表达FasL的肝癌细胞通过Fas/FasL诱导T淋巴细胞发生凋亡

目的研究发现肿瘤组织中FasL阳性表达区肿瘤浸润淋巴细胞的凋亡率比FasL阴性区高,推测肿瘤细胞可通过增加FasL表达来促使肿瘤浸润淋巴细胞凋亡.本实验在体外验证肝癌细胞是否可以诱导T淋巴细胞发生凋亡.方法选择FasL表达阳性的肝癌细胞(效应细胞)与对Fas介导凋亡敏感的活化T淋巴细胞共培养,取3种效靶比20:1,10:1,5:1.生长曲线法,流式细胞术,荧光显微镜观察分别检测T淋巴细胞的凋亡情况.结果流式细胞仪检测结果显示,肝癌细胞接种浓度为0(对照),0.5×105/ml,1×105/ml,2×105/ml时,T淋巴细胞凋亡率为1.80±0.21%,5.49±0.17%,11.18±0.14%,18.22±0.11%.荧光显微镜观察结果表明,肝癌细胞接种浓度为0(对照),0.5×105/m1,1×105/ml,2×105/ml时,T淋巴细胞凋亡率为1.58±0.12%,5.22±0.13%,9.74±0.21%,19.33±0.18%.3种效靶比条件下,肝癌均能诱导T淋巴细胞发生凋亡.随着肝癌接种浓度的升高及培养时间的延长,T淋巴细胞凋亡率逐渐增加,每个实验组与对照组比较P值均＜0.01.结论肝癌细胞可以通过Fas系统诱导淋巴细胞发生凋亡,这为肝癌的免疫逃逸和反攻击提供了证据.     

结肠癌细胞通过Fas/FasL诱导淋巴细胞发生凋亡

背景与目的:研究发现,肿瘤组织中Fas配体阳性表达区肿瘤浸润淋巴细胞的凋亡率比FasL阴性区高,推测肿瘤细胞可通过增加表达FasL来杀伤肿瘤浸润淋巴细胞。本研究拟在体外验证结肠癌细胞SW480是否可以诱导淋巴细胞发生凋亡。方法:结肠癌细胞系SW480(效应细胞)与对Fas介导凋亡敏感的Jurkat细胞(靶细胞)共培养,分为3种效靶比20∶1,10∶1,5∶1。生长曲线法、流式细胞术、荧光显微镜观察分别检测Jurkat细胞的凋亡情况。结果:流式细胞仪检测结果显示,SW480接种浓度为0(对照)、0.5×105/ml、1×105/ml、2×105/ml时,Jurkat细胞凋亡率为(1.8±0.21)%、(5.49±0.17)%、(11.18±0.14)%、(18.22±0.11)%。荧光显微镜观察结果表明,SW480接种浓度为0(对照)、0.5×105/ml、1×105/ml、2×105/ml时,Jurkat细胞凋亡率为(1.58±0.12)%、(5.22±0.13)%、(9.74±0.21)%、(19.33±0.18)%。3种效靶比条件下,SW480细胞均能诱导Jurkat细胞发生凋亡。随着SW480接种浓度的升高及共培养作用时间的延长,Jurkat细胞凋亡率逐渐增加。每个实验组与对照组相比,P值均小于0.01。结论:结肠癌细胞SW480可以通过Fas系统诱导淋巴细胞发生凋亡,这为结肠癌的免疫逃逸、反击机制提供了又一证据。     

