益气养阴方及其拆方对急性髓细胞白血病细胞细胞周期及相关蛋白的调控研究

目的:研究益气养阴方及其拆方后的扶正方、祛邪方对细胞周期及相关蛋白p21在人急性髓细胞白血病(acutemyeloid leukemia,AML)中表达的影响,探讨益气养阴方治疗白血病的作用机制。方法:NOD-SCID小鼠经60Co照射后,尾静脉注射KG1a细胞1×106个,分成4组。对照组予生理盐水,实验组分别予益气养阴方、扶正方、祛邪方中药制剂灌胃。采用流式细胞术法检测细胞周期;免疫组化法检测p21蛋白的表达。结果:流式细胞术法检测细胞凋亡率:益气养阴组、扶正组、祛邪组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。免疫组化法检测c-myc、survivin蛋白的表达:对照组与益气养阴组、扶正组、祛邪组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中药益气养阴方可升高p21蛋白的表达,诱导白血病细胞停滞在G1期,对AML治疗具有作用。     

益气养阴方及其拆方对急性髓细胞白血病小鼠骨髓细胞hTERT及其启动子甲基化表达的影响

目的探讨益气养阴方治疗急性髓细胞白血病的可能作用机制。方法 40只NOD-SCID小鼠经60Co照射后,尾静脉注射KG1a细胞1×106个,建立急性髓细胞白血病动物模型后随机分成4组,每组10只。模型组予生理盐水灌胃;扶正组予扶正方浓缩药液(1.08g/ml)灌胃;祛邪组予祛邪方浓缩药液(0.92g/ml)灌胃;全方组予益气养阴方浓缩药液(2g/ml)灌胃。各组均0.2ml/次,每日2次,共28天。采用PCR-ELISA法检测骨髓细胞端粒酶活性;荧光定量PCR法检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)-mRNA及其启动子甲基化的表达。结果扶正组、祛邪组和全方组小鼠骨髓细胞端粒酶活性、hTERT-mRNA和hTERT启动子甲基化的表达较模型组明显降低(P0.05或P0.01),全方组端粒酶活性、hTERT-mRNA和hTERT启动子甲基化的表达低于扶正组与祛邪组(P0.05或P0.01)。结论益气养阴方治疗急性髓细胞白血病的机制可能与降低端粒酶活性、hTERT及其启动子甲基化的表达水平有关。     

益气养阴方及其拆方对急性髓细胞白血病小鼠细胞凋亡及相关蛋白的影响

目的观察益气养阴方及其拆方对小鼠细胞凋亡率及相关蛋白c-myc、survivin的影响,探讨其作用机制。方法 NOD-SCID小鼠经60Co照射后,尾静脉注射KG1a细胞1×106个造模;随机分为对照组、全方组、扶正组、祛邪组。治疗组给予相应药物灌胃,对照组给予等体积生理盐水灌胃。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组化法检测c-myc、survivin蛋白表达。结果与对照组比较,治疗组细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P0.01);治疗组淋巴结c-myc、survivin蛋白表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。全方组对各指标的影响均优于扶正组和祛邪组(P0.05)。结论益气养阴方通过降低c-myc、survivin蛋白表达,诱导白血病细胞凋亡,起到治疗作用。     

