免疫相关性血细胞减少患者骨髓造血细胞岛的免疫损伤研究

目的探讨免疫相关性血细胞减少(immuno-related hematocytopenia,IRH)患者骨髓造血细胞岛(hematopoietic islands,HI)对病变造血细胞破坏的免疫机制。方法 ELISA法检测患者血清IL-12和IL-17水平,观察其体内炎性因子的含量,免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,观察其骨髓HI中免疫细胞Fcγ受体Ⅱ(Fcγrecepter Ⅱ,FcγRⅡ)、甘露糖受体(mannose receptor,MR)、IL-12、IL-17A、IL-17RA和ICAM-1表达,分析HI的相关病理作用。结果 37例患者血清IL-12和IL-17的水平分别为(318.59±20.13)ng/L和(45.81±8.27)ng/L,显著高于对照组[(94.05±3.26)ng/L和(20.03±1.14)ng/L];经治疗后均下降近正常,较治疗前差异显著,P<0.01。患者骨髓中HI主要为抗体依赖性细胞毒(antibody dependent cell cytotoxicity,ADCC)型、巨噬细胞型(Mφ)和抗原提呈(antigen presenting,AP)型3种,HI中的免疫细胞高表达FcγRⅡ、MR,呈分泌状表达IL-12、IL-17A、IL-17RA和ICAM-1,在上述免疫分子的介导下,发挥体液免疫和细胞免疫及炎性损伤作用,破坏病变的造血细胞。结论 IRH患者骨髓中不同造血细胞岛是活化的免疫细胞破坏病变血细胞的不同免疫形式,是造血细胞在骨髓中原位破坏的重要场所。     

Th17细胞在免疫相关性全血细胞减少症中的免疫调节作用

Th17细胞是以产IL-17 A、 IL-17 F为主的CD4+T细胞,并因此而得名。研究表明Th17细胞分化、转录及相关细胞因子等在机体免疫防御、免疫稳定维护中发挥重要作用。免疫相关性全血细胞减少症( immuno-related pancytopenia, IRP)涉及多个临床学科,造血早期自身抗体及免疫调节功能可能是其症结所在。研究Th17细胞与IRP发生之间的相关性,对临床诊断、治疗靶点具有重要意义。近年来,大量的研究结果表明, Th17细胞与一些免疫性疾病溃疡性结肠炎、急性冠状动脉综合征、类风湿性关节炎、骨髓异常综合征等有关。因此,文章就Th17细胞在免疫性疾病IRP中的调节作用进行重点综述。     

骨髓造血干/祖细胞自身抗体与免疫相关性全血细胞减少

背景：免疫相关性全血细胞减少涉及多个临床学科,近年来受到高度重视。骨髓造血早期细胞自身抗体及免疫调节功能可能是其症结所在。 目的：分析骨髓造血早期(干/祖)细胞自身抗体在免疫相关性全血细胞减少症发病机制中的作用及其进展。 方法：由作者电子检索1992年3月至2012年3月PubMed、万方医学网以及CHKD数据库中关于骨髓造血细胞相关抗体的文章,中文检索词为“免疫相关性全血细胞减少症、骨髓造血细胞、自身抗体、辅助性T细胞17”,英文检索词为“Immunorelated pancytopenia,Bone marrow hematopoietic cells,Autoantibody,Th17 cells”。排除重复性研究共保留30篇进行总结分析。 结果与结论：骨髓造血细胞自身抗体是由于T淋巴细胞调控失衡,导致B淋巴细胞及其亚群数量和功能异常而产生的一类抗体。它破坏或抑制骨髓早期造血细胞成熟分化,最终引起外周血细胞减少而致病。T辅助细胞17细胞数量增多、功能亢进可能与免疫相关性全血细胞减少症患者自身抗体产生呈一定相关性,是免疫相关性全血细胞减少症发病的重要因素。     