DFMO通过Fas/FasL通路诱导人肺癌细胞凋亡的研究

背景与目的:Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要通路。为了解Fas/FasL系统在肿瘤多胺生物合成抑制导致恶性表型逆转中的作用,本研究拟探讨多胺生物合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)对人肺癌A549细胞生长、凋亡的影响及其与人肺癌相关抗原、rasP21蛋白及Fas/FasL表达的相关性。方法:用MTT法观察细胞生长,流式细胞仪分析细胞周期,DNAladder电泳法观察细胞凋亡,SP免疫组化法及RT-PCR法检测细胞蛋白及基因表达。结果:DFMO可抑制A549细胞生长并诱导凋亡,使G1期细胞增多(61.0±2.08)%,S期细胞减少(21.2±0.88)%,出现DNAladder;同时下调A549细胞人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达,上调Fas基因mRNA及蛋白表达。结论:DFMO通过Fas/FasL通路诱导肺癌A549细胞的凋亡,并可能与人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达调控有关。     

原发性肝癌组织中Fas和FasL的表达研究

为了探讨原发性肝癌组织中乙肝病毒和丙肝病毒的感染与Ｆａｓ 和ＦａｓＬ表达的关系,采用免疫组化方法观察４０ 例原发性肝癌组织中Ｆａｓ、ＦａｓＬ、ＨＢｓＡｇ 及ＨＣＶ 抗原（ＮＳ５） 的表达。结果显示：癌细胞Ｆａｓ 阳性７ 例,阳性率为１７．５％ ,ＦａｓＬ阳性６例,阳性率为１５．０％ ;癌旁肝细胞Ｆａｓ 阳性２１ 例,阳性率５２ ．５％ ,ＦａｓＬ阳性１８ 例,阳性率４５ ．０％ 。癌组织中ＨＢｓＡｇ 阳性１２ 例,阳性率为３０．０％ ;癌旁组织中２５ 例阳性,阳性率为６２ ．５％ 。１２ 例ＨＢｓＡｇ 阳性的癌组织中,Ｆａｓ 阳性６ 例,ＦａｓＬ阳性５ 例;２８ 例ＨＢｓＡｇ 阴性的癌组织中,Ｆａｓ 和ＦａｓＬ 阳性各１ 例;癌组织中ＨＣＶＮＳ５ 阳性１１ 例,阳性率为２７ ．５ ％ ,癌旁组织中其阳性率为１２ ．５％（５／４０） ,１１ 例ＨＣＶＮＳ５ 阳性的肝癌组织中,Ｆａｓ 和ＦａｓＬ 阳性各５ 例,２９ 例ＨＣＶＮＳ５ 阴性的肝癌组织中,Ｆａｓ 阳性２ 例,ＦａｓＬ阳性１ 例。２ 组比较有显著性差异（ Ｐ＜０ ．０５） 。结果表明肝癌组织中Ｆａｓ 和ＦａｓＬ的表达与ＨＢＶ 和ＨＣＶ 的感染有一定关系。癌旁肝组织Ｆａｓ 和ＦａｓＬ高表达的意义尚不清楚     

维甲酸对DENA诱发肝癌大鼠的T淋巴细胞亚群与NK细胞的影响

目的：本文探讨维甲酸抑制大鼠肝癌细胞增殖对T淋巴细胞亚群和NK细胞的影响。方法：设三个实验组,分别收集30个大鼠外周血样本,然后进行免疫荧光抗体标记。应用流式细胞仪（EPICS-XL）检测T淋巴细胞亚群和NK细胞的百分率。结果：对照组与健康组比较,CD4＋细胞数明显减少,CD8＋细胞数明显增多,CD4＋/CD8＋比值下降（P〈0.01）。维甲酸组与健康组比较,CD4＋、CD8＋和CD56＋细胞数均无显著性差异（P〉0.05）。结论：维甲酸抑制大鼠肝癌细胞增殖时对机体免疫功能的改善有一定影响。     

