SP-A在急性坏死性胰腺炎肺损伤大鼠的表达和意义

目的探讨肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)在急性坏死性胰腺炎(ANP)并发急性肺损伤(ALI)发病中的意义及其可能的机制。方法将健康SD大鼠100只随机分成两组:假手术组(SO组)和模型组(ANP组)。成功制模后,各组分别在6、12、24、36、48 h采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清及肺泡灌洗液(BALF)中SP-A的浓度。同时进行肺湿/干质量比値(W/D)测定,观察胰腺和肺组织病理形态学的改变。结果 ANP组血清SP-A浓度从6 h开始明显上升,36 h达到高峰,48 h仍强烈表达,数值仍高于SO组(P<0.01)。ANP组BALF中SP-A浓度较SO组相同时间点明显下降(P<0.01)。随着胰腺损伤的逐渐加重,肺损伤程度也逐渐加重。结论血清SP-A浓度的增高及BALF中SP-A浓度减少程度与病情严重程度呈正相关。     

盐酸戊乙奎醚对急性坏死性胰腺炎肺损伤大鼠HMGBI、SP-A表达的影响

目的:观察盐酸戊乙奎醚(PHCD)对大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤高迁移率族蛋白B1(HMGBl)、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)表达的影响,探讨PHCD对急性坏死性胰腺炎肺损伤大鼠的治疗价值。方法:随机将100只SD大鼠分成模型组(急性坏死性胰腺炎组)和PHCD组。两组分别制模后随机再分为6h、12h、24h、36h、48h亚组,每组10只。采用酶联免疫吸附法测定血清HMGB1、SP-A浓度和肺泡灌洗液(BALF)中SP-A浓度。结果:PHCD组各时间点血清HMGB-1、SP-A浓度均较ANP组相同时间点明显降低(P均<0.01),同时PHCD组BALF中SP-A浓度显著增高(均P<0.01)。结论:PHCD通过抑制血清HMGB1、SP-A的表达,增加BALF中SP-A的表达,对大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤具有疗效。     

ghreIin在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用及机制

目的探讨ghrelin在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用和机制。方法 54只SD大鼠随机分为假手术（SO）组、急性坏死性胰腺炎（ANP）组和ghrelin干预组,采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导大鼠ANP模型,ghrelin干预组于模型制作前30 min和造模后3 h腹腔注射ghrelin,SO组开腹后翻动胰腺后关腹。观察各组大鼠血清淀粉酶的变化,ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,光镜观察胰腺和肺组织的病理改变,Western blot检测肺组织核因子-κB（NF-κB）蛋白的表达,酶化学法测定肺组织髓过氧化物酶（MPO）的变化。结果 ANP组大鼠胰腺和肺组织随着时间延长病变加重;ANP组血清淀粉酶、TNF-α、肺组织MPO均较SO组明显升高（均P〈0.05）,表达水平与肺病理严重程度成正相关。ghrelin干预组各检测指标均较ANP组明显降低（均P〈0.05）,胰腺及肺组织病理损伤明显减轻。结论 ghrelin可减轻大鼠ANP后的肺损伤,并对MPO和TNF-α有明显的抑制作用,其机制可能与影响了NF-κB的表达,从而干预了炎症信号传导过程有关。     

腹腔注射左旋精氨酸诱导急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤的实验研究

目的 探讨大剂量左旋精氨酸腹腔注射诱导大鼠急性坏死性胰腺炎相关性肺损伤模型。方法将48只sD大鼠随机分成对照组（c组,n=24）、急性胰腺炎组（A组,n=24）。A组用6％的左旋精氨酸（L-Arginine,L-Arg）腹腔内注射,每次1．5mg／g体重,共3次,注射间隔1h,诱导ANP和APAu模型;c组同法注射等量生理盐水。在注射完L-Arg后的第6、12和24小时三个时点分批处死大鼠,分别测定两组各时点血清淀粉酶水平,并观察各组对应各时点胰腺和肺组织病理学改变的变化。结果A组大鼠胰腺和肺组织病理损伤在各时点比C组明显加重（P〈0．01）;在肺损伤评分均呈正相关（rs=0．374,P=0．046;rs=0．452,P=0．027）。结论大剂量L-精氨酸分次腹腔内注射可成功诱导急性坏死性胰腺炎相关性肺损伤大鼠模型,ANP肺组织损伤程度与胰腺组织损伤程度密切相关。     

