响应曲面法优选毛头牛蒡子中总木脂素类成分的提取工艺研究

目的:采用响应曲面法对毛头牛蒡子中总木脂素的提取工艺进行优化。方法:在单因素试验的基础上,以加醇倍量、乙醇浓度和提取时间3个因素为自变量,以总木脂素含量、牛蒡苷含量、浸膏得率的综合评分为因变量,运用响应曲面法进行优化。结果:总木脂素的最佳提取工艺为加醇倍量为14.7倍,乙醇浓度为58%,提取2次,每次62 min。结论:响应曲面法优选毛头牛蒡子总木脂素的提取工艺方法简单、稳定、可行。     

大孔吸附树脂分离纯化毛头牛蒡子多糖的工艺研究

目的研究大孔吸附树脂分离纯化毛头牛蒡子中多糖的方法。方法比较4种不同型号大孔吸附树脂AB-8、HPD-300、HPD-450、HPD-600型对毛头牛蒡子多糖的纯化效果;采用分光光度法测定毛头牛蒡子多糖的含量,用静态吸附-解析方法从4种大孔吸附树脂中筛选出适宜的树脂,并优化纯化条件。结果 AB-8型大孔吸附树脂对毛头牛蒡子提取液中多糖的纯化效果最佳,最佳工艺条件为:上样液浓度2.8mg/ml;流速2BV/h;最佳洗脱溶剂为50%乙醇,洗脱溶剂用量为2BV。结论 AB-8型大孔吸附树脂能较好的洗脱分离毛头牛蒡子多糖,为毛头牛蒡子的综合开发提供新的思路与方法。     

牛蒡子和毛头牛蒡子体外抑制Hela细胞增殖的比较研究

目的研究牛蒡子和毛头牛蒡子提取物对宫颈癌Hela细胞体外增值抑制的比较研究。方法对牛蒡子和毛头牛蒡子进行提取,得到相应提取物,澄清后进行细胞体外给药实验,采用CCK-8法测定不同浓度不同时间下牛蒡子和毛头牛蒡子提取物作用后Hela细胞的存活率。结果随着药物浓度的增加,发现Hela细胞抑制率呈明显上升趋势。结论牛蒡子和毛头牛蒡子对宫颈癌Hela细胞的增殖有明显抑制作用。     

牛蒡子及其伪品的ITS序列分子鉴定研究

目的:研究牛蒡子与伪品之间的DNA分子鉴别方法.方法:采集全国26个不同产地的牛蒡子药材26份和4种伪品毛头牛蒡、大翅蓟、紫穗槐、水飞蓟10份样品进行总DNA的提取,PCR扩增,对扩增产物克隆并测序,计算机软件统计分 析.结果:测得了36份样品的ITS序列全长,分别为牛蒡子641 bp,毛头牛蒡为641 bp;大翅蓟为639 bp;水飞蓟为630～631bp;紫穗槐为625～626 bp,在GenBank中注册,获得登记号.牛蒡子样品间的相似度大于99%,牛蒡子与大翅蓟、水飞蓟、紫穗槐间的相似度低于95%,毛头牛蒡与牛蒡子的相似度为98.29%～99.22%.通过以ITS序列重建系统树进行的聚类分析可以将牛蒡子与伪品有效的区分开.结论:根据ITS序列,能够有效的区分牛蒡子与伪品.     

毛头牛蒡子抗氧化和降血糖的有效部位筛选研究

目的:筛选出毛头牛蒡子中抗氧化和降血糖的有效部位。方法:将毛头牛蒡子粗多糖提取物经AB-8大孔树脂脱色纯化,依次采用水和20%、40%、60%乙醇水进行洗脱,以DPPH自由基清除活性、还原力的测定、羟基自由基清除活性和超氧阴离子清除活性4项指标研究不同洗脱部位的抗氧化活性,采用体外α-葡萄糖苷酶活性测定毛头牛蒡子提取物不同部位的降血糖活性。结果:毛头牛蒡子20%乙醇水洗脱部位的抗氧化活性和降血糖活性均强于其他部位。结论:毛头牛蒡子抗氧化和降血糖的活性部位应为20%乙醇水洗脱部位。     

牛蒡子中牛蒡苷闪式提取的工艺研究

目的:优选牛蒡子中牛蒡苷的闪式提取工艺。方法:以牛蒡苷的含量为考察指标,采用正交试验设计,对牛蒡子闪式提取法的影响因素进行考察。结果:牛蒡子闪式提取的最优工艺是加10倍量60%乙醇闪式提取1.5 min。结论:闪式提取法操作简便、高效经济、提取率较高。     

牛蒡子中牛蒡子苷的工业纯化工艺研究

目的:研究从牛蒡子中提取纯化高纯度牛蒡子苷的工业纯化工艺条件.方法:通过工艺研究,考察提取条件对牛蒡子苷提取量的影响,建立大孔树脂梯度洗脱法精制牛蒡子苷提取物的优化工艺,结合DDW-16脱色树脂和重结晶技术,制备牛蒡子苷单体.结果:建立了牛蒡子苷单体的制备工艺,三批次中试的牛蒡子苷平均得率1.4%,平均纯度93.6%....     

