环状RNA在肝细胞癌中的差异表达研究

目的:探讨环状RNA(circ RNA)在肝细胞癌(HCC)与正常肝组织中表达谱的差异。方法:利用circ RNA芯片技术检测3例HCC组织和癌旁肝组织circ RNA的表达谱,经过对原始数据进行预处理、均一化后,找出差异表达的circ RNA(与癌旁肝组织比较,HCC组织中1.5倍以上变化并且差异有统计学意义的circ RNA定义为差异表达的circ RNA)。根据表达差异倍数较高和样本间一致性较好的原则筛选circ RNA,借助生物信息学软件预测可能受其调控的mi RNA,结合文献检索初步确定可能在HCC中具有重要作用的circ RNA。结果:与癌旁肝组织比较,HCC组织中的circ RNA表达谱发生了明显变化。HCC组织中,1.5倍以上变化的circ RNA共82条,其中上调21条,下调61条;5倍以上变化的circ RNA共3条,其中上调2条,下调1条。最终筛选出在HCC组织中明显上调的hsa-circ-0043278(8.15倍,P=0.002)、hsacirc-0006220(12.73倍,P=0.033)和明显下调的hsa-circ-0065214(6.28倍,P=0.019);生物信息学分析和文献检索显示,hsa-mi R-520可能受hsa-circ-0043278和hsa-circ-0006220调控而影响HCC的发生和进展。结论:HCC组织circ RNA表达谱发生了显著变化;hsa-circ-0043278和hsa-circ-0006220可能在HCC的发生和进展中发挥重要作用。     

长链非编码RNA LINC01358在前列腺癌组织中的表达及对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01358在前列腺癌组织中的表达及对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法:选取3对前列腺癌和癌旁组织,进行lncRNA芯片检测。利用MSKCC前列腺癌患者芯片数据库,比较LINC01358在前列腺癌癌旁、原发性前列腺癌组织和转移性前列腺癌组织中的表达。利用实时荧光定量PCR技术检测10对前列腺癌和癌旁组织中LINC01358的表达验证大数据的结果。采用干扰RNA降低前列腺癌细胞株DU145中LINC01358的表达,MTT检测DU145细胞的增殖,Transwell小室法测定细胞迁移。结果:在lncRNA芯片中,共有差异表达的lncRNA 79个,其中在肿瘤组织中高表达的有36个,在肿瘤组织中低表达的有43个,LINC01358在前列腺癌组织中高表达。MSKCC前列腺癌患者芯片数据库中,LINC01358在转移性前列腺癌组织(5.81±0.19,n=19)和原发性前列腺癌组织(5.47±0.04,n=131)中的表达高于癌旁组织(5.15±0.07,n=29),且与前列腺癌患者术后生化复发率相关(log-rank P0.05)。实时荧光定量PCR验证大数据的结果提示,LINC01358在前列腺癌组织(6.02±1.12)中的表达明显高于癌旁组织(3.21±0.21,P0.05)。应用干扰RNA转染DU145细胞后,LINC01358的表达明显下降。并且转染干扰RNA组和对照组相比,前列腺癌细胞增殖能力和迁移能力明显下降。结论:LINC01358在前列腺癌患者组织中高表达,敲低LINC01358表达可抑制前列腺癌细胞的增殖和迁移。LINC01358可能作为癌基因参与前列腺癌的发生发展,有望成为前列腺癌早期诊断指标及基因治疗的新靶点。     

miRNA-21在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其意义

目的 检测人甲状腺乳头状癌标本中微小RNA(miRNA) -21的表达,并探讨其意义.方法 采用miRNA芯片技术和TaqMan探针荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法,分别检测miRNA-21在3例和20例甲状腺乳头状癌和癌旁组织标本中的表达.结果 应用miRNAs芯片技术,对甲状腺乳头状癌标本进行检测,与癌旁组织比较,甲状腺乳头状癌筛选出的miRNA-21表达上调有统计学意义(P＜0.01);应用荧光定量PCR技术,检测出甲状腺乳头状癌标本中miRNA-21的平均表达水平较癌旁组织上调(3.97±1.29)倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miRNA-21显著高表达可能在甲状腺乳头状癌发生发展过程中起着重要的作用;miRNA芯片技术和TaqMan探针荧光定量PCR方法对minRNA21的检测结果具有一致性.     

肺癌、癌旁组织及正常组织中微小RNA表达谱的检测

目的 探讨肺癌、癌旁及正常组织中微小RNA(miRNAs,miR)表达谱差异及其与TNM病理分期的关系.方法 采用Agilent miRNA芯片检测9例非小细胞肺癌患者的同体癌、癌旁和正常组织的miRNA表达谱,比较不同TNM分期间的表达差异.结果 筛选出36个在癌组织和癌旁组织之间差异表达的miRNAs和55个在癌组织和正常组织间差异表达的miRNAs;与早期患者比较,Ⅲa期的正常组织有hsa-miR-205、hsa-miR-34b等11个差异表达的miRNAs;而癌旁组织则从Ⅱa期开始就出现了9个差异表达的miRNAs;不同TNM分期的癌组织之间仅有hsv2-miR-H7-3p和hsa-miR-23a*表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 随着肺癌病理分级的发展,癌旁组织甚至远端组织也会出现特定mircoRNA表达量的变化,该特定mircoRNA的表达可能提示肿瘤的浸润能力.     