大承气汤对急性胰腺炎致急性肺损伤-腹内高压的作用

目的通过研究大承气汤(Dachengqi tang,DCQT)在实验性急性胰腺炎治疗腹内高压以缓解急性肺损伤的机理,初步阐释肺与大肠相表里的现代科学研究依据及科学内涵。方法将30只SD雄性大鼠随机分成:假手术模型组(sham operation,SO组),坏死性胰腺炎组(acute necrosis pancreatitis,ANP组)和大承气汤组(DCQT组),每组10只。术前检测大鼠腹内压,麻醉大鼠后胆胰管内逆行泵入5%牛磺胆酸钠溶液制备急性坏死性胰腺炎模型。术后2 h前二组灌喂生理盐水,DCQT组灌喂大承气汤1次;造模后24 h采集动脉血、胰腺组织,肺组织,计算肠推进率;取胰腺、肺组织做病理切片并分别按病理学评分标准进行评分,计算干湿重比,ELISA法检测髓过氧化物酶(MPO)。结果 DCQT组治疗后腹内压力、胰腺及肺组织病理评分、胰腺与肺组织MPO、胰腺与肺组织含水量均较ANP组降低(P<0.05)。DCQT组肠推进率、氧分压高于ANP组(P<0.05)。DCQT组存活率高于ANP组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论大承气汤能通过降低腹内压以减轻重症急性胰腺炎肺损伤程度。     

急性胰腺炎大鼠胰腺组织核因子-κB动态变化

目的: 观察急性胰腺炎大鼠胰腺组织中核因子-κB (NF-κB)的表达和血清中细胞因子的变化,探讨胰腺组织NF-κB的表达和血清细胞因子的变化关系。方法: 实验动物随机分为5组,正常对照组(Normal组)、急性水肿性胰腺炎6h组(AEP6h组)和急性坏死性胰腺炎3h组(ANP3h)、6h组(ANP6h)、12h组(ANP12h),观察各组血清淀粉酶(Amy)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量及胰腺组织NF-κB的表达。结果: 急性水肿性胰腺炎大鼠TNF-α、IL-6、胰腺组织NF-κB的表达均较正常组明显增高(P<0.01),急性坏死性胰腺炎TNF-α、IL-6及胰腺组织NF-κB表达较水肿性胰腺炎增高(P<0.05~P<0.01),6h达高峰,此后下降。结论: 胰腺组织NF-κB参与急性胰腺炎的发病并呈动态变化;胰腺组织NF-κB表达与TNF-α、IL-6含量呈正相关。     

姜黄素对重症急性胰腺炎COX-2表达的影响

目的 探讨姜黄素对急性出血坏死性胰腺炎环氧化酶-2(COX-2)表达的影响.方法 将SD大鼠随机分成3组:假手术(SO)组、急性出血坏死性胰腺炎模型组(AHNP)、姜黄素预处理(Cur)组.Cur组在造模前2 h经腹腔注射姜黄素溶液(200 mg/kg),SO组和AHNP组注射等剂量的二甲基亚砜(DMSO)溶液.AHNP组和Cur组用5%(50 g/L)牛磺黄胆酸钠0.1 mL/100 g胰胆管逆行注射建立急性出血坏死性胰腺炎模型,SO组大鼠开腹后翻动胰腺3次即关腹.3组大鼠分别于术后3、6、12 h处死大鼠,每时间点各6只大鼠,观察胰腺组织病理学改变、胰腺组织COX-2表达和血清淀粉酶的变化.结果 AHNP组胰腺组织 COX-2 表达和胰腺损伤评分进行性增加,Cur组在各时相点胰腺损伤的程度均显著减轻,COX-2 的表达水平下降(P<0.05).结论 COX-2 参与了急性胰腺炎的发生和发展,姜黄素可能通过抑制COX-2表达,发挥对急性出血坏死性胰腺炎的保护作用.     