星点设计-效应面法优化牛蒡子中牛蒡子苷和牛蒡子苷元提取工艺

目的：优化牛蒡子中双指标成分最佳提取工艺。方法：采用星点设计-效应面法,在3个主要因素作用下,以牛蒡子苷及牛蒡子苷元提取率为评估指标,经过多元线性回归和二项式拟合,利用岭嵴分析法优化牛蒡子苷及其苷元提取工艺。结果：确定牛蒡子苷及牛蒡子苷元最佳提取工艺为：70%乙醇,24倍量,超声提取15 min。结论：上述工艺能够大量提取牛蒡子苷及牛蒡子苷元,为制备牛蒡子苷及其苷元提供试验依据,也为充分开发利用牛蒡资源提供参考。     

动态优化方法对维C银翘片中牛蒡子提取时间的优化

目的:采用动态优化方法优选维C银翘片中牛蒡子的提取工艺。方法:采用HPLC测定牛蒡子苷含量,检测波长280 nm,流动相乙腈-水(20∶80)。通过比较动态优化工艺与原提取工艺对维C银翘片提取率、指标成分含量和指纹图谱的相似度,评价动态优化方法应用于维C银翘片中牛蒡子提取工艺优化的可行性。结果:动态优化工艺与原提取工艺所得提取物基本一致。动态优化工艺为加8倍量60%乙醇回流提取2次,提取时间分别为140,60 min;提取时间较原工艺节约58%,耗电量节约53%。结论:动态优化方法可运用于维C银翘片中牛蒡子提取工艺的优化,该工艺能减少提取时间、降低能耗,具有明显的经济效益。     

基于高通量测序技术对牛蒡子药材与伪品药材混合粉末鉴定研究

牛蒡子是我国传统中药,主要伪品为毛头牛蒡、水飞蓟、云木香、大翅蓟、紫穗槐等果实。传统鉴定方法或分子条形码技术可以对牛蒡子和其伪品进行鉴定,但是对牛蒡子与其伪品混合粉末的鉴定较困难。该文利用高通量测序技术对牛蒡子以及其5种伪品混合粉末ITS2序列进行测序,对混合粉末物种进行鉴定,为牛蒡子药材混合粉末的鉴定提供新思路。对药材混合粉末中的总DNA进行提取,并对总DNA中ITS2片段进行扩增,利用Illumina MiSeq平台对群落DNA片段进行双端(paired-end)测序,利用FLASH,QIIME以及GraPhlAn等软件对序列进行整理分析。结果显示:混合样品中共得到高质量的ITS2序列39 910条,其中,样品中的物种ITS2序列共34 935。进一步的进化分析表明样品中含牛蒡子、毛头牛蒡、水飞蓟、大翅蓟、云木香和紫穗槐。利用高通量测序技术,以ITS2序列作为DNA条形码,可以检测出混合粉末中含有牛蒡子及其伪品,为牛蒡子药材质量控制、安全用药以及中药混合粉末的鉴定提供参考。     

中国牛蒡属药用植物果实脂肪油类成分GC-MS分析

目的:分析比较中国牛蒡属药用植物果实脂肪油的化学成分,为其进一步合理应用提供参考。方法:采用溶剂提取法提取药材中的脂肪油,甲酯化后采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对化学成分进行分析鉴定,以面积归一化法计算求得各组分的相对百分含量。结果:从牛蒡果实脂肪油中得到20个色谱峰,鉴定出10个,从毛头牛蒡果实脂肪油中得到8个色谱峰,鉴定出6个。结论:中国牛蒡属药用植物果实中含有大量脂肪油,已鉴定两者共有6个成分,亚油酸的相对含量都大于60%,具有极大的潜在开发利用价值。     

牛蒡与毛头牛蒡染色体核型比较分析

 目的 对药用植物牛蒡和毛头牛蒡进行染色体核型比较研究。方法 采用常规制片方法,结合显微摄影对2种药用植物的染色体进行检测分析。结果 牛蒡与毛头牛蒡的染色体数目相同均为2n=36,核型均为“2B”型。牛蒡染色体相对长度组成为2n=36=6L+6M₂+16M₁+8S,核型公式是K（2n）= 2X=36=18m+18sm。毛头牛蒡染色体相对长度组成为2n=36=6L+4M₂+20M₁+6S,核型公式是K（2n）= 2X=36=20m+16sm。结论 牛蒡与毛头牛蒡染色体数目清晰,核型明确,为2种药用植物的细胞学研究提供了数据。     