益气养阴方及其拆方对急性髓系白血病细胞细胞凋亡及Cyt-C,Apaf-1,Smac/Diablo,AIF表达的影响

目的:研究益气养阴方及其拆方后的扶正方、祛邪方对人急性髓系白血病细胞凋亡及细胞色素C(Cytochrome C,Cyt-C),凋亡蛋白酶活化因子(apoptotic protease activating factor 1,Apaf-1),第二个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活因子(the second mitochondria-derived activator of caspase/direct IAP-blinding protein with low PI,Smac/Diablo),凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factors,AIF)表达的影响,探讨益气养阴方治疗白血病的可能作用机制。方法:采用NOD/SCID小鼠,以KG-1a细胞株建立人急性髓系白血病模型,随机分为全方组、祛邪组、扶正组和空白组,取NOD/SCID小鼠脾细胞制成细胞悬液,应用流式细胞术检测NOD/SCID小鼠细胞凋亡率;采用免疫组化法检测NOD/SCID小鼠骨髓中线粒体相关凋亡因子CytC,Apaf-1,Smac/Diablo和AIF的表达。结果:用药后,用药组小鼠生存时间较空白组显著延长(P0.01),全方组小鼠生存时间较扶正组与祛邪组显著延长(P0.01),祛邪组小鼠生存时间较扶正组显著延长(P0.01)。用药组细胞凋亡率较空白组明显升高(P0.01),全方组较扶正组与祛邪组显著升高(P0.01),祛邪组较扶正组显著升高(P0.01)。用药组小鼠骨髓中Cyt-C,Apaf-1,Smac/Diablo,AIF的表达较空白组显著升高(P0.05),其中Cyt-C与Apaf-1表达显著升高(P0.01);全方组均高于扶正组与祛邪组(P0.01);祛邪组较扶正组均升高(P0.05),Cyt-C,Apaf-1和Smac/Diablo表达显著升高(P0.01)。其中对于各指标的影响全方组均优于扶正组与祛邪组,祛邪组均优于扶正组。结论:益气养阴方能够提高NOD/SCID小鼠的细胞凋亡率,上调线粒体相关凋亡因子Cyt-C,Apaf-1,Smac/Diablo,AIF的表达,并诱导其凋亡,抑制白血病细胞增殖,其机制可能与线粒体凋亡通路有关。     

益气养阴方对白血病细胞Caspase-3及Bcl-2表达的影响

目的研究益气养阴方对白血病细胞Caspase-3及Bcl-2蛋白表达的影响,探讨复方中药诱导白血病细胞凋亡的机制.方法给EL9611红白血病小鼠灌服益气养阴方水煎剂13 d后处死,取股骨骨髓细胞,用免疫组化法测细胞Ca spase-3及Bcl-2蛋白表达.结果益气养阴方组与对照组比较,Caspase-3表达阳性率增加(P＜0.01);Bc1-2表达积分下降(P＜0.01).结论益气养阴方上调白血病细胞Caspase-3表达、下调Bcl-2表达是其诱导白血病细胞凋亡的重要途径.     

益气养阴方对急性白血病细胞HL-60增殖和细胞形态的影响

目的:观察益气养阴方对急性白血病细胞HL-60增殖和细胞形态的影响。方法:制备益气养阴方含药血清,并设立对照组、低、中、高剂量含药血清,对急性白血病细胞HL-60进行培养。利用MTT比色检验法、Wright-Gimsa染色检测法分别检测细胞增殖和细胞形态变化。结果:与对照组比较,益气养阴方对HL-60细胞有一定抑制作用(P<0.01);低剂量组HL-60细胞形态变化不明显,中剂量组少数细胞出现变化,高剂量组变化最明显。结论:益气养阴方能够抑制急性白血病细胞HL-60增殖和诱导白血病细胞分化。     

益气养阴方治疗急性髓系白血病的疗效

目的:探究益气养阴方治疗急性髓系白血病(AML)的疗效及对患者血象、骨髓象的影响.方法:选取2014年5月至2017年12月江苏省中医院收治的AML患者77例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组(n=38)与观察组(n=39).对照组行常规化疗,观察组在对照组的基础上给予益气养阴方治疗.检测2组治疗前后细胞免疫状态...     

益气养阴解毒方配合化疗治疗老年急性白血病22例

<正>随着人口老龄化,老年急性白血病的诊治已引起人们重视。但中西医结合治疗老年白血病临床探讨尚少,我科应用益气养阴解毒中药联合化疗治疗老年急性白血病22例,取得一定的疗效,现报告如下。1临床资料1.1研究对象观察病例来源于2002年1月—2008年1月我院收治的初治急性髓细胞白血病     

中医药治愈急性髓细胞白血病m3b一例

1病历摘要患者李某,男,26岁,2010年7月20日在某医科大学总医院诊断：急性髓细胞白血病m3b。初诊（2010年7月20日）：①某医科大学总医院CT检查报告：左顶部颅骨内板下方可见一不规则形低密度影、边界清楚,邻近颅骨略受压;脑干,小脑半球形态、密度未见异常,脑室系统无扩张,脑沟、脑裂、脑池无增宽;     