三七皂甙对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺NF-κB活性及胰腺损伤的影响

目的探讨三七总皂甙能否抑制急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺NF-κB的活性,减轻ANP时胰腺病理损害。方法SD大鼠30只。随机分为3组每组10只：假手术模型组（SO组）,急性坏死性胰腺炎组（ANP组）,三七总皂甙预处理（PNS组）,SO组和ANP组造模前1h腹腔注射0.9%生理盐水（0.1ml/100g）,PNS组造模前1h腹腔注射50mg/ml三七总皂甙（0.1ml/100g）。5%牛磺胆酸钠大鼠胆胰管逆行注射制备大鼠急性坏死性胰腺炎模型,SO组进腹后仅翻动胰腺和十二指肠后关腹,不注入牛磺胆酸钠。各组造模后6h点处死大鼠,取胰腺组织测定湿/干重比和测其中NF-κB活性。结果ANP组造模后6h胰腺组织NF-κB阳性细胞数明显高于SO组（P〈0.01）。结论NF-κB在大鼠急性坏死性胰腺炎胰腺组织中明显激活;三七总皂甙可以在体内抑制NF-κB在胰腺组织中的激活,减轻各脏器的病理损害,可望用于治疗ANP。     

内脏神经对犬急性坏死性胰腺炎肺损伤的影响

目的 探讨腹腔双侧内脏大神经离断对犬急性坏死性胰腺炎肺损伤的影响。方法 健康雄性杂种犬24只,随机分为假手术组(sham operation,SO组,n=8), 急性坏死性胰腺炎组(acute necrotizing pancreatitis,ANP组,n=8),ANP+内脏大神经离断组(greater splanchnic nerve transection,GSNT组,n=8)。5％牛磺胆酸钠和胰蛋白酶混合液逆行胰胆管注射建立ANP模型,SO组逆行胰胆管注射液为生理盐水,GSNT组造模后行双侧内脏大神经离断。检测3组术前2h.术后12h.24h.3天.5天,7天血清中淀粉酶(AMY).白蛋白(ALB).P选择素(P-selectin).E选择素(E-selectin)水平。7天后统一处死实验犬,取组织标本行病理观察并做病理学评分。结果 术前AMY,ALB,P-selectin,E-selectin的血清含量在各组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后ANP组.GSNT组血清AMY.P-selectin.E-selectin水平,胰腺.肺病理评分均较SO组高,差异有统计学意义(P<0.05);ANP组.GSNT组血清白蛋白与SO组比较,差异有统计学意义(P<0.05);ANP组与GSNT组间AMY.ALB水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);GSNT组血清P-selectin.E-selectin水平低于ANP组,差异有统计学意义(P<0.05)。ANP组肺.胰腺病理评分与GSNT组比较,前者明显高于后者,差异有统计学意义(P<0.05)。ANP组实验中途死亡犬2只。结论 内脏大神经离断组犬急性坏死性胰腺炎肺损伤病情明显较轻,说明离断内脏大神经可减轻犬ANP时肺损伤。     

高迁移率族蛋白B1与大鼠急性胰腺炎模型病情严重程度的关系

目的 探讨高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)与大鼠急性胰腺炎模型病情严重程度关系.方法 制作大鼠重症急性胰腺炎A组、轻症急性胰腺炎B组、正常对照组C组模型各10只,于造模后12h、24 h、48 h采血,采用酶联免疫法(ELISA)检测各组大鼠模型不同时间段血清HMGB1含量的变化.结果 大鼠血清HMGB1在各时间点测量值A组高于B组高于C组,P＜0.05,具有统计学意义.结论 大鼠血清HNGB1与急性胰腺炎的病情严重程度成正相关.     