肝癌中Fas相关死亡区蛋白与细胞凋亡相关性初探

目的 :研究肝癌中Fas相关死亡区蛋白 (FADD)与细胞凋亡间的相关性。方法 :采用原位末端标记及免疫组化法分别检测肝癌中细胞凋亡及FADD蛋白表达。结果 :78例肝癌中 2 0例 (2 5 6 % )表达FADD蛋白 ,显著低于癌旁非癌肝组织 (10 16 ,6 2 .5 % ,P <0 .0 5 )。 12 36 (33 3% )分化中等良好的HCC中FADD表达 ,略高于分化差的HCC(8 4 2 ,19% ,P >0 .0 5 )。Ⅰ Ⅱ级HCC中 ,16例为FADD阳性 (16 4 2 ,38 1% ) ,而Ⅲ Ⅳ级HCC中阳性率仅为 11 1% (P <0 .0 5 )。所有标本中均能检测到细胞凋亡 ,在FADD蛋白中等阳性和强阳性的HCC中 ,细胞凋亡程度较高 ,与FADD表达弱阳性或阴性的HCC相比P <0 .0 5 ,癌旁组织中FADD表达与细胞凋亡无关 (P >0 .0 5 )。结论 :FADD表达降低在肝癌发生中起作用 ,且与肝癌细胞凋亡相关     

肝癌中Fas相关死亡区蛋白与细胞凋亡相关性初探

目的：研究肝癌中Fas相关死亡区蛋白(FADD)与细胞凋亡间的相关性。方法：采用原位末端标记及免疫组化法分别检测肝癌中细胞凋亡及FADD蛋白表达。结果：78例肝癌中20例(25.6％)表达FADD蛋白，显著低于癌旁非癌肝组织(10／16，62.5％，P＜0.05)。12／36(33.3％)分化中等良好的HCC中FADD表达，略高于分化差的HCC(8／42，19％，P＞0.05)。Ⅰ／Ⅱ级HCC中，16例为FADD阳性(16／42，38.1％)，而Ⅲ／Ⅳ级HCC中阳性率仅为11.1％(P＜0.05)。所有标本中均能检测到细胞凋亡，在FADD蛋白中等阳性和强阳性的HCC中，细胞凋亡程度较高，与FADD表达弱阳性或阴性的HCC相比P＜0.05，癌旁组织中FADD表达与细胞凋亡无关(P＞0.05)。结论：FADD表达降低在肝癌发生中起作用，且与肝癌细胞凋亡相关。     

人细胞毒T淋巴细胞杀伤胃癌细胞及诱发凋亡的实验研究

目的　测定特异性细胞毒 T淋巴细胞 (CTL )对胃癌细胞的体外杀伤活性及观察形态学改变。方法　用分离胃腺癌患者的癌细胞经丝裂霉素 C处理后 ,作为抗原与抗CD3单克隆抗体、重组白细胞介素 - 2刺激患者自体外周血单个核细胞 ,体外诱导 CTL,用 MTT比色法测定 CTL 对自体癌细胞、人胃癌细胞株 (BGC- 82 3和 MGC- 80 3)的体外杀伤活性。将 CTL与 BGC- 82 3共同温育 ,通过透射和扫描电镜观察杀伤靶细胞的形态改变。结果　 CTL对自体胃癌细胞有特异性杀伤作用 ,可使靶细胞凋亡或溶解坏死。结论　体外混合细胞培养诱导出的 CTL,对靶细胞有明显的杀伤作用     

165例原发性肝癌T淋巴细胞转化试验及临床观察

应用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法作Ｔ淋巴细胞转化试验，观察了１６５例原发性肝癌患者的细胞免疫功能，并以６３例健康人作对照。结果表明：患者Ｔ淋巴细胞转化力较健康人明显低下，其ＣＰＭ与ＳＩ值均低于健康人，差异非常显著（Ｐ＜０．０１）；Ⅲ期患者ＣＰＭ与ＳＩ均低于Ⅱ期患者，差异非常显著（Ｐ＜０．０１）；治疗有效者ＣＰＭ与ＳＩ升高，无效者则降低；ＣＰＭ与ＳＩ值接近正常者预后好、生存期长，严重低下者则预后差，生存期短。提示原发性肝癌患者细胞免疫功能低下，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法Ｔ淋巴细胞转化试验不失为测定原发性肝癌患者细胞免疫功能的重要方法与可靠指标，能为判断病程、疗效、预后及制订治疗方案提供帮助。     

