胃癌细胞与腹膜间皮相互作进用促腹膜纤维化致腹膜转移的研究

  目的   研究间皮细胞对胃癌细胞的抵御作用, 模拟游离癌细胞在接触腹膜前通过其分泌物导致的腹膜增厚、纤维化的过程, 同时观察了间皮细胞对胃癌细胞迁移及侵袭能力的反作用。   方法  用荧光显微镜观察共培养时间皮细胞对胃癌细胞的抵御作用; 体内实验观察腹膜变化; 电镜、光镜下观察体外实验中间皮层在胃癌-腹膜相互作用中的损伤和细胞骨架变化; 采用Millicell小室共培养观察间皮细胞对胃癌细胞迁移及侵袭能力的反作用。   结果  正常间皮细胞可防止肿瘤细胞对于腹膜的粘附, 受损脱落后胃癌细胞可轻易粘附。体内外实验均显示接触胃癌细胞上清后腹膜间皮细胞受损、凋亡, 并且受损残余的间皮可以反作用于癌细胞, 使其迁移转移力提高。   结论  正常间皮细胞可以抵御胃癌细胞的侵袭, 受损伤刺激后的间皮细胞可以反作用于胃癌细胞促进其迁移及侵袭。      

胃癌MKN45细胞培养液上清对腹膜间皮细胞损伤的实验研究

目的:建立胃癌腹膜转移早期间皮细胞的损伤模型,探讨胃癌腹膜转移早期癌细胞对间皮细胞的损伤与细胞凋亡的联系,以及凋亡程度与相关蛋白表达。方法:将人胃癌细胞培养液上清,与人腹膜间皮细胞系HMrSV5共培养。观察间皮细胞形态、增殖改变,透射电镜观察细胞凋亡,流式细胞仪和荧光染色判断凋亡比例。免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达情况。结果:接触胃癌培养液上清24h后,间皮细胞大片脱落并出现典型凋亡表现。胃癌细胞的分泌物明显抑制间皮细胞的生长。胃癌细胞培养液上清可诱导间皮细胞凋亡、抑制细胞增殖,呈程度-时间依赖性地抑制间皮细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达;并能增加促凋亡蛋白Bax表达。结论:胃癌细胞在腹膜转移早期可以通过其分泌物诱导间皮细胞损伤、凋亡,凋亡机制与Bcl-2和Bax的失调有关。提示保护间皮细胞,抗间皮细胞凋亡在胃癌腹膜转移治疗中可能有一定应用价值。     

IL-8诱导的肿瘤相关巨噬细胞对肝细胞肝癌侵袭转移的影响

  目的  探究外源性IL-8对单核细胞的活化作用及IL-8活化后的肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）对肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）侵袭转移的影响。  方法  外源性IL-8刺激THP-1细胞后检测M1、M2型TAMs的比例。IL-8活化的TAMs与HCC细胞共孵育,利用RT-PCR和Western blot法检测TAMs对HCC细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的影响;利用划痕修复实验和Transwell侵袭实验探究TAMs对HCC细胞侵袭转移的影响;并在100例HCC样本中进行组织水平验证。  结果  外源性IL-8可诱导THP-1细胞的表型向M2型TAMs方向分化。IL-8体外诱导的TAMs可以反作用于HCC,促使其发生EMT,进而促进其侵袭转移。在HCC组织中证实IL-8与TAMs浸润呈明显的正相关（r=0.22,P < 0.05）,同时浸润的TAMs与神经细胞型钙黏蛋白（N-cadherin）的表达量呈正相关（r=0.20,P < 0.05）。  结论  在HCC中,IL-8可以趋化TAMs浸润并促进其活化,活化后的TAMs可促进HCC细胞EMT和侵袭转移。      

卵巢癌腹腔微环境中肿瘤相关巨噬细胞表型特点及其TLR表达谱的研究

  目的  探讨卵巢癌腹水微环境中肿瘤相关巨噬细胞(TAM)浸润情况及其表型特征和TAM的Tol样受体表达情况。  方法  应用免疫组织化学方法及流式细胞术检测卵巢癌及妇科良性病变腹水中CD68+TAM及其亚型的比例情况。应用Real-timePCR检测不同亚型TAM的Tol样受体的表达情况。  结果  23例卵巢癌腹水细胞CD68+TAM平均值为73.6个/HP, 20例良性病变平均计数为50.2个/HP。两组间CD68+TAM浸润差异无统计学意义(P > 0.05)。CD68+TAM在卵巢癌及对照组腹水中所占比例无差异, 分别为31.7%和18.8%(P > 0.05)。卵巢癌腹水中M2型TAM占全部巨噬细胞54.3%, 明显高于对照组10.0%(P < 0.05);对照组M1型TAM占优势, 为53.3%, 明显高于卵巢癌组的30.5%(P < 0.01)。不同亚型巨噬细胞Toll样受体表达差异无统计学意义。  结论  卵巢癌腹腔微环境中同时存在M1和M2型TAM, 但M2型TAM在卵巢癌中占优势, 而M1型TAM在良性病变中占优势。Toll样受体不能区分M1-TAM与M2-TAM。      