细胞凋亡在大鼠急性胰腺炎发病机制的探讨

目的：探讨胰腺腺细胞凋亡和急性胰腺炎发病机制之间的关系。方法：用Chetty法制作大鼠的ANP模型，术后动态测定对照组、ANP组及大黄素 治疗组血淀粉酶，并取胰组织作病理检查，同时用TUNEL法分析腺泡凋亡情况。结果：血清淀粉酶在0h三组间无差别；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著差异（P＜0．01）；36h治疗组与ANP组之间无显著差异（P＞0．05）；二组与对照之间有显著差异（P＜0．01）；胰腺组织变化及细胞凋亡在0h三组间无差别；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著差异（P＜0．01）；30h及36h治疗组与ANP组之间有显著差异（P＜0．01）。结论：胰腺腺细胞凋亡参与急性胰腺炎的发病过程，且与其病情严重程度呈负相关，表明细胞凋亡在AP的发生和发展过程中起着一定作用。     

丙酮酸乙酯对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜的保护作用

目的探讨丙酮酸乙酯(EP)减轻急性坏死性胰腺炎(ANP)肠黏膜损伤及其治疗肠屏障功能障碍的机制。方法逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制作ANP模型。雄性Wistar大鼠随机分成3组,假手术组、ANP组和EP治疗组。测定血浆D-乳酸、肠组织髓过氧化物酶(MPO)水平,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肠组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达,并观察肠组织形态学改变。结果ANP组血浆D-乳酸、肠组织MPO在建模后24h达高峰,48h仍维持在较高水平,EP治疗组血浆D-乳酸、肠组织MPO水平明显低于ANP组(P<0.05)。ANP组大鼠肠组织HMGB1mRNA表达水平在ANP后12h明显升高,至24h达峰,48h仍维持在高水平。EP治疗组肠组织HMGB1mRNA表达水平均明显低于ANP组(P<0.05)。结论EP能显著下调血浆D-乳酸、肠组织MPO水平并明显抑制HMGB1基因表达,改善肠黏膜屏障功能,对ANP肠黏膜损伤有明显保护作用。     

大鼠急性坏死性胰腺炎外周血中的TNFa,IL-6浓度的动态测定及意义

目的：探讨急性胰腺时外周血清TNFa，IL—6的动态变化及其意义。方法：用chetty法制作大鼠的ANP模型，术后动态测定对照组、ANP组及大黄素治疗组血淀粉酶，并取胰组织作病理检查，同时动态检测外周血清中TNFa，IL—6的情况。结果：血清淀粉酶在0h三组间无差别；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著差异(P＜0．01)；36h治疗组与ANP组之间无显著差异(P＞0．05)；二组与对照之间有显著差异(P＜0．01)；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著异(P＜0.01)；TNFa，IL-6在0h三组间无差别；24h时治疗组与ANP无统计学差别与对照组比较有明显的升高(P＜0．05)；30h及36h治疗组与ANP组之间有显著差异(P＜0．01)。结论：细胞因子参与急性胰腺炎的发病过程，又与其病情严重程度呈正相关，表明细胞因子在ANP的发生和发展过程中起着一定作用。     

炎症因子在大鼠坏死性胰腺炎肺组织中的表达

目的观察大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）核因子-κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子（TNF-a）、白介素-10（IL-10）在肺组织中的表达及厚朴酚对上述因子表达的作用。方法56只SD大鼠随机分为假手术（SO）组、ANP模型组及厚朴酚（Mag）干预组。以5%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制备大鼠ANP模型。以荧光定量PCR检测肺组织中NF-κB、TNF-a和IL-10的基因表达。结果与假手术（SO）组相比,ANP组NF-κB mRNA、TNF-a mRNA、IL-10 mRNA表达量明显升高,Mag的干预可降低NF-κB mRNA、TNF-a mRNA。结论ANP肺损伤伴有NF-κB、TNF-a等炎症因子的表达升高,Mag的干预对其有一定的保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸对急性坏死性胰腺炎大鼠趋化因子MCP-1、MIP-2表达的影响

