人自体—异体表皮细胞混合培养及临床应用

目的：研究体外培养的表皮细胞膜片覆盖于烧伤II、III度创面上，有否获得理想的永久性皮肤替代物。方法：应用空气—液体界面培养方法，将自体—异体表皮细胞按一定比例(1：1)混合后培养出细胞膜片，移植于10例病人的深II、III度创面上，并观察其愈合情况．结果：移植16块膜片，成功11块，失败5块(其主要原因为感染、受压及移动)。结论：该方法简单易行，为缺乏皮源的的烧伤病人提供了一个好方法．     

人表皮细胞的培养与移植

用细胞悬液法,原代培养人表皮细胞,在373瓶原代培养中,3T3细胞作滋养层的74瓶,生长成细胞单层的占64.8％;以鼠尾腱胶原作支持物的299瓶生长成细胞单层的占83.6％。用扫描电镜观察,见细胞表面有微绒毛和突起,细胞间桥,有丝分裂,培养后10d形成细胞单层。将培养的细胞单层,初步试用在14例次烧伤病人的切(削)痂创面及感染肉芽创面,结果5例次成活,4例次部分成活,5例次因感染失败。     

混合培养自体与异体表皮细胞的移植方法

探索混合培养的自、异体表皮细胞县液植于烫伤大鼠的方法，Ｗｉｓｔａｒ大鼠背部造成１０％ＴＢＳＡⅢ度烫伤，４８ｈ后切除坏死组织，用ＳＤ大鼠皮覆盖，并将培养的Ｗｉｓｔａｒ和Ｆ３４４大鼠表皮细胞以１：１混合，与中性胶原混合滴入ＳＤ大鼠皮下。     

脱细胞异体真皮与自体表皮复合移植23例临床应用

在深度烧伤创面及瘢痕的手术治疗中,长期以来以自体皮移植为主,但由于自体全厚皮供区有限,而中厚皮、刃厚皮移植后不同程度存在不耐磨、易起水疱及瘢痕增生挛缩等问题.人们一直在寻求更加理想的皮肤替代物.在这一情况下,包含表皮和真皮的复合皮孕育而生.由于复合皮具有良好的组织弹性、抗磨擦性和外形质地近似正常皮肤,愈合质量较好.目前国内外采用复合皮移植的病例逐渐增多,应用范围不断扩大,收到了良好的效果.我科自2005年应用脱细胞异体真皮与自体表皮复合移植治疗深度烧伤及烧伤后瘢痕挛缩患者23例,取得了良好效果,现总结如下.     

混合培养自体与异体表皮细胞的移植方法

将2．7－二氧二氢荧光深外标记L－929小鼠成纤维细胞膜表面．用ACAS570测定细胞内自由基的含量，以对钛涂层317L不锈钢材料的细胞毒性进行实验研究．结果：钛涂层317L不锈钢材料和纯钛材料接触培养的L－929小鼠成纤维细胞内荧光含量较低，显示细胞内自由基含量较低，317L不锈钢材料组的荧光含量较高，与前两组比较均有显著性差异（P＜0.01）．上述结果表明钛涂层317L不锈钢材料的细胞毒性远低于317L不锈钢材料．与纯钛材料相似，作为口腔种植材料是安全的．     

脱细胞异体真皮与自体薄皮片复合移植的临床应用

目的　为深度烧伤创面及功能部位瘢痕切除后的创面修复寻求良好的覆盖材料。方法　自 1998年以来 ,采用J- 1型脱细胞异体真皮 +自体薄皮片复合移植治疗Ⅲ°烧伤创面及对烧伤后功能部位瘢痕挛缩畸形进行整复。结果　 8例烧伤创面及瘢痕切除后创面进行复合皮肤移植后 ,创面收缩轻、质软、功能良好、外观满意。结论　脱细胞异体真皮 +自体薄皮片复合移植是修复Ⅲ°烧伤创面及功能部位瘢痕挛缩畸形比较理想的覆盖材料     