新多胺类似物TBP对人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡及迁移能力的影响

  目的  研究新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutyl propaneadiamine, TBP)对人膀胱移行细胞癌T24细胞生长、凋亡及迁移能力的影响。   方法   MTT比色法分析细胞增殖, 流式细胞术分析细胞周期改变, TUNEL法检测细胞凋亡, Western blot用于分析细胞凋亡相关蛋白Bax和细胞色素C的表达水平, Transwell技术检测细胞迁移能力的变化。   结果  TBP有效抑制T24细胞增殖及迁移能力。细胞周期分析显示TBP抑制细胞发生G_1/S期转换, 导致S期细胞比例显著性下降, G_0/G_1期细胞比例升高, 同时出现SubG_1亚凋亡峰。TBP处理后, 细胞呈现典型凋亡现象, 细胞浆中促凋亡蛋白Bax和细胞色素C含量明显升高。   结论  TBP能够抑制人膀胱移行细胞癌T24细胞增殖、降低T24细胞迁移能力, 诱导细胞凋亡, 其机制可能与影响肿瘤细胞的细胞周期, 活化线粒体相关的细胞凋亡途径有关。      

肿瘤相关巨噬细胞在胃癌中的作用

巨噬细胞广泛参与固有免疫及适应性免疫,其表型和功能具有很大可塑性,在不同微环境中巨噬细胞可分化为经典活化（M1表型）和替代活化（M2表型）,其中M2表型有免疫调节作用,参与诱导Th2反应。肿瘤微环境浸润的巨噬细胞即肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）多具M2表型,能促进肿瘤新生血管生成、肿瘤侵袭和转移。由此可见,TAMs对胃癌的发生发展具有重要的免疫调节作用,本文就此进行综述。      

EGCG诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡相关基因的差异表达

  目的   研究表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate,EGCG）诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的生物学效应,并探讨其分子机制。   方法   运用DNA含量分析、Annexin Ⅴ/PI双标记法、DNA琼脂糖凝胶电泳以及透射电子显微镜形态学方法来观察细胞凋亡。通过SuperArray人细胞凋亡基因芯片检测100μmol/L EGCG作用于MGC-803细胞12 h后凋亡相关基因的表达谱,采用RT-PCR和Western blot技术验证上调基因Fas-L和下调基因Bag-1。   结果   25、50、100、200 μmol/L EGCG作用于MGC-803细胞24 h后,DNA含量分析出现了明显的亚二倍体峰;100 μmol/L EGCG作用4、8、12、24 h后,Annexin Ⅴ/PI双标记法表明早期凋亡细胞显著增加。100 μmol/L EGCG作用24 h后,在琼脂糖凝胶上电泳可见DNA凋亡特征性的阶梯状条带。电子显微镜观察到细胞体积缩小,核浓缩和凋亡小体形成等典型的形态学改变。通过基因芯片检测发现,100 μmol/L EGCG作用12 h后有8个凋亡相关基因表达差异显著,选择其中Fas-L和Bag-1运用RT-PCR和Western blot技术进行验证,其结果与基因芯片一致。   结论   EGCG能够诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡,这可能是多个基因和多条信号转导通路共同作用的结果。      

