用紫外线诱变育种筛选土霉素菌种的高效价菌株

以土霉素产生菌龟裂链霉菌 F_1为出发菌株,经紫外线诱变处理后,再经摇瓶初筛、复筛获得高效价菌株 F_2。     

耐磷酸盐土霉素菌株选育和发酵的研究

以土霉素生产菌株138^#为出发菌株，经饥饿培养、5-FU、UV、咖啡因复合诱变处理，再用含高磷酸盐的培养基定向筛选，得到高产突变菌株100^#。该突变株遗传特性稳定，代谢特性优于出发菌株，经57m^3发酵罐生产验证，生产稳定，低效价罐批减少59．5％，在磷酸盐浓度提高到0.04％～0.05％时，统计一年的正常罐批平均发酵效价比对照菌株提高5．76％。     

紫外线诱变育种提高土霉素菌种的生产能力

以土霉素产生菌龟裂链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｒｉｍｏｓｕｓ）Ｌｆ－２为出发菌株，经紫外线处理后，再经摇瓶初筛、复筛获得高效价菌株Ｕｆ－３。又经Ｌ９（３４）的正交设计实验，确定了Ｕｆ－３的最佳培养基配比，使其摇瓶效价提高１５．２％。在２０ｍ３罐上放大试验，与出发菌株相比发酵效价提高１７．４％，发酵指数提高２３．９％     

氮离子注入土霉素产生菌诱变高产菌株的研究

以土霉索生产菌株48。为出发菌株，采用氮离子注入诱变处理，经摇瓶筛选，得到土霉素02—2-44^#菌株。该菌株特性优良，经57m^3发酵罐试验。150批平均发酵效价高于对照菌株（1158．6μg／ml），提高3．42％。发酵总亿及发酵指数分别提高3.17％和3．99％。     

氮离子注入土霉素产生菌的诱变育种

目的获得土霉素产生菌的高产菌株,提高发酵单位。方法用土霉素产生菌龟裂链霉菌经分离纯化的2810#菌株的分生孢子作处理样品,使用发射能量为15×103eV的氮离子束对其进行诱变处理,氮离子的注入剂量为每平方厘米注入2.0×1015个离子,分生孢子死亡率为98.2%。结果诱变处理后经摇瓶筛选得到1082#高产菌种,其摇瓶发酵单位提高11.2%,投入发酵生产后平均发酵单位提高8.9%。结论氮离子注入方法对提高龟裂链霉菌的产量正向突变频率有明显效果。     

四环素生产菌诱变育种与发酵性能的研究

采用紫外线对四环素生产菌金色链霉菌４－２８的原生质体进行诱变处理,选是到一株高产突变株Ｈ３２－３７。该菌在形态上与出发菌株存在明显差异;菌落小,呈图形或梅花形,表面粗糙,孢子丰富,孢子颜色深,四环素生产能力比出发菌株提高２３．９％,研究了其发酵性能,优化了培养基组成和发酵工艺条件,使四环素效价提高了４４．４％。     

纳他霉素产生菌的诱变育种及其发酵条件的优化

目的 以纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis)SIPI-NHF-09为出发菌株进行诱变选育和培养条件优化,以提高其纳他霉素的产量.方法 采用紫外和微波结合对纳塔尔链霉菌SIPI-NHF-09进行诱变选育,并对获得的高产突变株SIPI-UW-10-22的发酵条件进行了初步优化.结果 经过连续3轮的紫外和微波诱变,获得高产突变株SIPI-UW-10-22,其纳他霉素(Natamycin)产量达到3.15g/L,是出发菌株的3.5倍,且该菌株经多次传代,遗传性能稳定.对SIPI-UW-10-22发酵条件优化后获得其发酵条件为:以5.5％玉米淀粉加0.5％葡萄糖为碳源,2％黄豆饼粉加1％酵母粉为氮源,种龄46h,初始pH7.0,接种量8％,摇床转速220r/min,28℃培养126h.此条件下,纳他霉素的产量达到4.07g/L,较优化前提高了1.29倍.结论 紫外与微波诱变相结合的方法简便有效,所获得高产菌株遗传性状稳定.     

