))及孕三烯酮组(0.25 mg·kg~(-1)),每组10只,另设假手术组10只。药物治疗6周后,超声成像系统及卡尺分别测量异位病灶体积,苏木素-伊红(HE)染色观察异位内膜组织形态,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测腹腔液白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测在位或异位内膜组织HIF-1αmRNA及蛋白表达,透射电镜观察异位内膜线粒体超微结构。结果:与假手术组比较,模型组可见异位病灶生成,呈囊泡样结构,病灶内可见典型的子宫内膜组织形态,IL-1β,TNF-α,TGF-β1含量显著升高(P0.01),HIF-1αmRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05,P0.01),透射电镜可见异位内膜胞浆中线粒体数量增加,结构完整;与模型组比较,温经汤各剂量组异位病灶体积显著降低(P0.01),且超声检测结果与卡尺测量结果大体一致,HE染色可见异位内膜柱状上皮细胞破损或脱落、间质细胞疏松;温经汤各剂量组TNF-α含量明显降低,温经汤中、高剂量组IL-1β,TGF-β1含量明显降低(P0.05,P0.01);温经汤各剂量组还可明显降低HIF-1αmRNA及蛋白表达(P0.05,P0.01);且温经汤治疗后异位内膜线粒体明显肿胀,嵴断裂甚至消失,部分线粒体空泡变性,外膜破裂。结论:温经汤对大鼠实验性EMs具有较好的治疗作用,机制与降低HIF-1α表达,改善异位病灶乏氧,诱导异位内膜线粒体损伤有关。     

小柴胡汤治疗大鼠内异症的实验研究

目的探讨小柴胡汤对子宫内膜异位症大鼠异位内膜的影响及其作用机制。方法建立内异症大鼠动物模型,利用透射电镜技术及免疫组化的方法,观察XCHT对内异症大鼠异位内膜的影响;分析异位内膜Fas及Caspase-3蛋白的表达。结果内异症大鼠给予5g·kg-1·d-1、10g·kg-1·d-1或15g·kg-1·d-1XCHT,连续给药四周后,观察到异位内膜生长明显受抑制;异位内膜Fas蛋白、Caspase-3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜。结论XCHT抑制内异症大鼠异位内膜的生长,其作用机制可能是通过上调Fas蛋白的表达,促进异位内膜细胞的凋亡而实现的。     

左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠肾脏 TGF-β1/Smad4 mRNA表达的影响

目的:研究左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用及其机制.方法:SD雌性大鼠分为正常组,假手术组,模型组,左归丸高、中、低剂量组,及尼尔雌醇组,采用去卵巢的方法建立绝经后骨质疏松症模型,术后21 d开始给药:正常组,假手术组ig生理盐水;左归丸高、中、低剂量组分别ig6.4,3.2,1.6g·kg-1,1次/d;尼尔雌醇组ig0.021 g·kg-1,1次/周,连续60d.取大鼠左后肢股骨远端1/3做病理切片,光镜下观察骨组织形态学变化,测定骨小梁面积百分比(Tb· Ar);采用双能X射线骨密度仪测定右后肢离体股骨近端1/3及股骨整体的骨密度(BMD);采用RT-PCR法检测大鼠肾髓质的转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad4 mRNA表达.结果:与模型组比较,左归丸高、中剂量组骨小梁面积百分率(Tb· Ar)显著升高(P＜0.05),左归丸高、中剂量组的股骨的骨密度显著升高(P＜0.05);各组肾脏组织病理形态学未见明显病理变化;与正常组相比,模型空白组TGF-β1,Smad4 mRNA水平过高表达(P＜0.05);与模型组相比,各给药组肾组织中TGF-β1,Smad4 mRNA表达均显著下调(P＜0.05),且左归丸各剂量组的下调力度均强于尼尔雌醇组,但以左归丸低剂量组下调最为显著.结论:左归丸能有效防治绝经后骨质疏松症,其作用机制之一可能与其干预肾组织中TGF-β1/Smad4的信号转导通路有关.     