肝癌病人化疗栓塞后联合应用s-TIL细胞后T淋巴细胞亚群的变化

目的 :观察 39例 PHC病人经化疗栓塞后联合应用经冷冻肝癌瘤苗刺激的肿瘤浸润淋巴细胞 (s-TIL )前后外周血 T淋巴细胞亚群的变化。方法 :于化疗栓塞及应用 s- TIL前、治疗后 7d、14d、2 1d分别查 T淋巴细胞亚群 ,并与对照组比较。结果 :肝癌病人经化疗栓塞后 CD 3、CD 4 、CD 8、CD 4 / CD 8比值约在 14d左右即上升 ,与对照组比较有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 :TACE后联合应用 s- TIL细胞具有提高机体细胞免疫功能的作用。     

γ-干扰素对白血病细胞Fas/FasL系统的调控及凋亡的影响

目的:探讨γ-干扰素(IFN-γ)对白血病细胞Fas/FasL表达的调控及凋亡的影响.方法:应用免疫组织化学方法、TUNEL测凋亡法、细胞培养技术,检测人髓系白血病细胞株HL-60及临床髓系白血病患者单个核细胞的Fas的表达及相关功能,并研究γ-干扰素对之的影响.结果:白血病细胞表达Fas蛋白较正常骨髓细胞低,并能致共同培养的Jurkat细胞发生凋亡;而IFN-γ能提高其Fas蛋白的表达(P＜0.01),且调节作用具有时间、剂量依赖性,并有下调白血病细胞致Jurkat细胞凋亡的能力,且能够增强白血病细胞对Fas途径介导的凋亡敏感性及增强对化疗药物阿糖胞苷的敏感性.结论:IFN-γ能通过对白血病细胞Fas/FasL系统的调控以防止其逃避免疫监视,并能增强白血病细胞对以Fas/FasL为靶标的化疗药物的敏感性.     

Fas／FasL信号通路在千金子甾醇诱导HL-60细胞凋亡中的作用与机制研究

目的：在明确千金子甾醇诱导HL-60白血病细胞发生凋亡的基础上,从Fas/FasL信号通路的角度探讨其诱导凋亡的分子机制。方法 HL-60细胞培养体系中分别以千金子甾醇终浓度2．5、10、40μg/ml作用24 h后CCK-8法检测千金子甾醇对HL-60细胞增殖的抑制作用,光学及荧光显微镜下观察细胞形态学变化,Annexin Ⅴ/PI 流式细胞术检测细胞凋亡,反转录-聚合酶链反应法检测Fas/FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平,比色法检测caspase-8和caspase-3的相对活性。结果千金子甾醇可明显抑制HL-60细胞的增殖,增殖抑制率分别为（34．9±3．7）％、（54．6±5．2）％、（61．3±4．3）％,细胞呈典型凋亡形态学改变,细胞早期凋亡率分别为（23．4±3．1）％、（35．7±4．3）％、（53．2±3．9）％。Fas、FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平明显上调（P＜0．01）,caspase-8和caspase-3活性显著增高（P＜0．01）。结论千金子甾醇可以诱导HL-60细胞发生剂量依赖性细胞凋亡,其机制与上调Fas/FasL凋亡信号通路有关。     

阿司匹林对结肠癌细胞凋亡及Fas/FasL表达的影响

目的：探讨阿司匹林对结直肠癌化学预防的机理。方法：培养结肠癌细胞株Caco-2，用不同浓度阿司匹林进行干预，对细胞生长、增殖、凋亡及Fas／FasL表达进行观察、检测。结果：高浓度阿司匹林组细胞大量死亡。低浓度组促进细胞凋亡；25mmol／L阿司匹林组可见Fas表达，而对照组不表达；25mmol／L阿司匹林组FasL表达与对照组相比明显降低。结论：低浓度阿司匹林促进结肠癌细胞凋亡，其机理与诱导Fas表达、下调FasL表达有关。     

