实时荧光定量PCR检测血清miR-375表达及临床应用

目的建立ploy(A)聚合酶加尾的SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清miR-375,并进行临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-375ploy(A)聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR GreenⅠ实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,绝对定量血清中miR-375的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-375表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在103~106 copy/μL范围内有良好的线性关系(r2=0.997),并且检测重复性好。糖尿病患者血清中miR-375表达水平明显高于健康体检者,差异有统计学意义(P0.05)。结论所建立的ploy(A)聚合酶加尾SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR能敏感、特异地检测血清中miR-375的表达水平,为下一步临床应用研究奠定了方法学基础。     

实时荧光定量PCR检测血清miR-7方法的建立及临床初步应用

目的建立ploy(A)聚合酶加尾的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测血清miR-7,并作临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-7ploy(A)聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR Green Ⅰ实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,绝对定量血清中miR-7的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-7表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在10~3copies/uL至10~6copies/uL范围内有良好的线性关系(r~2=0.995),并且检测重复性好。糖尿病患者血清中miR-7表达水平明显高于健康体检者(P0.05)。结论所建立的ploy(A)聚合酶加尾SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法能敏感、特异地检测血清中miR-7的表达水平,为下一步临床应用的研究奠定了方法学基础。     

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测宫颈癌血清中miR-21的表达

摘要：目的：建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法检测宫颈疾病患者血清中miR-21的表达水平,探讨miR-21在宫颈癌临床监测中的意义。 方法：设计miR-21、U6茎环逆转录引物和PCR扩增引物,以U6为内参,用实时荧光定量PCR检测32例不同宫颈疾病患者血清中miR-21表达水平。 结果：建立的实时荧光定量PCR法能特异地检测血清中的miR-21扩增信号,熔解曲线单一,产物特异。宫颈癌患者血清中miR-21水平明显高于子宫肌瘤、宫颈炎等其他良性宫颈疾病（P<0.05）,而宫颈癌患者手术切除后血清中miR-21水平明显下降（P<0.05）。 结论：SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR是一种快速简便、敏感性高、特异性好的检测方法,对宫颈癌早期诊断、分子分期和预后判断有很好的应用前景。     

poly(A)加尾的实时荧光定量PCR检测血清miR-124a表达及临床初步应用

目的建立ploy(A)聚合酶加尾的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法检测血清微小RNA(miR)-124a,并作临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-124aploy(A)聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR Green I实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,定量血清中miR-124a的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-124a表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在103~106 copies/uL范围内有良好的线性关系(r2=0.999),并且检测重复性好。糖尿病患者血清中miR-124a表达水平明显高于健康体检者(P0.05)。结论所建立的ploy(A)聚合酶加尾SYBR Green I实时荧光定量PCR方法能敏感、特异地检测血清中miR-124a的表达水平,为下一步临床应用的研究奠定了方法学基础。     

血清标本检测miR-29a实时荧光定量PCR方法的建立及临床初步应用

目的建立ploy(A)聚合酶加尾的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法检测血清miR-29a,并作临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-29a ploy(A)聚合酶加尾逆转录获得c DNA,进行SYBR Green I实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,绝对定量血清中miR-29a的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-29a表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在10~3copies/μl至10~6copies/μl范围内有良好的线性关系(r~2=0.991),并且检测重复性好。糖尿病患者血清中miR-29a表达水平明显高于健康体检者(P0.05)。结论所建立的ploy(A)聚合酶加尾SYBR Green I实时荧光定量PCR方法能敏感、特异地检测血清中miR-29a的表达水平,为下一步临床应用的研究奠定了方法学基础。     

