免疫结核球蛋白、血管内皮生长因子-C在肝癌组织中的表达及意义

目的 检测免疫结核球蛋白(Bip)、血管内皮生长因子(VEGF)-C在肝癌组织中的表达,探讨其在肝癌生长中的作用机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测术中所取新鲜的42例肝癌标本、15例同个体癌旁1.0 cm肝组织和15例正常肝组织中Bip、VEGF-C的mRNA表达,应用Western blot方法验证57例肝癌组织和正常肝组织标本中Bip及VEGF-C在蛋白水平的表达.结果 肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中Bip mRNA相对表达量分别为0.4772±0.0401、0.4332±0.0488、0.4301±0.0398,Bip mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05).肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中VEGF-C mRNA相对表达量分别为0.4447±0.0335、0.4195±0.0334、0.4019±0.0259,VEGF-C mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05);实验对肝癌组织和正常肝组织中Bip和VEGF-C的蛋白表达进行定性验证:在肝癌组织和正常肝组织中均有两种蛋白的表达,但肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织.结论 在肝癌的生长过程中存在未折叠蛋白反应(UPR)的激活.在肝癌组织中Bip、VEGF-C mRNA和蛋白的表达一致,均呈高表达.这些基因和蛋白表达的改变可能与肝癌的发生、生长及转移密切相关.     

血管内皮生长因子mRNA在食管癌中的表达和临床意义

目的检测和分析食管癌中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达情况，探讨其与食管癌的淋巴结转移、临床分期的关系。方法应用逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)检测和分析36例食管癌组织和24例癌旁6cm以上的正常食管组织中VEGFmRNA的表达情况。结果(1)VEGF189mRNA的表达与食管癌：在36例癌组织中，有22例表达VEGF189mRNA(61．1％)。在24例癌旁正常组织中，有1例表达VEGF189mRNA(4．2％)。(2)VEGFmRNA的表达与淋巴结转移及TNM分期：在18例有淋巴结转移的病例中VEGF189mRNA表达16例(88．9％)；在18例无淋巴结转移的病例中VEGF189mRNA表达6例(33．3％)。Ⅰ期中VEGF189mRNA表达3例(21．4％)；Ⅱ期中VEGF189mRNA表达11例(84．6％)；Ⅲ期中VEGF189mRNA表达8例(88．9％)。结论VEGF189mRNA与食管癌的侵袭、转移有密切的相关性。     

X盒结合蛋白1、免疫球蛋白结合蛋白在肝癌组织中的表达及意义

目的 检测X盒结合蛋白1( XBP1)、免疫球蛋白结合蛋白(Bip)在肝癌组织中的表达,探讨其在肝癌生长中的作用机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测术中所取的42例肝癌标本、15例同个体癌旁1.0 cm肝组织和15例正常肝组织中XBP1、Bip的mRNA表达.应用Western blot法验证57例肝癌组织和正常肝组织标本中XBP1、Bip在蛋白水平的表达.结果 肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中XBP1 mRNA相对表达量分别为0.4396±0.0241、0.4152±0.0252、0.4095±0.0149,XBP1 mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05);肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中Bip mRNA相对表达量分别为0.4772±0.0401、0.4332±0.0488、0.4301±0.0398,Bip mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05).实验对肝癌组织和正常肝组织中XBP1和Bip的蛋白表达进行了定性验证:在肝癌组织和正常肝组织中均有两种蛋白的表达,但肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织.结论 在肝癌的生长过程中存在未折叠蛋白反应(UPR)的激活.在肝癌组织中XBP1、Bip mRNA和蛋白的表达一致,均呈高表达.这些基因和蛋白表达的改变可能与肝癌的发生、生长及转移密切相关.     