长链非编码RNA POU3F3在黑色素瘤中的表达及其与转移的关系

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) POU3F3在黑色素瘤中的表达变化, 以及lncRNA POU3F3与黑色素瘤转移的关系。方法选取来郑州大学第一附属医院2022年1月至2023年5月收治并接受手术治疗的47例患者的临床样本作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术分析黑色素瘤和癌旁组织lncRNA POU3F3的表达水平, 并采用免疫组织化学分析肿瘤组织和癌旁组织中黏着斑激酶(FAK)、β-连环蛋白(β-catenin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)和锌指转录因子Snail蛋白的表达水平。相关性分析lncRNA POU3F3和转移相关蛋白水平的关系。采用Transwell分析lncRNA POU3F3敲降对细胞迁移和侵袭的影响。组间计量数据比较采用t检验。相关性分析采用皮尔森分析。结果癌旁组织中lncRNA POU3F3表达水平(1.23±0.18)明显低于黑色素瘤组织表达水平(2.31±0.19), 差异有统计学意义(t=27.890, P<0.05)。癌旁组织中FAK和β-catenin表达水平(58.98±11.11、73.38±12.26)明...     

胃癌及癌旁正常组织中微小RNA表达谱的检测

目的 应用微小RNA(miRNA)芯片技术筛选胃癌及癌旁正常组织中差异表达的miRNAs,从中发现与胃癌发生发展相关的miRNAs.方法 收集14例新鲜胃癌组织及癌旁正常黏膜组织,从标本中分离出小RNA,并用Cy3、Cy5双色荧光标记,将标记的小RNA在miRNAs芯片上进行杂交反应.结果 软件MeV4.0对芯片数据进行聚类分析,筛选获得92个在胃癌及癌旁正常组织中差异表达的miRNAs(P＜0.05).相对于癌旁组织,在胃癌组织中有8个miRNAs表达显著上调,11个miRNAs表达显著下调(P＜0.01).结论 胃癌组织和癌旁正常组织中存在差异表达的miRNA分子,它可能与胃癌的发生发展有关.

Abstract：

Objective To screen and identify the microRNA (miRNA) differential expression profiles in gastric cancer and paired adjacent normal tissue by the miRNA microarray technique. Methods Forteen gastric cancer fresh tissue samples and paired adjacent normal mucosa tissue samples were collected. Small RNA was isolated from the samples, labeled with Cy3, Cy5 two-color fluorescence and hybridized on miRNA microarray. Results By analysis of Software MeV4. 0 based on microarrays screening, 92 gastric cancer related miRNAs (P ＜ 0. 05 ) were obtained. In the gastric carcinoma, compared with paired adjacent normal tissue, 8 miRNAs were significantly up-regulated and 11 miRNAs were significantly downregulated (P ＜ 0. 01 ). Conclusion MiRNAs are differentially expressed between gastric carcinoma and adjacent normal tissue, which may be related to the pathogenesis and progression of gastric cancer.     

长链非编码RNA PAPAS与口腔鳞状细胞癌临床病理特征及预后的关系

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) PAPAS与口腔鳞状细胞癌临床病理特征及预后的关系。方法选取2019年12月至2023年3月收治的60例口腔鳞状细胞癌和对应癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌组织和癌旁组织lncRNA PAPAS表达水平。分析lncRNA PAPAS表达水平与口腔鳞癌患者临床病理特征的关系。并采用Kaplan-Meier分析口腔鳞癌患者3年生存情况, COX回归分析影响口腔鳞癌不良预后发生的危险因素。结果口腔鳞状细胞癌lncRNA PAPAS表达水平(1.94±0.25)明显高于癌旁组织(1.03±0.12), 差异有统计学意义(t=25.940, P<0.05)。低分化患者lncRNA PAPAS表达水平(2.22±0.21)明显高于中高分化患者(1.85±0.16), 差异有统计学意义(t=7.632, P<0.05)。淋巴结转移患者lncRNA PAPAS表达水平(2.19±0.24)明显高于未淋巴结转移患者(1.84±0.16), 差异有统计学意义(t=6.729, P<0.05)。浸润深度≥5 mm患者...     

