survivin与细胞凋亡在肺癌中的研究进展

生存素(survivin)是凋亡抑制蛋白(IAP)家族成员之一,在肺癌中高表达,具有抑制凋亡功能.细胞凋亡与肺癌的发生发展及预后密切相关.survivin及细胞凋亡与肺癌的关系可能为肺癌的研究治疗提供新思路.

Abstract：

Survivin is one of inhibitors of apoptosis protein family members. It is highly expressed in lung cancer. Survivin can inhibit apoptosis. Apoptosis is closely related with development and prognosis in lung cancer. Survivin and apoptosis might become breakthrough point in treatment of lung cancer.     

survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)中survivin表达水平及凋亡指数(AI)大小,探讨其临床病理意义、在肺癌发生和进展中的作用以及二者可能存在的相关性.方法:应用免疫组织化学法检测108例NSCLC,60例癌旁肺组织survivin表达情况,原位末端标记法(TUNEL)检测AI大小.结果:survivin在NSCLC中表达高于癌旁肺组织(P＜0.05),NSCLC 中AI小于癌旁肺组织(P＜0.05),survivin表达及AI均与肿瘤组织的分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(P＜0.05),survivin表达与AI呈负相关(P＜0.05).结论:细胞凋亡水平异常可能在肺癌发生发展中起重要作用,survivin可能通过抑制细胞凋亡参与了肺癌的发生、发展.     

生存素在非小细胞肺癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨生存素(survivin)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与细胞凋亡的关系. 方法采用免疫组化的方法检测60例NSCLC和16例肺良性组织中survivin的表达,用TUNEL技术检测60例NSCLC的凋亡情况. 结果肺癌组织中survivin表达的阳性率为63.3%(38/60),而在正常组织中无一例表达;survivin蛋白的表达与肺癌TNM分期(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)和细胞分化程度(P<0.01)有密切关系,但与肿瘤组织学类型、年龄、性别无明显关系(P>0.05).survivin在NSCLC中的表达水平与癌细胞的凋亡指数(AI)呈负相关(r＝-0.231,P<0.05). 结论 survivin蛋白的异常表达而引起的细胞凋亡抑制在NSCLC的发生中起一定作用,其过度表达提示NSCLC预后不良;survivin基因有望成为肺癌基因治疗的新靶点.     

Survivin siRNA对人肺腺癌细胞SPCA1和SH77抑制作用的比较分析

背景与目的 Survivin是IAP家族的新成员,具有抑制凋亡和调节细胞增殖的双重作用,是迄今发现最强的凋亡抑制因子。本项研究的目的是通过将survivin的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)表达载体分别转染至肺癌细胞SPCA1和SH77,分析survivin siRNA对不同肺癌细胞的增殖抑制作用。方法构建靶向survivin的siRNA表达载体与pSi scrambled,经由脂质体法分别转染至肺癌细胞SPCA1和SH77。通过MTT法检测细胞增殖抑制,用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期,利用半定量RT-PCR和Western blot印迹法分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平。结果 Survivin siRNA干预后,SPCA1和SH77细胞均出现凋亡,G0/G1期阻滞。实验组Survivin mRNA水平和蛋白表达水平比脂质体对照组明显减少。结论 Survivin基因特异性RNA干扰可以明显抑制肺癌SPCA1和SH77细胞的体外增殖并诱导明显的细胞凋亡。     

肺癌细胞中survivin与紫杉醇作用的实验研究

目的:探讨survivin与紫杉醇作用机制可能的关系.方法:分别以体外药物敏感试验(MTT法)、流式细胞术、Western blot观察紫杉醇作用后,A549细胞生长抑制情况以及细胞周期、凋亡、survivin蛋白等指标的变化.结果:紫杉醇作用12h后,A549细胞才表现出生长抑制,并且这种抑制具有明显的时间依赖性(P＜0.05).不同作用浓度对A549生长的影响也存在差异,在同一时间点,紫杉醇浓度越大,细胞存活率越低(P＜0.05).时间依赖性实验中,10nM紫杉醇诱导的survivin表达与G2/M期阻滞一样,早在4h即已出现,延长作用时间(48h或更长),表达反而降低,但凋亡所占比例则与作用时间呈正相关(P＜0.05).浓度依赖性实验中,不同浓度紫杉醇同样表现出有效诱导survivin表达的能力(P＞0.05),G2/M期阻滞则呈浓度依赖性特点,凋亡比例于10nM达高峰;survivin表达与G2/M期阻滞、凋亡无相关性(P＞0.05).结论:紫杉醇对A549的生长抑制作用呈时间依赖性,紫杉醇诱导的survivin表达与G2/M期阻滞及凋亡的关系可因紫杉醇浓度而不同.时间依赖性实验中,10nM紫杉醇诱导的survivin表达与G2/M期阻滞变化趋势基本一致,但与凋亡相反,提示有丝分裂生存途径可能是肺癌细胞通过survivin拮抗紫杉醇诱导凋亡的一种重要方式,抑制survivin表达可能成为增加肺癌细胞对紫杉醇敏感性的有效途径.     