血管内皮生长因子C和D在胃癌组织和血清中的表达和意义

目的 探讨VEGF-C和VEGF-D在胃癌组织和血清中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法 2005年1月至12月80例胃癌手术患者,48例有区域淋巴结转移,32例无区域淋巴结转移,另设10例胃溃疡患者的正常胃黏膜为对照.ELISA法检测血清VEGF-C和VEGF-D,应用免疫组织化学方法检测正常胃黏膜和胃癌标本VEGF-C、VEGF-D表达情况.结果 胃癌患者血清VEGF-C和VEGF-D明显高于胃溃疡患者(χ2=8.39,P<0.05).胃癌患者血清VEGF-C阳性率受淋巴结转移影响(χ2=7.01,P<0.05).胃癌组织中,VEGF-C、VEGF-D阳性表达率分别为53%(42/80)、63%(50/80),明显高于正常胃黏膜组织(χ2=6.44.6.58,P<0.05),VEGF-C阳性表达率受淋巴结转移影响(χ2=11.25,P<0.05).结论 VEGF-C的表达受胃癌淋巴结转移影响,血清VEGF-C可作为胃癌的标志物,对术前判定淋巴结转移具有一定的临床价值.     

血管内皮生长因子表达和肝癌细胞周期启动的关系

为了探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）表达与肝癌细胞增殖的联系。采用同步化环境Ｇ－期的ＨｅｐＧ２细胞用ＴＰＡ诱导启动细胞周期并用ｃ－ｊｕｎ反义寡核苷酸阻断吉期,观察ＶＥＧＦ表达变化。结果显示：Ｇ０期Ｈｅｐ Ｇ２不表达ＶＥＧＦ,伴随细胞周期妄动表达,ｃ－ｊｕｎ反义寡核苷酸在ｅｐ Ｇ２细胞周期停滞于Ｇ０／Ｇ１期的内时使表达下调。由此表明：在Ｈｅｐ Ｇ２细胞株ＶＥＧＦ表达和细胞周期妄动联动,提示二者受同一     

血管内皮生长因子与肝癌

肿瘤血管生成与肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关,在众多影响肿瘤血管生成的因子中,血管内皮生长因子及受体的研究倍受人们关注。原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,给人类生命安全带来严重威胁。本文仅就血管内皮生长因子及其受体在肝癌诊断、治疗过程中的作用现状作一简要综述。     

血管内皮生长因子在肾脏疾病中的表达及意义

血管内皮生长因子 (VEGF)是一种高度特异的德管生成因子 ,具有促进内皮细胞增殖　增加血管通透性以及血管维持功能 ,在正常生理功能和病理过程中起重要作用。VEGF与相应受体结合产生作用 ,可能参与了急慢性肾脏疾病的发病机制。因此 ,抑制VEGF以及受体可能为各种肾脏疾病治疗开辟新的途径     

血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及意义

目的:研究血管内皮生长因子( VEGF)在乳腺癌组织中的表达并探讨其临床意义.方法:采用免疫组化方法检测74例乳腺癌、24例癌旁组织及18例正常乳腺组织中VEGF蛋白的表达情况,并计数微血管密度(MVD).结果:74例乳腺癌组织中VEGF阳性表达率为86.5％,明显高于癌旁组织(16.7％)及正常乳腺组织(11 1％)(P＜0.01),VEGF表达与肿瘤大小、组织学分级、临床分期、淋巴结转移相关,与MVD正相关(P＜0.05),与患者年龄、雌激素及孕激素受体情况无关(P＞0.05).结论:VEGF在乳腺癌发生、发展中起重要作用,可以作为判定乳腺癌恶性程度和预后的分子标记物.     

胃癌组织中P15蛋白和血管内皮生长因子表达及其相关性的研究

目的　研究胃癌组织中P15蛋白和血管内皮生长因子 (VEGF)的表达及相关性。方法　应用SP免疫组织化学方法检测了 16 0例胃癌和 5 2例胃良性病变中P15蛋白和VEGF的表达情况。结果　P15蛋白在胃癌中阳性率为 43 8% (70 /16 0例 ) ,在胃良性病变中的阳性率为 6 9 2 % (36 /5 2例 ) (P <0 0 5 )。VEGF在胃癌中的阳性表达率为 75 0 % (12 0 /16 0例 ) ,在胃良性病变中的阳性表达率为 7 7% (4/5 2例 ) (P <0 0 0 1)。P15蛋白阳性 /VEGF阴性表达率于胃癌中为 11 3% (18/16 0例 ) ,胃良性病变中为 6 9 2 % (36 /5 2例 ) (P <0 0 0 1) ;P15蛋白阴性 /VEGF阳性表达率于胃癌中为 42 5 % (6 8/16 0例 ) ,胃良性病变中为 7 7% (4/5 2例 ) (P <0 0 0 1)。结论　胃癌中存在P15蛋白下调和VEGF上调 ,且两者具有相关性。     