IL-17等炎性因子在风湿免疫相关性血细胞减少骨髓细胞中的分泌状态及其临床意义

目的:观察风湿免疫相关性血细胞减少(Rheumatism immune-related hematocytopenia,RIRH)患者骨髓免疫细胞炎性因子分泌状态,探讨其对骨髓造血细胞损伤的病理作用及临床意义.方法:①ELISA法检测66例RIRH患者血清IL-5、IL-10、IL-12、IL-17和IFN-γ浓度,对照组30例采自健康查体血清;免疫化学法观察骨髓免疫细胞HLA-DR表达;②免疫荧光法观察骨髓细胞抗人球蛋白(IgG)抗体、FcγⅡ受体(FcγⅡR)、甘露糖受体(MR)、ICAM-1、IL-12、IL-17A与IL-17RA表达;30例缺铁性贫血患者骨髓作为疾病对照;③随机抽取32例血小板＞50×109 L-1无出血倾向患者,常规治疗同时联合复方丹参促进炎性因子代谢,与30例不联合复方丹参患者对照治疗效果.结果:①66例患者血清IL-5、IL-1O、IL-12、IL-17和IFN-γ浓度分别为(126.04±7.66) ng/L,(316.23 +25.163) ng/L,(328.43±27.01) ng/L,(48.17±4.22) ng/L和(40.28±3.69) ng/L,较之对照组(33.16 ±2.17) ng/L,(176.25±10.69) ng/L,(94.05±3.26) ng/L,(20.03±1.14) ng/L和(8.25 ±2.01)ng/L显著升高;②骨髓中活化的组织嗜碱细胞、嗜酸性粒细胞(EOS)、树突状细胞和巨噬细胞(Mp)等免疫细胞高表达HLA-DR、FcγⅡR、MR、ICAM-1、IL-12、IL-17A和IL-17RA;③32例IRHS患者联合复方丹参组经治疗2周后,血清IL-5和IL-17含量较之对照组显著降低,血象恢复时间较之对照组提前1周.结论:RIRH患者骨髓中多种免疫细胞活化,表达和分泌多种免疫分子,介导ADCC效应、细胞免疫功能和炎性反应,是损伤病变的造血细胞的重要免疫机制.抗感染、抑制免疫联合复方丹参活血化瘀,能改善骨髓造血微环境,促进造血恢复.     

骨髓细胞学联合WBC、 NAP在全血细胞减少性疾病诊断中的意义

目的 骨髓细胞学联合WBC、NAP在全血细胞减少性疾病诊断中的作用和意义.方法 选取2015年1月至2017年6月本院收治的80例全血细胞减少症患者,分为非造血系统疾病组(n=40)和造血系统疾病组(n=40),给予全部患者行骨髓细胞形态学和外周血常规的检查,同时选取40例健康体检者行外周血常规的检查.结果 与对照组相比,非造血系统疾病组和造血系统疾病组患者血小板(PLT)、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)和血红蛋白(Hb)水平明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).与非造血系统疾病组相比,造血系统疾病组患者血小板(PLT)、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)和血红蛋白(Hb)水平明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,非造血系统疾病组脾功能亢进患者和骨髓增生异常综合征患者NAP积分明显降低,多发性骨髓瘤NAP积分明显升高;造血系统疾病组再生障碍性贫血患者和急性白血病患者NAP积分明显升高,巨幼红细胞性贫血患者NAP积分明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 骨髓细胞学联合外周血常规WBC、NAP检查可作为临床诊断全血细胞减少性疾病的重要指标,具有较高的临床应用价值,值得推广应用.     

