丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后TGF-β1表达的影响

目的 探讨丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后TGF-β1表达的影响. 方法 选择健康成年SD大鼠(96只)为研究对象,随机分为正常对照组(8只)、假手术组(8只)、缺血再灌注组(40只)、药物干预组(40只),后两组根据不同再灌注时间点再分为6h、24h、48 h、72 h、7天共5个亚组,每个亚组8只.采用免疫组织化学方法检测大鼠脑组织中转化生长因子β1蛋白含量. 结果 缺血再灌注组、药物干预组各时间点组TGF-β1阳性细胞表达数均明显高于正常对照组和假手术组(P ＜0.05);6 h时,药物干预组TGF-β1阳性细胞表达与缺血再灌注组差异无显著性(P＞0.05),其余各时间点比较,药物干预组TGF-β1阳性细胞表达均明显高于缺血再灌注组(P＜0.05).丹红注射液干预后TGF-β1的表达上升,其中7天组表达明显高于其余各时间点干预组(P＜0.05).结论 丹红注射液能显著提高大鼠脑缺血再灌注损伤后TGF-β1的表达.     

肾缺血再灌注损伤后内源性转化生长因子β1表达的动态研究

[目的]探讨鼠肾缺血再灌注发生中不同时点转化生长因子β1(TGFβ1)在肾小管上皮细胞及肾小球中的表达的动态变化。[方法]将SD大鼠随机分成正常对照组(假手术组)、单纯缺血组、再灌注2 h组、4 h组、12 h组、24h组,制备双侧肾蒂夹闭模型后,腹主动脉取血测血肌酐、尿素氮,行肾脏组织病理学检查,免疫组化(SABC)法检测TGFβ1蛋白,RT-PCR法检测TGFβ1mRNA。[结果]缺血再灌注后肾脏出现病理改变,肾小管上皮细胞刷状缘脱落,管腔扩张,在12 h病理改变最重,可见管型,间质充血,炎性细胞浸润,24 h时病理改变明显减轻。缺血再灌注后肾功能出现损害并随着再灌注时间的延长而逐渐加重,尿素氮(BUN)及肌酐(Cre)在各组分别是单纯缺血组(225.62±3.05)及(89.36±3.97)、再灌注2 h组(280.58±4.89)及(110.25±6.46)、4 h组(358.36±5.35)及(120.32±6.42)、12 h组(456.56±23.6)及(148.58±2.98),24 h组(540.24±3.08)及(170.26±4.63)损害最重。正常肾脏组织中有少量TGFβ1mRNA及蛋白的表达,主要在肾小管上皮细胞中,肾小球中极少量。与正常对照组TGFβ1mRNA(0.2077±0.0114)及蛋白(0.01166±0.00104)相比,单纯缺血45 m in组(0.2934±0.0411)及(0.02154±0.00135)、再灌注2 h组(0.4550±0.0351)及(0.03039±0.00357)、再灌注4 h组(0.5049±0.0168)及(0.03621±0.00447)和再灌注12 h组(0.6462±0.0249)及(0.07223±0.01290)的肾组织中表达增加,差异有显著性意义(P<0.05);再灌注24 h组(0.2083±0.0098)及(0.01624±0.00119)表达基本恢复,与正常对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。[结论]TGFβ1mRNA及蛋白的表达参与了大鼠肾缺血-再灌注损伤的发生过程。     

实验性大鼠腮腺细胞缺血再灌注TGF-β_1的表达

目的 :探讨TGF - β1(Transforminggrowthfacto -r - β1—转化生长因子 - β1)在实验性大鼠腮腺导管细胞、腺泡细胞的表达区别与形态学改变的关系。材料和方法 :采用颈总动脉结扎法建立腮腺缺血再灌注模型 ,用光镜、免疫组化的方法 ,观察腮腺导管细胞、腺泡细胞形态学及TGF - β1的表达变化。结果 :实验组在缺血再灌注早期 ,开始出现形态学改变 ,中期明显 ,后期渐修复。在缺血和再灌注时间均相同时 ,TGF - β1在导管细胞较腺泡细胞表达高 ,前者增殖抑制明显。结论 :①实验性腮腺缺血再灌注大鼠腮腺导管细胞有形态学改变。②TGF - β1在导管细胞表达比腺泡细胞高 ,导管细胞可能比腺泡细胞更容易发生增殖抑制     

