韶关市1190例手足口病病原体检测结果分析

目的分析韶关地区手足口病病原体分布情况。方法收集2011年1月～12月的1190例手足口病患者的咽拭子,采用实时荧光PCR方法检测肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)。结果在1190份标本中病毒核酸阳性率为11.51%(137/1190),其中EV71占60.58%(83/137),CoxA16占39.42%(54/137);6月份高发,占29.08%(346/1190);男女比例为1.64:1,且0～4岁的患儿占93.11%。结论韶关地区2011年手足口病病原体以EV71为主,6月份高发,主要分布在0～4岁,男性多于女性,实时荧光PCR可用于手足口病病原体的检测,对手足口病的诊疗和防控具有重要意义。     

2008年广西手足口病病原体检测分析

目的了解2008年引起广西手足口病的病原体型别及分布特征,为制定预防控制措施提供实验依据。方法采集手足口病临床诊断病例的疱疹液、咽拭子、肛拭子、粪便等样本,应用RT-PCR方法检测EV、EV71和CoxA16病毒核酸。结果共检测753例手足口病临床诊断病例1 286份样本,422例(56.0%)检测到肠道病毒核酸,其中EV71阳性176例(41.7%),CoxA16阳性36例(8.5%),非EV71、CoxA16肠道病毒阳性210例(49.7%)。全区14个市送检的病例标本均检测到EV71,来宾市等5市EV71检出率大于50%,钦州市和百色市EV71检出率小于20%。25例(89.2%)重症死亡病例中检测到EV71病毒核酸。结论手足口病在广西分布广,病原体组成复杂,引起广西2008年手足口病的主要病原体为EV71。应加强HFMD病原图谱监测,为手足口病防控提供实验依据。     

贵阳地区2010年手足口病病原体检测分析

目的:对贵阳市2010年手足口病流行期间的手足口病患儿进行病原学及流行特征分析。方法:采用Real-TimePCR法检测307例手足口病患儿标本样本中的肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)、肠道病毒科萨奇A16型(CoxA16)3种核酸,将扩增产物测序获得的序列与GenBank中肠道病毒核苷酸序列进行比对,确定毒株血清型别。结果:肠道病毒通用型(EV)阳性率为68.27%,CA16阳性率为6.73%,EV71阳性率为13.46%。重症患者EV71的检出率为18.60%,CoxA16的检出率为4.65%,其他肠道病毒为57.55%,4株其它肠道病毒经鉴定属于CA10型。结论:手足口病病原复杂,2010年贵阳地区HFMD的主要病原为其他肠道病毒和EV71,存在一定比例的其他未知病原体(CoxA10)。     

2008年龙岩市手足口病实验室检测结果分析

目的了解龙岩市2008年手足口病病原特点。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及组织细胞分离法,对614例手足口病患者的咽拭样本454份、粪便样本377份、疱疹液样本62份共893份进行CA16和EV71的检测。结果 614例中158例检出CA16或EV71,其中CA16 37例、EV71 121例,4例检出其他肠道病毒。病原监测发现2008年4月以前流行的是CA16,5月份CA16和EV71同时存在,6月份以后7个县(市、区)监测的病例均为EV71,全市7个县(市、区)均监测到EV71。结论本检测表明RT-PCR用于手足口病CA16和EV71的检测,可以快速、准确地扩增咽拭、粪便、疱疹液及病毒培养物中的病毒,鉴定病毒亚型,结果可靠,是一种快速、敏感、特异的检测方法。2008年引起龙岩市幼儿手足口病的病原,5月份以前流行病原为CA16,5月份后为EV71。     

海南省2008年手足口病样本核酸检测分析

目的 了解2008年海南省手足口病(HFMD)暴发的病原及主要的病毒型别,为HFMD病例诊断和防控措施提供科学依据。方法 依据卫生部《手足口病预防控制指南》提取HFMD临床诊断病例各种样本中的病毒核酸,用肠道病毒通用引物、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)特异性引物进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),检测基因片段大小。结果 274例临床诊断手足口病病例中EV71型核酸阳性、柯萨奇病毒A16核酸阳性、其他型别肠道病毒核酸阳性分别有102,12,35例;样本中疱疹液阳性检出率最高,为72.0%,肛拭子为40.0%,鼻咽拭子为34.8%,其余样本均阴性;54份直接提取病毒核酸进行RT-PCR检测,结果阴性但细胞培养出现细胞病理改变(CPE)的分离物;肠道病毒、EV71型、CoxA16型阳性分别有48,29,4份,阳性率分别为88.89%,53.70%,7.40%;其中1份样本EV71型和CoxAl6型均为阳性。结论 引起海南省2008年手足口病暴发流行的主要病原是肠道病毒71型,其次为CoxAl6型。     