造血生长因子促进RV介导LacZ-NeoR基因在人骨髓造血细胞中转染的机制

目的：本文探索了不同组合的造血生长因子ＳＣＦ、ＩＬ３及ＩＬ６对逆转录病毒（ＲＶ）介导的ＬａｃＺ－ＮｅｏＲ双标志基因转染人骨髓造血细胞转染效率、表达水平的影响及其相关机理。方法：采用ＲＶ转染人骨髓非粘附造血细胞（ＮＡＢＭＣ）及经ＳＣＦ、ＩＬ３及ＩＬ６不同组合预激４８ｈ后的ＮＡＢＭＣ。经荧光素二－β－Ｄ－半乳糖呋喃苷脂（ＦＤＧ）标记的半乳糖苷酶、Ｇ４１８ＲＣＦＵ－ＧＭ及ＰＣＲ／Ｓｏｕｒｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测ＮｅｏＲ和ＬａｃＺ基因的表达。结果：早期造血生长因子（ＨＧＦｓ）的预激明显改善了ＲＶ介导的ＬａｃＺ－ＮｅｏＲ基因在人骨髓造血细胞中的转染效率与表达水平,ＳＣＦ＋ＩＬ３＋ＩＬ６＞ＳＣＦ＋ＩＬ３＞ＩＬ３＋ＩＬ６＞ＳＣＦ＋ＩＬ６。氚标记脱氧胸苷（３Ｈ－ＴｄＲ）自杀及５－溴脱氧尿苷－碘化丙啶（ＢｒｄＵ－ＰＩ）双标流式细胞仪（ＦＣＭ）检测显示,ＨＧＦｓ预激后人骨髓造血细胞及ＣＦＵ－ＧＭ的Ｓ期比例显著提高。结论：ＳＣＦ＋ＩＬ３＋ＩＬ６的联合预激可显著改善ＲＶ介导的外源基因在人骨髓造血细胞中的转染效率与表达水平,这可能与ＨＧＦｓ预激后明显提高人骨髓造血细胞及ＣＦＵ－ＧＭ的Ｓ期比例密切相关     

阿片样物质在免疫造血系统中的作用

阿片样物质可以影响正常免疫造血细胞和恶性细胞的增殖,其调节机制包括细胞因子的分泌、触发第二信使分子及凋亡的连锁反应,而且具有抗HIV-I感染的作用。     

滤泡辅助性T细胞在免疫相关性血液病中的研究进展

T细胞亚群异常是导致免疫相关性血液病发病的重要因素,其发病机制与Thl／Th2、Thl7细胞、调节性T细胞（Treg）等辅助性T细胞异常有关。滤泡辅助性T细胞（Tfh）作为新近发现的辅助性T细胞具有辅助B细胞产生抗体的作用,其产生、分化和功能均不同于以往的Thl、Th2和Thl7等CD4＋T细胞。Tfh细胞及其相关分子的数量和／或功能异常在免疫相关性血液病的发病中发挥重要作用,有望成为其新的治疗靶点。     

MHC在免疫识别作用中的研究进展

免疫识别是一个非常复杂的分子间相互作用过程。本文从MHC分子变异特点、结构柔性、超抗原作用和非MHC限制性T效应细胞等几个方面对免疫识别的进展进行了综述。     

关于骨髓像在患儿噬血细胞综合征中的临床研究

小儿噬血细胞综合征（HPS）,临床少见,属于组织细胞疾病,具有组织细胞异常增生和吞噬特点,选择我院2007年3月至2009年3月诊治的噬血细胞综合征10例,目的探讨其发病的骨髓像特点。     