常压室温等离子体诱变选育他克莫司高产菌株及发酵条件优化

目的 选育他克莫司高产菌株,提高发酵单位。方法 采用常压室温等离子体(ARTP)技术对一株他克莫司出发菌株FK13-2-14进行诱变,对高产菌株的种子瓶接种量、异亮氨酸的添加量及添加时间等发酵条件进行优化。结果 获得1株稳定的突变高产菌株FK18-1-56,摇瓶发酵单位提高了162%;优化后种子瓶接种量为1.5cm2/40mL,异亮氨酸添加时间为48h,添加量为3.0g/L。高产菌株在优化后的发酵条件下,100L罐发酵单位达到997μg/mL,比出发菌株提高了128%。结论 利用常压室温等离子体诱变技术得到他克莫司高产菌株,经发酵工艺优化后,大幅度提高了他克莫司的工业发酵水平。     

土霉素生物合成研究进展

本文介绍了近年来土霉素的生物合成研究进展,包括基因簇结构、土霉素分子调控等,以及运用基因工程和组合生物合成原理创造新型土霉素结构类似物的前景.     

柱晶白霉素产生菌的诱变育种和发酵研究

柱晶白霉素产生菌经常规诱变及原生质体多次再生处理，获菌株９１－９１１，其产量比原始菌株提高了３５倍以上；清除了原菌株的菌丝毒性；主组分Ａ５含量也有明显增加。为充分发挥９１－９１１菌株的生产潜力，采用均匀设计方法对发酵培养基进行优化，获得ｂ培养基。９１－９１１菌株用６培养基在２００Ｌ、１０ｔ规模发酵罐上试验，证实９１－９１１菌株确是一株高产稳产的优良生产菌种。     

纳他霉素高产菌株的链霉素抗性选育及其发酵工艺的优化

用紫外线对纳他霉素(Natamycin)产生菌褐黄孢链霉菌(Streptomyces gilvosporeus)ATCC13326菌株孢子进行诱变处理后，利用链霉素抗性突变选育得122株链霉素抗性突变株。其中纳他霉素产量高于出发菌株的有13株。突变株SG-56的生产能力达到出发菌株的146％，研究了其发酵性能，优化了培养基组成和发酵工艺条件，纳他霉素产量为2．81g／L，较出发菌株产量提高了170％。     

糖肽类抗生素A40926B产生菌的培养基优化及菌种选育

以A40926 B产生菌野野村放线菌SIPI-D-30为出发菌株,通过UV诱变及乙酸钠和甘氨酸抗性平板筛选,获得A40926 B产量提高的突变株SIPI-U-157。经优化,确定摇瓶发酵培养基(g/L)为:葡萄糖5.0、麦芽糊精30.0、可溶性淀粉10.0、玉米淀粉30.0、大豆蛋白胨5.0、肉蛋白胨10.0、酵母浸粉5.0、冷榨黄豆饼粉10.0、棉籽饼粉5.0、L-缬氨酸1.0,发酵培养7 d,突变株的A40926 B发酵单位为893 mg/L。该突变株在5 L发酵罐中培养180 h,A40926 B的产量最高为583 mg/L。     

基因重组hEGF融合蛋白的发酵条件优化

对hEGF融合蛋白基因工程菌的发酵条件进行优化。结果表明，当起始pH为6．6～7．0，以100ml／500ml的装液量，6％接种量，37℃培养2h，加入0．1mmol／L的IPTG诱导4h后，收获菌体可得到较高的生物量和hEGF融合蛋白表达量。其中IPTG诱导开始时间和菌体收获时间对蛋白表达有显著影响。     

产麦角固醇酵母菌株的筛选及发酵条件优化

从12株产麦角固醇(1)的酵母菌中,筛选出的一株1产量较高的酵母菌YN2,并对其产1发酵条件进行了优化.结果表明,最适培养基配方(%)为:酵母粉1,牛肉膏2.5,葡萄糖8,K2HPO4 0.3,MgSO4 0.15.最适培养条件为:培养温度28℃,起始pH6.5,发酵时间72h.在优化的试验条件下,进行摇瓶发酵,1含量可达生物量的2.2%,100ml发酵液中1产量达25.3mg.     