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测类风湿关节炎患者血清miR-146a的表达及意义

目的用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法检测类风湿关节炎(RA)患者血清miR-146a的表达水平,探讨其在RA诊断中的意义。方法以U6为内参照,用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测RA患者48例(活动期30例、缓解期18例)、骨性关节炎(OA)患者22例和体检健康者25例血清miR-146a的表达水平,并进行ROC曲线分析;对各组进行红细胞沉降率(ESR)检测。结果 SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测结果表明,活动期RA患者血清miR-146a水平为(2.42±0.75),显著高于缓解期RA患者(1.66±0.29)、OA患者(1.12±0.43)和体检健康者(1.01±0.34),差异均有统计学意义(P均0.05);miR-146a诊断活动期RA的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.914(95%CI:0.872~0.926);以1.96为cut off值,敏感性为95.0%、特异性为87.5%、准确性为91.9%。活动期RA组ESR为(37.5±5.2)mm/h,缓解期RA组为(14.4±4.7)mm/h,OA组为(11.6±5.1)mm/h,健康对照组为(9.6±3.9)mm/h,各组间差异有统计学意义(F=177.01,P0.01)。结论建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR可用于RA患者血清miR-146a的检测。miR-146a可用于诊断活动期RA。     

外周血检测miR-21方法的建立及在支气管哮喘中的应用

目的设计茎环结构引物,建立外周血检测微小RNA-21(miR-21)的检测方法,并初步应用于支气管哮喘患者外周血单个核细胞(PBMC)样本的检测。方法设计miR-21的茎环结构反转录引物和聚合酶链反应(PCR)扩增引物,以U6为内参照,利用SYBR green实时荧光PCR检测20例支气管哮喘患者和20名健康人的外周血miR-21的表达水平,并分析2组间的差异。结果 SYBR green实时荧光PCR检测U6和miR-21含量的熔解曲线单一,PCR产物特异。在外周血中20例哮喘患者的miR-21水平明显高于20名健康人(P<0.001)。结论本实验成功建立了SYBR green荧光定量PCR检测外周血miR-21表达水平的技术平台,为miR-21在支气管哮喘发生中分子生物学机制研究建立了基础。     

SYBR GreenⅠ荧光PCR熔解曲线鉴定鸟分枝杆菌方法的建立及初步应用

目的基于SYBR GreenⅠ荧光染料建立鉴定鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium,MA)的荧光PCR熔解曲线法,为临床鉴定MA提供简单、准确性高的分子生物学检测方法。方法以MA的特异性插入序列IS1311为检测靶标设计引物,在60℃的退火温度下,建立鉴定MA的SYBR GreenⅠ荧光PCR熔解曲线方法,并对MA等21种分枝杆菌标准株和金黄色葡萄球菌等5种常见致病菌进行检测,评价方法的特异性、检测限;以hsp65、16S rDNA普通PCR扩增产物测序分析为“金标准”,鉴定200株分枝杆菌临床分离株,评估建立方法鉴定MA的准确性。结果SYBR GreenⅠ荧光PCR熔解曲线方法在30个循环内能准确鉴定出21种分枝杆菌标准株和5种致病菌中的MA,检测限为5.6×10-2 ng/μL。200株分枝杆菌临床分离株中,以PCR测序鉴定出16株MA和184株其他分枝杆菌,以SYBR GreenⅠ荧光PCR熔解曲线方法鉴定出15株MA和185株非MA;本研究建立的方法和测序方法对MA的鉴定率差异无统计学意义(P>0.05);两法符合率为99.5%(199/200),一致性较高(Kappa值>0.75,P<0.01);建立方法的敏感性为93.8%(15/16),特异性为100.0%(184/184),阳性预测值为100.0%(15/15),阴性预测值为99.5%(184/185)。结论以MA特异性重复序列IS1311为基础建立的SYBR GreenⅠ荧光PCR熔解曲线方法,具有较高的灵敏度和特异性,为MA的临床检测提供新的途径。     

两种定量聚合酶链反应模式检测乳腺癌组织中缓激肽释放酶表达的比较

目的比较两种荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测乳腺癌组织中激肽释放酶6（KLK6）基因的表达。方法分别用TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料作为荧光指示剂,实时荧光定量PCR检测KLK6在乳腺癌中的相对表达水平,应用统计软件分析两种检测模式的差异。结果两种检测模式的检测结果均显示乳腺癌中KLK6的表达均高于正常组织,KLK6的相对表达水平无显著性差异。结论在扩增产物特异的条件下应用SYBR Green Ⅰ检测的效果同Taq Man探针,SYBR Green Ⅰ染料应用范围广泛,成拳低。     