细胞因子短期扩增对造血干/祖细胞黏附和迁移能力的影响

目的：探讨干细胞因子（SCF）+白细胞介素-6（IL-6）短期扩增对CD34+造血干/祖细胞黏附和迁移能力的影响。方法:用密度剃度离心的方法分离脐血CD34+细胞，经SCF和IL-6孵育48 h，用CCK-8方法检测CD34+细胞增殖能力；用流式细胞仪检测处理前后的CD49d（VLA-4）、CD11a（LFA-1）、CD62L（L-selectin）及CD184（CXCR4）的表达。用纤连蛋白（FN）包被96孔板，检测经或未经因子扩增的CD34+细胞的黏附能力。扩增的CD34+细胞悬浮于transwell培养板的上层，下层添加基质细胞衍生因子（SDF-1），流式细胞仪检测迁移细胞数，计算迁移率。结果:经SCF+IL-6处理48h后CD34+细胞扩增近3倍；表达CD49d、CD11a、CD62L及CD184的CD34+细胞的百分数分别由原来的26.34%±5.37%、17.63%±4.57%、46.38%±6.61%和9.58%±1.56%增加到65.67%±8.72%、56.67%±6.34%、84.76%±9.57%和19.32%±3.64%（P<0.01）。扩增后的CD34+细胞对FN的黏附能力及在SDF-1诱导下的迁移作用都显著增强（P<0.01）。结论:SCF+IL-6短期扩增CD34+ 造血干/祖细胞显著增加细胞的黏附能力，增加SDF-1诱导的迁移作用，可能是SCF+IL-6促进归巢的主要机制之一。     

基质细胞与造血干细胞移植后的造血重建

造血干细胞移植作为造血损伤修复及血液病治疗的主要手段已日益受到重视。受体的造血系统重建取决于两个条件：一是造血干细胞的质量和数量,二是造血微环境的质量。１９７７年,Ｄｅｘｔｅｒ用小鼠骨髓细胞进行长期培养,发现造血细胞只有附着于一种被称为基质细胞的集落上,才能增殖。而后 Ｍａｕｃｈ等［１］继而在人骨髓细胞长期培养的实验中证实了这一点。可以认为造血干细胞在分化增殖需要有一个特殊的环境,即造血微环境。基质细胞是造血微环境的主要成分,具有支持造血的作用。 一、基质细胞 造血微环境（ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉ…     

Multi-locus analysis of HLA class II genes in DR2-positive IDDM haplotypes in Finland

Abstract: In this study we characterized the haplotypes found in IDDM patients that normally confer resistance to the disease in order to localize the polymorphisms relevant for the protection. We studied 15 DR2-positive subjects with IDDM for their DRB1, DRB5 and DQB1 genes using RFLP, polymerase chain reaction (PCR), oligonucleotide typing, and in some specific cases direct sequencing after allele-specific PCR. In addition we analyzed 39 DR2-positive, IDDM non-associated haplotypes representing those haplotypes that are not inherited to probands and hence are present only in healthy family members. The frequency of the DRB1*1501-DRB5*0101-DQB1*0602 haplotype was slightly decreased among diabetic patients (80% vs. 92%). In addition, two unconventional haplotypes DRB1*1501-DRB5*0101-DQB1*05031 and DRB1*1501-DRB5*0101-DQB1*0502 were found in patients with IDDM while all the control ones were conventional. The sequencing of the DQB1*0602 allele present in IDDM haplotypes showed no differences when compared to the controls. These results support the primary but not absolute role of DQ in the protection against IDDM. An additional role of factors centromeric to DQB1 gene was suggested by findings based on the biallelic TaqI RFLP polymorphism of the DQA2 gene. All DR2-DQB1*0602 IDDM haplotypes were associated with the 2.1-kb fragment while in the control group the 2.1-kb and 1.9-kb fragments were evenly distributed.     

造血干细胞体外扩增影响因素的研究进展

造血干细胞的体外扩增是在模拟体内造血系统的基础上,通过添加造血生长因子和其它有利于扩增的成分,来实现HSCs体外的生长和扩增.近年来,随着对造血干细胞生物学特性研究的不断深入,对HSCs体外扩增影响因素的研究取得了较大进展.就HSCs体外扩增影响因素的进展作一综述.     