survivin和caspase-3在非小细胞肺癌中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系

背景与目的survivin是新近发现的凋亡抑制因子,在肿瘤的发生中起重要作用。survivin可直接抑制caspase3和caspase7的活性。本研究旨在探讨survivin和caspase3在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及其与肿瘤细胞凋亡的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测88例NSCLC患者手术标本和29例正常肺组织标本中survivin和caspase3的表达,分析其与NSCLC临床病理参数之间的关系,同时用原位末端标记法(TUNEL)标记肺癌组织中的凋亡细胞。结果88例NSCLC患者标本中survivin的阳性表达率为61.4%(54/88),明显高于正常肺组织(13.8%,4/29)(P<0.01);survivin在NSCLC中的表达与肿瘤的组织学分型、病理分级和淋巴结转移均无明显相关性(P>0.05),但与TNM分期有相关性(P<0.05)。caspase3在正常肺组织和NSCLC中阳性表达率分别为89.7%(26/29)和73.9%(65/88),但二者差异无显著性(P>0.05);caspase3在NSCLC中的阳性表达率随肿瘤的病理分级增高而降低,差异有显著性(P<0.05)。survivin蛋白阳性表达的肺癌组织中平均细胞凋亡指数(1.63±0.58)明显低于阴性表达组(3.29±0.76)(P<0.05),caspase3阳性组平均细胞凋亡指数(2.42±0.59)明显高于阴性组(1.28±0.65)(P<0.05);survivin和caspase3呈负相关(P<0.05)。结论凋亡抑制蛋白survivin在NSCLC组织中高表达,caspase3与survivin的表达呈负相关,survivin可能通过抑制caspase3的激活来发挥其抑制细胞凋亡的作用。     

凋亡抑制蛋白livin在人非小细胞肺癌中的表达以及和survivin表达的关系

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中凋亡抑制蛋白 livin 表达及其与各临床病理因素的关系, 以及和凋亡抑制蛋白 survivin表达的相关性. 方法: 采用免疫组织化学法检测100例NSCLC患者的病变肺组织(肺癌组) 以及10例正常或肺良性疾病患者肺组织(对照组) livin蛋白和survivin蛋白的表达水平,并分析2者与肺癌的组织类型、分化程度、淋巴结转移之间的关系,以及2种蛋白表达的相关性.结果:100例NSCLC组织中livin表达阳性率为 68.0%、survivin 为62.0%, 而在正常和癌旁组未检出阳性结果; livin的表达与组织分化和淋巴结转移有关,组织分化差,淋巴结转移者livin表达率高(P<0.05).62例survivin阳性样本中有 38例livin 呈阳性.结论: livin 和survivin 蛋白在癌组织中表达上调,提示其可能在非小细胞肺癌发生发展中起促进作用. survivin 和淋巴结转移的密切关系表明它的高表达可能反映患者较差的预后.livin基因可能成为非小细胞肺癌治疗的一个靶基因.     

凋亡抑制因子survivin及其在抗肿瘤中的应用

凋亡抑制因子存活素(survivin)与肿瘤细胞凋亡、细胞增殖活性相关.现就survivin调控方式、survivin在细胞凋亡中的作用及其在抗肿瘤中的应用作一综述.     