多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞微小RNA-202的表达及意义

目的 建立SYBR Green Ⅰ FQ-PCR检测人外周血单个核细胞(PBMC)中miR-202表达的方法,并初步探讨其检测MM的意义.方法 采用特异miR-202茎环引物逆转录后,用FQ-PCR对21例MM患者及20名健康人PBMC中miR-202表达水平做相对定量分析;结果用Mann-Whitney法进行两组间miR-202表达差异比较.此外,用1份1∶125稀释标本重复检测5次;及同一标本连续检测3d,每天检测1次,每次重复5管,根据循环阈值(Ct)计算标准差和变异系数(CV),以评价所建方法的重复性.结果 FQ-PCR检测PBMC中miR-202的扩增曲线呈标准的S型,熔解曲线峰值单一,未见杂峰,显示其特异性较好.批内CV为1.2％,批间CV为3.2％,当标本miR-202浓度被稀释为12.8 pmol/μl时,仍可稳定地得到扩增曲线.FQ-PCR检测MM组中miR-202表达量为1.844(0.162 ～3.966),健康对照组表达量为0.014(0.007～0.221),MM组中miR-202表达明显高于健康对照组(U=48.000,P＜0.01).结论 FQ-PCR是一种快速简便、特异性和重复性较好的检测miR-202的方法,MM患者PBMC中miR-202表达升高,其可能参与MM的发生过程,并有可能成为MM诊断和治疗的新指标.     

血清miR-765和CA153联合检测对乳腺癌的诊断价值

目的 探讨血清miR-765与CA153联合检测对乳腺癌的诊断价值。方法 收集乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-765的表达水平,受试者工作特征曲线分析单一和联合检测对早期乳腺癌的诊断价值。结果 乳腺癌患者血清miR-765相对表达量均显著低于乳腺良性疾病患者和健康对照者(F=35.97,均P<0.01); 单独检测miR-765的ROC曲线下AUC为0.843(95%CI:0.767～0.919),灵敏度为87.9%,特异度为81.0%; miR-765与CA153联合检测的ROC曲线下AUC为0.903(95%CI:0.844～0.962),灵敏度为89.7%,特异度为86.2%; CA153<25U/ml的乳腺癌患者血清miR-765的ROC曲线下AUC为0.840(95%CI:0.746～0.934),灵敏度为87.5%,特异度为82.4%。结论 miR-765对乳腺癌的诊断具有一定价值,与CA153联合检测可为临床提供一种潜在的辅助方法。     

血清miR-21、sICAM-1和CA153联合检测对乳腺癌的早期诊断价值

目的探讨血清miR-21、可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)和糖类抗原153(CA153)联合检测对乳腺癌的早期诊断价值。方法选取2016年1月至2019年12月在南京医科大学附属妇产医院诊断为乳腺癌的患者31例为恶性肿瘤组,选择同期活组织检测为乳房良性病变患者31例为良性肿瘤组,选择同期该院体检健康者31例为健康对照组。比较3组血清miR-21、sICAM-1、CA153水平,并对miR-21、sICAM-1和CA153单项及联合检测早期诊断乳腺癌的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、诊断效率进行比较。结果血清miR-21、sICAM-1、CA153水平在恶性肿瘤组明显高于良性肿瘤组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-21、sICAM-1、血清CA153联合检测早期诊断乳腺癌的灵敏度、阳性预测值和诊断效率与miR-21单项检测比较,差异有统计学意义(P<0.05);血清miR-21、sICAM-1、CA153联合检测早期诊断乳腺癌的灵敏度、阴性预测值、阳性预测值和诊断效率与sICAM-1单项检测比较,差异有统计学意义(P<0.05);血清miR-21、sICAM-1、CA153联合检测早期诊断乳腺癌的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值和诊断效率与CA153单项检测比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-21、sICAM-1、CA153联合检测用于乳腺癌早期诊断的受试者工作特征曲线下面积为0.891。结论血清miR-21、sICAM-1、CA153联合检测能够显著提高临床对乳腺癌的早期诊断效率。     