人类快速延迟整流性钾通道蛋白与血管内皮生长因子在胃癌组织中的表达及其目互关系

目的 观察人类快速延迟整流性钾通道基因表达的钾离子通道蛋白( HERG1)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌组织中的表达,探讨两者与胃癌预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法(SP法)、逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)技术方法对80例胃癌组织标本及对应正常胃黏膜组织中的HERG1蛋白和VEGF的表达进行检测,并进行回顾性随访.结果 免疫组织化学、RT-PCR检测胃癌组织中HERG1的阳性表达率分别为60％、90％,VEGF的阳性表达率分别为55％、85％;HERG1蛋白表达与淋巴结转移,远处转移关系密切;VEGF的表达与胃癌的浸润程度、TNM分期、分化程度、淋巴结转移明显相关(P＜0.05),而与性别、肿瘤大小、部位无明显相关.结论 HERG1蛋白和VEGF的过度表达与胃癌的发生发展有关,在肿瘤侵袭、转移过程中起重要作用,其共位表达有助于判断胃癌预后.     

人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建

目的：VEGF—C基因的真核表达载体，以便进一步研究VEGF—C基因在淋巴管生成中的作用。方法：根据人VEGF—C的cDNA序列，设计合成一对5’端分别含有EcoRI和BamH I酶切位点的特异性引物，运用RT—RCR方法扩塔人乳腺癌细胞MDA—MB－231中的VEGF—C cDNA(1.26kb)；回收PCR产物(1．28kb)，并将其连接至克隆载体pUMT—18中，重组的pUMT—18在大肠杆菌DH5α内扩增后，经质粒提取、EcoR I和BamH I酶切，筛选出阳性重组子，并进行基因测序鉴定；琼脂糖凝胶电泳回收含有VEGF—C cDNA全长的酶切片断(1．27kb)，然后在DNA连接酶作用下将其与真核表达载体pcDNA3．1（－)连接，重组质粒经EcoR I和BamH I酶切予以鉴定。结果：RT—PCR产物自有VEGF-C cDNA，基因测序显示重组的pUMT—18中自有正确的人VEGF—C cDNA全长序列，重组的pcDNA3．1(-)中含有人VEGF—C cDNA全长序列。结论：VEGP—C/pcDNA3．1(－)。     

PIGF及其受体Flt-1在胃癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨眙盘生长因子（PIGF）及其受体血管内皮生长因子受体-1（Flt-1）-5胃癌血管形成和临床病理特点的关系。方法：应用免疫组织化学染色法检测84例胃癌组织及20例正常胃组织中的PIGF和Flt-1,并计算以CD34为标志的微血管密度（MVD）,分析其与胃癌临床病理因素及预后的关系。结果：PIGF和Flt-1在胃癌组织中的表达均高于正常胃组织（P〈0．05）。PIGF表达与胃癌的组织学分化程度、浸润深度、Borrmann分型、淋巴结转移有关（P〈O．05）;Flt-1表达与胃癌的浸润深度、Borrmann分型有关（P〈0．05）;MVD与肿瘤浸润深度、Borrmann分型、淋巴结转移有关（P〈0．05）。PIGF与Flt-1表达阳性患者的5年存活率分别为45．5％、40.4％。浸润深度、Flt-1阳性表达为影响胃癌患者生存的独立预后因素。结论：PIGF／Flt-1通路可能在胃肿瘤血管发生及发展过程中起重要作用,从而影响胃癌的进展及预后。     