肿瘤相关巨噬细胞对胃癌MGC-803 细胞恶性生物学行为的影响

[摘要] 目的：探讨肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophage，TAM）对胃癌MGC-803 细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法：体外培养人单核细胞株THP-1，加入佛波酯（PMA）和IL-4 后，用ELISA法检测细胞培养上清液中IL-12、IL-10 的水平。取对数生长期MGC-803 细胞和M2 型TAM，根据培养方式不同分为单独细胞培养组、非接触共培养组和接触共培养组，用MTT法、Transwell小室法分别检测MGC-803 细胞的增殖、迁移和侵袭能力，用AnnexinV-FITC/PI 双染流式细胞术检测MGC-803 细胞的凋亡和细胞周期变化，用qPCR、Western blotting 分别检测MGC-803 细胞中MMP-9、MMP-2 mRNA和蛋白的表达水平。结果：与PMA组相比，PMA+IL-4 组细胞上清液中IL-12 水平显著降低、IL-10 水平显著升高（均P<0.05），成功将THP-1细胞诱导分化为M2型TAM。与单独细胞培养组相比，非接触共培养组、接触共培养组（: 1）MGC-803细胞的增殖率显著升高（均P<0.05）；（2）细胞的迁移、侵袭数量升高（均P<0.05）；（3）细胞凋亡率显著降低（均P<0.05）；（4）S、G2 期细胞的数量升高、G1 期数量降低（均P<0.05）；（5）细胞中MMP-9、MMP-2 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高（均P<0.05）。结论：TAM可促进胃癌MGC-803 细胞增殖、迁移和侵袭，解除细胞G1期阻滞，减少细胞凋亡，其机制可能与上调胃癌细胞MMP-9、MMP-2表达有关。     

天花粉蛋白对肺癌A549细胞凋亡及细胞骨架微管结构改变的研究

  目的   探讨天花粉蛋白（Trichosanthin, TCS）对肺癌A549细胞株抑制增殖作用及诱导凋亡效应。   方法   用不同剂量的TCS处理肺癌A549细胞,采用MTT法检测TCS对细胞增殖的抑制作用,透射电镜观察细胞骨架微管的变化,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率。   结果   TCS使肺癌A549细胞呈凋亡型改变,细胞活性下降,且随着浓度的升高、时间的延长抑制率相应升高。   结论   药理剂量的TCS可抑制肺癌A549细胞的增殖和分化,并通过细胞骨架的变化影响A549细胞的功能。      

miR-let-7c-5p靶向c-myc在白血病细胞定向单核/巨噬细胞分化中的作用机制研究

目的 探讨miR-let-7c-5p/c-myc信号轴在白血病细胞定向单核/巨噬细胞分化中的调控作用。方法 采用PMA+LPS+IFN-γ诱导THP-1白血病细胞向单核/巨噬细胞定向分化,PBS作为对照组。诱导48 h后CCK8法测定细胞增殖水平;流式细胞仪测定细胞CD11b与CD14分化抗原表达水平;RT-qPCR检测白血病细胞分化前后miR-let-7c-5p和c-myc的表达变化;蛋白质印迹法检测c-myc蛋白表达变化;双荧光素酶结合实验检测miR-let-7c-5p与c-myc的3′UTR靶向结合和活性调控关系;转染miR-let-7c-5p mimic观察c-myc表达变化后细胞的增殖分化水平变化;过表达c-myc拯救实验观察miR-let-7c-5p对PMA+LPS+IFN-γ诱导的THP-1细胞增殖分化的影响。THP-1细胞转染miR-let-7c-5p inhibitor,观察c-myc表达变化对THP-1定向分化为M1样巨噬细胞的影响。结果 与PBS对照组相比,PMA+LPS+IFN-γ诱导48 h后,THP-1细胞的增殖能力明显降低(0.64±0.01 vs 0.3...     

化疗后残余胃癌细胞发生上皮间质转化的体外研究

  目的  观察体外化疗能否诱导胃癌细胞发生上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition,EMT）。   方法  使用5-Fu（30 μg/mL）对胃癌细胞株SGC7901进行4个疗程的体外化疗,残余细胞继续培养,得到能稳定传代的细胞SGC7901/Fu。比较SGC7901及SGC7901/Fu在细胞形态、EMT标记物、化疗耐药性、侵袭能力、肿瘤干细胞特性等方面的差异。   结果   与SGC7901比较,SGC7901/Fu呈间质细胞形态、上皮表型标记物表达下调、间质表型标记物表达上调。在SGC7901细胞及SGC7901/Fu细胞中,5-Fu的中效浓度（IC₅₀）分别为（43.8±7.2）μg/mL及（64.6±5.5）μg/mL,穿过Transwell小室基底膜的细胞数分别为（51.4±8.7）个及（93.2±9.5）个,克隆形成率分别为5.2%±1.0%及13.2%±2.2%,CD44+/CD24-细胞亚群所占比例分别为4.13%±0.81%及7.97%± 0.50%,两者间的差异均具有统计学意义（P<0.05）。   结论  体外化疗后残余的胃癌细胞发生EMT,同时细胞侵袭能力增强、化疗耐药性升高,并获得了肿瘤干细胞特性。      

