钙离子在胃肠平滑肌收缩机制中的作用

钙离子(Ca~(2+))在胃肠平滑肌收缩机制中起重要作用。平滑肌细胞电-机械耦联主要涉及细胞膜电位改变,胞外Ca~(2+)内流,药物-机械耦联主要涉及胞内贮存Ca~(2+)的释放。Ca~(2+)可启动平滑肌细胞收缩蛋白之间的相互作用,收缩张力的产生不仅与[Ca~(2+)]i密切相关,而且与收缩蛋白对Ca~(2+)敏感性高低有关。     

平滑肌细胞内钙水平对胃肠动力的调节

在胃肠平滑肌收缩与舒张的信号转导机制中，细胞内游离Ca^2 作为一种重要的第二信使广泛参与细胞的运动、分泌、代谢和分化等多种细胞功能活动的调节。高浓度Ca^2 引起平滑肌收缩，低浓度Ca^2 引起平滑肌舒张。有关胃肠动力调节机制的研究很多，并已从器官组织水平发展到细胞和分子水平，而钙水平调节是其中重要的调节机制之一。     

地塞米松快速抑制气道平滑肌细胞收缩的机制初探

目的通过对平滑肌细胞进行地塞米松快速预处理,拟证实糖皮质激素（glucocorticoids,GC）对气道平滑肌细胞内三磷酸肌醇（trisphosphate,IP3）和细胞内游离钙离子（[Ca^2＋]i）浓度升高有快速抑制作用。方法原代培养的大鼠气道平滑肌细胞,比较不同浓度地塞米松预处理后10min与对照组之间游离钙上升情况的区别。利用离子交换层析液闪法和Fura-2／AM显微荧光检测技术,分别检测肌IP3和[Ca^2＋]i在受到激动剂刺激后的浓度变化;同时设米非司酮（mifepristone,Ru486）及放线菌酮（cycloheximide,CHX）对照组,排除基因组作用在该反应中的影响。结果用GC温浴大鼠气道平滑肌细胞10min,能够明显降低刺激物引起的气道平滑肌细胞内IP3和[Ca^2＋]i峰值。以上反应均不能被RU486和CHX影响或者逆转。结论GC能够通过非基因组作用快速抑制刺激物引起的气道平滑肌的收缩反应,使细胞内IP3和[Ca^2＋]i浓度降低。GC对于气道平滑肌的收缩可能存在着快速抑制作用,并且这一作用是通过非基因组机制实现的。     

Rho激酶是心血管药物治疗的一个重要靶点

业已证实Rho激酶是小GTP结合蛋白Rho效应器之一。越来越多的资料表明Rho／Rh。激酶途径在多种细胞功能上起重要作用，如血管平滑肌细胞收缩、肌动蛋白细胞骨架形成、细胞粘附与迁移、胞质分裂和基因表达，而这些都可能涉及心血管疾病的发病机制。在分子水平，Rho激酶上调促进炎症、氧化应激、血栓形成和纤维化的各种因子，下调内皮型一氧化氮合酶。     

尾加压素Ⅱ--促细胞增殖的活性肽

尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ，U Ⅱ)是迄今所知的体内最强的缩血管肽，它除了具有收缩／舒张血管、心肌变力等生物学效应外，对血管平滑肌细胞、心成纤维细胞、肿瘤细胞等多种细胞具有明显的促细胞增殖效应，该作用主要通过Ca^2 及Ca^2 依赖的CaN通路、PKC通路、MAPK通路。U Ⅱ还能通过PKC-Src酪氨酸激酶-MAPK途径与中度氧化LDL、5-羟色胺、溶血卵磷脂等物质发挥协同促细胞增殖作用。U Ⅱ的单独和协同促增殖作用很可能对阐明细胞增殖机制有重要补充，尤其是，U Ⅱ及其受体在心血管含量丰富，高血压、动脉粥样硬化、心衰等心血管疾病患者血浆U Ⅱ含量升高，U Ⅱ很可能是这些疾病促心血管细胞增殖的重要因子。     

人尾加压素的生物效应研究

1996年首次从人体中克隆出尾加压素－Ⅱ，G蛋白耦联受体－GPR14是尾加压素－Ⅱ的特异性受体，主要分布于血管平滑肌，内皮，心肌以及冠状动脉粥样硬化的病变部位。尾加压素－Ⅱ兼有缩，舒血管及较强的心 肌收缩作用，其中缩血管作用最为显著，在心血管稳态调节中起重要作用。     