转化生长因子β_1对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的影响及其作用机制

目的　探讨转化生长因子 β1(TGF - β1)对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法　用线栓法建立局灶脑缺血再灌注模型 ,立体定向下侧脑室内注入TGF - β1,观察不同剂量TGF - β1对局灶脑缺血再灌注损伤及对细胞凋亡、肿瘤坏死因子 (TNF -α)表达的影响。结果　TGF - β1小剂量、高剂量治疗组TNF -α表达及细胞凋亡较对照组均明显降低 ,神经功能缺陷评分明显下降 ,小剂量与高剂量组比较无明显差异。结论　TGF - β1对脑缺血再灌注损伤具有保护作用 ,且与剂量无明显关系 ;其机制可能为抑制TNF -α表达及细胞凋亡。     

实验性大鼠腮腺细胞缺血再灌注TGF—β1的表达

目的：探讨TGF—β1(Transforming growth facto-r-β1-转化生长因子—β1)在实验性大鼠腮腺导管细胞、腺泡细胞的表达区别与形态学改变的关系。材料和方法：采用颈总动脉结扎法建立腮腺缺血再灌注模型，用光镜、免疫组化的方法，观察腮腺导管细胞、腺泡细胞形态学及TGF—β1的表达变化。结果：实验组在缺血再灌注早期，开始出现形态学改变，中期明显，后期渐修复。在缺血和再灌注时间均相同时，TGF—β1在导管细胞较腺泡细胞表达高，前者增殖抑制明显。结论：①实验性腮腺缺血再灌注大鼠腮腺导管细胞有形态学改变。②TGF—β1在导管细胞表达比腺泡细胞高，导管细胞可能比腺泡细胞更客易发生增殖抑制。     

大鼠心肌急性缺血再灌注Fos蛋白表达及其意义

目的：探讨急性心肌缺血再灌注早期不同时间心肌细胞内Ｆｏｓ蛋白表达的变化，为心肌早期缺血再灌注损伤致死死后诊断提供新方法。方法；在３２只ＳＤ大鼠建立心肌早期缺血再灌注损伤模型，另外４０只大鼠分业怀缺血对照组，用免疫组化ＳＡＢＣ法结合图象分析研究心肌细胞核Ｆｏｓ蛋白的累积情况。结果：缺血３０ｍｉｎ再灌注３０ｍｉｎ后，再灌注区有部分心肌细胞核呈弱阳性着色，以后随缺血时间延长核阳性增强。     

再灌注对心肌β—受体的影响

心肌β-受体是否参与再灌注心律失常(RA)的发生,迄今尚无一致的结论[1]。再灌注是否会引起心肌β-受体的改变,现尚乏在体实验报道。本实验通过结扎与再松弛猫左冠状动脉前降支(LAD)这一在体再灌注实验运动模型以探讨再灌注对心肌β-受体的影响。材料与方法　　实验动物选用健康     

转化生长因子-β1对大鼠肠黏膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肠黏膜缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用.方法:30只SD大鼠随机分成3组(n=10):假手术组(A组)、I/R组(B组)和实验组(C组).C组夹闭肠系膜上动脉(SMA)60 min,再灌注120 min,缺血前10 min经SMA注入TGF-β1溶液0.5 mL;B组以生理盐水代替TGF-β1,余同C组;A组单纯分离肠SMA,不做阻断,余同B组.采用HE染色及Chiu评分法判断小肠黏膜形态学损伤程度,检测门静脉血浆中D-乳酸水平.结果:B组肠黏膜损伤较A组严重,C组肠黏膜损伤较B组明显改善.3组间比较,Chiu评分和门静脉血D-乳酸水平差异均有统计学意义(F=20.490、33.084,P均<0.001);门静脉血浆D-乳酸水平与肠黏膜损伤病理评分呈正相关关系(r=0.881,P<0.001).结论:TGF-β1可以减轻小肠L/R损伤,血D-乳酸水平可以间接反映肠黏膜屏障的通透性,进而评价肠黏膜屏障的损伤程度.     