人体表皮细胞培养及临床应用概况

自体供皮不足是大面积深度烧伤治疗中有待解决的关键问题之一。自1975年Rheinwald和Green［1］发表有关人体表皮细胞培养的文献后，近20多年来国外、国内不少学者对人体表皮细胞培养及移植进行了深入的研究，从小块皮肤经体外培养增殖获得覆盖整个体表面积的人表皮细胞膜片。在此基础上发展起来的复合皮克服了单纯细胞膜片移植出现的成活率低、不耐磨、疤痕显著等缺点，在烧伤创面修复方面取得了可喜的进步，现综述如下。1培养技术的发展1867年Tigri报道应用水疱表皮进行移植。1975年Rheinwald和Green[1]报道在表皮细胞培养时应用由射线灭…     

去细胞异体真皮与自体皮片复合移植的临床研究

目的 探讨去细胞真皮与自体皮片复合移植临床应用的具体方法及注意事项；方法 对8例患者共15个创面采用一步法用同种异体无细胞真皮与自体大张皮片进行复合移植。结果 13个创面的复合移植完全成活，皮片外观、质地和弹性均令人满意，无明显疤痕形成；结论 一步法复合移植具有较高的成功率，但对创面基底要求很高。     

人表皮细胞体外原代培养生长特性及临床应用初步报告

本文报告用组织块培养法观察25例表皮标本的培养结果,培养物几乎全是上皮细胞,在一定的时期内呈指数增长,其群体倍增时间为3.8±0.3天。以透折膜为载体,用培养的异体表皮膜片,移植于二例烧伤病人创面,经过半年的追踪观察所植皮膜片生长良好。     

同种异体皮覆盖、自体表皮、真皮皮浆混合移植技术的临床应用

目的 皮浆移植治疗大面积深度烧伤.方法 大面积深度烧伤且皮源不足的患者采用同种异体皮覆盖、自体表皮、真皮皮浆移植术治疗创面.结论 同种异体皮覆盖、自体表皮、真皮皮浆移植术治疗大面积深度烧伤创面效果肯定.     

去细胞异体真皮与自体皮片复合移植的临床研究

目的 探讨去细胞真皮与自体皮片复合移植临床应用的具体方法及注意事项。方法 对8例患者共15个创面采用一步法用同种异体无细胞真皮与自体大张皮片进行复合移植。结果 13个创面的复合移植完全成活,皮片外观、质地和弹性均令人满意,无明显疤痕形成。结论 一步法复合移植具有较高的成功率,但对创面基底要求很高。     

高效氯氰菊酯对人皮肤表皮细胞的直接刺激损害

目的探讨高效氯氰菊酯对人皮肤表皮细胞的直接刺激损害。方法以体外浸泡式培养的人皮肤表皮细胞为生物材料，以培养基中乳酸脱氢酶（LDH）活性为指标，检测了在不同染毒浓度条件下培养基中的LDH活性，并进行了电镜观察。结果随着染毒剂量的增加，培养基中LDH活性升高，与阴性对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；与阳性对照组相比，差异亦有统计学意义（P〈0．01）；电镜观察显示，在低浓度条件下，细胞虽可保持结构完整，但表面的绒毛状突起减少，少数细胞胞核内出现空泡（水肿），细胞受到轻微损害。随染毒剂量增加，细胞胞膜破裂，细胞核溶解呈空泡状，乃至细胞大量坏死。结论高效氯氰菊酯对人皮肤表皮细胞有直接刺激损害作用，在一定条件下，可损害皮肤屏障，使其更易被吸收，造成机体中毒，应特别注意劳动防护。     

简易人子宫内膜细胞培养法及其优点

本研究介绍一种人子宫内膜细胞培养的简易方法及其优点。该法既节省时间和经费，又能保持子宫内膜细胞间联系；利用细胞爬片能定性、定位且定量检测基因等的表达，为科研及临床工作提供了基础实验方法。     

Culture and Identification of Human Amniotic Mesenchymal Stem Cells

Objective To establish the method of isolation, purification, and identification of human amniotic mesenchymal stem cells （hAMSCs）. Methods hAMSCs were isolated from human amniotic membrane by trypsin-collagenase digestion, and cultured in Dulbecco＇s modified Eagle＇s medinm/F12 medium supplemented with 10% fetal bovine serum. Phenotypic characteristics of these cells were analyzed by means of immunocytochemistry and flow cytometry. Results The cells successfully isolated from human amniotic membrane expressed representative mesenchymal cell surface markers CD44, CD90, and vimentin, but not CD45. Conclusions This study establishes a potential method for isolation of hAMSCs from human amnion, in vitro culture, and identification. The isolated cells show phenotypic characteristics of mesenchymal stem cells.     