靶向生存素基因siRNA诱导骨肉瘤细胞株U-2OS的凋亡

目的:体外转录合成生存素(survivin)基因siRNA,观察其在骨肉瘤细胞株U-2OS中抑制survivin基因后细胞增殖及细胞凋亡情况.方法:将U-2OS细胞分为A组(空白对照组)、B组(非特异性转染组)、C组(特异性转染组),在荧光显微镜下观察转染前后细胞形态的改变,用RT-PCR和Western blot法分别检测转染前后survivin基因mRNA和蛋白的干涉效果,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并比较各组结果.结果:荧光显微镜下可见转染后细胞增殖变慢,凋亡细胞增加;RT-PCR结果显示survivin siRNA明显抑制survivin基因mRNA表达.Western blot法检测C组蛋白阳性表达率比A、B两组显著降低(P＜0.01);特异性转染组的细胞增殖缓慢,与其它两组比较有显著性差异(P＜0.01).流式细胞仪检测C组细胞凋亡率与其他两组比较有显著性差异(P＜0.01).结论:体外转录合成特异性survivin siRNA能有效抑制U-2OS细胞中survivin mRNA及蛋白表达,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.RNA干扰技术为骨肉瘤的基因治疗提供了一种新策略.     

雷帕霉素联合缺氧诱导肺腺癌A549细胞凋亡及其分子机制

目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶向(mammalian target of rapamycin, mTOR)通路抑制剂雷帕霉素联合缺氧诱导人肺腺癌细胞株A549细胞凋亡的分子机制.方法:应用雷帕霉素联合缺氧处理人肺腺癌细胞株A549后,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡情况,实时定量PCR和Western印迹法分别检测A549细胞中survivin mRNA和蛋白的表达变化,Western印迹法检测缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α, HIF1α)表达的改变.结合染色质免疫共沉淀技术,探讨雷帕霉素通过诱导细胞凋亡而发挥抗肺癌效应的分子机制.结果:雷帕霉素联合缺氧可在体外诱导A549细胞凋亡,雷帕霉素联合缺氧可诱导A549细胞中survivin mRNA(P＜0.01)和蛋白的表达水平明显下调.雷帕霉素通过抑制缺氧条件下诱导的HIF-1α表达增加,进而抑制survivin的表达.结论:雷帕霉素通过抑制缺氧条件下A549细胞中HIF-1α的表达,降低HIF-1α与survivin核心启动子的结合,下调缺氧引发的凋亡抑制基因survivin表达,进而发挥抗肿瘤的生物学效应.     

Survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与bcl-2、p53表达的关系

目的　探讨Survivin在非小细胞肺癌组织 (non smallcelllungcancer ,NSCLC)中的表达 ,及其与bcl 2、p5 3蛋白表达的相关性。方法　应用免疫组织化学SP法 ,检测Survivin、bcl 2、p5 3蛋白在 5 7例NSCLC组织和 10例正常肺组织中的表达。结果　Survivin蛋白在正常肺组织中不表达 ,5 7例NSCLC组织中 ,3 4例表达阳性 ,占 5 9.6%。Survivin蛋白表达与分化程度、淋巴结转移密切相关 (P<0 .0 5 )。NSCLC组织bcl 2蛋白表达阳性、阴性组中 ,Survivin蛋白阳性表达率分别为 78.9%( 15 / 19)和 5 0 %( 19/ 3 8) ,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;p5 3蛋白表达阳性、阴性组中 ,Survivin蛋白阳性表达率分别为 72 .2 %( 2 6/ 3 6)和 3 8.1%( 8/ 2 1) ,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,Survivin蛋白表达与bcl 2、p5 3蛋白表达密切相关。结论　Survivin在NSCLC组织中表达上调 ,通过抑制细胞凋亡 ,在NSCLC的发生和发展中起到重要作用 ;凋亡相关基因bcl 2的上调和抑癌基因p5 3的失活与Survivin的表达可能在NSCLC癌变中起协同作用     

凋亡抑制基因Survivin与肺癌的关系

Survivin是属于凋亡抑制蛋白（1AP）家族中的新成员，具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂等功能。Survivin主要在胚胎发育组织表达，在成人终末分化组织低表达或不表达，而在绝大多数肿瘤组织中高表达。研究表明，Survivin与肺癌的发生、发展有着密切关系，因而可望成为肺癌新的诊断标志物及治疗靶点。     