逆转录-环介导等温扩增技术结合横向流动试纸条法快速检测肠道病毒

目的建立一种快速特异敏感的肠道病毒检测方法。方法针对肠道病毒保守区基因序列,设计6条逆转录-环介导等温扩增技术(RT-LAMP)特异性引物,经过优化,用毛细管电泳及横向流动试纸条(LFD)检测扩增产物,建立RT-LAMPLFD检测方法,并与荧光定量PCR法进行比较。结果 LFD与毛细管电泳法检测特异的RT-LAMP扩增产物具有同样的敏感度,RT-LAMP-LFD法检测肠道病毒与其他病毒无交叉反应,最低检出限为10拷贝RNA分子,与荧光定量PCR法检测结果一致性为99.2%。结论建立的RT-LAMP-LFD方法,具有较高的特异性及灵敏度,操作简单、快速且不需要昂贵的仪器设备,适合应用于基层实验室肠道病毒的快速检测。     

北京市儿童手足口病与肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型感染有关

目的了解2007年5-6月北京市儿童中流行的手足口病的病原。方法于2007年5、6月间采集来首都儿科研究所附属儿童医院门诊就诊的手足口病患儿咽拭子标本6份和1份病情危重的手足口病并发神经系统症状而急诊收住院患儿（编号F4243，年龄9岁8个月，女性）的经气管插管呼吸道抽吸液、脑脊液及血清标本。将咽拭子和气管插管抽吸液标本接种Hep-2、MDCK和Vero细胞进行病毒分离。同时设计位于肠道病毒5^＋非编码区（UTR）的通用引物2对（巢式PCR）、肠道病毒71型（EV71）VPl基因不同位置的特异性引物2对半（PCR和半巢式PCR）和柯萨奇病毒A组16型（CAl6）的特异性引物1对检测标本中的病毒核酸。首先用随机引物将标本中的RNA逆转录成cDNA，然后分别用上述引物进行PCR扩增肠道病毒5^＋UTR和EV71／CAl6的VPl基因片段；对EV71阳性的标本还扩增了VPl全基因，扩增产物直接进行序列测定和分析。结果6例门诊就诊的普通手足口病患儿和F4243的呼吸道标本中均扩增到肠道病毒5^＋UTR基因片段，有2例门诊患儿和F4243的标本中还扩增到EV71的VPl基因片段，提示该组手足口病患儿均为肠道病毒感染，其中3例为EV71感染。序列测定和分析表明有1例普通手足口病患儿（F4211）和F4243标本确定为EV71。所有标本接种Hep-2和MDCK细胞均未出现病变，说明常见的呼吸道病毒为阴性。除1份咽拭子标本（F4283）外，其余6份接种Vero细胞的标本均出现细胞病变。用肠道病毒通用引物和EV71特异性引物对分离到的病毒株核酸的扩增结果显示这6株病毒均为肠道病毒，其中F4211和F4243为EV71，与直接从呼吸道标本中扩增的结果相符；其余4株为CAl6。结论北京市儿童中流行的手足口病与肠道病毒EV71和CAl6感染有关；EV71可以在5岁以上儿童中引起严重的神经系统并发症，应引起注意。     