Interaction of coagulation factors and tumor-associated macrophages mediates migration and invasion of gastric cancer

Abundant macrophage infiltration and increased expression of coagulation factors have been observed in cancer patients. The aim of the present study was to determine how the interaction between activated coagulation factors and monocytes/macrophages contributes to gastric cancer (GC) cell migration and invasion. We assessed cytokine/chemokine production of coagulation-factor-treated macrophages by ELISA. The effects of the interaction between coagulation factors and tumor-associated macrophages (TAM) on GC cell migration and invasion were determined by in vitro migration and invasion assay. In addition, we used an in vitro co-culture system of GC cells/TAM treated by coagulation factors to evaluate the effect of coagulation factor/TAM interaction on the human umbilical vein endothelial cell line (HUVEC). We found that the M2-like phenotype of interleukin (IL)-4(high), IL-10(high), transforming growth factor (TGF)-β(high), tumor necrosis factor (TNF)-α(high) was exhibited when the human monocytic cell line THP-1 was stimulated by coagulation factors III (TF), VIIa (FVIIa) and XIIa (FXIIa). For the migration assay, the GC cells (BGC-823 or SGC-7901) that were co-cultured with activated coagulation factor/TAM both showed increased migration. For the invasion assay, both BGC-823 and SGC-7901 cells co-cultured with TF/TAM showed increased invasion. We also found that TAM activated by coagulation factors could induce vascular endothelial growth factor/MMP-9 expression, which could promote invasion of GC cells. The HUVEC co-cultured with TAM (PMA-treated THP-1 macrophages co-cultured with GC cells) expressed high levels of FXIIa. In conclusion, coagulation factors might facilitate GC cell migration and invasion by transforming macrophages toward TAM-like cells. Interaction of coagulation factors and TAM mediates migration and invasion of GC.     

Transforming growth factor-beta1 signaling blockade attenuates gastric cancer cell-induced peritoneal mesothelial cell fibrosis and alleviates peritoneal dissemination both in vitro and in vivo

Peritoneal dissemination is the most frequent metastatic pattern of advanced gastric cancer and the main cause of death in gastric cancer patients. Transforming growth factor-beta1 (TGF- ß1), one of the most potent fibrotic stimuli for human peritoneal mesothelial cells, has been shown to play an important role in this process. In this study, we investigated the effect of TGF- ß1 signaling blockade in gastric cancer cell (GCC)-induced human peritoneal mesothelial cell (HPMC) fibrosis. HPMCs were cocultured with the high TGF- ß1 expressing GCC line SGC-7901 and various TGF- ß1 signaling inhibitors or SGC-7901 transfected with TGF-ß1-specific siRNA. HPMC fibrosis was monitored on the basis of morphology. Expression of the epithelial cell marker, E-cadherin, and the mesenchymal marker, α-smooth muscle actin (α-SMA), was evaluated by Western blotting and immunofluorescence confocal imaging. GCC adhesion to HPMC was also assayed. In nude mouse tumor model, the peritoneal fibrotic status was monitored by immunofluorescent confocal imaging and Masson’s trichrome staining; formation of metastatic nodular and ascites fluid was also evaluated. Our study demonstrated that GCC expressing high levels of TGF-ß1 induced HMPC fibrosis, which is characterized by both upregulation of E-cadherin and downregulation of α-SMA. Furthermore, HPMC monolayers fibrosis was reversed by TGF- ß1 signaling blockade. In vivo, the TGF- ß1 receptor inhibitor SB-431542 partially attenuated early-stage gastric cancer peritoneal dissemination (GCPD). In conclusion, our study confirms the significance of TGFß1 signaling blockade in attenuating GCPD and may provide a therapeutic target for clinical therapy.     