一株壳聚糖酶产生菌的鉴定和产酶条件优化D张子瑞1,2,孙谧1*,郝建华1,刘均忠1

对一株产壳聚糖酶菌株Y116进行了形态学观察、生理生化特征鉴定和16S rDNA序列同源性分析,初步确定该菌株属于芽孢杆菌属(Bacillus)。采用单因素法和响应面法,对菌株Y116产酶的培养基成分和培养条件进行了优化。首先筛选碳源、氮源、初始pH、金属离子、NaCl浓度、酵母浸粉浓度、接种量、发酵温度和时间8个因素。研究结果显示：当酶活达到最高值时,最终确定各因素的值分别为：乳糖 35 g/L,豆饼粉30 g/L, Mg₂₊ 0.5 g/L,NaCl 5 g/L,初始pH 5.0,接种量5%,培养温度30 ℃和发酵时间96 h。再通过Plackett-Burman(PB)设计对影响壳聚糖酶产量的8个主要因素进行评价,确定了豆饼粉浓度、初始pH和Mg₂₊浓度是影响产酶量的3个主要因素;利用中心组合设计(CCD)及响应面分析,最终得到3个主要因素的最优值：豆饼粉浓度39.44 g/L,pH 5.12,Mg₂₊ 浓度5.12 g/L,酶活力比优化前提高了5倍。     

鸟苷产生菌TA208发酵工艺优化

鸟嘌呤核苷(guanosine,1),又名9-β-D-呋喃核糖基鸟嘌呤,可用于合成阿昔洛韦、利巴韦林、5'-鸟苷酸(5'-GMP)、三磷酸鸟苷(GTP)等药物[1].随着1工业用途及国内市场的扩大,1的发酵生产也得到重视[2].     

麦考酚酸产生菌液体发酵条件的优化

研究了短密青霉菌L产生麦考酚酸的发酵工艺条件，包括斜面培养基种类、初始pH、培养温度、碳氮源种类等，并通过均匀设计法优化了发酵培养基的组成。在优化条件下，摇瓶发酵单位达8565μg／ml，比优化前提高了89％。     

阿卡波糖产生菌的诱变育种

阿卡波糖(acarbose)是α-葡萄糖苷酶抑制剂,用于口服降血糖,其生物合成主要受到易利用的结构类似物麦芽糖(maltose)的阻遏和终产物的反馈抑制.通过诱变育种可部分解除其合成途径中的阻遏和抑制作用,促进产物合成.本文采用了紫外光预处理、在种子培养基中递增添加高剂量麦芽糖的连续诱变模式,希望获得抗性突变株或解除前体生物合成途径中反馈抑制的突变株,以提高前体的生成速率,满足生物合成需要[1].结果表明,此法优于涂布平板诱变方法,所得的M-20突变株的生产能力比出发菌株提高74%.     

高产胞外硫酸软骨素酶菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化

目的 对从青岛胶东海岸潮间带淤泥中分离筛选高产胞外硫酸软骨素酶的菌株进行鉴定和发酵条件优化。方法 通过平板快速筛选法和摇瓶复筛,筛选到1株高产胞外硫酸软骨素裂解酶的菌株C26,根据形态学和16S rRNA基因序列分析对其鉴定,并采用单因素实验和响应面实验对发酵条件进行优化。结果 根据形态学和16S rRNA基因序列分析,鉴定菌株C26为不动杆菌属（Acinetobacter sp.）,命名为Acinetobacter sp. C26。优化最适发酵条件为：硫酸软骨素15 g?L-1,酵母粉7.69 g?L-1,培养温度23 ℃,在最适条件下硫酸软骨素酶的活力可达11.96 U/mL,是优化前的4.82倍。结论 本研究筛选得到的菌株Acinetobacter sp. C26产酶活力高,发酵周期短,在生物化工及医药方面具有潜在应用价值。     

阿弗菌素产生菌SIPI-AV-99081的选育

阿弗菌素链霉菌SIPI-AV-99081采用UV和NTG进行诱变处理。选育得到一高产菌株和几个典型的突变株。高产菌株AV-h-360的阿弗菌素B1的生产能力较出发菌株提高了3倍，AV-m-486和AV-m-796为阿弗菌素合成阻断突变株，它们都不能产生天然的阿弗菌素。