FLAG方案治疗难治性复发性急性髓细胞白血病

目的初步观察FLAG方案(Fludarabine、Cytarabine、G-CSF)对难治复发性急性髓细胞白血病的近期临床疗效及安全性。方法对32例难治复发性急性髓细胞性白血病进行FLAG方案治疗,根据Ara-C剂量分为2组,标准剂量组予氟达拉滨30 mg/(m2.d)第1—5天,Ara-C 1.0~2.0 g/d第1—5天;小剂量组予氟达拉滨30 mg/(m2.d),第1—5天,Ara-C 0.2~0.5 g/d,第1—5天。均根据化疗前WBC数决定联合或不联合G-CSF。结果32例患者中获得完全缓解(CR)10例(31%),部分缓解(PR)6例(19%),有效率50%。FLAG方案的血液系统不良反应较重。ANC回升至0.5×109L-1中位时间为15(8~24)d,化疗后血小板降至20×109L-1的中位时间为10 d,平均持续7 d血小板回升至20×109L-1以上。疗程中输去白少浆血的中位单位数为8(0~22)IU,输去白单采血小板的中位单位数为4(0~11)IU。非血液系统不良反应非常轻。结论FLAG方案作为难治复发性急性白血病的诱导治疗,有较好的疗效。骨髓抑制较重,但是患者可耐受。     

活血益气养阴方防治急性放射损伤的研究

目的：用活血益气养阴中药减轻放疗急性毒副反应。方法：７２例鼻咽癌患者分成两组，各３６例，均行根治性放疗，放疗中实验组（Ａ组）服用中药活血益气养阴方。对照组（Ｂ）组维斯克含漱或外敷。结果：口腔粘膜和皮肤损伤Ａ，Ｂ两组各为４７．２％（１７／３６例），９１．７％（３３／３６例），１３．９％（５／３６例），３３．３％（１２／３６例）；损伤各不相同。     

益气养阴方对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响

目的：评价益气养阴方鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。方法：制备CAM模型，比较大鼠含药血清和无药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响情况。结果：含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成产生明显抑制作用。结论：益气养阴方对活体血管的生成具有抑制作用，在肿瘤和其他病理情况下的血管形成治疗中具有一定的应用价值。     

益气养阴逐瘀方对LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症模型体外抗炎活性的影响

目的:研究益气养阴逐瘀方对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞系RAW 264. 7细胞炎症模型相关细胞因子表达及经典活化(M1)/选择性活化(M2)炎症表型转化的影响。方法:运用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同给药浓度的益气养阴逐瘀方对RAW 264. 7细胞增殖情况的影响;利用LPS诱导RAW 264. 7细胞,构建体外炎症模型,采用格里斯试剂法(Griess)检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的分泌量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清中M1/M2型相关炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL~(-1)β),一氧化氮合酶(i NOS),白细胞介素-10(IL~(-1)0),转化生长因子-β(TGF-β),精氨酸-1(Arg-1)的表达量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测M1型巨噬细胞标志基因TNF-α,IL-6,IL~(-1)β,i NOS和M2型巨噬细胞标志基因IL~(-1)0,TGF-β,Arg-1 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内相关蛋白TNF-α,IL-6,IL~(-1)β,i NOS的表达。结果:MTT比色法显示,与空白组比较,益气养阴逐瘀方2. 0 g·L~(-1)及以下时对细胞增殖无明显影响。Griess法显示,与空白组相比,LPS组NO释放量显著上调(P 0. 01);与LPS组相比,各给药组NO释放量均显著下调(P 0. 01)。ELISA显示,与空白组相比,LPS组M1/M2型巨噬细胞相关炎症因子表达均显著上调(P 0. 01);与LPS组相比,益气养阴逐瘀方各给药组可明显下调M1型巨噬细胞促炎症因子表达(P 0. 01),对M2型巨噬细胞抗炎症因子无影响。Real-time PCR显示,与空白组相比,LPS组M1/M2型巨噬细胞相关mRNA表达显著上调(P 0. 01);与LPS组相比,益气养阴逐瘀方各给药组可明显下调M1型巨噬细胞促炎症因子基因表达(P 0. 05,P 0. 01),对M2型mRNA表达无影响。Western blot显示,与空白组比较,LPS组TNF-α,IL-6,IL~(-1)β,i NOS蛋白的表达显著上调(P 0. 01);与LPS组相比,益气养阴逐瘀方各给药组TNF-α,IL-6,IL~(-1)β,i NOS蛋白的表达均下调,且于2. 0 g·L~(-1)下调最显著(P 0. 01)。结论:益气养阴逐瘀方可以有效抑制LPS诱导的RAW 264. 7细胞炎症。其诱导已经分化的促炎亚型M1型巨噬细胞向抗炎亚型M2型巨噬细胞转化不明显,其抗炎机制可能与通过抑制巨噬细胞向M1亚型方向极化从而发挥免疫调节作用,以减少NO,TNF-α,IL-6等相关炎症因子分泌相关。     