乳腺癌患者血清miR-765,miR-200b水平检测及与临床病理学相关研究

目的 探讨乳腺癌患者血清miR-765与miR-200b的表达及其临床应用价值。方法 选取乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量PCR技术检测血清miR-765和miR-200b的表达水平,评价指标的诊断价值,并分析与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果 乳腺癌患者血清miR-765和miR-200b相对表达量均显著性低于乳腺良性疾病患者(t=3.955,2.657,P<0.05)和健康对照者(t=4.465,3.518,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-765在乳腺癌诊断中的AUC为0.843(95%CI:0.767～0.919),miR-200b在乳腺癌诊断中的AUC为0.897(95%CI:0837～0.957)。miR-765联合miR-200b在乳腺癌诊断中的AUC为0.952(95%CI:0.941～0.990),两者联合优于单一检测miR-765或miR-200b。在乳腺癌患者中血清miR-765相对表达量与临床分期相关(t=3.222,P<0.05); miR-200b相对表达量与临床分期、淋巴结转移相关(t=1.855,3.987,P均<0.05)。结论 乳腺癌患者血清miR-765与miR-200b表达水平显著降低,并与乳腺癌临床病理特征明显相关,血清miR-765与miR-200b联合检测具有较高的临床应用价值。     

茎环引物的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测miR-155表达及其临床初步应用

目的建立茎环状逆转录引物（简称茎环引物）的SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）,并作初步应用。方法应用SYBR GreenⅠ实时FQ-PCR检测CD4＋T细胞株的miR-155,初步验证方法的可行性。用所建立的方法对60份临床宫颈刮取物标本进行检测,分析miR-155与宫颈癌及感染的高危型人类乳头状瘤病毒（HPV）基因型别的关系,其聚合酶链反应（PCR）反应产物通过电泳验证产物特异性。结果所建方法能特异的检测到miR-155的扩增信号,最低检出限为10^-7nmol/L,在10^-1-10^-6nmol/L之间有良好的线性关系,相关系数（r）为0.99,扩增后惟一的熔解曲线特异峰显示很好的特异性。CD4^＋T细胞株及60例临床宫颈刮取物标本miR-155均显示阳性,PCR反应产物电泳可获得单一条带。宫颈刮取物miR-155与宫颈癌有关（P〈0.05）,但与本研究涉及的HPV基因型别无关（P〉0.05）。结论所建立的茎环引物的SYBR GreenⅠ实时FQ-PCR能快速、敏感、特异地检测细胞株和临床宫颈刮取物miR-155的表达水平,为进一步研究miR-155及其临床应用奠定了基础。     

改良通用茎环引物筛查和定量检测微小RNA方法的建立

目的 建立可同时筛选和定量检测成熟型miR的荧光定量PCR方法.方法 改良通用茎环引物,在其茎环尾端引入8个随机碱基片段,用于成熟型miR逆转录,以建立SYBR Green PCR筛选和定量检测miR的方法(简称“改良通用茎环引物miR法”).同时,采用10倍梯度稀释的miR-155标准品cDNA(1～109拷贝/μl)评价其灵敏度;采用熔解曲线评价其检测miR-155的特异性;通过对2×105、2×106、2×107拷贝/μl的miR-155标准品cDNA分别进行批内20次重复实验,以其循环阈值(Ct)的变异系数(CV)评价其精密度;并与传统茎环法进行比较,计算实验所用时间和引物成本.然后,采用改良通用茎环引物miR法对植物血凝素(PHA)刺激培养0、16、24、48、72 h的人外周血T淋巴细胞内miR进行筛选(87个靶miR,经PubMed检索可能与免疫功能相关),并用以进行miR定量检测分析.结果 建立的改良通用茎环引物法的最低检测限为103拷贝/μl的miR-155 cDNA标准品;熔解曲线于80℃呈单峰,证实为针对miR-155的特异性扩增;其批内重复实验的精密度为CV＜2.5％.优化后的通用引物方法与传统方法相比较,节约引物约75％(1 917 bp比7 851 bp),节省逆转录时间约120min(85 min比205 min).用改良通用茎环引物法筛选T淋巴细胞中87个miR,85个miR在PHA刺激前、后的Ct无变化,而miR-150和miR-155表达量在T淋巴细胞激活前后分别发生超过10倍下降(72 h)和8倍的升高(48 h),且差异有统计学意义(Z=-2.023,P=0.043;Z=-2.032,P=0.042).结论 建立的改良通用茎环引物miR法具有快速、重复性好、灵敏、节约引物用量和实验时间的优点,可用于T淋巴细胞的miR筛查和定量检测.     