肺癌组织分型与转化生长因子-βⅡ型受体和肿瘤相关性巨噬细胞计数的关系

目的 检测肺腺癌和肺鳞状细胞癌中转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)和肿瘤相关性巨噬细胞(TAMs)计数,探讨两者与肺腺癌和肺鳞状细胞癌的关系.方法 应用免疫组织化学法检测TGF-βRⅡ蛋白和TAMs在肺腺癌和肺鳞状细胞癌组织中的表达,并与癌旁正常肺组织中的表达进行比较.结果 (1)TGF-βRⅡ蛋白的表达在肿瘤组织中明显降低(P＜0.01),其表达下调与肺癌的组织学类型、淋巴结转移、临床分期相关(P＜0.05).(2)TAMs在肿瘤间质内浸润数量明显增多(P＜0.01),并与肺癌的组织学类型、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05).结论 TGF-βRⅡ蛋白表达水平降低可促进肺癌的发生、浸润和转移,对肺腺癌发生或进展影响很大,并可能通过下调TGF-βRⅡ的表达、诱导TAMs至肿瘤间质,从而促进肿瘤的发生、发展,且这种作用在非小细胞肺癌中具有较普遍的意义.     

晚期糖基化终末产物诱导皮肤成纤维细胞中lncRNA表达谱的变化

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)在晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的皮肤成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞中表达谱的差异。方法利用lncRNA芯片技术检测AGEs诱导的皮肤成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞中lncRNA表达谱的变化,经过对原始数据进行标准化处理后,筛选出差异表达lncRNA。结果与正常培养的皮肤成纤维细胞相比较,24 h AGEs诱导的皮肤成纤维细胞中差异表达的lncRNA有3421条,其中1079条表达上调,2342条表达下调,差异表达达10倍以上的lncRNA有448条,其中208条表达上调,240条表达下调。结论与正常皮肤成纤维细胞相比较,AGEs诱导的皮肤成纤维细胞的lncRNA的表达谱发生了显著的变化,提示lncRNA可能参与了糖尿病皮肤病变的发生、发展。     

Sirtl在肝癌及癌旁组织中的表达差异研究

目的：研究肝癌组织与癌旁组织的基因表达谱差异。方法：应用包含44000条人类全长基因的寡聚核苷酸芯片检测肝癌组织与癌旁组织的基因表达谱,并比较两者之间存在明显上、下调的表达差异基因,随后用RT—PCR和Western blot方法进行验证分析。结果：基因芯片筛选出存在差异表达的基因,其中沉默信息调节因子1（Sirtl）在肝癌组织与癌旁组织中的表达差异明显,在肝癌组织中明显升高,经RT—PCR和Western blot证实与基因芯片结果一致。结论：Sirtl基因的表达可能与肝癌的发生发展密切相关。     

Experiences from tissue microarray in soft tissue sarcomas

The tissue microarray (TMA) technology was introduced in 1998 as a tissue preserving, high-throughput technique that allows studies of multiple markers in large sample sets. TMA slides can be analyzed using techniques such as immunohistochemistry and in situ hybridization and represents a powerful tool for the investigation of potential diagnostic and prognostic markers identified in DNA microarray studies. We review the TMA method, its reproducibility, advantages, limitations and future perspectives with specific focus on soft tissue sarcomas.     

Soft tissue contouring using autologous tissue for hemifacial atrophy

Summary Numerous methods for the restoration of facial symmetry in patients with hemifacial atrophy have been described. Most recently, the use of autologous tissue for augmentation has been employed. Experience gained from the use of free-tissue transplantation with microvascular anastomosis and injection of liposuctioned fat are presented in this paper. In 19 patients, reconstruction was performed using microsurgical tissue transfer, while in 3 patients, autologous fat transplantation alone was used. Indications, operative techniques together with the advantages as well as disadvantages associated with each procedure are described.     

经RNM诱导的前脂肪细胞构建组织工程化脂肪组织

目的:应用基因工程和组织工程的原理和方法,通过改造人前体脂肪细胞,提高其活性后,于裸鼠背部皮下构建组织工程化脂肪组织.方法:采用原代消化细胞培养法培养出前脂肪细胞,利用RNAi技术,诱导前脂肪细胞内的一个重要凋亡调控基因Bax基因表达沉默,然后接种到聚乳酸一乙醇酸共聚物(PLGA)支架上,种植在20只雌性裸鼠皮下,对获得的脂肪组织进行组织学评价.结果:经过改造后的前脂肪细胞活性良好,术后裸鼠全部成活,前脂肪细胞能够在支架上良好的存活,生长和增殖.结论:经过改造后的前脂肪细胞具有良好的活性,并且PLGA-前脂肪细胞复合体在裸鼠体内可形成脂肪细胞,值得进一步研究,以探索治疗软组织缺损的新途径.     

引导组织再生术用于牙周组织再生的影响因素

1982年Nyman S首先提出了引导组织再生（Guided Tissue Regeneration，GTR）的概念。引导组织再生的基本原理是用外科的方法放置一个物理屏障来选择性地分隔不同的牙周组织，即就是阻止牙龈结缔组织来源的成纤维细胞首先与根面接触，在膜与牙根之问形成楔状间隙，引导牙周膜细胞向冠方迁移生长，形成真正的牙周再生。随着GTR膜材料研究的不断深入，