益气养阴通脉方对冠心病稳定型心绞痛的临床疗效及对Hcy的影响

目的观察益气养阴通脉方对冠心病稳定型心绞痛(气阴两虚兼瘀型)的临床疗效及对Hcy的影响。方法将本院收治的64例患者按照随机数字表法分为对照组和观察组各32例。对照组给予西医常规基础治疗,观察组在对照组基础上给予益气养阴通脉方中药治疗,连续治疗4周,观察比较两组患者西雅图心绞痛量表评分、中医证候积分疗效、心电图疗效差异以及血浆Hcy水平。结果治疗前两组患者西雅图心绞痛量表评分、中医证候积分疗效、心电图疗效、血浆Hcy水平差异均无统计学意义(均P> 0. 05)。治疗后观察组患者西雅图心绞痛量表评分、中医证候积分疗效、心电图疗效均优于对照组,血浆Hcy低于对照组(均P <0. 05)。结论益气养阴通脉方能够改善冠心病稳定型心绞痛患者中医证候积分疗效,提高患者生存质量,降低血浆Hcy水平,具有确切的临床疗效,值得进一步研究应用。     

基于网络药理学-分子对接探讨益气养阴通络方抗类风湿关节炎的作用机制

[目的]采用网络药理学与分子对接探究益气养阴通络方干预类风湿关节炎（RA）的作用机制。[方法]通过中药系统药理学数据库及分析平台（TCMSP）、本草组鉴（HERB）和文献查阅获得复方活性成分与靶点,采用Genecards、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）等数据库获得疾病靶点,然后采用数据库计算出益气养阴通络复方成分与疾病的交集靶点。对交集靶点施行功能和通路富集分析,选取益气养阴通络方核心药物靶点与关键化合物施行分子对接。[结果]网络药理学共筛选出益气养阴通络方的83种活性成分和779个潜在靶点,RA相关靶点5 393个,交集靶点465个,其中交集核心靶点9个（分别为SRC、STAT3、MAPK3、MAPK1、HSP90AA1、PIK3R1、GRB2、AKT1、PIK3CA）。富集得出PI3K-AKT、癌症相关及神经活性配体-受体相互作用等通路,其中PI3K-AKT信号通路可能是复方干预RA的关键通路之一。对接计算表明,益气养阴通络方的11种主要活性成分与关键靶点SRC、STAT3、PIK3R1、AKT1均有较稳定的结合,其中与AKT的结合可能最大。[结论]益气养阴通络方通过多成分-...     

515抗瘤方剂诱导白血病HL60细胞凋亡的研究

目的：观察中药５１５抗瘤方剂对白血病ＨＬ－６０细胞的影响。方法：采用光镜、透射电镜观察形态及结构，流式细胞术测量凋亡率，原位末端标记检测ＤＮＡ断裂。结果：细胞与药物共同孵育一定时间后出现固缩、核 碎裂等典型的凋亡形态学变化，药物浓度在０．０１３～０．０４g/ml之间，药物组与对照组凋亡率有显著性差异（Ｐ〈０．０１）。结论：５１５抗瘤方剂能诱导ＨＬ－６０细胞发生凋亡，细胞凋亡率随时间延长增加，且呈现剂量