目的 探讨趋化因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)与巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)在大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)早期发病机制中的作用,并观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对趋化因子表达的影响.方法 35只SD大鼠随机分为假手术组(SO)组,ANP 3 h、6 h、12 h组和NAC干预3 h、6 h、12 h组,每组5只.采用4%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制备ANP动物模型,NAC组在诱导ANP前0.5 h腹腔注射NAC 500 mg/kg.检测血淀粉酶、髓过氧化物酶(MPO),观察胰腺病理组织学改哪变,采用RT-PCR检测胰腺组织中MCP-1与MIP-2 mRNA的表达.结果 ANP各组血淀粉酶较高,浸润到胰腺组织的白细胞明显较多,胰腺病理损伤依次加重.SO组胰腺MCP-1 mRNA与MIP-2 mRNA表达阴性或弱表达(0.1492±0.0036、0.1593±0.0117),ANP各组MCP-1 mRNA(0.3653±0.0213、0.5890±0.0225、0.7164±0.0275)与MIP-2 mRNA(0.3871±0.0286、0.6040±0.0448、0.7692±0.0620)的表达随ANP病变的加重逐渐增强(均P＜0.01).MCP-1与MIP-2 mRNA的表达与胰腺的病理损伤成正相关r=0.76和0.82,P＜0.05).经NAC干预后,趋化因子MCP-1、MIP-2 mRNA表达下调(0.2497±0.0168、0.4457±0.0097、0.6306±0.0423,0.2436±0.0099、0.4312±0.0221、0.6302±0.0288,均 P＜0.05),白细胞浸润减少(0.63±0.03 vs 0.89±0.03,0.88±0.05 vs 1.42±0.14,1.31±0.09 vs 1.94±0.07,均P＜0.05),组织损伤得到改善(3.50±0.61 vs 5.10±0.42,5.60±0.65vs 7.50±0.50,7.50±0.79 vs 9.90±0.96,均P＜0.05).结论 ANP早期趋化因子MCP-1、MIP-2在胰腺组织中过表达,并参与白细胞的趋化作用.NAC能显著下调胰腺组织中趋化因子MCP-1、MIP-2的表达.     

实验性急性胰腺炎大鼠肺内肿瘤坏死因子αmRNA的表达及其意义

为了解急性胰腺炎（ＡＰ）时,肺组织中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）转录水平上调在肺损伤机制中的意义,作者以半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测了急性水肿性胰腺炎（ＡＥＰ）与急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）两种模型的大鼠肺组织内ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达的状况,同时观察了它与内毒素（ＥＴ）血症及肺损伤的关系。结果表明,ＡＮＰ组血ＴＮＦ－α水平（１０７．４±４９．７ｐｇ／ｍｌ）显著高于ＡＥＰ组（５５．８±     

下调血清高迁移率族蛋白1水平对急性出血坏死性胰腺炎大鼠全身毛细血管渗漏的影响

目的 观察丙酮酸乙酯(EP)对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)大鼠全身毛细血管渗漏(SCL)的影响,探讨下调血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平在AHNP治疗中的作用.方法 采用胰管逆行灌注人工胆汁的方法复制大鼠AHNP模型.随机分为正常对照组(Normal组,n=8)、假手术组(Sham组,n=8)、AHNP组(n=16)、EP组(n=16).EP组建模12 h开始使用EP治疗.建模24 h取材,检测与水分渗漏相关的肺系数、肺湿/干比、腹水量.使用伊文氏蓝(EBD)尾静脉注射,检测与蛋白渗漏相关的腹水、肺、胰腺、空肠、回肠、耳廓组织EBD含量;Western blot法检测血清中HMGB1的含量.结果 建模后24 h,EP组血清HMGB1浓度明显低于AHNP组[(87±16)ng/ml vs.(154±22)ng/ml,P＜0.05].EP组大鼠腹水量、肺系数、肺湿/干比明显低于AHNP组,均P＜0.05.EP组大鼠胰腺、空肠、回肠和耳廓组织EBD含量明显低于AHNP组.结论 下调血清HMGB1水平可有效减轻AHNP大鼠SCL的程度.