白介素—1参与支气管哮喘的相关机制

白介素－1（IL－1）是由多细胞产生的具有多种效用的细胞因子，其和多种其它的细胞因子、趋化因子、粘附分子共同作用参与哮喘发病。气道平滑肌细胞在白介素－1和其他因子的作用下，通过环氧酶－2（COLX－2）产生收缩效用，加重哮喘症状。     

肿瘤坏死因子-α增强肾小球前小动脉平滑肌细胞内I型三磷酸肌醇受体的表达

目的 探讨肿瘤坏死因子－α（TNF－α）对肾小球前小动脉平滑肌细胞（RASMC）I型三磷酸肌醇（IP3）受体蛋白表达的影响。方法 通过对RASMC的分离、培养和鉴定,应用蛋白和核酸杂交技术分别检测TNF－α作用后RASMC中I型IP3受体蛋白和I型IP3受体mRAN的表达情况,同时测定I型IP3受体mRNA的半衰期。结果 TNF－α能增强RASMC内I型IP3受体蛋白的表达,且两者呈剂量依赖关系;TNF－α能促进I型IP3受体mRNA的表达,同时使受体蛋白合成增加;而TNF－α对I型IP3受体mRNA的影响不是抑制mRNA的降解,而是使其表达增加。结论 TNF－α可能作用于I型IP3受体mRNA的基因启动子,使其合成增加,由此导致I型IP3受体蛋白表达增加,诱导RASMC内储备的Ca^2 释放至细胞浆,引起肾小球前小动脉平滑肌细胞收缩,使肾血流量减少,肾小球滤过率下降,从而导致肾功能异常。     

气道平滑肌G蛋白耦联受体信号通路在哮喘发病中的作用

G蛋白耦联受体（GPCRs）是一组蛋白超家族成员,负责将胞外多种刺激通过细胞膜转导到细胞内不同的信号分子,从而调节多种细胞功能.目前大多数治疗哮喘的药物作用靶点是气道平滑肌（ASM）上的GPCRs.以往的研究均集中在GPCR调节ASM收缩和气道阻力方面,越来越多的资料表明,GPCRs如果对于ASM收缩状态的影响甚微,那么就可能会调节ASM的生长或分泌各种细胞因子、趋化因子、生长因子等,作用于间充质细胞和浸润的炎症细胞,在气道炎症、气道重构的发生发展起重要作用.本文综述ASM上各种GPCRs的信号通路与功能,以进一步理解哮喘的发病机制.     

南宁地区动脉内膜结蛋白与动脉粥样硬化的观察

连续１２例意外死亡的广西自治区南宁市年轻人（１５～３４岁）免疫组化染色证明，其主动脉及冠状动脉内膜的平滑肌细胞含有较多结蛋白。南宁是我国动脉粥样硬化最低发区之一，也是世界低发区。结蛋白阳性是平滑肌细胞成熟的标志。成熟平滑肌细胞为收缩型细胞，不易受生长因子作用而活跃增殖。因而认为这可能是动脉粥样硬化低发区的特征。与北京相比较，本地区动脉壁含较多具有抗增殖活性的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖。平滑肌细胞产生这种聚糖构成细胞外层，像筑茧自缚一样抑制自身生长，因而平滑肌细胞比较成熟稳定，显示较多结蛋白。     

钙激动剂介导血管平滑肌细胞增殖的信号转导途径

为探讨钙调神经磷酸酶依赖的信号通路在雷尼丁刺激的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用，以培养的大鼠血管平滑肌细胞为模型，用雷尼丁刺激其内贮Ca^2 释放入胞浆，环孢素A阻断钙调神经磷酸酶信号通路，维拉帕米阻断钙通道，检测血管平滑肌细胞钙调神经磷酸酶、丝裂素活化蛋白激酶和蛋白激酶C活性，用^3H-亮氨酸及^3H－胸腺嘧啶掺入量作为反应细胞增殖的指标。结果显示，雷尼丁刺激组蛋白核酸合成速率明显增高，与对照组相比差异显著（P＜0．01）；环孢素A及维拉帕米能明显抑制雷尼丁介导的平滑肌细胞蛋白核酸合成速率增高，与雷尼丁刺激组相比差异显著（P＜0．01）。同时发现雷尼丁刺激组钙神经磷酸酶、蛋白激酶C活性与对照组平滑肌细胞相比差异显著（P＜0．05或0．01）。环孢素A和维拉帕米抑制雷尼丁介导的平滑肌细胞钙调神经磷酸酶活性增高，维拉帕米抑制雷尼丁介导的平滑肌细胞蛋白激酶C活性的增高。提示钙调神经磷酸酶信号通路在雷尼丁刺激的平滑肌细胞增殖中起重要作用，但钙调神经磷酸酶信号通路不是雷尼丁介导平滑肌细胞增殖的唯一信号通路，以丝裂素活化蛋白激酶为核心的信号通路亦参与了雷尼丁刺激的平滑肌细胞增殖。     