胃癌细胞外泌体lncRNA LOXL1-AS1诱导M2型巨噬细胞极化功能及机制研究

目的:探究胃癌细胞外泌体lncRNA LOXL1-AS1对巨噬细胞分化的影响及机制。方法:差速离心法提取胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901、MKN-45和人胃黏膜细胞GES-1所分泌的外泌体（分别记为MGC-803 exo、SGC-7901 exo、MKN-45 exo和GES-1 exo）,人单核细胞系TH-1加入PMA诱导其分化为M0型巨噬细胞,将10 μg/mL 的GES-1 exo、MGC-803 exo、SGC-7901 exo、MKN-45 exo以及等体积的PBS分别与M0型巨噬细胞共孵育48 h后,qRT-PCR检测各组细胞中TNF-α、CCR7、Arg-1、CD206、MRC-1、lncRNA LOXL1-AS1表达,流式细胞术检测各组细胞CD206和CD14表达,Western blot检测各组细胞ERK和STAT3磷酸化水平。在MKN-45细胞中分别转染lncRNA LOXL1-AS1过表达质粒（lncRNA LOXL1-AS1）和空白质粒（Vector）后提取各组细胞分泌的外泌体（记为lncRNA LOXL1-AS1 exo和Vector exo）,将10 μg/mL的lncRNA LOXL1-AS1 exo和Vector exo分别与M0型巨噬细胞共孵育,检测孵育后各组细胞TNF-α、CCR7、Arg-1、CD206、MRC-1、lncRNA LOXL1-AS1表达以及ERK和STAT3磷酸化水平。结果:本文所提取的外泌体符合其结构和生物学特征。相比于PBS组,MGC-803 exo、SGC-7901 exo、MKN-45 exo组细胞TNF-α、CCR7表达显著下调（P＜0.01）,Arg-1、CD206、MRC-1、lncRNA LOXL1-AS1表达均显著上调（P＜0.01）,CD206+CD14+细胞所占比例显著增加（P＜0.001）,ERK和STAT3磷酸化水平显著增加（P＜0.001）。相比于Vector exo组,lncRNA LOXL1-AS1 exo组中lncRNA LOXL1-AS1表达显著上调（P＜0.001）。相比于Vector exo组细胞,lncRNA LOXL1-AS1 exo组巨噬细胞中Arg-1、CD206、MRC-1、lncRNA LOXL1-AS1表达均显著上调（P＜0.001）,CD206+CD14+细胞所占比例显著增加（P＜0.001）,ERK和STAT3磷酸化水平显著增加（P＜0.001）。结论:胃癌细胞外泌体中lncRNA LOXL1-AS1可显著促进巨噬细胞的M2型极化,其机制可能与激活ERK/STAT3信号通路相关。     

Gli-1信号通路对TGF-β1诱导的人胃癌细胞上皮间质转化和侵袭的影响

目的:探讨核转录因子神经胶质瘤关联癌基因同源物1（glioma associated oncogene homolog 1,Gli-1）对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用机制。方法:体外采用10 ng/ml TGF-β1对胃癌SGC-7901细胞进行处理,使用倒置显微镜观察细胞形态变化,RT-PCR和Western blot检测EMT上皮表型蛋白E-cadherin和间质表型蛋白Vimentin的表达水平;Transwell细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力变化,检测TGF-β1 对SGC-7901细胞发生EMT 的影响;同时采用RT-PCR和Western blot检测Gli-1的mRNA和蛋白表达水平。随后进一步采用Gli-1基因特异性阻断剂GANT 61阻断Gli-1表达,并使用TGF-β1（10 ng/ml）对SGC-7901细胞进行处理,RT-PCR 和Western blot检测Gli-1、E-cadherin和Vimentin mRNA 及其蛋白表达水平的改变,并使用Transwell细胞侵袭实验检测阻断Gli-1对SGC-7901细胞侵袭能力的影响。结果:TGF-β1可以诱导人胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化并促进细胞侵袭。TGF-β1可以在mRNA和蛋白水平下调上皮表型蛋白E-cadherin的表达、提高Gli-1和间质表型蛋白Vimentin的表达。TGF-β1可以明显提高SGC-7901细胞侵袭,而阻断Gli-1后可以抑制TGF-β1诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化和细胞侵袭。结论:胃癌SGC-7901细胞中Gli-1 可能参与TGF-β1 介导的EMT 的发生,Gli-1 可能作为胃癌基因治疗中的有效靶点发挥作用。     