Fas/FasL在肺癌中的表达

目的探讨Fas／FasL在肺癌中的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测60例肺癌组织、癌旁组织及20例正常肺组织的Fas／FasL的表达。结果Fas／FasL在肺癌组织中阳性表达率显著低于Fas／FasL在癌旁组织及正常肺组织中Fas／FasL表达率。Fas／FasL在非小细胞肺癌组织中阳性表达率显著低于Fas／FasL在小细胞肺癌中阳性表达率。Fas的阳性表达率与PTNM及淋巴结转移无明显相关，FasL的阳性表达率与PTNM及淋巴结转移明显相关。结论Fas／FasL在肺癌的发生和发展中起重要作用。     

柔红霉素对HL-60细胞凋亡及Fas、FasL表达的影响

目的 :通过测定柔红霉素 (DNR)对急性早幼粒细胞白血病细胞株HL 60凋亡及Fas/FasL基因表达的变化 ,探讨Fas/FasL系统在细胞凋亡中的作用。方法 :应用荧光显微镜、结合DNA电泳及流式细胞仪分析技术 ,观察柔红霉素对HL 60细胞凋亡的影响及细胞凋亡过程中Fas/FasL基因的表达。结果 :柔红霉素浓度为 0 .1、1 μg/ml时 ,作用 6小时出现典型凋亡细胞 ,荧光显微镜观察HL 60细胞可见凋亡小体、染色质浓缩和胞体出芽改变 ,流式细胞仪分析可见凋亡峰 ,2 4小时达高峰 (45 .2 %± 1 0 .3 % )。 1 0 μg/ml柔红霉素作用 6小时 ,未见凋亡峰。柔红霉素可诱导Fas/FasL基因表达。结论 :柔红霉素诱导细胞凋亡是其治疗白血病的主要机制之一 ,Fas/FasL系统参与柔红霉素诱导的HL 60细胞的凋亡过程     

Fas／FasL在肝癌中的表达及意义

目的 探讨Fas、FasL在肝癌中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学法,对41例肝癌组织中Fas及其配体FasL表达进行观察和比较。结果 肝癌中Fas阳性率为31.7％,癌旁肝硬化Fas阳性率80.0％,癌细胞Fas表达较癌旁显著减少,肝癌及癌旁肝硬化,FasL阳性率分别为41.5％和65.0％;FasL表达在二者间差异无显著性。肝癌组织Fas、FasL表达与性别、肿瘤大小、组织分级无关。Fas表达与门静脉癌栓发生率呈负相关,FasL表达则与其无关。结论 Fas/FasL系统在原发性肝癌肿瘤免疫逃避中起重要作用,Fas抗原表达在原发性肝癌门静脉癌栓形成中的作用值得进一步研究。     

术前化疗后结直肠癌组织中Fas/FasL和survivin的表达

目的探讨化疗后结直肠癌组织Fas/FasL和survivin的表达情况及两者之间的相关性。方法采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL法)和免疫组化方法,测定化疗后和未化疗两组各16例结直肠癌患者肿瘤的原位凋亡(AI)、原位增殖(KI)及survivin表达,运用流式细胞仪测定肿瘤细胞的细胞周期、Fas/FasL表达,用双抗体ELISA法检测患者血清可溶性Fas/FasL(sFas/sFasL)表达。结果化疗组结直肠癌患者肿瘤细胞的AI及Fas/FasL均较对照组高,KI、G2/M期细胞、sFas及survivin较对照组低,差别有统计学意义(P<0.05)。结论化疗通过诱导结直肠癌细胞凋亡及阻止细胞进入G2/M期从而抑制癌细胞的生长。Fas/FasL系统与结直肠癌细胞凋亡、增殖调控有关。survivin阳性表达下降程度可作为化疗有效的标志之一。