血管紧张素（1—7）舒血管机制的研究

目的 探讨血管紧张素（1－7）[Ang(1-7)]对血管功能的作用及机制。方法 应用生理多导仪测定存在和去除内皮后,血管对血管紧张素的反应;用钙敏感指示剂Fura-2/AM检测血管平滑肌细胞（VSMC）内游离钙离子浓度（[Ca^2 ]i);RT－PCR检测VSMC血管紧张素受体（ATR）mRNA表达。结果 Ang(1-7)明显抑制AngⅡ对动脉环的收缩作用,在内皮完整的动脉环比去除内皮的动脉环作用更明显;Ang(1-7)同样明显抑制AngⅡ诱导的VSMC[Ca^2 ]i上升幅度;AngⅡ能下调AT1RmRNA,而Ang(1-7)上调AT1RmRNA,AngⅡ和Ang(1-7)对AT2RmRNA影响不明显。结论 Ang(1-7)通过作用于血管内皮及VSMC内钙信号发挥抑制血管平滑肌收缩的作用。     

钙调神经磷酸酶在心血管系统中的作用

钙调神经磷酸酶是一种受Ca^2-钙调素调节的丝氨酸—苏氨酸蛋白磷酸酶，在体内分布广泛，作为Ca^2 信号下游效应分子，起去磷酸化作用，参与多种细胞功能的调节。尤其是新近研究表明，钙调神经磷酸酶可参与心血管正常结构和功能的维持、血管平滑肌细胞增殖、心肌肥大和内皮细胞功能的调节，在心血管生理及病理生理过程中均发挥重要作用。     

枳实含药血清对大鼠胃窦平滑肌细胞收缩效应及细胞内钙离子浓度、钙调蛋白表达的影响

目的:观察单味中药枳实含药血清对大鼠胃窦平滑肌细胞收缩效应及细胞内Ca2+、钙调蛋白表达的影响.方法:按照血清药理学通法制备大鼠枳实含药血清,将血清分为枳实组(10%、20%、50%枳实含药血清)、空白血清对照组,酶解法提取胃窦平滑肌细胞并进行培养,倒置显微镜下观察各组对胃窦平滑肌细胞收缩效应,激光共聚焦显微镜技术检测各组加药前后胃窦平滑肌细胞内Ca2+浓度变化,免疫组织化学方法观察各组对胃窦平滑肌细胞内钙调蛋白的表达.结果:10%、20%、50%枳实含药血清对胃窦平滑肌细胞收缩及细胞内Ca2+荧光强度的影响呈药物剂量依赖关系,细胞收缩、细胞内Ca2+荧光强度随药物浓度的增高而增强(P<0.05),20%、50%枳实含药血清与空白血清对照组对胃窦平滑肌细胞收缩、细胞内Ca2+荧光强度差异有统计学意义(P<0.05),50%枳实组与空白血清对照组对胃窦平滑肌细胞内钙调蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05).结论:枳实含药血清可以促进胃窦平滑肌细胞收缩,其机制可能与增加细胞内Ca2+浓度、调节钙调蛋白的表达有关.     

钙离子在CNP抑制Ach增强胃窦环行平滑肌收缩效应中的作用

目的 探讨细胞内外钙离子在C型钠尿肽(CNP)对乙酰胆碱(Ach)引起的大鼠离体胃窦环行平滑肌收缩效应中的作用.方法 利用浴槽孵育离体大鼠胃窦环行肌肌条,用离体平滑肌张力记录装置记录平滑肌肌条收缩活动,观察钙离子对Ach引起的大鼠离体胃窦环行平滑肌收缩效应的影响.结果 CNP对Ach引起的胃平滑肌自发性收缩增强效应有明显的抑制作用,在用无钙灌流液灌流后,CNP仍能抑制Ach引起的收缩效应.而用胞内钙离子释放抑制剂(TMB-8)后,CNP不能抑制Ach引起的收缩效应.结论 CNP抑制Ach引起的胃平滑肌自发性收缩增强效应与胞内钙释放有关.     