胎垂体下丘脑黑质细胞混合培养研究

为了判断混合胎垂体下丘脑黑质细胞能否作为一种理想的移植物，本文将脑垂体下丘脑黑质细胞进行混合培养（ＰＨＮ）通过组织学检查与激素测定，与单纯胎垂体细胞培养（Ｐ）及胎垂体下丘脑细胞培养（ＰＨ）相比较，结果显示，在ＰＨＮ组，不仅培养的细胞无明显为性，而且培养液中生长激素（ＧＨ）与泌乳素（ＰＲＬ）浓度可平衡在一定水平，提示在胎垂体下丘脑黑质细胞混合培养中，垂体细胞可保持良好的活性与功能。     

人骨髓间充质干细胞体外培养及与Bio-gide胶原膜复合培养的实验研究

目的本实验拟研究人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stemcells,hMSCs)分离、培养与鉴定的方法,探讨其作为牙周组织工程种子细胞的可行性。方法体外分离培养hMSCs,进行形态学观察,细胞表面抗原检测;将hMSCs与Bio-gide胶原膜进行体外复合培养,通过倒置相差显微镜,扫描电镜进行观察。结果梯度密度离心法结合贴壁筛选法能获得高纯度高活性的hMSCs。hMSCs可在Bio-gide胶原膜上贴附增殖,并复层生长。结论hMSCs取材方便、创伤小;扩增分化能力强。hMSCs可作为牙周组织工程种子细胞来源。Bio-gide胶原膜可作为细胞生长载体。     

人卵泡颗粒细胞的原代培养与鉴定

目的 建立和完善人卵泡颗粒细胞的体外原代培养和鉴定方法.方法 分离行辅助生殖助孕技术治疗的符合研究纳入标准的不孕患者的卵泡颗粒细胞,接种于DMEM培养基进行原代培养;以H-E染色和卵泡刺激素受体(FSHR)免疫组织化学染色对所培养的卵泡颗粒细胞进行鉴定.结果 分离培养的人卵泡颗粒细胞存活率>90%;FSHR免疫组织化学...     

人类神经干细胞的长期培养和传代

【目的】探讨人类神经干细胞的体外培养条件及其传代的方法。【方法】采用机械方法从胎脑中分离神经细胞 ,应用N2培养基进行培养 ,碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和表皮生长因子 (EGF)刺激细胞扩增 ;传统方法和对神经球切割的方法进行传代培养 ;应用免疫组织化学染色对培养的细胞及其分化的细胞进行鉴定。【结果】从流产胎脑当中成功培养出人类的神经干细胞 ,培养条件下呈悬浮状态生长 ,形成神经球 ,绝大多数的细胞表达波形蛋白和Musashi1两种神经干细胞的标志物 ;这种细胞可分化为神经元和星型胶质细胞 ,早期的培养有少量的少突胶质细胞 ;在这种培养条件下 ,神经干细胞生长速度较慢 ,而采用切割神经球的方法保持了细胞间的联系 ,神经干细胞可获得较大的扩增速度。【结论】体外的培养条件下 ,可从胎脑组织中培养出神经干细胞 ,它可做为中枢神经系统疾病移植治疗的潜在细胞来源。     

输卵管上皮细胞的培养及生物学特性

目的建立输卵管上皮细胞的培养方法，进行形态学观察，鉴定及冻存，方法取雌性日本大白兔的输卵管上皮细胞进行原代及传代培养，用光镜，电镜及单克隆角蛋白抗体进行ＳＰ染色，结果输卵管上皮细胞呈多角形组成簇生长。电镜下可见表面有微绒毛，细胞之间有紧密连接等上皮细胞的特征，免疫组化染色上皮细胞角蛋白染色阳性，原代培养细胞７天长成单层，传代细胞４天长成单层，结论建立稳定的输卵管上皮细胞的培养方法，为进一步研究输卵