PEP-1-SOD1对离体缺血再灌注损伤大鼠心肌Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究细胞穿透肽PEP-1介导人铜锌-超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD,SOD1)对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤(MIRI)细胞凋亡的影响。方法:采用Langendorff灌流系统对离体大鼠心脏进行停灌-复灌建立心肌缺血再灌注损伤模型。大鼠随机分为对照组、SOD1蛋白预处理组,25、50、100μmol/L PEP-1-SOD1蛋白预处理组。复灌结束后,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫荧光法检测心肌组织Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:与对照组及SOD1组相比,各PEP-1-SOD1组心肌细胞凋亡指数(AI)显著下降,Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论:PEP-1-SOD1融合蛋白可抑制离体心脏缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与上调Bax表达及下调Bcl-2表达有关。     

头针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠TGF-β_1的影响

目的探讨头针治疗脑缺血可能的作用机制。方法将70只健康SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和头针组,后两组再根据缺血再灌注时间的不同(24h、48h、72h),各随机分为3个亚组。采用人脑中动脉线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型,选取顶颞后斜线,顶颞前斜线,进针后接韩氏穴位神经刺激仪,疏密波,频率2Hz/100Hz,强度2mA,每次30min,每天1次。应用神经功能缺损评分(NSS)、聚合酶链反应(PCR)及酶联免疫吸附反应(ELISA)检测急性脑缺血再灌注各时间点大鼠神经功能缺损评分、缺血脑组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA及TGF-β1含量。结果头针组和模型组各时相NSS比较,差异均有统计学意义,以脑缺血再灌注72h较明显(P0.05,P0.01)。头针组各时相脑组织TGF-β1mRNA及TGF-β1与模型组比较,均有显著性升高(P0.05,P0.01)。结论头针有利于大鼠脑神经功能的恢复,可减轻由急性脑缺血再灌注后神经元的损害,并在一定范围内增强TGF-β1的表达,从而减缓免疫炎症反应,减轻脑缺血再灌注损伤。     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注时TGF-β1表达的影响

目的：观察异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注时TGF-β₁表达的影响,并探讨其脑保护的 机制。 方法：采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。45只雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注组(I/R)和缺血再灌注-异丙酚治疗组,大鼠经历2 h脑缺血,然后实行再灌注。分别于再灌注后3、6、24、72 h断头取脑,用免疫组化法检测脑组织TGF-β₁的表达;再灌注后24 h做神经功能缺陷评估及HE染色观察缺血皮层组织形态学变化。 结果：局灶性脑缺血再灌注后TGF-β₁明显表达, 24 h后达高峰(P<0.01), 72 h后降至正常。大鼠神经功能缺陷评分明显升高,组织形态学观察可见皮层水肿、淤血,神经细胞明显变性坏死;应用异丙酚能显著地促进TGF-β₁的表达,与脑缺血再灌注组比较,异丙酚治疗组TGF-β₁释放增多、高峰提前、延缓下降（P<0.05）,同时显著降低大鼠神经功能缺陷评分和减轻缺血皮层组织形态学损伤（P<0.05）。 结论：异丙酚的脑保护作用可能与促进TGF-β₁的表达有关。     

前列腺素E1对缺血再灌注大鼠心肌NO及NOS活性的影响

目的：通过观察前列腺素E1（PGE1）对缺血再灌注大鼠心肌一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）活性的影响,探讨PGE1保护心肌的机制。方法：18只SD大鼠随机分成3组,正常组、缺血再灌注组织和PGE1组,以结扎大鼠冠脉左室支30min后再灌注生理盐水60min作为缺血再灌注组,灌注PGE1 12．5μg/kg为实验组,用RT－PCR方法检测心尖心肌组织eNOSmRNA和iNOSmRNA的变化,通过凝胶图象分析系统对RT－PCR产物电泳条带进行密度分析,硝酸还原酶法测定血浆NO浓度。结果：缺血再灌注注后iNOS升高,eNOS,NO下降,而PGE1组与缺血再灌注组比较,eNOS明显升高,iNOS变化无显著差异,NO上升。结论PGE1通过提高eNOS活性水平而达到对缺血再灌注心肌的保护作用。     

芬太尼对大鼠全心缺血再灌注心功能的影响

目的 观察芬太尼对离体大鼠全心缺血再灌注心功能的影响。方法 ３０只ＳＤ大鼠分为３组，麻醉后开胸取心，经主动脉插管行Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ恒压灌注。平衡１５ｍｉｎ后，对照组灌注Ｋ－Ｈ液，两芬太尼组灌注含芬太尼１０或３０μｇ／Ｌ的Ｋ－Ｈ液１０ｍｉｎ，全心缺血２５ｍｉｎ，复灌３０ｍｉｎ，实验过程中测左室发展压（ＬＶＤＰ），左室舒张末期压（ＬＶＥＤＰ），左室收缩及舒张速率（＋ｄＰ／ｄｔ，－ｄＰ／ｄｔ）及冠     