血管内皮生长因子及其受体mRNA在乳腺癌组织中的表达

目的　研究血管内皮生长因子及其受体FLT 1、FLK 1mRNA在乳腺癌组织中的表达及与临床病理因素的相关性。　方法　采用逆转录聚合酶链反应技术对手术的 47例乳腺癌标本 ,11例乳腺良性病变标本中血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体FLT 1、FLK 1mRNA的表达进行检测。结果　在良、恶性乳腺组织中均检测到VEGF12 1、165mRNA的表达 ,在乳腺癌组织中表达水平分别为0 42 0± 0 13 3、0 2 91± 0 0 94高于良性乳腺组织 0 196± 0 0 67(P =0 0 0 0 )、0 2 0 6± 0 0 5 8(P =0 0 0 1) ;在乳腺癌组织中 ,VEGF12 1mRNA表达高于VEGF165mRNA(P =0 0 0 0 ) ,而在良性乳腺组织中两者表达水平差异无显著性意义 (P =0 666)。FLT 1、FLK 1mRNA在部分乳腺癌组织中表达 ,分别为 3 8 3 %(18/4 7)和 2 5 5 % (12 /4 7) ,而在良性乳腺组织中未见表达。乳腺癌组织中VEGF12 1、VEGF165、FLT 1、FLK 1mRNA表达与患者年龄、肿块大小、淋巴结转移状况、肿瘤分期及雌、孕激素受体状况之间无明显相关性。　结论　乳腺癌组织中VEGF12 1、165及其受体FLT 1、FLK 1mRNA表达水平上调 ,提示其在乳腺癌的血管生成中起着重要作用。     

直肠癌患者血管内皮生长因子C和胶原三股螺旋重复蛋白1的表达对其预后的影响研究

目的探讨直肠癌血管内皮生长因子C（VEGF-C）和胶原三股螺旋重复蛋白1（CTHRCl）的表达及其与患者预后的关系。方法收集江西省宜春市人民医院2005年9月至2010年9月经手术切除的直肠癌石蜡病理标本共120例,采用免疫组织化学方法检测VEGF-C和CTHRCl的表达,并分析其与患者临床病理特征和预后的关系。结果VEGF-C表达与本组患者肿瘤大小（r=0．943）、TNM分期（r=O．784）和分化程度（r=0．773）明显相关（均P〈0．05）;而CTHRCl表达与肿瘤大小（r=0．829）、TNM分期（r=0．632）和分化程度（r=0．532）密切相关（均P〈0．05）。VEGF-C低表达组直肠癌患者生存期[（40．0±1．3）月]明显长于高表达组[（35．4±0．5）月,P〈0．01];CTHRCl低表达组生存期[（39．0±0．5）月]也明显长于高表达组[（35．0±0．5）月,P=-0．014];差异均有统计学意义。结论VEGF-C和CTHRCl可能协同促进肿瘤细胞的侵袭和转移,可能为直肠癌患者预后的判断提供客观依据。     

Isoflurane induces expression of vascular endothelial growth factor through activating protein kinase C in myocardial cells

Objective： Vascular endothelial growth factor （VEGF） plays important roles in establishing collateral circulation of ischemic myocardium. This study aimed to investigate the effect of isoflurane on VEGF expression and the potential intracellular signal transduction pathway in cultured rat myocardial cells in order to further reveal the molecular mechanism of myocardial preservation of isoflurane. Methods： Primary myocardial cells of Sprague-Dawley rats were isolated and cultured. They were divided randomly into control group, isoflurane group, protein kinase C （PKC） inhibitor group and PKC inhibitor＋isoflurane group where cells were respectively incubated without any treatment, treated by 0.5, 1.0 and 1.5 minimum alveolar concentration （MAC） of isoflurane for 6 hours, by PKC inhibitor calphostin C at a final concentration of 50 nmol/L and by 50 nmol/L calphosfin C＋ 1.0 MAC isoflurane for 6 hours. VEGF expression was detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） and the expression levels of PKC isoforms were determined by Western immunoblotting method. Results： Isoflurane increased the VEGF expression in myocardial cells in a dose-dependent way. VEGF levels were significantly higher in 1.0 and 1.5 MAC isoflurane groups than in the control group （both P〈0.01）. The effect of isoflurane on upregulating VEGF expression was blocked by PKC inhibitor calphostin C （P〈0.01）, but calphostin C did not alter VEGF expression （P〉0.05）. Isoflurane induced the activation and translocation of PKC Immunoblotting analysis revealed that the immunoreactivity of PKC ε increased significantly in the membrane fractions and deceased significantly in the kytoplasm fractions for cells treated with 1.0 MAC isoflurane as compared with the untreated cells, but not of PKC a, PKCα and PKCζ （P〈0.01）. Conclusion： Isoflurane induces myocardial cells to release VEGF through activating PKCε from the endochylema to the cytomembrane, suggesting a possible novel mechanism of isoflurane protecting myocardial cells.