脐血造血干/祖细胞移植SCID小鼠的实验研究

目的 :检测扩增后脐血造血干 祖细胞的体内移植能力和造血活性 ,建立脐血细胞体外扩增优化方案和体内移植的SCID小鼠模型。方法 :采用无基质接触的液体悬浮培养方法扩增脐血CD34 细胞 ,将扩增前后的细胞移植给预先经过亚致死量辐照的SCID小鼠 ,4w后通过免疫荧光标记、PCR等检测存活小鼠体内的人源细胞。结果 :连续培养一定时间后 ,FL TPO SCF IL 6组脐血细胞得到持续扩增 ,并能维持一定比例的CD34 细胞 ;SCF IL 3 IL 6 GM CSF EPO组在第 2周时集落形成数已降低 ,第 4周时集落形成的细胞、CD34 细胞已基本检测不到。移植至少 4w后 ,在存活小鼠体内检测到人CD4 5 细胞和Alu基因。结论 :因子组合FL TPO CSF IL 6可以有效扩增脐血CD34 细胞 ,而且扩增后的细胞具有较高的移植效率和造血活性     

脐带血清对造血细胞的增殖刺激作用

目的：探讨脐带血清(CBS)对骨髓造血细胞的效应。方法：采用骨髓粒单系祖细胞、混合细胞、卵石造血区、长期培养超始细胞培养法，在培养体系中加入CBS或/和细胞因子（CK），根据培养集落的形成量，推算CBS中CK的含量。结果：CBS中含有能直接刺激骨髓造血细胞形成的CK，其中约含GM-CSF65.6μg/L，IL-32.9μg/L，有较高的SCF、IL-6等活性。结论：CBS内含有的造血刺激活性，可支持造血细胞体外生长、扩增，与CK比，有一定可比性及协同作用，具有一定应用前景。     

Detection of a TLR2 agonist by hematopoietic stem and progenitor cells impacts the function of the macrophages they produce

Several groups have shown that detection of microbial components by TLRs on hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) instructs myeloid cell generation, raising interest in the possibility of targeting TLRs on HSPCs to boost myelopoiesis. However, although “TLR‐derived” cells exhibit myeloid cell characteristics (phagocytosis, cytokine production, antigen presentation), it is not clear whether they are functionally equivalent to macrophages derived in the absence of TLR activation. Our in vitro and in vivo studies show that macrophages derived from mouse and human HSPC subsets (including stem cells) exposed to a TLR2 agonist prior to or during macrophage differentiation produce lower levels of inflammatory cytokines (TNF‐α, IL‐6, and IL‐1β) and reactive oxygen species. This is in contrast to prior exposure of differentiated macrophages to the TLR2 agonist (“tolerance”), which suppresses inflammatory cytokine production, but elevates reactive oxygen species. Soluble factors produced following exposure of HSPCs to a TLR2 agonist can also act in a paracrine manner to influence the function of macrophages derived from unexposed HSPCs. Our data demonstrate that macrophage function can be influenced by TLR signaling in the HSPCs from which they are derived, and that this may impact the clinical utility of targeting TLRs on HSPCs to boost myelopoiesis.     

微重力影响造血干/祖细胞生物学特性及其机制研究进展

造血干/祖细胞具有自我更新、增殖及多向分化的功能,从而使机体维持正常的造血.机体在微重力环境下会出现外周血细胞数量和功能的改变,其中有多方面的原因,而在微重力环境下造血干/祖细胞生物学特性的改变是这一改变的主要因素.对微重力如何影响造血干/祖细胞的迁移、增殖及分化等生物学特性进行了综合评述.     

The regulatory role of stromal microenvironments in fetal hematopoietic ontogeny

Fetal hematopoietic development occurs through the successive expansion and differentiation of hematopoietic stem cells in distinct anatomic sites. The temporal pattern of fetal hematopoietic ontogeny suggests a coordinated developmental sequence whereby the preceding organ sustains the basic, immediate hematopoietic needs of the embryo allowing time for the development of niches within the subsequent organ with more complex supportive functions. We examine the hypothesis that there is a period of stromal genesis and circulating mesenchymal precursor cells, which gives rise to specialized niches within each of the definitive fetal hematopoietic organs, and these niches regulate hematopoietic stem cells fate determination. This article reviews fetal hematopoietic and stromal development and the current understanding of the development, composition, and regulation of the fetal stem cell niche.