激活小鼠大网膜乳斑及腹腔巨噬细胞杀伤胃癌SGC-7901的研究

目的 观察小鼠腹腔注射干扰素-γ(IFN-γ)、高聚生和新城疫病毒(NDV-L)对激活网膜乳斑及腹腔巨噬细胞杀伤胃癌细胞的作用。方法 用活性炭染色、计算机辅助分析、非特异性脂酶染色、台盼蓝染色计数、扫描电镜及荧光定量PCR方法,观察大网膜乳斑及腹腔巨噬细胞的激活。用MTT法测定巨噬细胞培养上清对人胃癌细胞株SGC-7901的杀伤活性。结果 大网膜乳斑量增多,乳斑巨噬细胞数增多。腹腔巨噬细胞数增多,形态呈激活态,TNF-α和iNOS mRNA表达增多。激活的巨噬细胞对SGC-7901杀伤作用增强。结论 腹腔注射IFN-γ、高聚生和NDV-L,均能激活乳斑及腹腔巨噬细胞,其中以IFN-γ的激活作用最强。激活的巨噬细胞对SGC-7901有杀伤能力,培养中加用LPS可增加激活程度以及对SGC-7901的杀伤作用。     

miRNA海绵在胃癌细胞EMT过程中调控作用的体外研究

  目的   探讨“miRNA海绵”在胃癌细胞系SGC7901上皮-间质转化（EMT）过程中的作用及机制。   方法   将人工合成的ZEB2 3'UTR质粒及siZEB2采用脂质体Lipofectamine 2000转染SGC7901细胞。qRT-PCR检测转染后miR-200a/b/c的表达;Transwell侵袭实验、划痕实验和克隆形成实验检测细胞侵袭迁移增殖能力;Western Blot检测目的蛋白的表达。   结果   与对照组相比,ZEB2 3'UTR转染组miR-200a/b/c的表达均下调,迁移、侵袭、增殖活性均增强;而转染siZEB2后miR-200a/b/c表达均升高,迁移、侵袭、增殖能力则下降。Western Blot显示ZEB2 3'UTR转染导致ZEB2表达升高,E-cadherin表达下降,而Vimentin表达上调;而转染siZEB2后,各项指标则表现出相反的表达趋势。   结论   ZEB2 3'UTR可以通过调控miR-200a/b/c的表达调控胃癌细胞EMT过程,调节肿瘤的侵袭与转移。      

Tumor-associated mesothelial cells are negative prognostic factors in gastric cancer and promote peritoneal dissemination of adherent gastric cancer cells by chemotaxis

Peritoneal dissemination is highly frequent in gastric cancer. Damage to human peritoneal mesothelial cell (HPMC) barriers provokes gastric cancer peritoneal dissemination (GCPD), the key events during GCPD, is characterized by fibroblastic development. In this study, we have studied the association between fibroblast activation protein (FAP) expression in peritoneum and the pathological features of the primary tumor. The clinical prognosis of gastric cancer patients was evaluated according to FAP expression. In a gastric cancer cell-HPMC co-culture system, expression of E-cadherin, α-smooth muscle actin, and FAP were evaluated by Western blotting. Gastric cancer cell migration and adhesion to HPMC were also assayed. Our results showed positive peritoneal staining of FAP in 36/86 cases (41.9 %), which was associated with a higher TNM stage in primary gastric cancer and higher incidence of GCPD (both p?<?0.05). Survival analysis showed FAP expression was an independent prognostic factor of poor survival (p?=?0.02). Peritoneum of FAP-positive expression exhibited a distinct fibrotic development and expressed higher level of the mesenchymal marker α-SMA, which was confirmed by the in vitro Western blot assay. In HPMC and gastric cancer cell adherence assay, SGC-7901 cells preferentially adhered to TA-HPMC at different cell densities (both p?<?0.05). Additionally, SGC-7901 cells were more prone to chemotaxis by FAP-expressed tumor-associated–human peritoneal mesothelial cells (TA-HPMC) compared with HPMC co-cultured with normal gastric glandular epithelial cells in a time-dependent manner (both p?<?0.05). Our study indicated a positive correlation between peritoneum FAP expression and GCPD. FAP-expressed TA-HPMC might be an important cellular component and instigator of GCPD.     

miR-138对人胃腺癌细胞SGC-7901增殖的影响

探讨microRNA-138（miR-138）对人胃癌SGC-7901细胞株增殖能力的影响及可能的机制。方法:采用阳离子脂质体Lipofectamine2000将miR-138 RNA转染人胃癌SGC-7901细胞株,采用荧光实时定量PCR检测miR-138表达丰度;采用流式细胞术检测转染后的细胞周期;采用MTT法检测细胞生长曲线;采用Western blotting检测人端粒酶逆转录酶（hTERT）蛋白的表达。结果:转染miR-138 RNA后,SGC-7901细胞内miR-138表达丰度升高,细胞增殖能力受到显著抑制,同时hTERT蛋白表达水平下调。结论:miR-138可抑制人SGC-7901细胞的增殖能力,机制可能是通过抑制靶基因hTERT蛋白的表达。