预照射联合siRNA抑制小鼠肺癌Survivin基因表达的研究

背景与目的：肿瘤放化疗的效果与肿瘤细胞凋亡成正相关。Survivin是凋亡抑制基因,在肺癌中过度表达,降低其表达可增加肺癌细胞凋亡。RNA干扰可以特异、高效地封闭该基因的表达。肿瘤组织接受一定剂量的照射后,也可以提高基因转导率。本研究旨在探讨预照射联合瘤内注射siRNA对小鼠肺癌Survivin基因表达的影响。方法：将皮下移植瘤小鼠随机分为4组：未处理组(A组)、单纯siRNA瘤内注射组(B组)、单纯放射组(C组)和4 Gy预照射+siRNA瘤内注射组(D组)。小鼠经上述不同处理2 d后用颈椎脱臼法处死,剥离皮下移植瘤,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和蛋白［质］印迹法(Westernblot)检测Survivin基因在mRNA和蛋白水平的表达情况;采用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。结果：B组、C组、D组Survivin基因在mRNA和蛋白水平的表达均较A组减少,且D组与A组Survivin基因在mRNA和蛋白水平的差异有统计学意义(P=0.036);D组处于S期的细胞比例为(2.70±0.34)%,较B组［(8.93±0.75)%］和C组［(6.71±0.51)%］明显减少,且与A组S期细胞的比例相比,差异有统计学意义(P=0.034);D组肿瘤组织的细胞凋亡率为(25.6±0.65)%,较其他3组肿瘤组织的细胞凋亡率明显增多,差异有统计学意义(F=78.82,P<0.05)。结论：预照射可增强siRNA的转导率,使肺癌组织中Survivin基因表达水平降低,促进细胞凋亡,进 而增加放疗敏感性。     

非小细胞肺癌18F-FDG PET-CT影像与Survivin

目的:探讨非小细胞肺癌氟-18-2-脱氧-D-葡萄糖(18F-FDG)正电子发射体层成像(PET-CT)的标准摄取值(SUV)与凋亡抑制基因Survivin表达间的关系。方法:选择行18F-FDG PET-CT扫描并经手术确诊的NSCLC患者33例,Survivin的检测,并结合临床病理特点进行统计学分析。结果:33例NSCLC病例PET-CT的SUVmax平均为10.5±5.4,SUVmax与病理类型(鳞癌和腺癌,r=0.432,P=0.012)、临床分型(中心型和周围型,r=0.379,P=0.029)及病灶大小(r=0.743,P=0.000)具有显著的相关性;Survivin表达的阳性率为84.8%(28/33),腺癌的阳性表达高于鳞癌,u=2.29,P=0.022;SUVmax与Survivin的表达无明显相关性,与年龄、性别、病理分级、TNM分期及淋巴结转移无明显相关性。结论:PET-CT的SUVmax与组织病理类型、临床分型及病灶大小有关,Survivin的表达与组织病理类型有关,SUVmax与Survivin表达无明显相关性。     

Survivin和PTEN在肺癌中的表达及其意义

目的检测Survivin 和PTEN在肺癌中的表达,探讨两者在肺癌中的意义及关系.方法利用S-P免疫组化法检测62例肺癌标本和10例正常肺标本中Survivin和PTEN表达情况.结果 62例肺癌中Survivin和PTEN阳性率分别为56.5%和41.9%,正常肺组织中Survivin和PTEN阳性率分别为0和90.0%.Survivin在肺癌组织中的表达显著高于正常肺组织(P<0.01),Survivin的表达与淋巴结转移和临床分期相关(P<0.05);PTEN在正常组织的表达显著高于肺癌组织(P<0.01),与淋巴结转移和临床分期相关(P<0.01).Survivin和PTEN两者表达强度之间呈显著负相关(P<0.01).结论 Survivin在肺癌中过表达,PTEN在肺癌中表达减低,PTEN可下调Survivin的表达.Survivin在肺癌发展中起促进作用,PTEN起保护作用,两者与肺癌的侵袭性和预后有一定关系.     