转化生长因子β1对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的影响及其作用机制

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法用线栓法建立局灶脑缺血再灌注模型，立体定向下侧脑室内注入。TGF—β1，观察不同剂量TGF—βl对局灶脑缺血再灌注损伤及对细胞凋亡、肿瘤坏死因子(TNF—α)表达的影响。结果TGF—β1小剂量、高剂量治疗组TNF—a表达及细胞凋亡较对照组均明显降低，神经功能缺陷评分明显下降，小剂量与高剂量组比较无明显差异。结论TGF—β1对脑缺血再灌注损伤具有保护作用，且与剂量无明显关系；其机制可能为抑制TNF-α表达及细胞凋亡。     

缺血再灌注大鼠心肌Fos蛋白表达及川芎嗪的作用

目的：研究大鼠心肌缺血再灌注（ＭＩＲ）时Ｆｏｓ蛋白表达与其病理组织学改变,并观察川芎嗪（ＴＭＰ）对ＭＩＲ时Ｆｏｓ蛋白表达的作用。方法：采用大鼠ＭＩＲ模型,用免疫组化ＡＢＣ法检测ＭＩＲ过程中不同时期Ｆｏｓ蛋白表达并与病得组织学改变进行对照分析．结果：（１）非缺血心肌无Ｆｏｓ蛋白表达,ＭＩＲ６０ｍｉｎ可诱导Ｆｏｓ蛋白表达,９０ｍｉｎ时达高峰,主要分布在心外膜侧。（２）与ＭＩＲ大鼠相比,ＴＭＰ干预缺血心     

缺血/再灌注大鼠心肌PPAR-γ表达变化对再灌注心律失常的影响

目的 探讨不同预处理的心肌缺血/再灌注(I/R)动物模型中PPAR-γ表达对再灌注心律失常的影响.方法 32只SD大鼠分为4组(n=8):罗格列酮+I/R组(ROS组),GW9662+I/R组(GW组),I/R组(I/R组),假手术组(Sham组).采用冠状动脉左前降支结扎法制造缺血/再灌注动物模型,缺血30 min,再灌注2h.动态肢体Ⅱ导联心电图检测,荧光定量PCR检测PPAR-γ mRNA和Western blot检测PPAR-γ蛋白质的表达变化.结果 分别在术前、缺血30 min、再灌注1h、再灌注2h4个时间点检测心电图QRS波宽度增加幅度由大到小依次是ROS组、I/R组、GW组、Sham组;ROS组较其他组大鼠再灌注心律失常评分明显较高(P＜0.05),GW组则相对减少.荧光定量PCR检测ROS组PPAR-γ mRNA表达水平明显上调(P＜0.05),GW较I/R组和ROS组表达下调(P＜0.05).PPAR-γ蛋白质表达结果与PPAR-γ mRNA相似.结论 心肌PPAR-γ表达上调可能增加心肌I/R动物模型再灌注心律失常的发生.     

1型糖尿病大鼠心肌对缺血再灌注损伤的耐受性及其机制

目的 研究1型糖尿病大鼠心肌对缺血再灌注损伤的耐受性及其可能机制。方法 健康雄性SD大鼠以链脲佐菌素腹腔注射制作1型糖尿病模型，血糖升高3～4周后取心脏在体外进行灌注，并进行缺血再灌注实验。依据心肌磷酸肌酸激酶(CPK)释放量、心脏收缩及舒张功能、再灌注心律失常判定心脏缺血再灌注损害程度。测定冠状动脉流出液中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)及糖酵解产物乳酸盐含量。结果 与正常大鼠相比，糖尿病大鼠基础心脏收缩功能显著减弱，但缺血再灌注后心脏收缩及舒张功能恢复较对照组显著增强，心肌CPK释放量减少，心律失常严重程度减轻。糖尿病大鼠心脏冠状动脉流出液中的MDA含量显著升高，乳酸盐含量显著减少，提示糖尿病心肌脂质过氧化反应增强，糖酵解受抑制。结论 1型糖尿病大鼠心肌对缺血再灌注损伤的耐受性显著增强，心肌糖酵解抑制使酸性代谢产物减少可能是其机制之一。