2011年平顶山市手足口病实验室检测结果分析

目的：对平顶山市2011年手足口病实验室检查结果进行分析,了解2011年平顶山市手足口病病原学特征,为实验室诊断手足口病提供参考。方法采集2011年平顶山市各地送检的499例手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液和脑脊液等标本507份,应用RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒、肠道病毒71型（ EV71）、柯萨奇病毒A组16型（ CA16）。结果499例手足口病患者的507份各类样本中,检测到肠道病毒（PE）阳性84份,EV71病毒特异性基因片段阳性167份, CA16特异性基因片段阳性125份。499例手足口病病例中,阳性376例,阳性率75.35%;其中EV71阳性167例,占阳性人数44.41%,CA16阳性共125例,占阳性人数33.24%, EV71的检出率较CA16高。已检验499例中,重症患者133例,阳性109例,阳性率81.95%;其中EV71共91例,占阳性人数83.49%,CA16共9例,占阳性人数8.26%。结论 EV71是2011年平顶山市手足口病的优势病原体;同时EV71是引起手足口病重症病例的主要毒株类型。     

环介导等温扩增技术应用于口岸病原体快速检测的现状及展望

环介导等温扩增技术由于不需要专业仪器,操作简便,价格便宜,被广泛应用于口岸多种病原体的快速检测.此文总结了环介导等温扩增技术在检测结核分枝杆菌、寨卡病毒、登革热病毒、疟原虫及肝炎病毒等方面的最新研究成果,并对其在口岸快速检测方面的应用前景进行综合分析.     

2011年济南市手足口病病原学检测结果分析

[目的]了解济南市手足口病病原学特征,为制定防治措施提供科学依据。[方法]对2011年济南市831例临床诊断手足口病病例标本,采用实时荧光RT-PCR法检测人肠道病毒(PE)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)特异性核酸。[结果]831例手足口病患者标本中,肠道病毒总阳性率为76.05%,其中EV71、CoxA16和其他肠道病毒核酸阳性率分别为40.19%、18.29%和17.57%。肠道病毒阳性率,粪便标本为75.34%,咽拭子为93.75%(P<0.05);3岁最高(83.41%),≥10岁最低(54.55%);男性为77.10%,女性为74.38%(P>0.05);托幼儿童为83.00%,散居儿童为70.60%,学生为52.38%,其他为50.00%;平阴县最高(93.22%),商河县最低(46.88%)。粪便标本阳性率,病后24h内采集的为86.67%,1～3d采集的为83.11%,4～7d采集的为77.52%,8～14d采集的为62.50%,15～21d采集的为51.02%,22～37d采集的为35.71%(P<0.01)。[结论]EV71是济南市2011年手足口病的主要病原体,及时采集标本可以提高阳性检出率。     

宁波市2010年-2011年重症手足口病病原学及流行特征分析

目的:了解宁波市手足口病重症病例的病原学类型,为本地区手足口病的综合防制提供参考资料。方法:收集2010年-2011年医院临床诊断为手足口病重症病例的粪便标本,应用RT-PCR技术检测肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)。结果:171例手足口病重症病例中,EV71型病毒占81.28%,CoxA16型病毒占1.75%,其他肠道病毒占16.96%;5月-7月为高发月份,1岁组重症病例最多,重症病例人群男性高于女性(1.76∶1)。结论:EV71型是宁波地区手足口病重症病例的主要致病病毒类型,其流行具有明显的年龄、季节界限。     

一起引发手足口病流行的肠道病毒71型的分子特征

上海市某幼儿园 2 0 0 0年 10～ 11月发生手足口病 (HFMD)流行 ,从患儿粪便标本中分离到 13株肠道病毒 71型 (EV71) ,血清学实验证明 ,所分离的病毒为此次HFMD流行的病因。对其中的 4株病毒 (SHANGHAI EV71 H2 5、SHANGHAI EV71 H2 6、SHANGHAI EV71 F1和SHANGHAI EV71 F2 )进行了VP1区全基因核苷酸序列测定 ,并做了比较分析。 4株EV71VP1区全基因均为 891个核苷酸 ,编码 2 97个氨基酸 ,与检索到的广东省深圳市和台湾省HFMD病人EV71分离株同源性较高 (>94 % ) ,与脑炎EV71分离株 (BrCr株 )同源性低 (<83% )。种系发生树分析亦表明 ,上海市的 4株EV71与深圳株 (AF30 2 996 EV71 SHZH98)和台湾株 (AF2 86 5 31 FV71 TW 98)亲缘关系较近 ,与BrCr株亲缘关系较远。因此上海市HFMD 4株EV71分离株为本地流行株。     

肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型实验室检测研究进展

肠道病毒71型（Enterovirus,EV71）和柯萨奇病毒A组16型（Coxsackievirus,CoxA 16）是引起手足口病的主要病原体,因此,快速准确地检测这2种病原体对于手足口病治疗和控制有着至关重要的作用。该文介绍了这2种病原体实验室检测技术的研究进展,主要包括病毒分离培养、血清学检测、分子生物学方法包括RT—PCR法、实时荧光RT—PCR法等。     

中国2008--2009年手足口病报告病例流行病学特征分析

目的 了解2008-2009年中国手足口病流行时间、区域和人群分布以及病原构成.方法 利用2008-2009年疾病监测信息系统报告的手足口病例对其流行病学特征进行分析.结果 (1)2008和2009年全国报告手足口病例分别为488955例和1155525例,发病率为37.01/10万和87.01/10万,重症病例数为1165例和13810例,死亡126例和353例.(2)高、中、低纬度地区报告发病率分别为50.09/10万、68.47/10万和59.04/10万.(3)2009年中、低纬度地区12～24周为发病高峰期;高纬度地区23～35周为流行高峰期;第二个流行峰仅波及低、中纬度地区,高纬度地区不明显.(4)病例主要集中在5岁及以下儿童,占发病总数的92.23%,2岁组儿童发病率最高,重症和死亡病例集中在低年龄组儿童的特点更为明显,0岁组儿童发生重症的比例和病死率最高,随着年龄增加各年龄组重症比例及病死率依次降低.(5)不同类型病例病原构成存在差异.相对于普通病例,重症和死亡病例肠道病毒71型(EV71)检测阳性的危险度分别为1.82和2.11,且病原构成存在季节变化.(6)2008-2009年共发生聚集性病例疫情477起,幼托机构发生疫情为389起,占总起数的81.21%,村庄发生疫情47起,占总起数的9.81%;聚集性病例疫情发生时间主要集中在4-7月.结论 2009年中国手足口病流行强度增强.不同纬度地区流行强度不同,季节分布存在差异,5岁及以下儿童是发病主要人群,年龄越小发生重症和死亡的风险越高,EV71和柯萨奇病毒A16型为主要病原,聚集性病例高发场所为托幼机构和村庄.

Abstract：

Objective To clarify the seasonal and geographical difference and pathogen patterns so as to provide reference of prevention and control of the disease through analyzing the epidemical characteristics of reported hand-foot-mouth disease(HFMD)cases in China,2008-2009.Methods We analysed the epidemiological data of HFMD from the Chinese national notifiable infectious diseases reporting system in 2008 and 2009.Results There were 488 955 and 1155525 reported HFMD cases in 2008 and 2009,in China,of which 1165 and 13810 were severe and 126 and 353 were fatal,respectively.The notification rates were 50.09/10 million,68.47/10 million and 59.04/10 million in high,medium and low latitudes areas,respectively.The epidemic periods in Medium and Low latitude were from 12 to 24 weeks in 2009,and in high latitude it was from 23 to 35 weeks.HFMD cases were concentrated mainly in 5 year-old or even younger children,accounted for 92.23% of the total cases.The incidence rate of two years old appeared to be the highest.The features of severe and death case concentrated in lower age groups were more evident,and the proportion of severe case and case fatality rate under 1 vears old was higher than that in other age groups.We also noticed that with the increasing of age,the proportion of severe case and case fatality rate had a decreasing trend.There was a difference between the pathogens seen.The relative risk(RR)for an human enterovirus 71(HEV71)isolate was higher among severe case than in common cases(RR=1.82),whereas the RR for an EV71 isolate was higher among the death cases than in common cases (RR=2.11).There was seasonal variation of pathogen composition.There were 477 clusters of cases from 2008 to 2009,of which 389 found in preschools,47 in rural villages,outbreaks of clusters were mainly from April to July. Conclusion The HFMD epidemics was increasing in 2009.The epidemic of HFMD in different latitudes area and seasons was different.Children of five year old or under were the major population groups at risk,of HFMD.The younger ones had higher risk of becoming severe and death cases.HEV71 and coxsackievirus A16 were both the major etiologic agents of HFMD.The preschool and rural villages were the main senings of clusters of cases.     