卒中易感型自发性高血压大鼠血管平滑肌收缩装置对Ca^2＋敏感性变…

比较卒中易感型自发性高血压大鼠与常压大鼠基底动脉和尾动脉平滑肌收缩装置对Ｃａ＾２＋敏感性的差异。采用血管平滑肌细胞膜化学高通透技术并结合细胞钙钳制技术，使上述血管肌条平滑肌细胞膜具有高通透性，并使胞内Ｃａ＾２＋固定于一定水平，然后制作神经鞘氨醇预温浴后的肌条ｐＣａ－张力曲线，比较ＳＨＲｓｐ和Ｗｉｓａｔｒ大鼠ＢＡ和ＣＡ平滑肌在不同处理时的ｐＣａ５０值。     

肺动脉平滑肌细胞膜钾通道的细胞内高控

肺动脉平滑肌细胞上主要有3种钾通道（K^ 通道）,分别是电压依赖性K^ 通道（KV通道）、Ca^2 激活的K^ 通道（KCa通道）和ATP激活的K^ 通道（KATP通道）。一些细胞内的信息物质（如cAMP、cGMP、PKA、PKG、PKC、NO等）调节着K^ 通道的活性,对肺动脉产生收缩或舒张作用,从而在低氧性肺动脉高压的发病机制中发挥着重要的作用。本文对近年来肺动脉平滑肌细胞膜K^ 通道细胞内调控因素的研究动态作一总结。     

卒中易感型自发性高血压大鼠血管平滑肌收缩装置对Ca2＋敏感性变化的研究

目的比较卒中易感型自发性高血压大鼠（ＳＨＲｓｐ）与常压（Ｗｉｓｔａｒ）大鼠基底动脉（ＢＡ）和尾动脉（ＣＡ）平滑肌收缩装置对Ｃａ２＋敏感性（以ｐＣａ５０表示）的差异。方法采用血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）膜化学高通透技术并结合细胞钙钳制技术，使上述血管肌条（环）平滑肌细胞膜具有高通透性，并使胞内Ｃａ２＋固定于一定水平，然后制作神经鞘氨醇（ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ）预温浴后的肌条（环）ｐＣａ－张力曲线，比较ＳＨＲｓｐ和Ｗｉｓｔａｒ大鼠ＢＡ和ＣＡ平滑肌在不同处理时的ｐＣａ５０值。结果不论ＳＨＲｓｐ或Ｗｉｓ－ｔａｒ大鼠，ＢＡ平滑肌收缩装置对Ｃａ２＋的敏感性均高于ＣＡ（Ｐ＜０．００５）。ＳＨＰｓｐ的ＢＡ和ＣＡ平滑肌收缩装置对Ｃａ２＋的敏感性均高于Ｗｉｓｔａｒ大鼠的相应血管（Ｐ＜０．００５）。蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ可使ＳＨＲｓｐＣＡ平滑肌ｐＣａ－张力曲线右移，但不能使ＳＨＲｓｐＣＡ平滑肌ｐＣａ－张力曲线右移，甚至轻微左移。结论ＳＨＲｓｐＢＡ和ＣＡ平滑肌收缩装置对Ｃａ２＋的敏感性均高于Ｗｉｓｔａｒ大鼠，ＰＫＣ在这种Ｃａ２＋敏感性变化中所起的作用在ＢＡ和ＣＡ可能不同     

心脏营养素-1延缓失神经骨骼肌萎缩作用机制研究

目的探讨外源性心脏营养素-1（CT-1）延缓失神经骨骼肌萎缩的作用机制。方法将120只小鼠随机分为两组各60只，制作腓肠肌失神经模型后实验组腹腔注射CT-1 100μg／（kg&#183;d），对照组注射等量CT-1溶媒，分别于给药后2、4、6周完整切取腓肠肌，检测骨骼肌细胞凋亡、蛋白代谢、兴奋一收缩耦联等相关指标。结果与对照组比较，观察组Fas mRNA表达降低、Bcl-2 mRNA表达增加、骨骼肌细胞凋亡率下降；肌细胞收缩蛋白中α-肌动蛋白、肌球蛋白重链Ⅱa mRNA表达增加；肌质网Ca^2＋-ATP酶水平升高；但泛素、RC2 mRNA表达水平及MeHis释放量无明显差异。结论外源性CT-1延缓失神经骨骼肌萎缩的机制为促进失神经骨骼肌结构性蛋白合成、抑制肌细胞凋亡、提高Ca^2＋-ATP酶水平等。     

蛋白—酪氨酸激酶在大鼠血管平滑肌细胞诱导型一氧化氮合酶基 …

为了解蛋白－酪氨酸激酶及蛋白激酶Ｃ在血管平滑肌细胞诱导型一氧化氮合酶基因表达的作用,应用蛋白－酪氨酸激酶抑制剂抑制细胞蛋白－酪氨酸激酶活性及应用伏波脂耗竭细胞蛋白激酶Ｃ。