野葛与粉葛总黄酮提取方法的比较

目的：野葛与粉葛总黄酮提取方法的比较。方法：分别采用传统回流提取法、超声提取法、微波辅助提取法对中药野葛和粉葛中总黄酮进行提取;以葛根素为对照品,采用紫外分光光度法测定提取物中总黄酮的含量;以总黄酮的含量为考察指标,优选出适宜的提取方法。结果：3种提取方法中,野葛超声提取法总黄酮含量最高,粉葛微波辅助提取法总黄酮含量最高,但回流提取法和超声提取法提取野葛与粉葛总黄酮时没有显著性差异。结论：提取野葛与粉葛黄酮时应采用不同的提取方法。     

应用碱溶酸沉法制备牛蒡子苷元的研究

目的:筛选一种简单制备牛蒡子苷元的方法。方法:采用碱溶酸沉法对牛蒡子原药材粗粉提取,提取物经硅胶柱色谱分离后,再利用氧化铝、氧化镁、活性炭进行纯化处理。结果:利用此方法从2kg牛蒡子原药材中制备得到26g牛蒡子苷元,其纯度达到97%。结论:采用碱溶酸沉法制备牛蒡子苷元,该方法简便可行,制备得到的牛蒡子苷元纯度较高,是制备牛蒡子苷元的一种较为理想的方法。     

夜交藤总黄酮提取物工艺研究

目的:对夜交藤总黄酮提取物工艺进行研究,以期建立富集总黄酮的工艺方法。方法:利用大孔树脂对夜交藤黄酮类成分富集纯化。结果HPD-600树脂装柱,上样浓度为17mg·mL-1,上样容量为34mg·g-1,先0.1mol/L NaOH和20%乙醇混合溶液洗脱除杂,后用0.1mol/L NaOH和85%乙醇混合溶液,洗脱流速1mL·min-1,洗脱4倍柱体积,最后收集洗脱液减压浓缩至干得提取物。此工艺可使其总黄酮纯度可达68.34%,收率可达48.64%,结论利用该工艺可以富集纯化夜交藤总黄酮成分,该工艺稳定、具有可重复性。     

超声波提取嘉菊总黄酮的工艺研究

目的对超声波提取嘉菊总黄酮的工艺条件及参数进行优化。方法采用L9(34)正交设计,以嘉菊总黄酮的含量为考察指标,考察溶剂用量、溶剂浓度、超声时间及提取次数对提取率的影响。结果最佳提取工艺:10倍70%乙醇、超声4次,30 min/次。结论采用超声波提取嘉菊总黄酮工艺简易,可行,对进一步的工艺开发有较好的参考价值。     

正交法优选盐制小茴香工艺

[目的]优选小茴香的最佳炮制工艺。[方法]以反式茴香醚和水溶性浸出物的含量为评价指标,选择加盐量、炒制度及炒制间为考察因素,采用正交设计L9（3^4）,优选小茴香的最佳炮制工艺。[结果]小茴香的最佳炮制工艺为：小茴香每20g加15mL盐水（含0．4g盐）,闷润1．5h,在110～120℃下炒4min。[结论]盐制小茴香的最佳炮制工艺合理可行。     

桂枝甘草汤方药半仿生提取醇沉法最佳醇沉浓度的优选

目的优选桂枝甘草汤方药半仿生提取醇沉（SBAE）法最佳醇沉浓度。方法用优选的最佳半仿生提取工艺,最佳组合方式混煎制备提取液,对提取液分别作甘草次酸、肉桂酸、总黄酮、干浸膏的含量测定,优选最佳醇沉浓度。结果醇沉浓度为70％的SBAE液综合评价,值明显高于其他醇沉浓度的SBAE液。结论桂枝甘草汤SBAE法的醇沉浓度以70％为佳。     

大孔树脂纯化显齿蛇葡萄黄酮的工艺研究

采用分光光度法测黄酮的含量,筛选大孔树脂纯化显齿蛇葡萄黄酮的最佳条件.实验结果表明：HPD100树脂的吸附效果最好,当黄酮浓度为137.8 ug/mL、上柱体积为5 mL、吸附30 min,用95％乙醇、以1.5 mL/min流速洗脱时,吸附率为85.44％,洗脱率为94.92％,回收率为95.66％,样品的黄酮质量分数从2.76％纯化至81.1％.实验证明本工艺合理、可行,适合工业化生产.