南京市2011年手足口病流行病学及病原学特征分析

目的：分析南京市2011年手足口病的流行病学及病原学特征。方法：利用国家疾病监测信息系统结合实验室确诊阳性样本信息对2011年南京市手足口病相关资料进行描述性流行病学分析。结果：2011年全市共报告手足口病15694例,其中重症877例,死亡3例。年均报告发病率为193.54/10万,发病高峰集中在4～7月;主城区发病高于城郊区县;发患者群以5岁以下的幼托及散居儿童为主,男性发病高于女性。全市共报告实验室检测病例1757例,普通病例以EV71和CoxA16共同主导流行,重症病例和死亡病例以EV71为流行优势株。结论：南京市2011年手足口病流行存在明显的季节、人群和地区差异,5岁以下幼托和散居儿童是手足口病防控的重点人群。主要致病病原为EV71和CoxA16,深入开展手足口病流行病学和病原学研究,将有助于更好的防控和治疗手足口病。     

2008年-2010年湖州市手足口病病原监测分析

目的:了解湖州市手足口病的感染情况,为制定预防和控制措施提供科学依据。方法:采用荧光定量RT-PCR方法,对2008年-2010年湖州市765份疑似手足口病感染者的疱疹液、咽拭子及粪便标本进行肠道病毒、肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的核酸检测。结果:肠道病毒通用核酸阳性510例,阳性率为66.67%(510/765)。其中EV71阳性228例,阳性率为29.80%(228/765);Cox A16阳性134例,阳性率为17.52%(134/765);其他EV病毒阳性148例,阳性率为19.35%(148/765)。男女阳性率分别为67.46%(313/464)和65.44%(197/301)。5岁以下年龄组儿童阳性率为67.64%,是感染的主要人群。结论:EV71是引起湖州市儿童手足口病的主要病原,不同性别间EV、EV71及Cox A16的发病率无显著性差异。定期开展手足口病病原学监测,将有助于提出更好的预防和控制措施。     

河南省2014年手足口病重症病例病原学分析

目的 分析2014年河南省手足口病(HFMD)重症病例病原学特征。方法 整群抽取郑州市某儿童医院2014年4-6月244例HFMD住院病例作为研究对象,采集粪便标本,病原学检测采用荧光定量RT-PCR、病毒分离、VP1测序比对等方法。病原学特征统计分析采用SPSS 17.0软件。结果 244例手足口病病例中,重症组109例,轻症组135例,肠道病毒(EV)通用引物RT-PCR阳性229例,阳性率为93.85%。肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)和Cox A10的感染构成比分别为83.84%、5.68%和8.30%。EV71感染致8例心肺功能衰竭,2例死亡;Cox A10感染致1例心肺功能衰竭、死亡。重症组与轻症组之间肠道病毒感染率差异有统计学意义(χ²=5.312,P=0.021)。采用Fisher精确概率法对重症组和轻症组EV71、Cox A16和其他EV感染构成比进行统计学比较,P=0.048。EV71和Cox A10感染致心肺功能衰竭发生率和致死率的差异无统计学意义(分别为χ²=0.051,P=0.821和χ²=2.198,P=0.138)。2014年河南省Cox A10分离株属于基因6型,VP1区段核苷酸和氨基酸同源性分别为94.3%~99.7%和96.3%~100.0%。结论 EV71仍然是河南省HFMD的主要病原。Cox A10在感染病原谱中所占比加大,且感染后可致心肺功能衰竭,应加强对其他EV的监测。     

2010年池州地区手足口病病原学分析

目的分析池州地区手足口病的流行病学和病原学特征,为手足口病防控提供科学依据。方法采集2010-03/2010-12池州市各地送检的133例手足口病临床诊断患者的咽拭子,应用RT-PCR技术检测样本中肠道病毒(EV)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)。结果 133例手足口病临床诊断病例咽拭子中,检测到肠道病毒阳性79份,EV71阳性28份,CoxA16阳性24份,EV71和CoxA16的阳性率为21.05%和18.05%。6例手足口病重症病例中,EV71病毒感染病例4例。结论 EV71和CoxA16是2010年池州地区手足口病的主要病原体,而EV71是引起手足口病重症病例的主要类型。