Survivin、Caspase-3和Bcl-2在肺癌中的表达及意义

背景与目的:细胞凋亡异常是肿瘤发生的原因之一。细胞凋亡是受凋亡控制基因调节,近来研究表明由于肿瘤组织分型不同,其凋亡调控基因的表达也存在差异。本研究旨在通过和细胞凋亡有关的基因蛋白生存素(Survivin)、Caspase-3和Bcl-2在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达分布,对同一肿瘤,不同病理类型组织肺癌进行凋亡对比性研究,描述性分析在同一解剖部位、不同细胞学类型肿瘤组织中三种有关凋亡的基因蛋白表达的差异。方法:选取41例SCLC,30例NSCLC,采用免疫组化SP法检测肺癌组织中Survivin、Caspase-3、Bcl-2的表达水平和相关性。结果:SCLC中Survivin阳性表达率为29.3%,NSCLC为70%,两者表达分布差异有显著性(P<0.01);SCLC中Bcl-2阳性表达率为63.4%,NSCLC为30%,两者表达分布差异有显著性(P<0.05);SCLC的Survivin阳性患者中Caspase-3表达率为3/12例,阴性患者为62.1%(18/29),两者间差异有显著性(χ2=4.67,P<0.05)。NSCLC中Survivin阳性患者中Caspase-3的表达率为19.0%(4/21),阴性患者为88.9%(8/9),阴性患者Caspase-3的表达率显著高于阳性患者(χ2=12.80,P<0.01)。Caspase-3阳性表达在SCLC和NSCLC的表达分别为51.2%和40.0%,差异无显著性(P>0.05)。结论:在NSCLC中,Survivin表达上调,Bcl-2表达水平相对低下;在SCLC中,Bcl-2过表达,Survivin表达相对不高。Caspase-3在SCLC和NSCLC中的表达差异无显著性。由于组织学差异,SCLC和NSCLC的细胞凋亡过程可能存在不同的凋亡调节通路和凋亡调节因子。     

Nuclear localization of Survivin renders HeLa tumor cells more sensitive to apoptosis by induction of p53 and Bax

Clinical studies have shown that nuclear expression of the inhibitor of apoptosis protein Survivin in tumor cells predicted a favorable prognosis whereas cytosolic-localized protein caused a decreased overall survival. Therefore Survivin’s subcellular localization may be important for its anti-apoptotic capacity. To address this question, we investigated localization and function of Survivin in normal human lung fibroblasts (NHLFs) and HeLa tumor cells. NHLFs of early passages expressed Survivin in the nucleus and were highly sensitive to C2 ceramide, which induces the mitochondrial apoptotic pathway. In contrast, NHLFs at higher passages relocated Survivin to the cytosol and became more resistant to C2 ceramide.

Blocking nuclear export of Survivin by leptomycin B in HeLa cells increased susceptibility to C2 ceramide. In addition, transduction of HeLa cells with Survivin fused to a nuclear localization signal augmented basal expression levels of p53 and Bax and enhanced sensitivity for intrinsic apoptosis. Those findings suggest that a predominant nuclear localization of Survivin increases the sensitivity for pro-apoptotic stimuli, whereas nuclear export enables Survivin to fulfill its inhibitor of apoptosis function. A therapeutic intervention which holds Survivin in the nucleus of tumor cells might improve cancer therapy.     

FEZ1、Survivin在肺小细胞癌及低分化鳞状细胞癌蛋白表达及其在凋亡中的作用

Objective:To detect the expressions of FEZ1 and Survivin in small cell lung cancer (SCLC) and poorly differentiated squamous cell carcinoma (PDSCC),and to approach a theoretical basis for clinical diagnosis and treatment.Methods:Immunohistochemical and flow cytometry method were used to detect the expressions of FEZ1 and Survivin.Apoptosis ratio and cell proliferation index in normal lung tissue,SCLC and POSCC were analyzed.Results:The expressions of FEZ1 and Survivin were significantly different between SCLC and PDSCC (P＜0.05).The apoptosis ratio and proliferation index of normal lung tissue were lower than those of PDSCC and SCLC,with a significant difference (P＜0.05).Conclusion:The expressions of FEZ1 and Survivin are significantly different between SCLC and PDSCC,indicating that detecting the expressions of the two indexes may be helpful for clinical diagnosis.     

Survivin蛋白在早期非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系

背景与目的:Survivin作为凋亡蛋白抑制家族成员,在多种肿瘤组织中出现高表达.本实验研究Survivin蛋白在早期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其预后意义.方法:用免疫组化染色方法检测213例NSCLC的肿瘤组织中Survivin蛋白的表达,并采用Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,用Cox比例风险模型进行多因素分析.结果:NSCLC组织中免疫组化染色Survivin阳性细胞百分率＞lO%者193例(90.6%);Survivin蛋白低表达(≤75%)170例,高表达(＞75%)43例.Survivin蛋白在细胞核与细胞浆内均有表达.多因素Cox比例风险模型显示Survivin蛋白表达无预后意义(P＞0.05).肿瘤直径≤3 cm的肺小腺癌组生存曲线提示Survivin蛋白低表达组与高表达组比较具有生存优势,但两者之间的差异无统计学意义(P＞0.05).结论:早期NSCLC中Survivin蛋白表达的预后意义尚不明确.