转移性宫颈癌细胞衍生的外泌体miR-21-5p促进宫颈癌侵袭及转移

目的 探讨转移性宫颈癌组织的旁分泌作用对肿瘤细胞扩散的影响。方法 选择22例转移性宫颈鳞癌患者的手术标本（癌组织和癌旁组织）和血清标本,以及22名健康体检者的血清标本,采用逆转录-实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-21-5p在癌组织和癌旁组织中的表达水平;分别转染miR-21-5p模拟物/抑制剂到宫颈癌SiHa细胞,采用RT-qPCR、细胞集落形成实验、Transwell迁移实验、噻唑蓝（MTT）比色法、蛋白免疫印迹法、双荧光素酶报告分析差异;采用高速离心法提取血清外泌体;采用纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术、蛋白免疫印迹法、透射电子显微镜（TEM）对外泌体进行表征鉴定;采用RT-qPCR 检测宫颈鳞癌患者和健康体检者血清外泌体中miR-21-5p的表达差异;采用受试者操作特征（ROC）曲线分析血清外泌体中miR-21-5p对肿瘤转移的诊断效能。结果 miR-21-5p在转移性宫颈鳞癌组织中表达上调;miR-21-5p过表达能促进宫颈鳞癌SiHa细胞集落形成以及细胞增殖与迁移（P均< 0.01）;双荧光素酶报告显示,miR-21-5p可以靶向快速发育生长因子同源蛋白2抗体（SPRY2）,对SPYR2的表达水平进行调控;miR-21-5p模拟物转染的SiHa细胞中,磷酸化丝裂原和应激激活的蛋白激酶、磷酸化核糖体S6蛋白激酶、磷酸化原癌基因C-RAF、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激酶和磷酸化MAPK蛋白的表达均上调（P均< 0.05）。miR-21-5p在宫颈鳞癌患者的血清外泌体中上调（P < 0.05）。血清外泌体评估宫颈癌转移的ROC曲线下面积为0.9375。结论 转移性宫颈鳞癌患者组织中miR-21-5p通过外泌体传递促进肿瘤转移,其机制可能与靶向SPRY2/细胞外调节蛋白激酶/MAPK信号通路有关。     

血清CEA和CA15-3水平对乳腺癌化疗疗效及预后评估的价值分析

目的探讨血清CEA和CA15-3水平对乳腺癌化疗疗效及预后评估的价值。方法回顾性分析2011年5月至2012年6月荆州市第一人民医院肿瘤科收治的63例乳腺癌晚期患者作为乳腺癌组,根据存活情况将其分为存活组(n=42例)和死亡组(n=21例),采用荧光免疫法检测血清CEA和CA15-3水平,随访4年,统计分析所有患者生存预后情况。结果Ⅳ期乳腺癌患者血清CEA和CA15-3水平明显高于Ⅲ期,差异有统计学意义(P0.05);CEA、CA15-3、CEA和CA15-3表达阴性组化疗有效率明显高于阳性组,差异有统计学意义(P0.05);所有患者随访1~4年,平均随访时间3.63年,最终有42例存活4年以上,CEA阳性组患者4年生存率(55.26%)明显低于阴性组(84.00%),差异有统计学意义(P0.05),CA15-3阳性组患者4年生存率(52.78%)明显低于阴性组(85.19%),差异有统计学意义(P0.05),CEA和CA15-3阳性组患者4年生存率(52.38%)明显低于阴性组(95.24%),差异有统计学意义(P0.05);存活组化疗前血清CEA和CA15-3水平明显低于死亡组,差异有统计学意义(P0.05)。结论检测乳腺癌患者化疗前血清CEA和CA15-3水平可为化疗疗效及预后评估提供可参考数据。     