内异止痛方对子宫内膜异位症大鼠相关mRNA E-cadherin、mRNA β-catenin的影响

[目的]采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测子宫内膜异位症(EMs)模型大鼠异位病灶组织中β-catenin、E-cadherin基因转录水平,探讨内异止痛方对EMs模型大鼠β-catenin、E-cadherin的影响。[方法]取SD大鼠57只,采用自体移植法构建EMs模型,于4周后开腹观察模型构建是否成功,并取模型大鼠5只,利用苏木精-伊红(HE)染色法对其进行组织病理学评价。将40只造模成功的EMs大鼠,随机分为4组,即模型组、中药高、低剂量组、阳性药物组,每组10只,另设假手术组8只(仅进行开腹切除手术,不进行自体移植)。中药高、低剂量治疗组分别灌胃985.3 mg/(kg·d)和245.8 mg/(kg·d)内异止痛方,阳性药物组灌胃7.2 mg/(kg·d)达那唑,模型组及假手术组灌胃2 mL/(kg·d)生理盐水,各组每天均给药1次,连续用药4周;采用RT-PCR技术检测EMs模型大鼠异位病灶组织中β-catenin、E-cadherin转录水平。[结果]与模型组比较,内异止痛方能够显著升高EMs模型大鼠E-cadherinmRNA并降低β-catenin mRNA转录水平,且中药高剂量组各基因转录水平明显优于低剂量组(P0.01)。[结论]内异止痛方可通过上调E-cadherin或下调β-catenin基因转录来维持E-cad/β-cat复合体结构和功能的稳定性,而达到加强在位内膜细胞间黏附的作用。     

葛根素联用非洛地平对肾性高血压大鼠肾脏Apelin和APJ mRNA及蛋白表达的影响

目的:探讨葛根素联用非洛地平对肾性高血压大鼠肾脏局部组织中Apelin与APJ mRNA及蛋白的影响.方法:62只SD大鼠随机选取8只为假手术组,剩余大鼠采用两肾一夹(2KIC)制造肾性高血压大鼠模型.将造模成功的2KIC大鼠随机分为5组,分别为非洛地平组(0.8mg·kg-1 ·d-1)、葛根素组(50mg·kg-1 ·d-)、葛根素联用非洛地平组(葛根素25mg· kg-1·d-4+非洛地平0.4 mg·kg-1·d-1)、非洛地平联用卡托普利组(非洛地平0.4 mg·kg-1·d-1+卡托普利15 mg·kg-1·d-1)、模型组(给予蒸馏水),给药8周.用RT-PCR和Western blot分别分析各组肾性高血压大鼠缺血肾与非缺血肾中Apelin和APJ mRNA及蛋白的表达水平.结果:与假手术组相比,模型组缺血肾与非缺血肾中Apelin mRNA和蛋白的表达显著升高(P＜0.01);缺血肾中APJ mRNA及蛋白的表达无显著差异,非缺血肾中APJ mRNA及蛋白的表达下调(P＜0.01).与模型组相比,各给药组均能显著降低缺血肾与非缺血肾中Apelin mRNA及蛋白的表达(P＜0.01);各给药组均能显著上调非缺血肾APJ mRNA及蛋白的表达(P＜0.01).与非洛地平组相比,葛根素联用非洛地平组Apelin mRNA及蛋白在缺血肾与非缺血肾中的表达均显著降低(P＜0.01或P＜0.05),APJ mRNA及蛋白在缺血肾中的表达无显著差异,在非缺血肾中的表达显著升高(P＜0.01或P＜0.05).结论:葛根素能下调缺血肾与非缺血肾中Apelin的表达并上调非缺血肾中APJ的表达;与非洛地平联用后作用增强,且该作用与非洛地平联用卡托普利的作用无明显差异.以上结果提示葛根素可通过Apelin/APJ通路调节血压、保护靶器官,与CCB类药物有协同作用.