血清miR-146b-3p、miR-15b-5p、miR-16-5p在良恶性肺结节鉴别诊断、预后评估中的价值

目的探究微小RNA（miR）-146b-3p、miR-15b-5p、miR-16-5p在良恶性肺结节鉴别诊断以及预后评估中价值。 方法前瞻性选择2018年6月至2020年6月期间安徽医科大学第二附属医院收治139例肺结节患者作为研究对象,行病理检查或者穿刺活检后确定患者病灶良恶性,其中良性组75例,恶性组64例。2组患者均测定血清miR-146b-3p、miR-15b-5p、miR-16-5p。分析上述指标在患者良恶性结节诊断上价值,恶性组患者血清miR-146b-3p、miR-15b-5p、miR-16-5p与患者病理特征之间关系。随访评估恶性组患者预后,分析血清miR-146b-3p、miR-15b-5p、miR-16-5p对预后预测价值。 结果良性组患者血清miR-146b-3p、miR-15b-5p显著低于恶性组（P＜0.05）,miR-16-5p显著高于恶性组（P＜0.05）。受试者工作特征（ROC）曲线显示,血清miR-146b-3p、miR-15b-5p、miR-16-5p及各种指标联合对于结节良恶性诊断曲线下面积（AUC）分别为0.803、0.786、0.889、0.962。血清miR-146b-3p、miR-15b-5p、miR-16-5p与分化程度、淋巴结转移、临床分期类型有关（P＜0.05）;Spearman相关性分析显示,血清miR-146b-3p、miR-15b-5p均与分化程度呈显著的负相关,且均有统计学意义（r=-0.534,-0.468;P＜0.05）,均与淋巴结转移呈显著的正相关,且均有统计学意义（r=0.582,0.608;P＜0.05）,均与临床分期类型呈显著的正相关（r=0.486,0.519;P＜0.05）;miR-16-5p与分化程度、淋巴结转移、临床分期分别呈显著的正相关、负相关、负相关（r=0.412,-0.563,-0.657;P＜0.05）,且均有统计学意义。预后不良恶性组患者血清miR-146b-3p、miR-15b-5p显著高于恶性组,miR-16-5p显著高于预后良好患者,且上述差异均有统计学意义（P＜0.05）。ROC曲线显示,血清miR-146b-3p、miR-15b-5p、miR-16-5p及各指标联合对于恶性结节患者预后预测AUC分别为0.799、0.772、0.554、0.837。 结论血清miR-146b-3p、miR-15b-5p、miR-16-5p与肺结节良恶性、恶性结节临床特征以及恶性结节患者预后关系密切,三种血清指标联合用于肺结节良恶性鉴别诊断以及预后预测价值优异。     

血清miR-107在结直肠癌患者中的表达及其诊断价值分析

目的 探究血清微小RNA(miR)-107在结直肠癌患者中的表达及其对疾病的诊断价值。方法选取2016年1月至2019年1月该院收治的结直肠癌患者60例作为结直肠癌组,并选取同期在该院接受治疗的60例结直肠息肉患者作为息肉对照组,另选取同期在本院体检的健康志愿者60例作为健康对照组。采用实时荧光定量PCR法检测miR-107的相对表达量,比较3组研究对象血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)、miR-107的水平,分析血清miR-107与结直肠癌患者临床病理特征的关系,受试者操作特征曲线(ROC)分析血清miR-107、CEA、CA199对直结肠癌的诊断价值。结果 结直肠癌组的血清miR-107相对表达量以及血清CEA、CA199水平高于息肉对照组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌患者血清miR-107的水平与性别、年龄、肿瘤最大径无关,差异无统计学意义(P>0.05),而与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05);miR-107所得ROC曲线下面积为0.882(95%CI:0.814~0.950),灵敏度和特异度分别为85.0%和82.9%。若和CEA及CA199进行联合应用,则灵敏度和特异度可提高至91.7%和86.7%。结论 miR-107在结直肠癌患者血清中呈高水平,而且其水平与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,且对结直肠癌有较高的诊断价值。